實驗1微生物學(xué)實驗常用儀器洗滌及干熱滅菌

1、實驗一實驗一 微生物學(xué)實驗常用儀器洗滌微生物學(xué)實驗常用儀器洗滌及干熱滅菌及干熱滅菌 l目的要求目的要求l實驗原理實驗原理l實驗材料實驗材料l實驗程序?qū)嶒灣绦騦結(jié)果與思考題結(jié)果與思考題目目 的的 要要 求求l 認識微生物實驗所需要的各種器皿，認識微生物實驗所需要的各種器皿，了解常用工具和儀器的名稱、用途。了解常用工具和儀器的名稱、用途。l 掌握對玻璃器皿的清洗、包扎方法掌握對玻璃器皿的清洗、包扎方法與干熱滅菌的操作過程。與干熱滅菌的操作過程。實驗原理實驗原理l 微生物學(xué)實驗要求較高的無菌狀態(tài)，因微生物學(xué)實驗要求較高的無菌狀態(tài)，因此，實驗所用的器皿，大多數(shù)要進行消毒、此，實驗所用的器皿，大多數(shù)要進

2、行消毒、滅菌從而用以培養(yǎng)微生物，所以對其質(zhì)量、滅菌從而用以培養(yǎng)微生物，所以對其質(zhì)量、規(guī)格、洗滌和包扎方法均有一定要求。規(guī)格、洗滌和包扎方法均有一定要求。l 清潔的玻璃器皿是實驗得到正確結(jié)果的清潔的玻璃器皿是實驗得到正確結(jié)果的先決條件，包扎方法要能保證防止污染雜先決條件，包扎方法要能保證防止污染雜菌。菌。l 空的玻璃器皿一般用干熱滅菌空的玻璃器皿一般用干熱滅菌. 實實 驗驗 材材 料料玻璃儀器：玻璃儀器： 每人數(shù)：每人數(shù)：培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿 3套；套； 大試管大試管 3只。只。 每組數(shù)：每組數(shù)：三角瓶三角瓶 6只；只； 燒杯（燒杯（500ml）2只；只； 燒杯（燒杯（1000ml）1只；只； 小試管小

3、試管 6只；只； 吸管（吸管（ 0.2ml 2支，支， 0.5ml 2支，支，1ml 2支，支， 5ml 2支）共支）共8支支 每櫥數(shù)：每櫥數(shù)：量筒（量筒（500ml）1只；只；洗滌用品：洗滌用品： 去污粉、肥皂、清洗劑、毛刷等。去污粉、肥皂、清洗劑、毛刷等。包扎用品：包扎用品：棉花、扎繩、包扎紙等。棉花、扎繩、包扎紙等。實驗程序?qū)嶒灣绦颍▋x器的認識、清洗與包扎儀器的認識、清洗與包扎）（一）學(xué)習(xí)下列常用儀器的種類、規(guī)格和應(yīng)用范（一）學(xué)習(xí)下列常用儀器的種類、規(guī)格和應(yīng)用范圍：圍： 培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿； 試管試管； 三角瓶三角瓶； 燒杯；燒杯； 吸管；吸管； 量筒。量筒。（二）學(xué)習(xí)（二）學(xué)習(xí)玻璃器皿的洗滌

4、方法玻璃器皿的洗滌方法：（三）學(xué)習(xí)（三）學(xué)習(xí)各種器皿的包扎：各種器皿的包扎：l 由一底一蓋組成一套，常用的培養(yǎng)皿皿底直徑直徑90 mm，高，高15mm,皿底皿蓋均為玻璃制成。l 制成平板，可用于分離、純化、鑒分離、純化、鑒定菌種、活菌計數(shù)定菌種、活菌計數(shù)以及測定抗生素測定抗生素、噬菌體的效價噬菌體的效價等。 l 根據(jù)其大小和用途不同，有下列三種型號有下列三種型號：l (1)大試管大試管(約約18mm180mm) : 可裝倒平板用的培養(yǎng)基可裝倒平板用的培養(yǎng)基; ; 可作制備斜面用（需要大量菌體時用）可作制備斜面用（需要大量菌體時用） 裝液體培養(yǎng)基用于微生物的振蕩培養(yǎng)。裝液體培養(yǎng)基用于微生物的振蕩

5、培養(yǎng)。l (2)中試管中試管(1315)mm(100150)mm: 裝液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌或做斜面用裝液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌或做斜面用, , 用于細菌、霉菌、病毒等的稀釋和血清學(xué)試驗用于細菌、霉菌、病毒等的稀釋和血清學(xué)試驗。l (3)小試管小試管(1012)mm100mm: 一般用于糖發(fā)酵或血清學(xué)試驗，和其它需要節(jié)省材料一般用于糖發(fā)酵或血清學(xué)試驗，和其它需要節(jié)省材料的試驗。的試驗。l三角瓶三角瓶: 100ml、250ml、500ml和和1000 ml 用來裝無菌水、培養(yǎng)基和振蕩培養(yǎng)微生物無菌水、培養(yǎng)基和振蕩培養(yǎng)微生物等。l燒杯燒杯: 50ml、100ml、250ml、500ml和和1000ml 用來

6、配制培養(yǎng)基與各種溶液配制培養(yǎng)基與各種溶液等。l玻璃吸管玻璃吸管: 1ml、2ml、5ml、10ml 玻璃器皿的洗滌方法玻璃器皿的洗滌方法:1、新玻璃器皿的洗滌、新玻璃器皿的洗滌 在在2%的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時，用自來水沖洗干凈。的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時，用自來水沖洗干凈。2、舊玻璃器皿的洗滌、舊玻璃器皿的洗滌（1）試管、培養(yǎng)皿、三角瓶）試管、培養(yǎng)皿、三角瓶：洗衣粉和去污粉洗刷，自來水沖洗洗衣粉和去污粉洗刷，自來水沖洗 a 裝有固體培養(yǎng)基：裝有固體培養(yǎng)基：刮掉，洗滌刮掉，洗滌 b 帶菌的器皿：帶菌的器皿：2%來蘇爾或來蘇爾或0.25%新潔爾滅消毒液中浸泡新潔爾滅消毒液中浸泡24小時小時或煮沸或煮沸

7、0.5小時，然后洗滌小時，然后洗滌 c 帶病原菌培養(yǎng)物的器皿帶病原菌培養(yǎng)物的器皿：先高壓蒸汽滅菌，倒去培養(yǎng)物先高壓蒸汽滅菌，倒去培養(yǎng)物（2）玻璃吸管）玻璃吸管：吸管尖端與裝在水龍頭上的橡皮管連接，反復(fù)沖洗吸管尖端與裝在水龍頭上的橡皮管連接，反復(fù)沖洗 a 吸過血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管：吸過血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管：立即投立即投入盛有自來水的容器中浸泡，實驗后集中沖洗。入盛有自來水的容器中浸泡，實驗后集中沖洗。 b 塞有棉花的吸管：塞有棉花的吸管：用水將棉花沖出，然后沖洗用水將棉花沖出，然后沖洗 c 吸過含有微生物培養(yǎng)物的吸管：吸過含有微生物培養(yǎng)物的吸管：2%來蘇爾

8、或來蘇爾或0.25%新潔爾滅新潔爾滅消毒液中浸泡消毒液中浸泡24小時然后洗小時然后洗 d 吸管內(nèi)壁有油垢：吸管內(nèi)壁有油垢：洗滌液中浸泡數(shù)小時，再沖洗洗滌液中浸泡數(shù)小時，再沖洗 洗滌后，若內(nèi)壁的水均勻分布成一洗滌后，若內(nèi)壁的水均勻分布成一薄層薄層，表示完全洗凈，若還掛有水珠，則需表示完全洗凈，若還掛有水珠，則需用洗滌液浸泡數(shù)小時，然后再用自來用洗滌液浸泡數(shù)小時，然后再用自來水沖洗。水沖洗。 洗凈后的試管倒置于試管筐內(nèi)，三角瓶倒置于洗滌架上，培養(yǎng)皿的洗凈后的試管倒置于試管筐內(nèi)，三角瓶倒置于洗滌架上，培養(yǎng)皿的皿底和皿蓋分開，依次壓著皿邊排列倒扣在桌上皿底和皿蓋分開，依次壓著皿邊排列倒扣在桌上,晾干晾

9、干. 培養(yǎng)皿的包扎：培養(yǎng)皿的包扎： 牛皮紙或舊報紙包緊，一牛皮紙或舊報紙包緊，一般以般以58套套培養(yǎng)皿包成培養(yǎng)皿包成1包包吸管的包扎：吸管的包扎： 1 在上端約0.5cm處，塞入一小段1.5 cm長的棉花（勿用脫脂棉），目的是避免將外界或嘴中雜菌吹入管內(nèi)，或不慎將菌液吸出管外。 2 45 cm寬的長紙條.試管和三角瓶等的包扎：試管和三角瓶等的包扎： 實驗程序?qū)嶒灣绦颍ǜ蔁釡缇脑砗筒僮鞣椒ǜ蔁釡缇脑砗筒僮鞣椒?） 干熱滅菌是利用高溫使微生物細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固變性而干熱滅菌是利用高溫使微生物細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固性與其本身的含水量有達到滅菌的目的。細胞內(nèi)

10、的蛋白質(zhì)凝固性與其本身的含水量有關(guān)，在菌體受熱時，當(dāng)環(huán)境和細胞內(nèi)含水量越大，則蛋白質(zhì)凝關(guān)，在菌體受熱時，當(dāng)環(huán)境和細胞內(nèi)含水量越大，則蛋白質(zhì)凝固就越快，反之含水量越少，凝固緩慢。固就越快，反之含水量越少，凝固緩慢。 與濕熱滅菌相比，干熱滅菌所需溫度要高（與濕熱滅菌相比，干熱滅菌所需溫度要高（160170），），時間要長（時間要長（12h），但干熱滅菌溫度不能超過），但干熱滅菌溫度不能超過180，否則，否則，包器皿的紙或棉塞就會燒焦，甚至引起燃燒。包器皿的紙或棉塞就會燒焦，甚至引起燃燒。原理原理實驗程序?qū)嶒灣绦颍ǜ蔁釡缇脑砗筒僮鞣椒ǜ蔁釡缇脑砗筒僮鞣椒?）1裝入待滅菌物品裝入待滅菌物品 將

11、包好的待滅菌物品（培養(yǎng)皿、吸管等）放入電烘箱內(nèi)，關(guān)好箱門。物品將包好的待滅菌物品（培養(yǎng)皿、吸管等）放入電烘箱內(nèi)，關(guān)好箱門。物品不要擺得不要擺得太擠，太擠，以免妨礙空氣流通；以免妨礙空氣流通；不要接觸電烘箱內(nèi)壁的鐵板不要接觸電烘箱內(nèi)壁的鐵板，以防包裝紙烤焦起火。，以防包裝紙烤焦起火。2升溫升溫 接通電源，撥動開關(guān)，接通電源，撥動開關(guān)，打開電烘箱排氣孔打開電烘箱排氣孔，讓溫度逐漸上升。，讓溫度逐漸上升。當(dāng)溫度升至當(dāng)溫度升至100時時，關(guān)閉排氣孔。，關(guān)閉排氣孔。3恒溫恒溫 當(dāng)溫度升達到當(dāng)溫度升達到160170時，恒溫調(diào)節(jié)器會自動控制調(diào)節(jié)溫度，保持此溫度時，恒溫調(diào)節(jié)器會自動控制調(diào)節(jié)溫度，保持此溫度2h。干熱火菌過程，嚴(yán)防恒溫調(diào)節(jié)的自動控制失靈而造成安全事故。干熱火菌過程，嚴(yán)防恒溫調(diào)節(jié)的自動控制失靈而造成安全事故。4降溫降溫 切斷電源、自然降溫。切斷電源、自然降溫。5開箱取物開箱取物 待電烘箱內(nèi)溫