抗菌肽及在飼料中的應(yīng)用

1、WORD整理版抗菌肽及其在飼料中的應(yīng)用抗菌肽概述1972年，瑞典科學(xué)家Bomar等首先在果蠅中發(fā)現(xiàn)抗菌肽及其免疫功能，隨后從惜 古比天蠶蛹誘導(dǎo)分離到并命名為 cecropir。此后人們相繼從細(xì)菌、真菌、兩棲類、 高等植物、哺乳動(dòng)物乃至人類中發(fā)現(xiàn)并分離獲得具有類似性質(zhì)的活性蛋白。抗菌肽又稱抗微生物肽（artimicrobial peptide ）或肽抗生素（peptide an tibiotics ），在動(dòng)植物體內(nèi)分布廣泛，是天然免疫防御系統(tǒng)的一部分?？咕牟粌H具有廣譜抗細(xì)菌能力，而且對真菌、病毒、及癌細(xì)胞也有作用。其對 畜禽具促生長、保健和治療疾病的功能，屬無毒副作用、無殘留、無致細(xì)菌耐藥性

2、的一類環(huán)保型制劑。具有廣闊的應(yīng)用前景?？咕牡姆诸惪咕陌唇Y(jié)構(gòu)、功能大致分為四類：cecropin （天蠶素）類；富含pro殘基（脯氨 酸）的magainin （蛙皮素）；富含gly殘基（甘氨酸）的melittin（ 蜂毒素）；富含 cys殘基（半胱氨酸）的defensin （防御素）?？咕陌磥碓匆话惴譃榱悾翰溉閯?dòng)物抗菌肽、兩棲動(dòng)物抗菌肽、昆蟲抗菌肽、植物抗菌肽、細(xì)菌抗菌肽、病毒抗菌肽抗菌肽的結(jié)構(gòu)和特性通常由數(shù)十個(gè)氨基酸殘基組成的堿性小分子多肽，水溶性好，分子量大約為4KD含有4個(gè)或多于4個(gè)帶正電荷的氨基酸，N端親水C端硫水具有雙親的性質(zhì)；具有熱穩(wěn)定性，在100C加熱10-15分鐘仍能保持

3、其活性。等電點(diǎn)大于 乙 表現(xiàn)出 較強(qiáng)的陽離子特性。對較大的離子強(qiáng)度和較高或較低的 pH值均具有較強(qiáng)的抗性；具備抵抗胰蛋白酶和胃蛋白酶水解的能力?？咕牡淖饔脵C(jī)理抗菌肽是以一端插入細(xì)菌細(xì)胞膜， 通過？。打孔？形成一個(gè)通道使細(xì)菌細(xì)胞膜破 裂，原生質(zhì)？。泄漏？士而死亡。（對于G陰性菌，抗菌肽易與其外膜上的帶負(fù)電荷脂多糖相互作用，從而破壞外 膜結(jié)構(gòu)以穿越內(nèi)膜，而G陽性菌不具有脂多糖，但其表面由于肽聚糖中的胞壁酸、 糖醛酸、磷壁酸和氨基酸羧基的存在而帶負(fù)電電荷， 抗菌肽也能破壞肽聚糖層而穿 透質(zhì)膜）抗菌肽的作用機(jī)理抗菌肽的殺菌機(jī)制模擬圖質(zhì)曝內(nèi)髓帶有正電荷的陽離子峯肚O與帶有負(fù)電荷的 磷脂雙層外表面細(xì)胞質(zhì)

4、膜結(jié)合導(dǎo)致局部的 磷脂取層變窄，在膜電位的彫晌F,多肽插入膜 內(nèi)形戲通道，導(dǎo)致胞質(zhì)內(nèi)分子外流*鼠終導(dǎo) 致細(xì)胞死亡.陽離子多肚的殺菌機(jī)制抗菌肽的殺菌機(jī)制模擬圖專業(yè)資料學(xué)習(xí)參考蛋白凝聚細(xì)菌細(xì)胞膜內(nèi)嵌蛋白+ Mg+ KNastu細(xì)胞膜穿孔 形成離子通道細(xì)菌細(xì)胞崩潰細(xì)胞內(nèi)容物由孔道外溢抗菌肽的作用機(jī)理特點(diǎn)1. 作用部位的有效性傳統(tǒng)抗生素作用是通過消除微生物生長或生存必需的功能實(shí)現(xiàn)的，如阻擾細(xì)菌蛋 白質(zhì)的合成或者改變酶的活性來達(dá)到殺菌目的， 而細(xì)菌通過改變一種基因就足以對 付抗生素的這種進(jìn)攻?？咕淖饔糜诩?xì)菌細(xì)胞膜，導(dǎo)致膜的通透性增大，以此穿透、殺滅細(xì)菌，即“膜 機(jī)制”。細(xì)菌必須改變膜的結(jié)構(gòu)，即改變相當(dāng)

5、部分的基因才能防御抗菌肽的進(jìn)攻， 而這幾乎是不可能的。因此，抗菌肽極少地減少了產(chǎn)生耐藥性的可能。2. 作用對象的選擇性抗菌肽只對原核生物細(xì)胞和真核生物病變細(xì)胞有抗菌作用，對正常的生物細(xì)胞不 起作用。原因在于原核生物和正常真核生物的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)不同， 正常真核細(xì)胞膜中 含有大量的膽固醇，而膽固醇的存在使膜結(jié)構(gòu)趨于穩(wěn)定。 此外高等動(dòng)物存在高度發(fā) 達(dá)的細(xì)胞骨架系統(tǒng)，其存在也抵抗了抗菌肽的作用。癌細(xì)胞的細(xì)胞骨架系統(tǒng)與正常 細(xì)胞相比不發(fā)達(dá)，這是抗菌肽對其產(chǎn)生抑制作用的原因之一。抗菌肽作用對象的選擇性廣譜抗微生物：當(dāng)前畜禽疾病多為混合感染，傳統(tǒng)的抗生素抗菌譜一般都較窄，且只對細(xì)菌有效.而大多數(shù)抗菌肽對G陰陽

6、性菌均有效，有些還對真菌、病毒、寄生蟲、 原生動(dòng)物有抑制和殺滅作用作用快速、安全、無殘留：由于分子較小，在機(jī)體受到侵犯時(shí)，幾分鐘內(nèi)就能產(chǎn) 生，且擴(kuò)展擴(kuò)散速度比體內(nèi)免疫細(xì)胞更快更靈活。 抗菌肽獨(dú)特的抗菌機(jī)理更形成了 不耐藥的特性，這就超越了抗生素的局限，是新一代的高效抗菌劑。動(dòng)物食品安全 有賴于生產(chǎn)過程的各個(gè)環(huán)節(jié)，使用無污染、在動(dòng)物體內(nèi)無殘留、無毒副作用的添加 劑是解決問題的一個(gè)關(guān)鍵。刺激免疫反應(yīng)：抗菌肽可參與宿主天然免疫的其它反應(yīng)，比如刺激單核細(xì)胞和嗜 中性白細(xì)胞的趨化作用、促進(jìn)肥大細(xì)胞組織胺的釋放、抑制組織蛋白酶以及促進(jìn)創(chuàng) 傷愈合。與其它抗菌物質(zhì)的聯(lián)合作用：抗菌肽與傳統(tǒng)抗生素聯(lián)用，可提高藥效

7、并拓寬傳統(tǒng) 抗生素的抗菌譜。至今未發(fā)現(xiàn)有關(guān)抗菌肽與其它藥物相拮抗的報(bào)道，這就顯示出抗 菌肽比微生態(tài)制劑等綠色添加劑更有優(yōu)勢。對環(huán)境有較強(qiáng)的抗性，適合做添加劑：抗菌肽在100 C加熱10-15分鐘仍能保持其活性，對PH值有較強(qiáng)的適應(yīng)性、水溶性好。具備抵抗胰蛋白酶或胃蛋白酶水解 的能力，進(jìn)入動(dòng)物消化道，能很好發(fā)揮抗菌功效。這彌補(bǔ)了其它添加劑如酶制劑、 微生態(tài)制劑等易受影響的缺陷，更便于在生產(chǎn)中應(yīng)用。抗菌肽與抗生素殺菌機(jī)理對比 抗菌肽在兩親性的a螺旋結(jié)構(gòu)作用下使原核細(xì)胞質(zhì)膜上形成離子通道，這種通道的直徑 經(jīng)推算大約在4nm離子通道的形成改變了細(xì)胞內(nèi)外滲透壓，使細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)大量外 滲，起到殺菌作用?？咕?/p>

8、肽在兩親性的a螺旋結(jié)構(gòu)作 用下使原核細(xì)胞質(zhì)膜上形 成離子通道，這種通道的 直徑經(jīng)推算大約在4nm離 子通道的形成改變了細(xì)胞 內(nèi)外滲透壓，使細(xì)胞內(nèi)物 質(zhì)大量外滲，起到殺菌作抗生素1、影響細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)或抑制其 合成，如青霉素2、改變細(xì)胞膜的通透性如多粘菌素3、影響細(xì)菌的細(xì)胞蛋白質(zhì)合成，如 氯霉素、四環(huán)素類、鏈霉素、慶大 霉素、卡那霉素等4、改變細(xì)菌的核酸代謝，如灰黃素用。WORD整理版賜爾健的主要成分高濃度的抗菌肽抗菌肽殺菌活力： 8000u/g豐富的生物活性酶采用和產(chǎn)酶菌協(xié)同發(fā)酵的技術(shù)，產(chǎn)品含有高質(zhì)量的木聚糖酶、果膠酶、B -葡聚糖酶、甘露聚糖酶、淀粉酶、蛋白酶、纖維素酶等賜爾健中發(fā)酵過程中

9、產(chǎn)生多糖、小肽及多種未知的生長因子賜爾健中酶的種類與活性( u/g )木聚糖 酶B -葡聚 糖酶果膠酶纖維素 酶甘露聚糖 酶淀粉酶酸性蛋白 酶25000070000120007000800015萬8000賜爾健的功能1抑制和殺滅有害菌，預(yù)防動(dòng)物疾病的發(fā)生2、大幅度提高幼齡動(dòng)物對蛋白質(zhì)和淀粉的消化率3、降解飼料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子(非淀粉多糖 NSP，提高谷物類原料的營養(yǎng)價(jià)值4、賜爾健在發(fā)酵過程中產(chǎn)生多糖、小肽以及多種未知生長因子，能有效促進(jìn)動(dòng) 物生長，發(fā)揮更好的生產(chǎn)性能。賜爾健(抗菌肽1.在畜禽、水產(chǎn)上的應(yīng)用試驗(yàn)賜爾健治療雞大腸桿菌感染的效果項(xiàng)目死亡率治愈率感染對照7030恩諾沙星(:5mg/kg）

10、1684賜爾?。?00g/噸）1882賜爾?。?00g/噸）1288賜爾?。?.5kg/噸）3972.抗菌肽藥敏試驗(yàn)致病菌試驗(yàn)次數(shù)抑菌圈直徑(mm)1ppm2.5ppm5ppm10ppm雞沙門氏菌(1920)39111926雞沙門氏菌(7913)310131824豬大腸桿菌47111218豬巴氏桿菌專(PM )業(yè)資料學(xué)習(xí)參考12131519(PM丿禽巴氏桿菌314161718WORD整理版專業(yè)資料學(xué)習(xí)參考注：抑菌圈直徑大于 20mn為極敏，15 20mn為高敏，10 15mn為中敏，小于10mm 為低敏3.賜爾健治療豬沙門氏菌感染的效果項(xiàng)目死亡率腹瀉率感染對照23100恩諾沙星（10mg/kg

11、）1016.6賜爾健（1kg/噸）1016.6賜爾?。?.5kg/噸）6.613.3治愈率77909093.44.賜爾健對雞白痢預(yù)防試驗(yàn)組別試雞只數(shù)發(fā)病數(shù)出欄數(shù)存活率500g/噸賜爾健組9704未發(fā)現(xiàn)955898.5%+15.3%對照組150851127283.2%使用500g/噸賜爾健可有效預(yù)防雞白痢，存活率提高15.3 %,差異極顯著5. 雞白痢人工發(fā)病對比試驗(yàn)組別試雞數(shù)日齡雞白痢菌口 服量(1 : 100 倍)試 驗(yàn) 天成 活 數(shù)死 亡 數(shù)成活率0.1%賜爾健組605-201ml1555591.7%200ppm 痢特靈組605-201ml15382263.3%接種 不給藥組605-201

12、ml15105016.7%不接種 不給藥組605-2001560296.7%6. 賜爾健與其它抗菌劑對肉仔雞應(yīng)用效果比較組別雞數(shù)試驗(yàn)天數(shù)成活率%平均日增重 (克)平均料肉比500g/噸賜爾健組208642 - 4998.647.81.91100ppm 土霉素組10324993.243.62.1150ppm洛克沙胂11494997.342.12.1360ppm 桿菌肽鋅12364296.845.61.965ppm黃霉素9864296.645.92.04賜爾健對肉雞生長與存活率的影響 安徽和威農(nóng)業(yè)開發(fā)股份有限公司試驗(yàn)場表2-1-1試驗(yàn)各組肉雞成活率成活率黃霉素5 mg/kg、 喹乙醇30mg/kg

13、;硫酸抗敵素15mg/kg、 桿菌肽鋅75 mg/kg ;賜爾健400mg/kg賜爾健500mg/kg21d95.45%a97.56%ab99.06%b98.64%b42d93.26%a95.28%ab97.43%b97.63%b表2-1-2試驗(yàn)各組平均日增重、料肉比 溫氏集團(tuán)營養(yǎng)部科研基肉雞試驗(yàn)場 試驗(yàn)動(dòng)物：矮B公雞測試項(xiàng)目黃霉素5 mg/kg、 喹乙醇30mg/kg;硫酸抗敵素15mg/kg、桿菌肽鋅75mg/kg；賜爾健400mg/kg賜爾健500mg/kg21日齡體重（g）586.00 2.31605.00 )2.31614.00 11.8626.00 5.3642日齡體重（g）179

14、0).081900.00 .061980.00 0.072000.00 ).25121日齡平均日增重（g）26.00 2.3626.90 0.2527.33 3.5327.90 15.362242日齡平均日增重（g）57.33 4.36a61.67 !.69a65.05 3.15b65.43 翌.69b142日齡平均日增重（g）41.67 5.23a44.29 l.15a46.19 5.32b46.67 4.25b121日齡料肉比1.45 ).361.42 ).251.39 ).561.38 ).25142日齡料肉比2.00 ).891.95 ).591.90 ).251.89 ).69組別試

15、驗(yàn)處理重復(fù)數(shù)重復(fù)雞 數(shù)（只）階段劃分（天）小雞中雞第1組喹烯酮（50g/t）3707小雞：1-25 中雞： 26-45第2組4%安來霉素（150g/t）370第3組4%安來霉素150克/噸+ 10%抗敵素200克/噸30第4組15%干菌肽鋅300克/噸+10%抗敵素200克/噸370第5組10%北里霉素100克/噸+10%抗敵素200克/噸370第6組0.05%那西肽 400g/t370第7組賜爾健（小卜 400g/t、中雞 300g/t)370組別試初 數(shù)試 末 數(shù)總耗 料試初 均重試末 均重總增 重平均日增重料肉比日采食量成活率(只)（只）(kg)（kg/只）(kg/ 只)(kg)（g/

16、只, 日）（g/ 只,日）(%)喹烯酮195179129.750.03770.419070.3615.251.84428.1298.46安來霉素195179131.750.03770.423571.0815.431.85328.6097.95安、抗195183134.050.03770.423571.8715.431.86528.7898.97桿、抗195175128.550.03770.416668.5915.151.87428.4097.95北、抗195190138.550.03770.422173.9315.371.87428.81100.00那西肽195183133.550.03770

17、.420871.4415.321.86928.6498.97賜爾健195185134.3 (.03770.422272.2715.381.85828.5898.97組別試初試末總耗試初試末總增平均日料肉比日采食成活數(shù)J數(shù)料均重均重重增重量率(只)(只)(kg)Kg/只Kg/只kg（g/ 日）（g/只日(%)喹烯酮179177228.350.4190.92790.3225.412.52864.2399.44安來霉素1791782470.4230.97097.327.342.53969.4099.44安+抗183183256.90.4230.979101.627.762.52970.19100桿+

18、抗175174238.60.4160.94892.9526.562.56768.1799.43北+抗190188258.70.4220.963102.1027.062.53468.5798.95賜爾健185182262.70.4220.990104.3128.372.51871.4499.46賜爾健在蛋雞生產(chǎn)上的應(yīng)用 浙江建德蛋雞場 賜爾健對蛋雞生產(chǎn)性能的影響對照組對照組賜爾健400g/t賜爾健500g/t采食量（g）118.14 7.4118.23 5.8119.89 5.4120.78 也.6產(chǎn)蛋率（%75.08 1.1075.02 .6480.36 ).9080.49 5.37平均蛋重（

19、g）62.69 .4462.96 .5163.92 .5264.40 .07料蛋比2.50 : 12.48 : 12.25 : 12.23 : 1破蛋率（%4.95 .294.87 ).332.46 .282.31 ).22異常蛋分率4.47 .374.88 ).292.60 .362.57 ).49賜爾健對蛋品質(zhì)的影響對照組對照組賜爾健400g/t賜爾健500g/t蛋型指數(shù)（%0.75 ).020.78 ).020.77 ).020.70 ).03蛋比重（g/cm3）1.14 ).011.13 ).011.14 ).041.13 ).01蛋殼相對重（%11.06 ).6511.01 1.13

20、12.37 .0312.26 ).58蛋殼厚度（mrh0.36 ).030.36 .04b0.43 ).040.46 ).12哈夫單位（U）83.68 4.3283.95 5.7785.52 .6486.20 5.86蛋黃指數(shù)（%44.20 2.1645.27 ).2745.64 .4545.82 2.62蛋黃相對重（%10.19 ).7610.81 ).8211.72 .5411.71 ).62賜爾健在生長豬上的應(yīng)用 浙江省農(nóng)科院海寧試驗(yàn)豬場 日增重與料比初始重（kg）結(jié)束重（kg）平均日增重（g）料比75mg/kg金霉素40.7568.15685.13.23300g/t速美肥39.1967

21、.71713.03.09500g/t賜爾健39.6770.28765.32.94抗菌肽在南美白對蝦養(yǎng)殖中的應(yīng)用中國水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所深圳海水試驗(yàn)基地安康素對南美白對蝦生長的影響試驗(yàn)結(jié)果平均初始體長平均初始體重平均終末體長平均終末體重(cm)(g)（cm）（g）對照組2.87土 0.530.168土 0.1243.53土 0.590.250 0.150實(shí)驗(yàn)組2.89土 0.530.158土 0.1383.73土 0.690.308 0.182日生長速度相對增重率 （%）餌料系數(shù)成活率（%）對照組0.003 土 0.000761.56 0.061.93 0.2186.55 7.99實(shí)驗(yàn)組

22、0.0047 0.001191.85 0.161.68 0.4295.00 1.70*攻毒試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)天數(shù)對照組死亡數(shù)實(shí)驗(yàn)組死亡數(shù)10020030040054261047188抗菌肽在草魚飼料中的應(yīng)用效果試驗(yàn) 蘇州大學(xué)水產(chǎn)系生長速度分析各組生長速度組號(hào)初始重尾數(shù)結(jié)束重增重率%瞬間生長率%.d-1空白對照組232.545627.3170.181.245mg/kg黃霉素組220.445604.4174.31.2620mg/kg維吉尼亞霉素組222.345625.7181.391.29400克/噸賜爾健225.245633.6181.501.29500克/噸賜爾健232.345660.3183.961.30飼料利用效率表4各組的飼料系數(shù)組號(hào)飼料系數(shù)平均值空白對照組1.31黃霉素組1.28維吉尼亞霉素組1.21400克/噸賜爾健1.25500克/噸賜爾健1.21養(yǎng)殖成活率表5各養(yǎng)殖試驗(yàn)組成活率組號(hào)死魚條數(shù)成活率%空白對照組980.00黃霉素組882.22維吉尼亞霉素組882.22400克/噸賜爾健588.89500克/噸賜爾健588.89轉(zhuǎn)氨酶活力表6:各試驗(yàn)組草魚血清和肝胰臟轉(zhuǎn)氨酶活力（u/ml , u/g ）GOTGPT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）組號(hào)血清平均值肝胰臟平 均值血清平均值肝胰臟平均值空白對照組74.29186.35363.11741.02黃霉素組68.90192.92349.987