法醫(yī)血清學教學大綱

1、法醫(yī)血清學教學大綱前 言 法醫(yī)物證學是高等醫(yī)學院校法醫(yī)學專業(yè)的主要課程之一。為適合我國高等法醫(yī)學教育的改革和發(fā)展，根據(jù)教育部法醫(yī)學培養(yǎng)目標，參照國家教委規(guī)劃教材法醫(yī)物證學（高等醫(yī)藥院校法醫(yī)學類專業(yè)用教材，人民衛(wèi)生出版社，1998年）編寫本大綱，供我校法醫(yī)學專業(yè)學生的法醫(yī)物證學教學中使用。理論課教學內(nèi)容及學時分配章（節(jié)）授 課 內(nèi) 容學時數(shù)第一章緒論2學時第二章法醫(yī)物證檢驗的遺傳學基礎2學時第三章紅細胞血型血清學基本原理4學時第四章紅細胞血型系統(tǒng)6學時第五章人類白細胞抗原系統(tǒng)2學時第六章血清型6學時第七章紅細胞酶型4學時第八章DNA分析及其在法科學中的作用20學時第九章親權鑒定4學時第十章血痕檢

2、驗4學時第十一章精斑檢驗2學時第十二章精液與陰道分泌物混合斑的檢驗2學時第十三章唾液（斑）及尿斑檢驗1學時第十四章個體組織的個人識別1學時總 計60學時實驗課教學內(nèi)容及學時分配實驗題目實 驗 內(nèi) 容學時數(shù)實驗室基本操作常規(guī)儀器的使用、試劑配制、血清效價的測定4學時血液的紅細胞血型檢驗紅細胞凝集實驗檢測血液的ABO、MN、Rh血型4學時血清HP型檢驗聚丙稀酰胺凝膠垂直板電泳法檢測HP型6學時血清TFC亞型檢驗聚丙稀酰胺凝膠等電聚焦法檢測TF型6學時血清Gm型檢驗Dot-ELISA法檢測Gm型4學時紅細胞ESD型檢驗瓊脂糖凝膠水平電泳法檢測ESD型4學時DNA多態(tài)性分析酚/氯仿法提取DNA，PCR

3、擴增6學時DNA多態(tài)性分析變性聚丙稀酰胺凝膠垂直板電泳檢測STR多態(tài)性8學時血痕檢驗血痕的預備試驗、確證試驗、種屬鑒定4學時血痕ABO血型檢驗解離試驗（試管法）檢測血痕ABO血型4學時血痕ABO血型檢驗解離試驗（玻片法）檢測血痕ABO血型4學時精斑檢驗精斑的確證試驗、種屬鑒定4學時唾液（斑）檢驗唾液的預備試驗、中和試驗檢測唾液ABO血型4學時常用統(tǒng)計學計算個人識別幾率、非父排除率、父權指數(shù)等的計算4學時總 計 66學時法醫(yī)血清學（理論課）教學大綱第一章 緒 論【目的要求】1 掌握 法醫(yī)物證學的概念、法醫(yī)物證檢驗的對象、法醫(yī)物證鑒定的概念。2 熟悉 法醫(yī)物證鑒定書的內(nèi)容、法醫(yī)物證學的任務。3 了

4、解 法醫(yī)物證學的研究方法、法醫(yī)物證學的沿革及進展?！窘虒W內(nèi)容】1 法醫(yī)物證學的概念，物證的概念及內(nèi)容，法醫(yī)物證檢驗的對象，法醫(yī)物證鑒定的概念及程序，法醫(yī)物證鑒定書的內(nèi)容。2 法醫(yī)物證學的任務。3 法醫(yī)物證學的研究方法。4 法醫(yī)物證學的沿革，我國法醫(yī)物證檢驗的進展。5 法醫(yī)物證檢材的發(fā)現(xiàn)、提取、包裝、保存及送檢?！窘虒W方法】 課堂講授【授課學時】 2學時第二章 法醫(yī)物證檢驗的遺傳學基礎【目的要求】1 掌握 基因的分子結構、基因突變的種類、基因頻率與個人識別機率的計算。2 熟悉 基因的類型及遺傳方式。3 了解 DNA分子的結構、孟德爾遺傳規(guī)律?！窘虒W內(nèi)容】1 遺傳與變異、DNA分子的結構及復制原理

5、。2 基因、等位基因、顯性基因、隱性基因、無效基因及復等位基因的概念，基因突變的概念及分類，遺傳標記，基因的結構與分類。3 孟德爾遺傳規(guī)律，基因型、純合子及雜合子，基因連鎖；單基因遺傳與多基因遺傳，伴性遺傳；線粒體DNA的遺傳。4 群體遺傳學的概念，遺傳組成，孟德爾群體，基因庫，基因、基因型及表型頻率，Hardy-Weinberg平衡定律。5 遺傳多態(tài)性的概念及形成機制，雜合率，個人識別機率，否定父權機率，多態(tài)信息容量。【教學方法】課堂講授【授課學時】2學時第三章 紅細胞血型血清學基本原理【目的要求】1 掌握 紅細胞的動電位的概念及形成原理、紅細胞血型抗體的分類及其特征。2 熟悉 紅細胞血型抗

6、原的化學性質(zhì)、紅細胞的凝集反應的步驟及影響因素。3 了解 紅細胞血型的命名、紅細胞血型抗原的化學性質(zhì)?！窘虒W內(nèi)容】1 血型、血型血清學、紅細胞血型的概念，紅細胞血型發(fā)現(xiàn)的歷史。2 紅細胞血型的命名。3 紅細胞血型抗原的化學性質(zhì)，紅細胞的抗原決定簇，紅細胞抗原部位的數(shù)目，抗原性的強弱，紅細胞抗原的發(fā)生與發(fā)育。4 紅細胞血型抗體的分類及其特征5 紅細胞抗原引起的免疫反應的種類，免疫反應的個體差異。6 凝集反應，紅細胞的動電位的概念及形成原理；紅細胞的凝集反應的步驟及影響因素；凝集反應的促進因素，不正常凝集反應，抗人球蛋白試驗和酶法處理紅細胞促進紅細胞凝集反應的實驗方法?！窘虒W方法】課堂講授【授課學

7、時】4學時第四章 紅細胞血型系統(tǒng)【目的要求】1 掌握 ABH 、MNSs 、Lewis 和Rh系統(tǒng)的基因結構與抗原生成的遺傳途徑。2 熟悉 ABH 、MNSs 、Lewis 和Rh系統(tǒng)亞型的DNA基礎與血清學特征。3 了解 血型抗原的種類與分布。【教學內(nèi)容】1 ABO血型系統(tǒng)：發(fā)現(xiàn)的歷史；ABO血型抗原，常見表型、亞型及變異型的血清學特點；ABO血型抗體的生成、特性；ABH抗原生成的遺傳途徑；ABO血型的遺傳。2 分泌型與非分泌型：分泌型和非分泌型的概念，ABH血型物質(zhì)的種類，分泌狀態(tài)的遺傳，分泌狀態(tài)的檢驗方法中和試驗。3 MNSs血型系統(tǒng)的抗原特征及生成機制，MNSs血型的表型與基因型，MN

8、Ss抗體免疫學特征及劑量效應；MNSs血型的遺傳。4 Rh血型系統(tǒng)：發(fā)現(xiàn)的歷史，命名法，Rh抗體的免疫學特征；Rh表型的測定；Rh血型系統(tǒng)的抗原，Rh血型的遺傳。5 Lewis系統(tǒng)；紅細胞的Lewis表型，紅細胞表面Lewis物質(zhì)，唾液及血清的Lewis表型，Lewis抗原的發(fā)育，Lewis物質(zhì)產(chǎn)生的遺傳途徑，Lewis抗體。6 P血型系統(tǒng)：P血型的表型，抗-P1、抗-PP1Pk、抗-P抗體，P血型抗原的生化組成及抗原生成的遺傳途徑。7 Duffy血型系統(tǒng)：Fya，F(xiàn)yb抗體，抗原及其基因頻率分布，Duffy血型系統(tǒng)的其它抗原8 Kidd血型系統(tǒng)：Jka與Jkb抗原，抗-Jka與抗-Jkb抗體

9、，抗Jk3抗體。9 其它血型系統(tǒng)：Kell血型系統(tǒng)，Lutheran血型系統(tǒng)，性聯(lián)Xga血型系統(tǒng)?！窘虒W方法】課堂講授【授課學時】6學時第五章 人類白細胞抗原血型系統(tǒng)【目的要求】1 掌握 HLA基因定位及HLA區(qū)的結構、HLA命名的原則、HLA遺傳特征。2 熟悉 HLA的分型方法及判型、HLA-抗原的結構。3 了解 HLA-抗原分子的組織分布、HLA的抗血清特征?！窘虒W內(nèi)容】1 HLA血型的發(fā)現(xiàn)歷史2 HLA的命名：HLA命名的原則，HLA基因的分類及組成。3 HLA區(qū)的遺傳學：HLA基因定位及HLA區(qū)的結構，HLA遺傳特征，HLA群體分布。4 HLA的細胞分布：HLA-I類抗原和HLA-II

10、類抗原分子的組織分布。5 HLA的分子結構：HLA-I類抗原的結構，HLA-II抗原的結構，HLA抗原的理化性質(zhì)。6 HLA的抗血清特征及其來源7 HLA發(fā)交叉反應8 HLA的純合子推斷9 HLA的分型方法及判型：淋巴細胞毒性試驗，淋巴細胞培養(yǎng)試驗，DNA分型技術10HLA型鑒定的法科學應用【教學方法】課堂講授【授課學時】2學時第六章 血清型【目的要求】1 掌握 HP、GC、TF、PI的遺傳。2 熟悉 HP、GC、TF、PI的分型原理及方法。3 了解 血清型的亞型?！窘虒W內(nèi)容】1 血清型的概念及根據(jù)分型原理不同的分類。2 結合珠蛋白（HP）：HP的生理功能及分子結構，HP的表型及遺傳變異，HP

11、型的遺傳，HP與疾病的關系，分型的分型原理及方法。3 維生素D結合蛋白（DPB）或型特異性成分（GC）：GC的生化性質(zhì)與生物學功能，GC的遺傳，群體遺傳學調(diào)查結果，分型原理及方法。4 1-抗胰蛋白酶：生化性質(zhì)和生物學功能，遺傳多態(tài)性，群體遺傳學調(diào)查結果，遺傳缺陷，分型方法。5 轉(zhuǎn)鐵蛋白（TF）：生化性質(zhì)及生物學功能，遺傳多態(tài)性，血清轉(zhuǎn)鐵蛋白型與疾病的關系，分型方法。6 血清類粘蛋白（ORM）：生物化學性質(zhì)與生物學功能，遺傳多態(tài)性，群體遺傳學調(diào)查結果，分型原理及方法。7 2-HS糖彈白（AHSG）：生物化學性質(zhì)與生物學功能，遺傳多態(tài)性，群體遺傳學調(diào)查結果，分型原理及方法。8 纖維蛋白溶酶原（PL

12、G）：生化性質(zhì)與生物學功能，遺傳多態(tài)性，分型方法。9 間-胰蛋白酶抑制因子（ITI）：生物化學性質(zhì)與生物學功能，遺傳多態(tài)性，群體遺傳學調(diào)查結果，分型原理及方法。10抗凝血酶（AT）生物化學性質(zhì)與生物學功能，遺傳多態(tài)性，群體遺傳學調(diào)查結果，分型原理及方法。11凝血因子 亞單（FXA）和B 亞單位（FXB）：生物化學性質(zhì)與生物學功能，遺傳多態(tài)性，群體遺傳學調(diào)查結果，分型原理及方法。12同種異型遺傳標記：免疫球蛋白的結構和分類，免疫球蛋白同種異型遺傳標記的發(fā)現(xiàn)歷史和命名，同種異型遺傳標記在免疫球蛋白上的位置，Gm與Km的遺傳，Gm與Km在人群種的分布，Gm與Km血型的測定。13補體的遺傳多態(tài)性：C1

13、，C6，C7，C8，BF，HF，其它補體蛋白，補體蛋白型的檢查方法?！窘虒W方法】課堂講授【授課學時】6學時第七章 紅細胞酶型【目的要求】1 掌握 同工酶產(chǎn)生的遺傳學基礎、分型方法。2 熟悉 紅細胞酶型的亞型。3 了解 同工酶的分類與命名，紅細胞同工酶的種類?！窘虒W內(nèi)容】1 紅細胞酶型的概念，同工酶產(chǎn)生的遺傳學基礎，同工酶的分類與命名，紅細胞同工酶的種類。紅細胞同工酶的分型。2 紅細胞酸性磷酸酶（ESP）：生理生化特征，遺傳多態(tài)性，群體遺傳學調(diào)查結果，EAP的分型方法 。3 酯酶D（EsD）：生化特征，遺傳多態(tài)性，群體遺傳學調(diào)查結果，Esd的分型方法。磷酸葡糖變位酶（PGM）：生理生化特征，遺傳

14、多態(tài)性。4 群體遺傳學調(diào)查結果，PGM1表型的分型方法。5 乙二醛酶I（GLOI）：生理生化特征，遺傳多態(tài)性，群體遺傳學調(diào)查結果，GLOI的分型方法。6 谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）：生理生化特征，遺傳多態(tài)性，群體遺傳學調(diào)查結果，GPT的分型方法。7 其他紅細胞酶型：6-磷酸葡糖酸脫氫酶（6-PGD），腺苷脫氨酶（ADA）。【教學方法】課堂講授【授課學時】4學時第八章 DNA分析及其在法科學中的應用第一節(jié) 概述【目的要求】1 掌握 DNA多態(tài)性的類型與產(chǎn)生的分子結構基礎、2 熟悉 DNA的變性和復性。3 了解 分子雜交的種類。【教學內(nèi)容】1 DNA的分子結構：核內(nèi)DNA的雙螺旋結構，堿基配對原則，DN

15、A的變性和復性。2 結構基因：基因的定義，結構基因的定義及組成。3 DNA多態(tài)性類型：DNA多態(tài)性的概念及分類。序列多態(tài)性：序列多態(tài)性的概念；限制性片段長度多態(tài)性：限制性片段長度多態(tài)性的概念、產(chǎn)生的分子結構基礎，DNA重復序列的種類，可變數(shù)目串聯(lián)重復序列多態(tài)性（VNTR），短串聯(lián)重復多態(tài)性（STR）；線粒體DNA多態(tài)性：線粒體DNA的結構，遺傳特征，多態(tài)性的分子基礎。4 分子雜交：分子雜交的概念；分子雜交的種類：Southern雜交，斑點雜交，原位雜交?！窘虒W方法】課堂講授【授課學時】6學時第二節(jié) DNA指紋【目的要求】1 掌握 DNA指紋技術實驗原理、DNA圖譜的本質(zhì)及法醫(yī)學意義。2 熟悉

16、DNA指紋技術的操作過程。單位點與多位點指紋的異同。3 了解 DNA指紋技術應用的條件?！窘虒W內(nèi)容】1 DNA指紋與DNA紋印，DNA圖譜的本質(zhì)，個體特異性，技術核心。2 核酸限制性內(nèi)切酶：核酸限制性內(nèi)切酶的概念，限制酶的分類及特征，制備DNA指紋圖選擇限制酶的基本條件。3 探針：探針的概念，核酸分子探針的分類，制備DNA指紋圖選擇探針的基本原則；探針的篩選和合成：多位點探針，單位點探針；探針的標記：同位素標記，非同位素標記。4 DNA指紋的基本特征：多位點DNA指紋特征：體細胞的穩(wěn)定性，孟德爾式遺傳，突變片段，群體遺傳學特征，多位點DNA指紋的局限性；單位點DNA指紋特征：多態(tài)片段的遺傳方式

17、，高多態(tài)性，突變率，種屬特異性。5 DNA指紋技術：DNA的提?。悍?氯仿提取DNA的基本步驟，精子DNA抽提方法；DNA定量：分光光度法，溴化乙錠-熒光法：限制酶消化：限制酶的活性單位，酶解反應緩沖液的主要成分和酶解反應體系的基本組成；電泳分離：凝膠種類的選擇，影響電泳效率的因素；印跡轉(zhuǎn)移：固相濾膜的選擇，印跡轉(zhuǎn)移方法；分子雜交：預雜交，雜交，雜交后漂洗；指紋圖顯示：同位素標記的顯示，非同位素標記的顯示。6 DNA指紋在法科學中的應用：DNA指紋技術的突出特點，DNA指紋在個人識別中的應用，DNA指紋在親子鑒定中的應用?！窘虒W方法】課堂講授【授課學時】4學時第三節(jié) 聚合酶鏈反應【目的要求】1

18、 掌握 PCR的基本原理、PCR反應條件的選擇、PCR反應產(chǎn)物的檢測方法。2 熟悉 PCR技術的特點、PCR實驗的操作。3 了解 聚合酶鏈反應技術的法醫(yī)學應用?！窘虒W內(nèi)容】1 聚合酶鏈反應技術PCR的基本原理：PCR的概念，DNA片段變性過程；PCR反應體系的組成：引物，耐熱DNA聚合酶，三磷酸脫氧核苷酸，模板DNA，反應緩沖液；PCR反應條件的選擇：變性、退火及延伸的溫度及時間選擇，循環(huán)次數(shù)的選擇；PCR技術的特點。2 聚合酶鏈反應技術的法醫(yī)學應用：選擇DNA多態(tài)位點的參考原則，擴增產(chǎn)物序列多態(tài)性的檢測：斑點印跡雜交技術，DNA測序技術；擴增片段長度多態(tài)性的檢測：擴增產(chǎn)物分型方法，擴增片段長

19、度多態(tài)性的法醫(yī)學應用。性別測定3 聚合酶鏈法應技術的改進：生物性檢材DNA的提取，小衛(wèi)星重復單位變異分型，等位基因特異性PCR，隨機引物PCR，PCR-單鏈構想多態(tài)性分析。【教學方法】課堂講授【授課學時】8學時第四節(jié) DNA分析的質(zhì)量控制【目的要求】1 掌握 DNA多態(tài)分析的技術標準。2 熟悉 實驗室質(zhì)量控制的內(nèi)容。3 了解 常用的實驗室設備?！窘虒W內(nèi)容】1 DNA多態(tài)分析的技術標準2 實驗室質(zhì)量控制的內(nèi)容【教學方法】課堂講授【授課學時】2學時第九章 親權鑒定【目的要求】1 掌握 三聯(lián)體與二聯(lián)體父權機率的計算方法、遺傳標記的選擇原則。2 熟悉 親子鑒定應注意的事項。3 了解 親子鑒定應具備的條

20、件。【教學內(nèi)容】1 概述：親權糾紛的案件類型，進行親權鑒定的實驗室標準。2 親子鑒定的條件及注意事項：親子鑒定應具備的條件，親子鑒定應注意的事項。3 親子鑒定：親子鑒定的概念，遺傳特征的種類，血液遺傳標記的選擇，遺傳規(guī)律。4 父權鑒定：父權鑒定的概念，父權否定的幾種情況。5 否定父權的機會：基因頻率的計算方法，否定父權機會的計算方法，否定父權累進機會的計算方法。6 錯誤否定父權的危險性：錯誤否定父權的情況，防止錯誤否定父權的方法。7 母親未參加鑒定的父權否定8 父權機率：根據(jù)測定遺傳標記的CCE計算父權機率，根據(jù)母、子遺傳標記聯(lián)合，確定生父傳遞遺傳標記的機率，根據(jù)母、子聯(lián)合遺傳標記類型計算父權

21、機率。【教學方法】課堂講授【授課學時】4學時第十章 血痕檢驗【目的要求】1 掌握 血痕檢驗的基本程序與方法學原理。2 熟悉 常用的血痕檢驗實驗方法。3 了解 可用于檢測血痕的遺傳標記種類?！窘虒W內(nèi)容】1 血痕檢驗需解決的問題，血痕檢驗的基本程序2 肉眼檢查3 預試驗：血痕預試驗的基本原理，常用的實驗方法。4 確證試驗：確證試驗的基本原理，常用的實驗方法。5 種屬鑒定：種屬鑒定的必要性，常用方法的分類，6 人血痕的個人識別ABO血型測定：吸收試驗，解離試驗，混合凝集試驗；MN血型測定；血清型測定：血痕HP型測定，血痕GC型測定；紅細胞酶型測定；DNA多態(tài)性分析；性別鑒定。 7出血部位判定【教學方

22、法】課堂講授【授課學時】4學時第十一章 精斑檢驗【目的要求】1掌握 精斑確證實驗的指標。2熟悉 可用于精斑檢測的遺傳標記。3了解 常用的精斑預試驗方法。【教學內(nèi)容】1概述：精液的組成及理化性質(zhì)，精子的形態(tài)檢查，精子在女性生殖道中的可檢測時間。2精斑的證明：肉眼檢驗，預試驗，確證試驗。3精斑的種屬鑒定：抗人精液血清沉淀反應，乳膠凝集抑制試驗，精漿前列腺特異性抗原P30的檢測。4精斑的個人識別：ABO血型檢測：中和試驗，酶標抗體免疫測定法，解離試驗及混合凝集試驗；同工酶型檢測：紅細胞酶型，F(xiàn)u型，DIA3型，-GGT型；血清型：GC型，ORM1型；DNA分析【教學方法】課堂講授【授課學時】2學時第

23、十二章 精液與陰道分泌五混合斑的檢驗【目的要求】1掌握 混合斑中精液遺傳標記的檢測方法。2熟悉 混合斑的證明。3了解 精液的化學組成?！窘虒W內(nèi)容】1混合斑的證明：陰道脫落上皮細胞檢查，陰道肽酶測定2混合斑的個人識別：混合斑中精液的ABO血型測定：中和試驗，測-2-SGP的ABH物質(zhì)，抗人精液獨特蛋白血清測定，其他方法；混合斑中精子的ABO血型測定：間接酶標抗體免疫組化法，免疫金銀染色法；血清型測定：GC型，ORM1型；酶型測定：PGM1型，DIA3型，F(xiàn)u型，-GGT型；精子DNA分析 【教學方法】課堂講授【授課學時】2學時第十三章 唾液（斑）及尿斑檢驗【目的要求】1掌握 唾液斑與尿斑確證試驗

24、的原理。2熟悉 唾液斑與尿斑可檢測的遺傳標記。3了解 檢材提取的注意事項。【教學內(nèi)容】1唾液斑檢驗：檢材提取的注意事項，唾液斑的確證試驗，唾液斑的個人識別。2尿斑的檢驗：尿斑預試驗，尿斑確證試驗，尿斑的個人識別?！窘虒W方法】課堂講授【授課學時】1學時第十四章 人體組織的個人識別【目的要求】 1掌握 不同人體組織可檢測的遺傳標記。2熟悉 遺傳標記檢測的特點。3了解 檢測毛發(fā)與指甲的注意事項。【教學內(nèi)容】1軟組織的個人識別：人體組織的ABO型測定，人體組織中其他遺傳標的檢測。2指甲遺傳標記的測定與個人識別：指甲的ABO血型測定，指甲mtDNA的序列測定。3人類毛發(fā)遺傳標記的測定：ABO血型測定，P

25、GM1、Esd、GLOI表型測定，毛根細胞核DNA多態(tài)性分析，毛干mtDNA序列多態(tài)性分析，用PCR法測定毛發(fā)的性別。【教學方法】課堂講授【授課學時】1學時法醫(yī)血清學（實驗課）教學大綱實驗一、實驗室基本操作【目的要求】 1掌握 紅細胞懸液配制的方法，抗血清價測定方法。2熟悉 實驗常用儀器的使用方法，常用試劑的配制方法。3了解 實驗室玻璃器材的洗滌和消毒?！窘虒W內(nèi)容】1生理鹽水的配制：藥品的準確稱量，試劑配制。2紅細胞懸液的制備：紅細胞的采集，紅細胞的洗滌，2%紅細胞懸液的制備。3抗血清效價測定：抗血清的二倍稀釋，凝集反應結果的判定。【教學方法】實驗操作【授課時數(shù)】4學時實驗二、血液的紅細胞型檢

26、驗【目的要求】1掌握 ABO血型，MN血型的檢測方法。2熟悉 Rh血型的檢測方法?！窘虒W內(nèi)容】1ABO血型檢驗（試管法）： 正實驗：用標準抗血清測定未知紅細胞的抗原； 反實驗：用標準紅細胞測定未知血清的抗體。2MN血型檢驗（凹玻板法）：用標準抗-M，抗-N抗體測定紅細胞MN抗原。3Rh血型檢驗（微滴板法）：用標準抗-D、C、E、c、e血清檢測經(jīng)木瓜酶處理的紅細胞Rh抗原。【教學方法】實驗操作【授課時數(shù)】4學時實驗三、血清HP型檢驗【目的要求】1掌握 聚丙稀酰胺凝膠垂直板電泳技術，掌握HP型的判型方法。2熟悉 血紅蛋白溶解液的制備及檢材處理方法。3了解 聯(lián)苯胺染色的原理?！窘虒W內(nèi)容】1樣品處理：

27、待檢血清樣品與血紅蛋白溶血液混合。2凝膠制備：組裝電泳槽，灌制電泳凝膠（分離膠T=7%，C=2.6%，濃縮膠T=4%，C=2.6%）。3電泳分離：加樣，連接電泳儀和電泳槽，加電電泳至血紅蛋白前沿接近凝膠正極端。4顯譜：剝膠，聯(lián)苯胺染液染色，判型?！窘虒W方法】實驗課【授課時數(shù)】6學時實驗四、血清TFC亞型檢驗【目的要求】1掌握 聚丙稀酰胺凝膠等電聚焦技術，掌握TFC亞型的判型方法。2熟悉 等電聚焦的基本原理。3了解 神經(jīng)胺酸酶處理檢材的意義?！窘虒W內(nèi)容】1樣品處理：神經(jīng)胺酸酶處理檢材。2凝膠制備：凝膠槽的組裝，光聚合法制備凝膠。3加樣：濾紙條浸取處理后的檢材加樣。4聚焦：加載電極條，連接電泳槽和

28、電泳儀，設置電泳條件，聚焦。5顯譜：剝膠，考馬斯亮藍蛋白染色，判型?！窘虒W方法】實驗操作【授課時數(shù)】6學時實驗五、血清Gm型檢驗【目的要求】1掌握 dot-ELISA法的操作技術及結果判定標準。2熟悉 dot-ELISA的實驗原理。3了解 預處理和封閉的實際意義?！窘虒W內(nèi)容】1樣品處理及點樣：PBS-T液浸泡檢材，用毛細管在硝酸纖維素膜上點樣。2預處理及封閉：點樣后的硝酸纖維素膜分別用3%H2O2預處理和1%牛血清白蛋白封閉。3抗體結合：10倍稀釋的酶標抗人G2m（23）抗體浸泡硝酸纖維素膜。4顯色：酶活性顯譜。【教學方法】實驗操作【授課時數(shù)】4學時實驗六、紅細胞ESD型檢驗【目的要求】1掌握

29、 瓊脂糖凝膠水平電泳方法及ESD判型方法。2熟悉 ESD檢驗的顯譜原理。【教學內(nèi)容】1樣品處理：制備血紅蛋白溶血液。2凝膠制備：制備1%的瓊脂糖凝膠板。3加樣：切制加樣槽，用濾紙浸取處理后的樣品加樣。4電泳：濾紙連接凝膠板和電泳液，設置電泳條件電泳。5顯譜：熒光染色法顯譜，判型。【教學方法】實驗操作【授課時數(shù)】4學時實驗七、DNA多態(tài)性分析（一）【目的要求】1掌握 酚/氯仿提取DNA的方法，掌握PCR擴增方法。2熟悉 PCR基本原理及提高擴增特異性的方法。3了解 DNA濃度測定的方法?！窘虒W內(nèi)容】1血液樣品的采集及白細胞層的分離。2，酚/氯仿法抽提DNA。3PCR反應體系的配制。4PCR反應條件的設置及擴增。 【教學方法】實驗操作【授課時數(shù)】6學時實驗八、DNA多態(tài)性分析（二）【目的要