實(shí)驗(yàn)一細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)_第1頁
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文檔簡介

1、細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)20082008生物科學(xué)生物科學(xué)5 5班班細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 室室 守守 則則1 1、不遲到,不早退,更不能無故缺課;不遲到,不早退,更不能無故缺課;2 2、進(jìn)實(shí)驗(yàn)室要、進(jìn)實(shí)驗(yàn)室要穿白大褂穿白大褂。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)禁止喧嘩禁止喧嘩。3 3、實(shí)驗(yàn)前必須認(rèn)真、實(shí)驗(yàn)前必須認(rèn)真預(yù)習(xí)預(yù)習(xí),熟悉實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容。,熟悉實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容。4 4、實(shí)驗(yàn)中應(yīng)、實(shí)驗(yàn)中應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行,認(rèn)真操,認(rèn)真操作、仔細(xì)觀察,及時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)果;作、仔細(xì)觀察,及時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)果;5 5、在實(shí)驗(yàn)的過程中制造的任何垃圾都要丟到垃在實(shí)驗(yàn)的過程中制造的任何垃圾都要丟到

2、垃圾筐里(或先放在自己的桌面廢物缸內(nèi)),圾筐里(或先放在自己的桌面廢物缸內(nèi)),嚴(yán)嚴(yán)禁隨地投棄!禁隨地投棄!細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 室室 守守 則則6 6、實(shí)驗(yàn)器具應(yīng)、實(shí)驗(yàn)器具應(yīng)保持清潔保持清潔,用過的玻璃器皿必須用過的玻璃器皿必須洗凈后放回原處。實(shí)驗(yàn)臺(tái)面應(yīng)保持整潔,儀器、洗凈后放回原處。實(shí)驗(yàn)臺(tái)面應(yīng)保持整潔,儀器、藥品擺放整齊。藥品擺放整齊。公用試劑及用具盒用完后,應(yīng)公用試劑及用具盒用完后,應(yīng)立即蓋好放回原處。立即蓋好放回原處。 7 7、執(zhí)行執(zhí)行值日生制度值日生制度,每天安排,每天安排3-43-4人值日,其職人值日,其職責(zé)是負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)器具的整理、操作臺(tái)、水槽、地責(zé)是負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)器具的整

3、理、操作臺(tái)、水槽、地板等實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生工作。板等實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生工作。8 8、保證安全保證安全9 9、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后實(shí)驗(yàn)結(jié)束后認(rèn)真分析和總結(jié)認(rèn)真分析和總結(jié),實(shí)事求是、實(shí)事求是、獨(dú)獨(dú)立地完成立地完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)報(bào)告細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式班級(jí)、姓名、學(xué)號(hào)、日期班級(jí)、姓名、學(xué)號(hào)、日期實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)器材(實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)試劑實(shí)驗(yàn)試劑,實(shí)驗(yàn)儀器實(shí)驗(yàn)儀器)實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果(重點(diǎn))(重點(diǎn))分析和討論分析和討論(重點(diǎn))(重點(diǎn))參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一、細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)及其影響因素、細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)及其影響因素實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二、葉綠體的分離

4、與熒光觀察、葉綠體的分離與熒光觀察實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三、線粒體的制備與活性鑒定、線粒體的制備與活性鑒定實(shí)驗(yàn)四實(shí)驗(yàn)四、細(xì)胞膜的滲透性與植物液泡系的觀察細(xì)胞膜的滲透性與植物液泡系的觀察實(shí)驗(yàn)五實(shí)驗(yàn)五、細(xì)胞的凝集反應(yīng)與細(xì)胞融合、細(xì)胞的凝集反應(yīng)與細(xì)胞融合 實(shí)驗(yàn)六實(shí)驗(yàn)六、動(dòng)植物細(xì)胞骨架的觀察、動(dòng)植物細(xì)胞骨架的觀察實(shí)驗(yàn)七實(shí)驗(yàn)七、細(xì)胞吞噬作用和細(xì)胞中過氧化物酶的顯示、細(xì)胞吞噬作用和細(xì)胞中過氧化物酶的顯示實(shí)驗(yàn)八實(shí)驗(yàn)八、電子顯微鏡演示、電子顯微鏡演示細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安排安排第第2-9周周36學(xué)時(shí)學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)及其影響因素細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)及其影響因素細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)觀察植物細(xì)胞質(zhì)

5、流動(dòng)現(xiàn)象觀察植物細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)現(xiàn)象了解影響細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的因素了解影響細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的因素實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康募?xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理在多種植物的細(xì)胞中都能觀察到植物在多種植物的細(xì)胞中都能觀察到植物細(xì)細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)胞質(zhì)流動(dòng)現(xiàn)象,它是現(xiàn)象,它是細(xì)胞活動(dòng)強(qiáng)弱的重細(xì)胞活動(dòng)強(qiáng)弱的重要指標(biāo)要指標(biāo)。細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)現(xiàn)象的產(chǎn)生,是細(xì)胞骨架中細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)現(xiàn)象的產(chǎn)生,是細(xì)胞骨架中微絲肌動(dòng)蛋白與肌球蛋白相互滑動(dòng)的結(jié)微絲肌動(dòng)蛋白與肌球蛋白相互滑動(dòng)的結(jié)果。果。細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)要消耗能量,受各種因素諸細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)要消耗能量,受各種因素諸如溫度、滲透壓及各種離子的影響。如溫度、滲透壓及各種離子的影響。細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)引起細(xì)胞

6、質(zhì)流動(dòng)的因素引起細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的因素內(nèi)因內(nèi)因微絲束(肌動(dòng)蛋白纖維)、肌球蛋白、微絲束(肌動(dòng)蛋白纖維)、肌球蛋白、atp外因外因物理:溫度、光、機(jī)械刺激物理:溫度、光、機(jī)械刺激化學(xué):化學(xué): ph、電解質(zhì)、非電解質(zhì)、滲透壓、電解質(zhì)、非電解質(zhì)、滲透壓、呼吸抑制劑呼吸抑制劑細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的主要形式細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的主要形式細(xì)胞質(zhì)環(huán)流:細(xì)胞質(zhì)環(huán)流:在液泡發(fā)達(dá)的植物在液泡發(fā)達(dá)的植物(如黑藻、如黑藻、 輪藻、伊樂藻輪藻、伊樂藻)細(xì)細(xì)胞中,細(xì)胞質(zhì)成薄層沿著細(xì)胞膜以一定的速度和方向循環(huán)流動(dòng)。胞中,細(xì)胞質(zhì)成薄層沿著細(xì)胞膜以一定的速度和方向循環(huán)流動(dòng)。這種不斷地循環(huán)流動(dòng)稱為細(xì)胞質(zhì)環(huán)流。這種不斷地循環(huán)流動(dòng)

7、稱為細(xì)胞質(zhì)環(huán)流。 穿梭流動(dòng):穿梭流動(dòng):穿梭流動(dòng)是細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的另一種形式,它與環(huán)流穿梭流動(dòng)是細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的另一種形式,它與環(huán)流不同,是向相反方向來回穿梭。由于流動(dòng)方向在一定時(shí)間內(nèi)來回不同,是向相反方向來回穿梭。由于流動(dòng)方向在一定時(shí)間內(nèi)來回交換,因此叫穿梭流動(dòng)。交換,因此叫穿梭流動(dòng)。 布朗運(yùn)動(dòng):布朗運(yùn)動(dòng):在活細(xì)胞中可以看到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的許多小顆粒在無在活細(xì)胞中可以看到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的許多小顆粒在無規(guī)則地跳動(dòng)著,這在暗視野顯微鏡下觀察更為明顯,叫做布朗運(yùn)規(guī)則地跳動(dòng)著,這在暗視野顯微鏡下觀察更為明顯,叫做布朗運(yùn)動(dòng)。布朗運(yùn)動(dòng)的產(chǎn)生除了與微絲的存在有關(guān)外,還與微梁網(wǎng)格的動(dòng)。布朗運(yùn)動(dòng)的產(chǎn)生除了與微絲的存在有關(guān)外,還與微

8、梁網(wǎng)格的收縮有關(guān)。收縮有關(guān)。細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)材料試劑儀器實(shí)驗(yàn)材料試劑儀器 實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料:紫鴨趾草花絲,黑藻(水王:紫鴨趾草花絲,黑藻(水王蓀、輪葉黑藻)葉。蓀、輪葉黑藻)葉。 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)材料試劑儀器實(shí)驗(yàn)材料試劑儀器實(shí)驗(yàn)試劑:實(shí)驗(yàn)試劑:0.17 mol/l, 0.35 mol/l, 1 mol/l 氯化鈉氯化鈉0.17 mol/l, 0.35 mol/l , 1 mol/l 丙二酸鈉丙二酸鈉1 mmol/l 2,4二硝基酚二硝基酚(dinitrophenol, dnp)1 mol/l 甘露醇甘露醇實(shí)驗(yàn)儀器:顯微鏡,載玻片,蓋玻片,尖頭鑷實(shí)驗(yàn)儀器:顯微鏡,

9、載玻片,蓋玻片,尖頭鑷子,刀片子,刀片, ,吸水紙等吸水紙等細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)丙二酸鈉丙二酸鈉結(jié)構(gòu)簡式:結(jié)構(gòu)簡式:naooc-ch2-coona丙二酸在結(jié)構(gòu)上與琥珀酸(丁二酸)相似,可與琥珀酸競爭和琥珀酸脫氫酶的活性中心結(jié)合。若琥珀酸脫氫酶與丙二酸等結(jié)合,則不能再與琥珀酸結(jié)合而使之脫氫,產(chǎn)生抑制作用,且抑制程度取決于琥珀酸與抑制劑在反應(yīng)體系中濃度的相對(duì)比例,所以這種抑制是競爭性抑制競爭性抑制。細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)乙酰乙酰coa三羧酸三羧酸循環(huán)循環(huán)電子傳遞電子傳遞(氧化)(氧化)磷酸化磷酸化脂肪脂肪多糖多糖蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)脂肪酸、甘油脂肪酸、甘油葡萄糖、葡萄糖、其它單糖其它單糖氨基

10、酸氨基酸大分子降解成基本結(jié)構(gòu)單位小分子化合物分解成共同的中間產(chǎn)物(如丙酮酸、乙酰coa等共同中間產(chǎn)物進(jìn)入三羧酸循環(huán),氧化脫下的氫由電子傳遞鏈傳遞生成h2o,釋放出大量能量,其中一部分通過磷酸化儲(chǔ)存在atp中。+pi生物氧化的三個(gè)階段生物氧化的三個(gè)階段細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)三羧酸循環(huán)三羧酸循環(huán)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)2,4-二硝基酚(二硝基酚(dnp) 結(jié)構(gòu)式結(jié)構(gòu)式 dnp是氧化磷酸化的是氧化磷酸化的解偶聯(lián)劑解偶聯(lián)劑 ,解偶聯(lián)劑使氧化和磷,解偶聯(lián)劑使氧化和磷酸化脫偶聯(lián),酸化脫偶聯(lián),氧化仍可以進(jìn)行,而磷酸化不能進(jìn)行氧化仍可以進(jìn)行,而磷酸化不能進(jìn)行,解偶聯(lián)劑作用的本質(zhì)是增大線粒體內(nèi)膜對(duì)解偶

11、聯(lián)劑作用的本質(zhì)是增大線粒體內(nèi)膜對(duì)h+的通透性,的通透性,消除消除h+的跨膜梯度,因而的跨膜梯度,因而無無atp生成生成,解偶聯(lián)劑只影,解偶聯(lián)劑只影響氧化磷酸化而不干擾底物水平磷酸化,解偶聯(lián)劑的響氧化磷酸化而不干擾底物水平磷酸化,解偶聯(lián)劑的作用使氧化釋放出來的能量全部以熱的形式散發(fā)。作用使氧化釋放出來的能量全部以熱的形式散發(fā)。 2,4-二硝基苯酚二硝基苯酚(dnp)等藥劑因阻礙磷酸化等藥劑因阻礙磷酸化(形成高能磷形成高能磷酸鍵酸鍵),會(huì)抑制或減慢細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)會(huì)抑制或減慢細(xì)胞質(zhì)流動(dòng) 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)及其影響因素載玻片,滴載玻片,滴12滴蒸餾水滴蒸餾水 紫鴨趾草雄蕊花紫鴨趾草雄蕊

12、花絲絲(黑藻黑藻嫩葉嫩葉)裝片裝片低倍物鏡低倍物鏡(10(10) )觀察觀察高倍物鏡高倍物鏡(40(40) )觀察觀察吸水紙吸干水吸水紙吸干水加加試劑試劑記錄記錄細(xì)胞質(zhì)停止流動(dòng)的時(shí)間細(xì)胞質(zhì)停止流動(dòng)的時(shí)間 吸水吸水紙吸干紙吸干加加清水清水 流動(dòng)是否能恢復(fù)流動(dòng)是否能恢復(fù) 實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):不同因素對(duì)細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的影響不同因素對(duì)細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的影響滲透壓:0.17 mol/l0.35mol/l nacl1.0mol/lnacl溶液(高滲)1 mol/l 甘露醇甘露醇生物氧化抑制劑: 1mmol/l 2,4-二硝基酚(解偶聯(lián)劑) 0.17、0.35、1.0mol

13、/l丙二酸鈉溶液(競爭性抑制劑) 注意:高濃度丙二酸鈉有雙重影響細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)黑藻葉紫鴨趾草花絲毛 實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)選選 材(材(老與嫩葉)細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的形式與方向細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的形式與方向細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的快慢(未加試劑前)細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的快慢(未加試劑前)加入試劑量(當(dāng)裝片中的水份沒完全吸加入試劑量(當(dāng)裝片中的水份沒完全吸干,則影響加入試劑的實(shí)際濃度)干,則影響加入試劑的實(shí)際濃度)計(jì)時(shí)計(jì)時(shí)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)報(bào)告1.繪制紫鴨趾草雄蕊花絲毛繪制紫鴨趾草雄蕊花絲毛(或黑藻或黑藻)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)圖質(zhì)流動(dòng)圖 (標(biāo)明流動(dòng)方向) 。2.記錄

14、各種因素對(duì)細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)影響的結(jié)記錄各種因素對(duì)細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)影響的結(jié)果果(如流動(dòng)停止的時(shí)間與流動(dòng)能否恢復(fù)如流動(dòng)停止的時(shí)間與流動(dòng)能否恢復(fù)),并分析原因并分析原因(可以表格形式完成可以表格形式完成)。 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)記錄加入各種化學(xué)試劑后細(xì)胞質(zhì)記錄加入各種化學(xué)試劑后細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)停止的時(shí)間,并分析原因。流動(dòng)停止的時(shí)間,并分析原因。nacl丙二酸鈉dnpdnp甘露醇停止流動(dòng)的時(shí)間加水是否恢復(fù)分析原因細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)思考題1 如何理解細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)原理?如何理解細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)原理?2 胞質(zhì)環(huán)流有何特點(diǎn)胞質(zhì)環(huán)流有何特點(diǎn)? 為什么為什么?細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)滲透壓計(jì)算稀溶液的稀溶液的滲透壓滲透壓可根據(jù)范荷夫公式計(jì)算:可根據(jù)范荷夫公式計(jì)算: p=icrt參數(shù)說明參數(shù)說明c:溶液的摩爾濃度;:溶液的摩爾濃度;r:氣體常數(shù)(:氣體常數(shù)(0.083升升巴摩爾巴摩爾-1度度-1););i:滲透常數(shù),:滲透常數(shù),i=1+(n-1);n:1分子解離后

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