NMH基因轉(zhuǎn)染前后人大細胞肺癌細胞株蛋白質(zhì)組差異表達的研究PPT課件_第1頁
NMH基因轉(zhuǎn)染前后人大細胞肺癌細胞株蛋白質(zhì)組差異表達的研究PPT課件_第2頁
NMH基因轉(zhuǎn)染前后人大細胞肺癌細胞株蛋白質(zhì)組差異表達的研究PPT課件_第3頁
NMH基因轉(zhuǎn)染前后人大細胞肺癌細胞株蛋白質(zhì)組差異表達的研究PPT課件_第4頁
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文檔簡介

1、 一、研究不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株和正常一、研究不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株和正常人肺成纖維細胞株人肺成纖維細胞株MRC-5中中KAI1的的mRNA表達表達水平及其差異水平及其差異二、研究不同轉(zhuǎn)移潛能的人大細胞肺癌細胞株中二、研究不同轉(zhuǎn)移潛能的人大細胞肺癌細胞株中KAI1的的mRNA表達水平，探討表達水平，探討KAI1與與nm23-H1在在調(diào)控肺癌轉(zhuǎn)移中的相互關(guān)系調(diào)控肺癌轉(zhuǎn)移中的相互關(guān)系三、研究甲基化抑制劑三、研究甲基化抑制劑5-雜氮脫氧胞苷雜氮脫氧胞苷(5-Aza-CdR)對肺癌細胞株對肺癌細胞株L9981、GLC-82和和NCI-H460中中KAI1的的mRNA表達水平和體外增殖能力的

2、影響表達水平和體外增殖能力的影響 第1頁/共21頁主要材料與方法主要實驗方法：主要實驗方法： 實時熒光定量實時熒光定量PCR MTT法繪制細胞生長曲線法繪制細胞生長曲線甲基化抑制劑：甲基化抑制劑： 第2頁/共21頁實 驗 結(jié) 果第3頁/共21頁比較MRC-5與不同組織類型肺癌細胞株間KAI1基因mRNA表達水平1. MRC-5 , 正常人肺成纖維細胞株；2. L9981, 人高轉(zhuǎn)移大細胞肺癌細胞株；3. NL9980,人低轉(zhuǎn)移大細胞肺癌細胞株；4. L9981-nm23-H1-pEGFP，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染nm23-H1的L9981細胞株；5. A549，6. GLC-82，7. A2，8. SPCA-

3、1，肺腺癌細胞株；9. NCI-H460，人大細胞肺癌細胞株；10. SH-77，11. NCI-H446，人小細胞肺癌細胞株；12. LTEP-2，肺腺癌細胞株;13. YTMLC-90，肺鱗癌細胞株； P第4頁/共21頁不同細胞株間KAI1基因表達水平比較的P值表CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L9

4、9810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.000

5、0.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. MRC-5 , 正常人肺成纖維細胞株；2. L9981, 人高轉(zhuǎn)移大細胞肺癌細胞株；3. NL9980,人低轉(zhuǎn)移大細胞肺癌細胞株；4. L9981-nm23-H1-pEGFP，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染nm23-H1的L9981細胞株；5. A549，6. GLC-82，7. A2，8. SPCA-1，肺腺癌細胞株；9. NCI-H460，人大細胞肺癌細胞株；10. SH-77，11. NCI-H446，人小細

6、胞肺癌細胞株；12. LTEP-2，肺腺癌細胞株; 13. YTMLC-90，肺鱗癌細胞株； 第5頁/共21頁在L9981細胞中轉(zhuǎn)染nm23-H1可顯著上調(diào)KAI1的mRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.000

7、0.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.002

8、0.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. L9981；2. NL9980；3. L9981-nm23-H1-pEGFP第6頁/共21頁比較L9981細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1的mRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0

9、000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SP

10、CA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.012；2. A549；3. GLC-82；4. A2；5. SPCA-1；6. NCI-H460；7. SH-77；8. NCI-H446；9. LTEP-2；10. YTMLC-90 第7頁/共21頁比較NL9980與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1的mRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2

11、SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.11

12、10.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NL9980；2. L9981-nm23-H1-pEGFP；3. A549；4. GLC-82；5. A2；6. SPCA-1；7. NCI-H460；8. SH-77；9.

13、NCI-H446；10. LTEP-2；11. YTMLC-90 第8頁/共21頁比較A549A549細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的mRNAmRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000

14、.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020

15、.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.012；2. GLC-82；3. A2；4. SPCA-1；5. NCI-H460；6. SH-77；7. NCI-H446；8. LTEP-2；9. YTMLC-90 第9頁/共21頁比較GLC-82GLC-82細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的mRNAmRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC

16、-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.00

17、00.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.012；2. A2；3. SPCA-1；4. NCI-H460；5. SH-77；6. NCI-H446；7. LTEP-2；8. YTMLC-90 第10頁/共21頁比較A2A2細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的mRNAmRNA表達水平CelllinesCe

18、ll lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0

19、000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. A2；2. SPCA-1；3. NCI-H460；4. SH-77；5. NCI-H4

20、46；6. LTEP-2；第11頁/共21頁比較SPCA-1SPCA-1細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的mRNAmRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000N

21、L99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000

22、.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. SPCA-1；2. NCI-H460；3. SH-77；4. NCI-H446；5. LTEP-2；第12頁/共21頁比較NCI-H460NCI-H460細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.000

23、0.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.58

24、80.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NCI-H460；2. SH-77；3. NCI-H446；4. LTEP-2；第13頁/共21頁比較SH-77SH-77細胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細胞株間KAI1KAI1的mRNAmRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H4

25、46LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.39

26、2GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. SH-77；2. NCI-H446；3. LTEP-2；第14頁/共21頁比較NCI-H446、 LTEP- -2和YTMLC-90細胞株間KAI1的mRNA表達水平CelllinesCell lines L9981NL998

27、0L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.

28、0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NCI-H446；2. LTEP-2；第15頁/共21頁5-Aza-CdR上調(diào)了NCI-H460 和L9981細胞中KAI1

29、的mRNA表達水平1. Control ；2. 2mol/L 5-Aza-CdR ；3. 10mol/L 5-Aza-CdRGroupsNCI-H4605-Aza-CdR(2mol/L)5-Aza-CdR(10mol/L)NCI-H4600.0010.0005-Aza-CdR(2mol/L)0.005NCI-H460NCI-H460和和L9981L9981細胞株對照組與實驗組間細胞株對照組與實驗組間KAI1KAI1基因表達水平比較的基因表達水平比較的P P值表值表1. Control ；2. 2mol/L 5-Aza-CdR ；3. 10mol/L 5-Aza-CdRGroupsL99815-Aza-CdR(2mol/L)5-Aza-CdR(10mol/L)L99810.0000.0005-Aza-CdR(2mol/L)0.016NCI-H460 cellsL9981 cells第16頁/共21頁5-Aza-CdR對GLC-82細胞中KAI1的mRNA表達水平無顯著影響1

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