臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

1、臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)血液常規(guī)檢驗(yàn)一、微量吸管的使用、毛細(xì)血管采血、計(jì)數(shù)板的鑒定與使用【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆瘴⒘课艿氖褂谩⒚?xì)血管采血、計(jì)數(shù)板的鑒定、構(gòu)造與使用?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：紅細(xì)胞稀釋液、75乙醇、消毒藥棉?！緦?shí)驗(yàn)器材】： 一次性采血針、計(jì)數(shù)板、蓋玻片、微量吸管、2ml吸管、中號試管、顯微鏡、小玻璃棒?！緦?shí)驗(yàn)原理】：一次性采血針刺破毛細(xì)血管后，用微量吸管吸取一定量的血液，稀釋一定的倍數(shù)，沖入計(jì)數(shù)池計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的細(xì)胞的數(shù)量?！緦?shí)驗(yàn)方法】：一、微量吸管的使用：用抗凝血訓(xùn)練微量吸管的使用。二、毛細(xì)血管采血（以紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為例）：準(zhǔn)備：取清潔干燥試管一支，加2ml紅細(xì)胞稀釋液。 采血部位選擇、按摩75

2、乙醇棉球進(jìn)行刺針部位皮膚消毒待酒精揮發(fā)干（否則血流不成滴）自指尖腹內(nèi)側(cè)迅速刺針擦去第一滴血準(zhǔn)確吸取10ul血液用無菌干棉球壓住傷口止血用無菌干棉球擦去管尖外圍余血后將血液釋放到稀釋液底部回吸上清液2-3次輕輕混勻。三、計(jì)數(shù)板構(gòu)造與應(yīng)用1計(jì)數(shù)板構(gòu)造外觀構(gòu)造：每塊計(jì)數(shù)板由“H”型凹槽分上下兩個(gè)計(jì)數(shù)室，在計(jì)數(shù)室兩側(cè)各有一條支柱，比計(jì)數(shù)室高出0.1mm，將一塊平整光滑的血細(xì)胞計(jì)數(shù)專用蓋玻片（24.0mm20.0mm0.6mm）覆蓋其上時(shí)，蓋玻片與計(jì)數(shù)室間形成0.1mm的縫隙。格子構(gòu)造：計(jì)數(shù)池長、寬各3mm，平均分成9個(gè)大格，每個(gè)大方格的容積是0.1 mm3四角的四個(gè)大方格分別用單線劃分成16個(gè)中方格，

3、是白細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)域；中央的大方格用雙線條劃分成25個(gè)中方格，每個(gè)中方格又用單線劃分成16個(gè)小方格，其中四角和正中的5個(gè)中方格是紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)域。2計(jì)數(shù)板的使用： 用清潔干燥柔軟的紗布擦拭計(jì)數(shù)板及蓋玻片用推蓋法從計(jì)數(shù)板下緣向前平推蓋玻片將其蓋在計(jì)數(shù)室上充分混勻細(xì)胞懸液充池靜置觀察細(xì)胞分布情況（若嚴(yán)重不勻，應(yīng)重新充池。）【注意事項(xiàng)】：1采血部位應(yīng)選擇皮膚完整，不能有燒傷、凍瘡、發(fā)紺、水腫或炎癥。2針刺應(yīng)迅速，深度適宜（約23mm）。待血液自行流出，擦去第一滴血。3微量吸管取血時(shí)應(yīng)將微量吸管管尖側(cè)著插入血滴中央。若血流不暢，可以左手自采血部位遠(yuǎn)端向指尖稍壓力至血液流出為止。切忌用力擠壓，造成組織液混入，

4、影響結(jié)果準(zhǔn)確性。4計(jì)數(shù)板在使用中勿讓手指接觸計(jì)數(shù)池及蓋玻片表面，以訪油膩污染，致使充液時(shí)起泡。二、血涂片的制作,瑞氏染色【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆昭谱鞣椒?，瑞氏染色原理及方法。【?shí)驗(yàn)試劑】：瑞吉氏復(fù)合染液 （液、液）【實(shí)驗(yàn)器材】：顯微鏡、載玻片、推玻片、一次性針頭、消毒棉球、洗耳球【實(shí)驗(yàn)原理】：細(xì)胞的著色既有化學(xué)的親和作用，又有物理的吸附作用，不同的細(xì)胞由于其所含化學(xué)成分不一樣，化學(xué)性質(zhì)各不相同，所以對染料的親和力也不一樣，因此將細(xì)胞染成不同的顏色?！緦?shí)驗(yàn)方法】：一、瑞一吉氏復(fù)合染液配制液：取瑞特染粉1g，吉姆薩染粉0.3g，置潔凈研缽中，加少量甲醇（分析純），研磨片刻，吸出上層染液，再加少量甲醇

5、，繼續(xù)研磨，再吸出上層染液。如此連續(xù)幾次，共用甲醇500ml。收集于棕色瓶中，每天早晚各振搖3共5天，再存放一周，將染液過濾后即可使用。液：磷酸鹽緩沖液（PH6.56.8），取磷酸二氧鉀（無水）6.64g，磷酸氟二鈉（無水）2.56g，加少量蒸餾水溶解，調(diào)整PH后，加水至1000ml。二、血片制作、瑞氏染色方法準(zhǔn)備：取清潔干燥載玻片，邊緣光滑清潔推玻片各一張。1、制備血涂片：取載玻片取血1滴于載玻片右端（邊緣留1.5cm空隙）左手持載玻片，右手持推玻片將推玻片放至血滴前沿逐漸后移至血滴沿推片散開后，推玻片與載玻片成3035的夾角以平穩(wěn)的速度將血液向前推進(jìn)干燥（手持載玻片末端迅速在空氣中揮動(dòng)干燥

6、）。2、染色：將干透的血涂片放在水平位置加瑞吉氏復(fù)合染液液數(shù)滴，以染液覆蓋整個(gè)血膜為度靜置染0.51min滴加約2倍于液量的液用洗耳球吹氣混勻染色510min平持玻片用流線型水洗干燥鏡檢【注意事項(xiàng)】：1嚴(yán)格皮膚消毒。2.血滴大、血黏度高、推片角度大、速度快則血膜厚，反之則血膜薄。3.染料放置時(shí)間越長，美蘭逐漸氧化為天青，染色效果越好。4染液淡，室溫低，細(xì)胞多則染色時(shí)間長，反之減少染色時(shí)間。5水洗方法為平持血涂片流線型水緩緩沖洗干凈，不要先倒掉染液。三、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆瞻准?xì)胞計(jì)數(shù)的原理、操作方法與結(jié)果報(bào)告。【實(shí)驗(yàn)原理】：用白細(xì)胞稀釋液將全血稀釋一定的倍數(shù)并破壞紅細(xì)胞，充入血

7、細(xì)胞計(jì)數(shù)池，顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求出每升血液中的白細(xì)胞數(shù)量?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：白細(xì)胞稀釋液 【實(shí)驗(yàn)器材】： 顯微鏡、改良Neubauer計(jì)數(shù)板、試管、微量吸管、玻璃棒【實(shí)驗(yàn)方法】：準(zhǔn)備：取清潔干燥試管一支，加0.38ml白細(xì)胞稀釋液。采血部位按摩75乙醇棉球進(jìn)行刺針部位皮膚消毒待酒精揮發(fā)干（否則血流不成滴）自指尖腹內(nèi)側(cè)迅速刺針擦去第一滴血準(zhǔn)確吸取20ul血液用無菌干棉球壓住傷口止血用無菌干棉球擦去管尖外圍余血后將血液輕輕釋放到稀釋液底部回吸上清液2-3次混勻室溫靜置至液體變?yōu)樽睾稚醇t細(xì)胞破壞完全清潔計(jì)數(shù)板、蓋玻片充池靜置23min待細(xì)胞下沉低倍鏡下計(jì)數(shù)四角大方格內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù)計(jì)

8、算報(bào)告。計(jì)算：WBC=四個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)（N）/41020106=N/20109/L【注意事項(xiàng)】：1采血部位應(yīng)選擇皮膚完整，不能有燒傷、凍瘡、發(fā)紺、水腫或炎癥。2針刺應(yīng)迅速，深度適宜（約23mm）。待血液自行流出，擦去第一滴血。3.稀釋液要過濾使用，試管、計(jì)數(shù)板均須清潔，以免混入雜質(zhì)被誤認(rèn)為白細(xì)胞。4.加稀釋液、血液量應(yīng)精確，以保證稀釋倍數(shù)。5.計(jì)數(shù)池內(nèi)細(xì)胞分布要均勻，每個(gè)大方格間白細(xì)胞數(shù)差異不得超過均值的10，否則要重新充液計(jì)數(shù)。6.嚴(yán)格掌握計(jì)數(shù)原則，以免人為擴(kuò)大或縮小計(jì)數(shù)區(qū)域。 7.白細(xì)胞數(shù)量過高時(shí)，可加大稀釋倍數(shù)，反之白細(xì)胞過低時(shí)可計(jì)數(shù)8個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞數(shù)或加大取血量。四、白細(xì)胞分類

9、計(jì)數(shù)（DC）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆诊@微鏡法外周血分類計(jì)數(shù)的方法、各種白細(xì)胞的鏡下形態(tài)?！緦?shí)驗(yàn)原理】：將血液制備成涂片，經(jīng)瑞吉氏染色后顯微鏡下根據(jù)白細(xì)胞的形態(tài)特征進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。通常分類100個(gè)白細(xì)胞，計(jì)算得出各種白細(xì)胞所占百分比?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：瑞吉氏復(fù)合染液 【實(shí)驗(yàn)器材】：顯微鏡、外周血標(biāo)本片、香柏油、擦鏡紙、清潔劑【實(shí)驗(yàn)方法】：準(zhǔn)備：血涂片制備及瑞吉氏染色待干低倍鏡下選擇細(xì)胞分布均勻、著色良好的區(qū)域轉(zhuǎn)油鏡按一定的規(guī)律移動(dòng)視野，依次進(jìn)行分類計(jì)夠100個(gè)白細(xì)胞算出各種白細(xì)胞的百分比報(bào)告【注意事項(xiàng)】：1.涂片制備要厚薄適中、均勻、頭體尾分明。2.分類時(shí)要有程序地連續(xù)進(jìn)行，避免主觀選擇視野。3.分類中如見

10、幼紅細(xì)胞，不計(jì)入100個(gè)白細(xì)胞內(nèi)，以分類100個(gè)白細(xì)胞過程中見到幼紅細(xì)胞多少個(gè)來報(bào)告，并應(yīng)注明其所屬階段，4.分類中應(yīng)注意觀察成熟紅細(xì)胞、血小板的形態(tài)染色及其分布情況，注意有無寄生蟲（如瘧原蟲）及其他異常所見。五、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）及分類計(jì)數(shù)(DC)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆瞻准?xì)胞計(jì)數(shù)及分類計(jì)數(shù)原理、方法與結(jié)果報(bào)告【實(shí)驗(yàn)原理】：白細(xì)胞計(jì)數(shù)原理：用白細(xì)胞稀釋液將全血稀釋一定的倍數(shù)并破壞紅細(xì)胞，充入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池，顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求出每升血液中的白細(xì)胞數(shù)量。 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)原理：將血液制備成涂片，經(jīng)瑞吉氏染色后顯微鏡下根據(jù)白細(xì)胞的形態(tài)特征進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。通常分類100個(gè)白細(xì)胞，計(jì)算得出

11、各種白細(xì)胞所占百分比?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：白細(xì)胞稀釋液、瑞吉氏復(fù)合染液【實(shí)驗(yàn)器材】：顯微鏡、改良Neubauer計(jì)數(shù)板、試管、微量吸管、玻璃棒、載玻片、推玻片、香柏油、擦鏡紙、清潔劑【實(shí)驗(yàn)方法】：準(zhǔn)備：1.取清潔干燥試管一支，加0.38ml白細(xì)胞稀釋液。2.取清潔干燥載玻片，邊緣光滑清潔推玻片各一張。采血部位按摩75乙醇棉球進(jìn)行刺針部位皮膚消毒待酒精揮發(fā)干（否則血流不成滴）自指尖腹內(nèi)側(cè)迅速刺針擦去第一滴血準(zhǔn)確吸取20ul血液用無菌干棉球擦去管尖外圍余血后將血液輕輕釋放到稀釋液底部回吸上清液2-3次混勻另取血一滴于載玻片的右端立即推制血膜用無菌干棉球壓住傷口止血清潔計(jì)數(shù)板、蓋玻片充池（靜置23min待

12、細(xì)胞下沉）低倍鏡下計(jì)數(shù)四角大方格內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù)將干透的血膜進(jìn)行瑞吉氏染色油鏡下分類計(jì)數(shù)計(jì)算報(bào)告。六、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、Hb測定【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆占t細(xì)胞計(jì)數(shù)，Hb測定原理、操作方法，規(guī)范的報(bào)告結(jié)果【實(shí)驗(yàn)原理】：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)原理：用等滲稀釋液將血液稀釋一滴倍數(shù)，充入計(jì)數(shù)池，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求得內(nèi)升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。Hb測定（HiCN法）原理：血紅蛋白被高鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白，后者再與氰離子結(jié)合形成穩(wěn)定地氰化搞鐵血紅蛋白（HiCN），HiCN在規(guī)定波長（540nm）和液層厚度（1cm）的條件下具有一定的毫摩爾消光系數(shù)?？捎脴?biāo)準(zhǔn)的高精度分光光度計(jì)進(jìn)行直接定量測定，或用

13、HiCN標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行比色法測定，根據(jù)標(biāo)本的吸光度即可求出血紅蛋白濃度?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：紅細(xì)胞稀釋液（甲醛枸木緣酸鹽稀釋液）， HiCN轉(zhuǎn)化液【實(shí)驗(yàn)器材】：改良Neubauer計(jì)數(shù)板、顯微鏡、分光光度計(jì)、玻璃試管、微量吸管、玻璃棒、【實(shí)驗(yàn)方法】：RBC：取清潔干燥試管一支加紅細(xì)胞稀釋液1.99ml加未梢血10ul于稀釋液底部吸取上清液嗽洗34次顛倒混勻清潔計(jì)數(shù)板，蓋玻片充液靜置23計(jì)數(shù)（中央大格中四角及正中5個(gè)方各細(xì)胞數(shù)）計(jì)算RBC=5個(gè)中方格細(xì)胞數(shù)510200106=5個(gè)中方格細(xì)胞數(shù)1012/L。Hb測定:1.直接定量測定法：取中號試管一支加HiCN轉(zhuǎn)化液5ml加未梢血20ul混勻靜置5721比色

14、，波長540nm，以轉(zhuǎn)化液為空白對照管測其吸光度“A”計(jì)算（“A”367.7）報(bào)告2.標(biāo)準(zhǔn)曲線法：將血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液稀釋成不同的三種濃度（150g/L、100g/L、50g/L）分別測其吸光度“A”，以“A”為縱坐標(biāo)，血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液參考值（g/L）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線查出待測樣本的血紅蛋白濃度。【注意事項(xiàng)】：1.取血應(yīng)順利、準(zhǔn)確，采血部位不得有燒傷、凍瘡、發(fā)紺、水腫或炎癥，不得過渡擠壓，紅細(xì)胞數(shù)量明顯增高者可適當(dāng)加大稀釋倍數(shù)。2. HiCN轉(zhuǎn)化液應(yīng)置棕色瓶于4冰箱中，不能儲(chǔ)存于白色瓶、塑料瓶及強(qiáng)光下，否則會(huì)使CN丟失，結(jié)果偏低。3HiCN轉(zhuǎn)化液中有氧化鉀劇毒，防止污染。測定后的比

15、色液不能與酸性溶液混合，否則可產(chǎn)生劇毒的氫氰酸氣體。4.所用分光光度計(jì)的波長、吸光度需要校正，帶寬應(yīng)小于1nm，比色杯光徑1.000cm時(shí)，測定溫度為2025。七、血液常規(guī)檢驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆昭Ｒ?guī)的連續(xù)操作規(guī)程并規(guī)范的報(bào)告結(jié)果?！緦?shí)驗(yàn)原理】：見實(shí)驗(yàn)二、三、四、六【實(shí)驗(yàn)試劑】：紅細(xì)胞稀釋液、白細(xì)胞稀釋液、瑞吉氏復(fù)合染液、HiCN轉(zhuǎn)化液【實(shí)驗(yàn)器材】：改良Neubauer計(jì)數(shù)板、分光光度計(jì)、玻璃試管、微量吸管、顯微鏡、玻棒?！緦?shí)驗(yàn)方法】：取大、中、小號試管各一支分別加HiCN轉(zhuǎn)化液5ml、紅細(xì)胞稀釋液2ml、白細(xì)胞稀釋液0.38ml手指消毒針刺分別取未梢血10ul于紅細(xì)胞稀釋液中、20ul于白細(xì)

16、胞稀釋液中、20ul于HiCN轉(zhuǎn)化液中并及時(shí)混勻取清潔干燥玻片粘取1滴血液于玻片一端推制血片待干721比色瑞氏染色白細(xì)胞及紅細(xì)胞計(jì)數(shù)DC計(jì)算報(bào)告（血常規(guī)結(jié)果報(bào)告）正常值： 成人 兒童 新生兒1.WBC:（410）109/L （512）109/L （1520）109/L 成年男性 成年女性 兒童2.RBC:（45.5）1012/L (3.5-5) 1012/L (6-7) 1012/L3.HB: 120-165g/L 110-150 g/L 170-200 g/L4.DC: N: 桿狀15分葉5070L：2040 M：38 E：0.55 B：01【注意事項(xiàng)】：1.取血應(yīng)順利、準(zhǔn)確，采血部位不得有

17、燒傷、凍瘡、發(fā)紺、水腫或炎癥，不得過度擠壓。2HiCN轉(zhuǎn)化液中有氧化鉀巨毒，防止污染。測定后的比色液不能與酸性溶液混合，否則可產(chǎn)生劇毒的氫氰酸氣體。3細(xì)胞計(jì)數(shù)混合不易過分震搖。4. 瑞氏染色時(shí)加染液與緩沖液的比例為1：1或1：2。 5.采取標(biāo)本的順序：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測定、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血片制作八、血小板計(jì)數(shù)（BPC或PLT）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆昭“宓挠?jì)數(shù)原理、方法、鏡下形態(tài)及結(jié)果報(bào)告?！緦?shí)驗(yàn)原理】：用稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)后混勻，充入計(jì)數(shù)池中，于顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積的血小板數(shù)，經(jīng)換算求得每升血液內(nèi)的血小板數(shù)。【實(shí)驗(yàn)試劑】：10g/L草酸銨液 【實(shí)驗(yàn)器材】：顯微鏡、：改良Neubauer計(jì)

18、數(shù)板【實(shí)驗(yàn)方法】：準(zhǔn)備：取清潔干燥的小試管一支，加10g/L草酸銨液0.38ml 準(zhǔn)確取自然流出的外周血20ul輕輕放入到上述稀釋液底部回吸上清液漱洗吸管23次混勻室溫靜置10 min清潔計(jì)數(shù)板、蓋玻片混勻細(xì)胞懸液后充池靜置10 min15min于高倍鏡下計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)四角和中央5個(gè)中方格內(nèi)血小板總數(shù)計(jì)算報(bào)告 計(jì)算：血小板數(shù)/L5個(gè)中方格內(nèi)血小板總數(shù)109/L【注意事項(xiàng)】：1. 所用試劑、器材應(yīng)10g/L草酸銨液稀釋液中無塵埃、細(xì)菌等污染。2.毛細(xì)血管采血時(shí)，針刺深度應(yīng)達(dá)3mm。采血要快避免血液凝固. 若遇血小板成簇分布時(shí)，應(yīng)重采標(biāo)本計(jì)數(shù).3.細(xì)胞懸液充入計(jì)數(shù)池中靜置時(shí)，應(yīng)注意保持濕度，避免

19、水分蒸發(fā)。4.計(jì)數(shù)時(shí)光線不可太強(qiáng)，注意微有折光性的血小板與塵埃的鑒別。血小板為輕度折光性的園形、橢園形。5血小板計(jì)數(shù)應(yīng)在1h內(nèi)完成，否則結(jié)果可降低。九、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RC）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆站W(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)原理、測定方法、鏡下形態(tài)、結(jié)果報(bào)告?！緦?shí)驗(yàn)原理】：網(wǎng)織紅細(xì)胞為晚幼紅細(xì)胞脫核后，但尙未完全成熟的紅細(xì)胞。其胞質(zhì)中尙殘存核糖體、核糖核酸等堿性物質(zhì)，經(jīng)活體染色后于胞質(zhì)中可見藍(lán)綠色網(wǎng)點(diǎn)狀或點(diǎn)粒狀結(jié)構(gòu)?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：10g/L黃焦油籃生理鹽水溶液【實(shí)驗(yàn)器材】：顯微鏡、試管、載玻片、推玻片【實(shí)驗(yàn)方法】：準(zhǔn)備：取清潔干燥小試管一支，加10g/L黃焦油籃生理鹽水溶液23滴 取外周血23滴于上述試管中立即

20、混勻37下染色1520min取試管里的混合血液一滴于載玻片一端推制成薄血膜待干燥油鏡下計(jì)數(shù)（于目鏡筒中放一縮小視野的硬紙片）至少1000個(gè)紅細(xì)胞中的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)計(jì)算報(bào)告計(jì)算：網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比計(jì)數(shù)的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)/100【注意事項(xiàng)】：1.網(wǎng)織紅細(xì)胞必須在活體染色下才能顯示。2.染色時(shí)血液與染料的比例約為1：1，貧血時(shí)適當(dāng)增加血量，室溫較低時(shí)適當(dāng)延長染色時(shí)間或置37溫箱.3.涂片應(yīng)厚薄適宜，以紅細(xì)胞不重疊為度，涂片后應(yīng)及時(shí)計(jì)數(shù)，否則網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)消失。4.計(jì)數(shù)區(qū)域一般選擇血膜的體部，自體部向尾部迂回檢查。十、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆帐人嵝粤＜?xì)胞直接計(jì)數(shù)的原理、操作方法、鏡下形態(tài)及結(jié)果報(bào)告。【實(shí)驗(yàn)

21、原理】：用嗜酸性粒細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定的倍數(shù)，破壞紅細(xì)胞和其他大部分白細(xì)胞并使嗜酸性粒細(xì)胞著色，滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池，顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的嗜酸性粒細(xì)胞，經(jīng)換算得出每升血液中嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：2伊紅丙酮嗜酸性粒細(xì)胞稀釋液 【實(shí)驗(yàn)器材】：顯微鏡、改良Neubauer計(jì)數(shù)板、試管、微量吸管、玻璃棒【實(shí)驗(yàn)方法】：準(zhǔn)備：取清潔干燥試管一支，加0.38ml嗜酸性粒細(xì)胞稀釋液。 精確吸取外周血20ul輕輕放入到上述稀釋液底部回吸上清液漱洗吸管23次混勻室溫靜置清潔計(jì)數(shù)板、蓋玻片混勻細(xì)胞懸液后充池靜置3 min5min于低倍鏡下計(jì)數(shù)兩側(cè)計(jì)數(shù)池中10大方格（每側(cè)計(jì)數(shù)池的四角和中央大方格）內(nèi)的嗜酸

22、性粒細(xì)胞數(shù)計(jì)算報(bào)告 計(jì)算：嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)/L10個(gè)大方格內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)20106/L【注意事項(xiàng)】：1.計(jì)數(shù)應(yīng)在30min內(nèi)完成，因時(shí)間過長嗜酸性粒細(xì)胞可被溶解，結(jié)果偏低。 2.血液加入稀釋液后應(yīng)及時(shí)混勻，否則易致血液凝固和細(xì)胞聚集，但不易用力振搖以免嗜酸性粒細(xì)胞破碎。3.震搖與殘留的中性粒細(xì)胞區(qū)別，中性粒細(xì)胞一般不受色或受色極淺，且其顆粒較小。4.做嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)最好固定時(shí)間，以免受日間生理變化影響十一、血細(xì)胞分析儀使用、LEC、血沉【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚菏煜ぱ?xì)胞分析儀的檢測原理及方法；掌握LEC的鏡下形態(tài)、血沉檢測方法及結(jié)果觀察報(bào)告?！緦?shí)驗(yàn)原理】：見儀器說明書【實(shí)驗(yàn)試劑】：溶血素、清洗液【實(shí)驗(yàn)

23、器材】：血細(xì)胞分析儀、顯微鏡、血沉架、血沉管【實(shí)驗(yàn)方法】：紅細(xì)胞沉降率（ESR）:取抗凝血約2ml灌制血沉管“0”刻度垂直豎立在血沉架上室溫靜置1小時(shí)觀察紅細(xì)胞沉降毫米數(shù)報(bào)告（紅細(xì)胞沉降率：mm/h）十二、凝血酶原時(shí)間測定（PT）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚耗康恼莆誔T測定方法、原理及結(jié)果觀察報(bào)告【實(shí)驗(yàn)原理】：在受檢血漿中加入足量的凝血活酶和鈣離子，測定血漿凝固所需的時(shí)間，即為血漿凝血酶原時(shí)間。本試驗(yàn)是外原性凝血系統(tǒng)常用的篩檢試驗(yàn)?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：1.血漿2.組織凝血活酶3.氯化鈣溶液【實(shí)驗(yàn)器材】：恒溫水浴箱、離心機(jī)、試管、微量加樣器、秒表【實(shí)驗(yàn)方法】：準(zhǔn)備：將1.2.3.試劑分別置37水溶預(yù)熱，小試管預(yù)熱。

24、取已預(yù)熱清潔干燥小試管加血漿0.1ml，同時(shí)加組織凝血活酶液0.1ml、cacl20.1ml混勻、開動(dòng)秒表計(jì)時(shí)在37水溶中不斷輕輕搖動(dòng)小試管8取出觀察，來回傾斜試管，混合物不再流動(dòng)時(shí)(出現(xiàn)膠凍狀)立即停表，讀取時(shí)間即為凝血酶原時(shí)間，作3次取均值報(bào)告?！咀⒁馐马?xiàng)】：1.采血應(yīng)“一針見血”，抗凝劑與血液比例（1：9）應(yīng)準(zhǔn)確。取血后4h內(nèi)完成測定。2.試劑在用前先預(yù)溫到測定溫度，且不能超過30分鐘。3.標(biāo)本測定前應(yīng)先測定正常人混合血漿，其PT值在允許范圍內(nèi)才能測定樣本。4.必須在36.537.5溫度下操作。輸血技術(shù)一、ABO血型鑒定（正、反定型）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆昭丸b定（正定、反定）原理、測定方法

25、及結(jié)果觀察、分析、報(bào)告?！緦?shí)驗(yàn)原理】：根據(jù)紅細(xì)胞表面A、B抗原與相應(yīng)的抗體特異性結(jié)合，可使紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集反應(yīng)這一原理，通過正、反定型來判斷型別。正定型：用已知抗A、抗B型血清來測定紅細(xì)胞上有無相應(yīng)的A、B抗原；反定型：用已知A抗原和B抗原紅細(xì)胞來測定血清中有無相應(yīng)的抗A、抗B抗體?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：標(biāo)準(zhǔn)抗A、抗B血清；5A、B 型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞生理鹽水懸液；生理鹽水【實(shí)驗(yàn)器材】：試管、離心機(jī)、記號筆、滴管、顯微鏡【實(shí)驗(yàn)方法】：準(zhǔn)備：1、分離血清，并做好標(biāo)記。2、洗滌紅細(xì)胞，制備5紅細(xì)胞懸液，做好標(biāo)記。一、正定（用已知標(biāo)準(zhǔn)血清鑒定血型）。取試管2支分別標(biāo)明抗A、抗B字樣加5方紅C晨液各1滴離離心（100

26、0轉(zhuǎn)/min 1分鐘）觀察結(jié)果。二、反定（已知標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞鑒定血型）取標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞A、B型各1-2滴分別裝在大小相等并表明A、B字樣的兩支試管中分別加被檢者血清1-2滴混勻離心觀察結(jié)果結(jié)果判斷【注：（）示凝集（）示不凝集】正定反定抗A（B型）抗B（A型）被檢者血型B型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞A 型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞【注意事項(xiàng)】：1.格查對，切不可將姓名、標(biāo)本、血型等搞錯(cuò)，要求正、反定型結(jié)果一致。2.觀察結(jié)果、登記、出報(bào)告均應(yīng)仔細(xì)查對3.滴管、試管應(yīng)清潔干燥，各吸管不能混用，避免溶血及相互污染二、交叉配血實(shí)驗(yàn)（同型、異型配血）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆整}水介質(zhì)配血法的原理、操作方法及結(jié)果觀察、分析、報(bào)告?！緦?shí)驗(yàn)原理】：天然抗體I

27、gM因其分子鏈較長，在鹽水介質(zhì)中，可以克服紅細(xì)胞表面電荷的排斥力，與含有相對應(yīng)抗原的紅細(xì)胞結(jié)合并出現(xiàn)肉眼可見的凝集?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：生理鹽水【實(shí)驗(yàn)器材】：試管、滴管、離心機(jī)、記號筆【實(shí)驗(yàn)方法】：準(zhǔn)備：1、分離血清，并做好標(biāo)記。2、洗滌紅細(xì)胞，制備2紅細(xì)胞懸液，做好標(biāo)記一、同型交叉（1）取試管2支分別注明主側(cè)、次側(cè)： 主側(cè)：受血得血清1滴+獻(xiàn)血者2紅細(xì)胞懸液1滴。 次側(cè)：受血者2紅細(xì)胞懸液1滴+獻(xiàn)血者血清1滴。（2）充分混勻離心1分鐘（1000轉(zhuǎn)/min）觀察結(jié)果。（3）結(jié)果觀察：在白色背景下，先觀察上清液呈正常血清狀即無溶血現(xiàn)象，再輕搖試管，試管內(nèi)血球呈現(xiàn)均勻混濁也無凝集。為叉配血試驗(yàn)相合，若有

28、溶血或凝集均不可輸。二、異型交叉：“O”型作為獻(xiàn)血者獻(xiàn)給“A”或“B”或“AB”型，其結(jié)果是：主側(cè)不凝，次側(cè)凝。【注意事項(xiàng)】：1.嚴(yán)格查對，切不可將受血者、獻(xiàn)血者姓名、標(biāo)本、血型等搞錯(cuò)。2.觀察結(jié)果、登記、出報(bào)告均應(yīng)仔細(xì)查對。3.吸管、試管應(yīng)清潔干燥，各吸管不能混用，避免溶血及相互污染。4.交叉配血時(shí)主側(cè)、次側(cè)一定要分清。尿液檢驗(yàn)一、尿液理學(xué)及化學(xué)檢驗(yàn)（尿液外觀、SG、PRO、GLU、KET、URO）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆漳蛞旱囊话憷韺W(xué)檢驗(yàn)及常用化學(xué)檢驗(yàn)原理、操作方法及結(jié)果觀察、報(bào)告。【實(shí)驗(yàn)原理】：1.PRO原理：磺基水楊酸發(fā)：在酸性條件下，磺基水楊酸的磺酸根陰離子與蛋白質(zhì)氨基酸陽離子結(jié)合，形成不

29、溶性蛋白鹽沉淀。加熱醋酸法：加熱煮沸使蛋白質(zhì)變性凝固，加乙酸使尿pH接近等電點(diǎn)（pH5左右）而加速蛋白質(zhì)沉淀。2.GLU（班氏法）原理：葡萄糖在堿性溶液中加熱后，由環(huán)狀結(jié)構(gòu)變?yōu)閹┗逆湢罱Y(jié)構(gòu)而具有還原性，可將硫酸銅還原為黃或紅色的氧化亞銅（Cu2O）而沉淀。3.KET（朗格氏環(huán)狀法）原理：尿中的酮體（丙酮和已酰乙酸）與亞硝基鐵氰化鈉和硫酸銨作用，可生成異硝基、異硝基胺，后者與（CN）53生成紫紅色復(fù)合物。4.URO原理：在酸性溶液中，尿膽原與對二氨基本甲醛反應(yīng)，生成櫻紅色化合物?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：5冰乙酸液、200g/L磺基水楊酸液、班氏試劑、亞硝基鐵氰化鈉、氨水、Ehrlich試劑【實(shí)驗(yàn)器材】

30、：試管、PH試紙、滴管、酒精燈、試管夾、尿比重計(jì)【實(shí)驗(yàn)方法】：1、尿色，透明度：正常人黃色透明，若遇混濁尿，采取加熱加酸法鑒別；深黃色（黃膽病人）。2、尿PH值：正常尿液一般為弱酸必（PH6.5 ）。3、尿比重(SG)：成人為1.0151.025（多積尿），若受飲水、出汗影響比重波動(dòng)于1.0031.030之間（隨機(jī)尿）。尿比重測定方法：斜持比重筒（量筒），將尿液沿管壁緩慢倒入量筒中以將比重計(jì)浮起為度，避免激起泡沫，如有泡沫，可用濾紙吸去，將比重計(jì)輕輕放入并加以捻轉(zhuǎn)，使其懸浮在尿液中，待比重計(jì)稍停穩(wěn)后，讀取液面的比重測度。4、尿蛋白定性試驗(yàn)(PRO)（兩種方法）（1）加熱醋酸法（參考方法）：取試

31、管加尿至試管2/3處用試管夾夾持試管下1/3處加熱上1/3處的尿液（注意：不斷轉(zhuǎn)動(dòng)試管均勻加熱，防止尿液沸濺）加冰醋酸23滴再加熱煮沸觀察結(jié)果報(bào)告。（2）200g/L磺基水楊酸法（首選方法）：取試管加尿約1ml于試管內(nèi)加磺柳酸數(shù)滴觀察結(jié)果報(bào)告。5、尿糖定性試驗(yàn)(GLU)（班氏法）：取試管加班氏試劑1ml于試管內(nèi)加熱煮沸試劑仍呈清亮藍(lán)色滴加尿液23滴再次煮沸2min冷卻觀察結(jié)果報(bào)告。6、尿酮體檢驗(yàn)(KET)（即格氏環(huán)狀法）：取試管一支加尿液約2ml加冰乙酸數(shù)滴混勻加亞硝基鐵氰化鈉（粉少許）震蕩混勻沿管壁輕輕加入氨水作環(huán)狀試驗(yàn)報(bào)告。 7、尿膽原檢驗(yàn)（URO）（歐氏法）：取試管加新鮮尿1ml加歐立區(qū)

32、試劑0.1ml混勻靜置10分鐘在白色背景下，從管口向管底觀察結(jié)果報(bào)告?！咀⒁馐马?xiàng)】：1、認(rèn)真觀察尿色、量、測PH。 2、加熱煮沸時(shí)，切忌管口對人，應(yīng)不時(shí)振動(dòng)試管，以防止溢出。3、尿膽原檢驗(yàn)時(shí)尿液應(yīng)新鮮，否則尿膽原在空氣中氧化為尿膽素而致假陰性結(jié)果。4、在測尿比重時(shí)應(yīng)注意校正溫度及尿量不足時(shí)的校正方法。二、尿液沉渣鏡檢【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆漳虺猎鼧?biāo)本制作方法及尿沉渣顯微鏡下檢查的內(nèi)容?！緦?shí)驗(yàn)原理】：用顯微鏡檢查方法，依據(jù)尿液細(xì)胞、管型等有形成分的形態(tài)特征，識別并記錄其在一定顯微鏡視野內(nèi)的數(shù)目。【實(shí)驗(yàn)器材】：玻片、離心機(jī)、試管、顯微鏡【實(shí)驗(yàn)方法】：取中號試管一支加混合均勻尿液約至試管2/3處離心（55

33、00轉(zhuǎn)/分鐘）5分鐘一次性傾去上清液留取尿沉渣液約0.2ml混勻在載玻片上涂成薄片鏡檢報(bào)告報(bào)告方式：“少許”少數(shù)視野可見（14個(gè)）“+”占視野面積1/4或每個(gè)視野都有少量敬在（514個(gè)）“+”占視野面積的一半（1529）“+”占視野面積的3/4（3050）“+”滿視野（50個(gè)以上）注：低倍鏡下計(jì)數(shù)20個(gè)視野所見管型數(shù)，高倍鏡下計(jì)數(shù)至少10個(gè)視野各類細(xì)胞數(shù)。【注意事項(xiàng)】：1尿在離心前和涂片前必須混勻2棄去上清液應(yīng)一次性傾去勿來回顛倒。3報(bào)告方式規(guī)范。三、1小時(shí)細(xì)胞排泄率測定【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆漳蛞?小時(shí)細(xì)胞排泄率檢驗(yàn)原理、方法及結(jié)果觀察、報(bào)告?！緦?shí)驗(yàn)原理】：在日常生活不受限制的情況下，準(zhǔn)確留取3小

34、時(shí)的全部尿液。取混勻后的部分尿液離心，留沉淀液，混勻充入細(xì)胞計(jì)數(shù)池，計(jì)數(shù)一定體積沉淀液中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞和管型，然后換算成1小時(shí)尿中相應(yīng)的數(shù)量?！緦?shí)驗(yàn)器材】：量筒、細(xì)胞計(jì)數(shù)板、刻度離心管、離心機(jī)【實(shí)驗(yàn)方法】：1.準(zhǔn)確測量尿量,并記錄.2.將尿液充分混勻取10ml尿于刻度離心內(nèi)離心1500r/min5分鐘準(zhǔn)確吸取上清液9ml輕輕混勻管底沉淀取1滴充入計(jì)數(shù)板兩側(cè)的計(jì)數(shù)池中低倍鏡下計(jì)數(shù)18個(gè)大方格里的管型數(shù),高倍鏡下計(jì)數(shù)10個(gè)大方格里的紅細(xì)胞.白細(xì)胞包括腎小管上皮細(xì)胞計(jì)算報(bào)告計(jì)算:N=C10/D1000V/(103)式中：N為1小時(shí)尿中細(xì)胞或管型數(shù)D為計(jì)數(shù)的大格數(shù)C為計(jì)數(shù)D個(gè)大格所見的細(xì)胞或管型數(shù)V

35、為3小時(shí)尿量毫升數(shù)【注意事項(xiàng)】：1.尿液標(biāo)本留取時(shí)可不限制飲食，但勿過量飲水。2尿在離心前和充池前必須混勻3尿液應(yīng)新鮮檢查，PH應(yīng)在6以下，若為堿性尿，則細(xì)胞和管型易溶解。四、尿液分析儀的使用、HCG檢測【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆漳蛞悍治鰞x的使用方法及 HCG檢測原理、操作方法及結(jié)果觀察、報(bào)告?！緦?shí)驗(yàn)原理】：HCG檢測（膠乳凝集抑制試驗(yàn)）原理：將尿液與抗HCG 血清混合，待反應(yīng)后加入被HCG致敏的膠乳懸液，若尿中含有HCG，則先于膠乳與血清結(jié)合，故膠乳仍呈均勻狀，不出現(xiàn)凝集，反之，非孕婦尿液因不含HCG，抗血清中的抗體則膠乳抗原發(fā)生反應(yīng)，出現(xiàn)凝集。【實(shí)驗(yàn)試劑】：妊娠診斷血清、妊娠診斷抗原【實(shí)驗(yàn)器材】：

36、尿液分析儀、顯微鏡、玻片、試管、尿液試紙條【實(shí)驗(yàn)方法】：1、尿液分析儀結(jié)構(gòu)、原理見教材；尿液分析儀的使用：每2個(gè)實(shí)驗(yàn)臺為一小組；由老師示教操作方法，注意事項(xiàng)，然后每組抽人操作，認(rèn)真操作，熟練操作程序，為以后的臨床工作打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，并學(xué)會(huì)在使用儀器過程中愛護(hù)儀器，保養(yǎng)儀器。2. HCG檢測：取玻片一張于玻片的一端加被檢尿液另一端加生理鹽水(陰性對照)各一滴兩端同時(shí)加HCG抗血清各一滴混勻1分鐘再同時(shí)加膠乳抗原各一滴充分混勻放置5分鐘后觀察結(jié)果報(bào)告陽性:不凝集陰性:凝集【注意事項(xiàng)】：1. 尿液、抗血清和膠乳抗原必須按規(guī)定順序滴加，滴量大小應(yīng)一致。2. 不同批號的試劑不能互相搭配使用。3. 室溫低于

37、20，反應(yīng)緩慢，應(yīng)適當(dāng)加溫或延長反應(yīng)時(shí)間。4. 標(biāo)本渾濁有沉淀時(shí)，應(yīng)離心取上清液測定。5.試劑在28冰箱保存，特別注意不能冰凍，否則膠乳上HCG抗原釋放，不能再凝集。五、尿常規(guī)（RT）檢驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆漳虺Ｒ?guī)檢驗(yàn)規(guī)程，熟悉使用尿液分析儀。【實(shí)驗(yàn)原理】：見實(shí)驗(yàn)十三、十四【實(shí)驗(yàn)試劑】：200g/L磺基本楊酸、5%冰乙?！緦?shí)驗(yàn)器材】：尿液分析儀、顯微鏡、玻片、試管、PH試紙、離心機(jī)、酒精燈【實(shí)驗(yàn)方法】：一、理學(xué)檢驗(yàn)?zāi)蛏?尿量 透明度 PH二、尿蛋白定性（兩種方法任選一種）1法：取試管加尿約1ml于試管內(nèi)加磺柳酸數(shù)滴觀察結(jié)果報(bào)告。2.5%冰乙酰法：取試管加尿至試管2/3處用試管夾夾持試管下1/3處

38、加熱上1/3處的尿液（注意：不斷轉(zhuǎn)動(dòng)試管均勻加熱，防止尿液沸濺）加冰醋酸23滴再加熱煮沸觀察結(jié)果報(bào)告。三、尿液沉渣鏡檢取中號試管一支加混合均勻尿液約至試管2/3處離心（5500轉(zhuǎn)/分鐘）5分鐘一次性傾去上清液留取尿沉渣液約0.2ml混勻在載玻片上涂成薄片鏡檢報(bào)告細(xì)胞成分：用最低值最高值/HPF(或平均值/HPF)報(bào)報(bào)告方式 管型成分：用最低值最高值/LPF(或平均值/LPF)報(bào)告。結(jié)晶成分：用高倍視野觀察，占視野1/4為+，占視野1/2為+，占視野3/4為+，滿視野為+。四、尿液分析儀使用 每2個(gè)實(shí)驗(yàn)臺為一小組；由老師示教操作方法，注意事項(xiàng)，然后每組抽人操作，認(rèn)真操作，熟練操作程序，為以后的臨

39、床工作打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，并學(xué)會(huì)在使用儀器過程中愛護(hù)儀器，保養(yǎng)儀器。排泄物及分泌物檢驗(yàn)一、糞常規(guī)（Rt）檢驗(yàn)及糞隱血（OB）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆占S便外觀、顯微鏡檢查的方法及糞便隱血試驗(yàn)的方法，熟悉鏡檢時(shí)糞便中各物質(zhì)的形態(tài)和估計(jì)方式?！緦?shí)驗(yàn)原理】：糞隱血（OB）試驗(yàn)原理：血紅蛋白中的亞鐵血紅素有類似過氧化物酶的活性，能催化過氧化氫分解釋放新生態(tài)氧，將受體鄰聯(lián)甲苯胺氧化成鄰甲偶氮苯而顯藍(lán)色?！緦?shí)驗(yàn)試劑】：生理鹽水、10g/L鄰聯(lián)甲苯胺冰乙酸溶液、3過氧化氫【實(shí)驗(yàn)器材】：顯微鏡、竹簽、載玻片、濾紙【實(shí)驗(yàn)方法】：一、糞便外觀檢查1顏色 2.粘稠度二、顯微鏡檢驗(yàn)取玻片加生理鹽水12滴用竹簽自糞便多處取材（特別是

40、膿、血、粘液等異常部分）與鹽水混合涂成薄片（以能透過字跡為度）低倍鏡觀察有無蟲卵、原蟲轉(zhuǎn)高倍鏡檢驗(yàn)細(xì)胞情況并對其數(shù)量進(jìn)行估計(jì)報(bào)告報(bào)告方式：細(xì)胞數(shù)報(bào)告1020個(gè)視野的最低值至最高值或報(bào)告平均值。低倍鏡直接報(bào)告見到XX蟲卵及食物殘?jiān)亩嗷蛏?。三、糞便潛血試驗(yàn)（OB試驗(yàn)）用竹簽挑取少許糞便于濾紙片上，滴加鄰聯(lián)甲苯胺冰乙酸液23滴，再加H2O2（1mol/L）23滴，于標(biāo)本上立即觀察結(jié)果，報(bào)告。（-）2后仍不顯色（+）10S后由淺蘭漸變深蘭結(jié)果觀察 （+）初顯淺蘭褐色漸變成明顯蘭褐色（+）立即呈現(xiàn)蘭褐色 （+）立即呈現(xiàn)黑蘭色【注意事項(xiàng)】：1.鏡檢時(shí)至少每張涂片觀察10個(gè)視野。2.因3過氧化氫不穩(wěn)定，長

41、時(shí)間放置可使反應(yīng)減弱，所以試驗(yàn)前應(yīng)檢查試劑是否有效，可將過氧化氫滴于未染色的血片上，如產(chǎn)生泡沫表示過氧化氫有效。二、陰道分泌物檢驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆贞幍狼鍧嵍鹊膬?nèi)容、判定標(biāo)準(zhǔn)及常見陰道菌的形態(tài)?！緦?shí)驗(yàn)器材】：陰道分泌物標(biāo)本片、顯微鏡、擦鏡紙、清潔液、鏡油【實(shí)驗(yàn)方法】：一.陰道分泌物清潔度檢查：先用低倍鏡觀察，再用高倍鏡檢查，根據(jù)上皮細(xì)胞、白細(xì)胞（或膿細(xì)胞）、桿菌、球菌的多少分度。(清潔度,)陰道清潔度的分級判斷清潔度陰道桿菌雜菌（球菌）上皮細(xì)胞白細(xì)胞（或膿細(xì)胞）+-+-0-5/HPF5-15/HPF15-30/HPF30/HPF二.展片:陰道桿菌、霉菌、淋病雙球菌、陰道線索細(xì)胞等。（要求繪出鏡

42、下形態(tài)）【注意事項(xiàng)】：看展片時(shí)不可動(dòng)粗調(diào)更不要移動(dòng)視野,看不清只可動(dòng)微調(diào)體液檢驗(yàn)一、潘氏試驗(yàn)、李凡他試驗(yàn)、精子鏡檢【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆张耸显囼?yàn)、李凡他試驗(yàn)的檢測原理、操作方法及結(jié)果觀察、報(bào)告，熟悉鏡下異常及正常的精子形態(tài)?！緦?shí)驗(yàn)原理】：潘氏試驗(yàn)原理：腦積液中球蛋白與苯酚結(jié)合，形成不溶性蛋白鹽而產(chǎn)生白色混濁或沉淀。李凡他試驗(yàn)原理：漿膜上皮細(xì)胞在炎癥反應(yīng)的刺激下分泌粘蛋白量增加。粘蛋白是一種酸性糖蛋白，等電點(diǎn)為PH35，因此在稀乙酸中出現(xiàn)白色沉淀。【實(shí)驗(yàn)試劑】：飽和苯酚溶液、冰乙酸【實(shí)驗(yàn)器材】：試管、吸管、量筒、滴管【實(shí)驗(yàn)方法】：一、潘氏法或潘迪試驗(yàn)取飽和石碳酸（苯酚）約2ml于試管中，用滴管加入標(biāo)本1滴，置黑色背景處觀察，如顯白色混濁即為陽性，結(jié)果可根據(jù)白色渾濁程度分別判斷為：（-）無