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1、消化管平滑肌的生理特性【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?. 學(xué)習(xí)哺乳動(dòng)物離體器官實(shí)驗(yàn)的一般方法;2. 記錄離體小腸在模擬體內(nèi)環(huán)境中的活動(dòng);3. 研究不同藥物對(duì)消化道平滑肌收縮的影響,了解平滑肌的生理特性。 【實(shí)驗(yàn)原理】哺乳動(dòng)物消化管平滑肌具有肌組織共有的特性,如興奮性、傳導(dǎo)性和收縮性等。但是消化道平滑肌有其特點(diǎn),即興奮性較低,收縮緩慢,富有伸展性,具有自動(dòng)節(jié)律性,對(duì)化學(xué)、溫度和機(jī)械牽張刺激較敏感等。 將離體組織器官至于模擬體內(nèi)環(huán)境的溶液中,可以在一定時(shí)間內(nèi)保持其功能。本實(shí)驗(yàn)以臺(tái)氏液作灌流液,在體外觀察及記錄家兔離體腸段的一般生理特性。【實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與器材】實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:家兔實(shí)驗(yàn)器材:恒
2、溫平滑肌浴管、生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)、肌張力傳感器、萬(wàn)能支架、大鐵夾、螺旋夾、雙凹夾2個(gè)、溫度計(jì)、燒杯、臺(tái)氏液、無(wú)鈣臺(tái)氏液、1:50000腎上腺素、1:1000000乙酰膽堿、1:50000阿托品【實(shí)驗(yàn)方法與步驟 】一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備(一) 啟動(dòng)平滑肌浴管恒溫系統(tǒng) 恒溫平滑肌浴管是自供液式,中心管為平滑肌浴管。外部容器為恒溫浴鍋,加蒸餾水或自來(lái)水。使用前將浴管刷洗干凈,加入臺(tái)氏液至浴管高度的2/3處,約50ml。開(kāi)啟電源加熱,恒溫工作點(diǎn)定在38,浴管溫度將自動(dòng)穩(wěn)定在38左右。(二) 標(biāo)本制備 用槌猛擊兔的頭枕部使其昏迷,剖開(kāi)腹部,找出胃與十二指腸交界處,用線結(jié)扎,在結(jié)扎
3、線近胃?jìng)?cè)剪斷小腸,將腸管的腸系膜沿腸緣剪開(kāi),分離出長(zhǎng)約2030cm的腸管。把離體的腸管置于4左右的臺(tái)氏液中,剪成數(shù)段,每段長(zhǎng)23cm,然后用注射器向腸腔內(nèi)注入臺(tái)氏液,沖洗腸腔,待腸腔內(nèi)容物基本洗凈后,放入4臺(tái)氏液中備用。 (三) 建立實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)1.標(biāo)本與張力傳感器連接:取一段長(zhǎng)23cm的腸段,一端固定于浴管底部的小鉤上,另一端用手術(shù)線連接固定于肌張力傳感器的應(yīng)變簧片上。將標(biāo)本浸置于含15臺(tái)氏液的浴管中,取37的臺(tái)氏液浸泡。2.通過(guò)調(diào)整使腸管及其連線有一定的緊張度,但要適度,勿牽拉過(guò)緊或過(guò)松。腸段勿與周圍管壁接觸,以免磨擦而影響實(shí)驗(yàn)記錄。3. 連接儀器,打開(kāi)實(shí)驗(yàn)軟件選擇消化
4、道平滑肌生理特性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,記錄家兔離體腸段正常的收縮曲線。 二、實(shí)驗(yàn)觀察內(nèi)容(一)啟動(dòng)恒溫加熱系統(tǒng),使浴管內(nèi)臺(tái)氏液溫度升至37,觀察收縮曲線改變,然后溫度恒定在38,再觀察以下實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。(二) 將浴管內(nèi)37臺(tái)氏液放掉,向浴管內(nèi)加入低溫臺(tái)氏液,觀察在低溫臺(tái)氏液中的腸段平滑肌收縮情況,描記收縮曲線。 (三) 向浴管內(nèi)臺(tái)氏液中加入1:50000的腎上腺素0.2ml,描記觀察腸段活動(dòng)有何變化。待作用效果明顯后,沖洗腸段,即放掉浴管中的臺(tái)氏液,加入預(yù)先準(zhǔn)備好的38新鮮臺(tái)氏液,重復(fù)更換23次臺(tái)氏液,使腸段活動(dòng)恢復(fù)正常,再進(jìn)行下一個(gè)實(shí)驗(yàn)。(四) 向浴管內(nèi)臺(tái)氏液中加
5、入1:1000000乙酰膽堿0.2ml,描記觀察腸段運(yùn)動(dòng),待作用出現(xiàn)后,同上法沖洗腸段。(五) 向浴管內(nèi)臺(tái)氏液中加入1:50000阿托品0.2ml,2分鐘后,再加入1:50000的乙酰膽堿0.2ml,觀察腸段活動(dòng)變化,并與上一項(xiàng)結(jié)果比較。沖洗腸段,使腸段活動(dòng)恢復(fù)正常。(六) 用37無(wú)ca2+臺(tái)氏液沖洗腸段至少3次,換上新鮮37的無(wú)ca2+臺(tái)氏液,觀察小腸收縮曲線有何變化。(七) 向無(wú)ca2+臺(tái)氏液浴管內(nèi)加入1:50000的乙酰膽堿0.2ml,觀察腸段活動(dòng)變化。如無(wú)反應(yīng),一分鐘后用正常含ca2+臺(tái)氏液沖洗3次,觀察有何現(xiàn)象發(fā)生?!緦?shí)驗(yàn)分析與討論】實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一:圖一 平
6、滑肌腸段在正常情況下記錄的收縮曲線圖此圖曲線為平滑肌腸段處于維持在38恒溫臺(tái)氏液內(nèi)的收縮曲線,即模擬消化管平滑肌處于兔子體內(nèi)生理環(huán)境的收縮情況。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目二:圖二 平滑肌腸段記錄對(duì)照運(yùn)動(dòng)曲線后在低溫下的收縮曲線圖此圖中,曲線收縮幅度較大的前半段為平滑肌腸段處于正常情況下所記錄的運(yùn)動(dòng)收縮曲線,打有“低溫”標(biāo)記處實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目三:圖三 平滑肌腸段記錄對(duì)照運(yùn)動(dòng)曲線后滴加腎上腺素的收縮曲線此圖中,曲線收縮幅度較大的前半段為平滑肌腸段處于正常情況下所記錄的運(yùn)動(dòng)收縮曲線,打有“腎上腺素”標(biāo)記附近腸段收縮強(qiáng)度下降,明顯弱于前面的對(duì)照收縮曲線。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目四:圖四 平滑肌腸段記錄對(duì)照運(yùn)動(dòng)曲線后滴加乙酰膽堿的收縮曲線此圖中,曲線收縮幅度
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