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1、消化管平滑肌的生理特性【實驗?zāi)康摹?. 學(xué)習(xí)哺乳動物離體器官實驗的一般方法;2. 記錄離體小腸在模擬體內(nèi)環(huán)境中的活動;3. 研究不同藥物對消化道平滑肌收縮的影響,了解平滑肌的生理特性。 【實驗原理】哺乳動物消化管平滑肌具有肌組織共有的特性,如興奮性、傳導(dǎo)性和收縮性等。但是消化道平滑肌有其特點,即興奮性較低,收縮緩慢,富有伸展性,具有自動節(jié)律性,對化學(xué)、溫度和機械牽張刺激較敏感等。 將離體組織器官至于模擬體內(nèi)環(huán)境的溶液中,可以在一定時間內(nèi)保持其功能。本實驗以臺氏液作灌流液,在體外觀察及記錄家兔離體腸段的一般生理特性?!緦嶒瀯游锱c器材】實驗動物:家兔實驗器材:恒
2、溫平滑肌浴管、生理信號采集處理系統(tǒng)、肌張力傳感器、萬能支架、大鐵夾、螺旋夾、雙凹夾2個、溫度計、燒杯、臺氏液、無鈣臺氏液、1:50000腎上腺素、1:1000000乙酰膽堿、1:50000阿托品【實驗方法與步驟 】一、實驗準備(一) 啟動平滑肌浴管恒溫系統(tǒng) 恒溫平滑肌浴管是自供液式,中心管為平滑肌浴管。外部容器為恒溫浴鍋,加蒸餾水或自來水。使用前將浴管刷洗干凈,加入臺氏液至浴管高度的2/3處,約50ml。開啟電源加熱,恒溫工作點定在38,浴管溫度將自動穩(wěn)定在38左右。(二) 標本制備 用槌猛擊兔的頭枕部使其昏迷,剖開腹部,找出胃與十二指腸交界處,用線結(jié)扎,在結(jié)扎
3、線近胃側(cè)剪斷小腸,將腸管的腸系膜沿腸緣剪開,分離出長約2030cm的腸管。把離體的腸管置于4左右的臺氏液中,剪成數(shù)段,每段長23cm,然后用注射器向腸腔內(nèi)注入臺氏液,沖洗腸腔,待腸腔內(nèi)容物基本洗凈后,放入4臺氏液中備用。 (三) 建立實驗系統(tǒng)1.標本與張力傳感器連接:取一段長23cm的腸段,一端固定于浴管底部的小鉤上,另一端用手術(shù)線連接固定于肌張力傳感器的應(yīng)變簧片上。將標本浸置于含15臺氏液的浴管中,取37的臺氏液浸泡。2.通過調(diào)整使腸管及其連線有一定的緊張度,但要適度,勿牽拉過緊或過松。腸段勿與周圍管壁接觸,以免磨擦而影響實驗記錄。3. 連接儀器,打開實驗軟件選擇消化
4、道平滑肌生理特性實驗項目,記錄家兔離體腸段正常的收縮曲線。 二、實驗觀察內(nèi)容(一)啟動恒溫加熱系統(tǒng),使浴管內(nèi)臺氏液溫度升至37,觀察收縮曲線改變,然后溫度恒定在38,再觀察以下實驗項目。(二) 將浴管內(nèi)37臺氏液放掉,向浴管內(nèi)加入低溫臺氏液,觀察在低溫臺氏液中的腸段平滑肌收縮情況,描記收縮曲線。 (三) 向浴管內(nèi)臺氏液中加入1:50000的腎上腺素0.2ml,描記觀察腸段活動有何變化。待作用效果明顯后,沖洗腸段,即放掉浴管中的臺氏液,加入預(yù)先準備好的38新鮮臺氏液,重復(fù)更換23次臺氏液,使腸段活動恢復(fù)正常,再進行下一個實驗。(四) 向浴管內(nèi)臺氏液中加
5、入1:1000000乙酰膽堿0.2ml,描記觀察腸段運動,待作用出現(xiàn)后,同上法沖洗腸段。(五) 向浴管內(nèi)臺氏液中加入1:50000阿托品0.2ml,2分鐘后,再加入1:50000的乙酰膽堿0.2ml,觀察腸段活動變化,并與上一項結(jié)果比較。沖洗腸段,使腸段活動恢復(fù)正常。(六) 用37無ca2+臺氏液沖洗腸段至少3次,換上新鮮37的無ca2+臺氏液,觀察小腸收縮曲線有何變化。(七) 向無ca2+臺氏液浴管內(nèi)加入1:50000的乙酰膽堿0.2ml,觀察腸段活動變化。如無反應(yīng),一分鐘后用正常含ca2+臺氏液沖洗3次,觀察有何現(xiàn)象發(fā)生?!緦嶒灧治雠c討論】實驗項目一:圖一 平
6、滑肌腸段在正常情況下記錄的收縮曲線圖此圖曲線為平滑肌腸段處于維持在38恒溫臺氏液內(nèi)的收縮曲線,即模擬消化管平滑肌處于兔子體內(nèi)生理環(huán)境的收縮情況。實驗項目二:圖二 平滑肌腸段記錄對照運動曲線后在低溫下的收縮曲線圖此圖中,曲線收縮幅度較大的前半段為平滑肌腸段處于正常情況下所記錄的運動收縮曲線,打有“低溫”標記處實驗項目三:圖三 平滑肌腸段記錄對照運動曲線后滴加腎上腺素的收縮曲線此圖中,曲線收縮幅度較大的前半段為平滑肌腸段處于正常情況下所記錄的運動收縮曲線,打有“腎上腺素”標記附近腸段收縮強度下降,明顯弱于前面的對照收縮曲線。實驗項目四:圖四 平滑肌腸段記錄對照運動曲線后滴加乙酰膽堿的收縮曲線此圖中,曲線收縮幅度
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