灌腸液Ⅱ號(hào)組成藥材的薄層色譜鑒別

1、灌腸液號(hào)組成藥材的薄層色譜鑒別灌腸液號(hào)由黃柏、連翹、蒲公英、黃芩、大黃、青黛等藥材組成.具有清熱解毒、涼血燥濕、活血化瘀、止痢潤腸、排膿止痛的功效.主要用于治療慢性非特異性潰瘍性結(jié)腸炎,適用于腸黏膜充血水腫,血管紋理不清,大便次數(shù)增多,便不成形,便中帶膿者.本試驗(yàn)采用薄層色譜法對(duì)處方中黃柏、連翹、蒲公英、黃芩、大黃、青黛進(jìn)行薄層色譜鑒別.1 儀器與試藥儀器:HP1100 高效液相色譜儀(Anglient company),包括G1322A 真空脫氣機(jī),G1311 雙泵,G1314 紫外檢測(cè)器,Hp 化學(xué)工作站.濾膜 0.45um,Φ0.25mm(上海興亞凈化材料廠).硅膠 G 薄層板,

2、青島海洋化工廠(供薄層層析用).黃柏、連翹、蒲公英、黃芩、大黃、青黛陰性樣品自制.中藥飲片(經(jīng)包頭市藥檢所鑒定,均符合文獻(xiàn)1規(guī)定.購于包頭市金草堂醫(yī)藥有限責(zé)任公司).灌腸號(hào)液本院制劑室自制;甲醇為色譜純;其他試劑均為分析純.2 薄層色譜鑒別2.1 連翹的薄層色譜鑒別:照成品方法制備連翹的陰性對(duì)照液.分別取樣品溶液和陰性對(duì)照液各 15ml,用氯仿振搖提取 3次,每次 20ml,合并氯仿提取液,蒸干,殘?jiān)蛹状?2ml 使溶解,作為供試品溶液和陰性對(duì)照品溶液.另取連翹對(duì)照藥材 1g,加水 50ml,煎煮 1h,濾過,取濾液30ml,自樣品加氯仿振搖提取起同法制備,作為對(duì)照藥材溶液.另取連翹苷對(duì)照品

3、,加甲醇制成每 1ml 含 2mg 溶液,作為對(duì)照品溶液.照薄層色譜法試驗(yàn)吸取上述溶液供試品溶液、陰性對(duì)照品溶液和對(duì)照藥材溶液及對(duì)照品溶液各 2μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上,以甲苯丙酮乙酸乙酯甲酸水(78511)的上層液為展開劑,展開、取出、晾干.噴以香草醛硫酸試液,加熱至斑點(diǎn)顯色清晰.供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn),在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn),而陰性對(duì)照品溶液沒有.2.2 黃芩的薄層色譜鑒別:照成品方法制備黃芩的陰性對(duì)照液分別取樣品溶液和陰性對(duì)照液各 30ml,用稀鹽酸調(diào)節(jié) pH至 2,用乙酸乙酯振搖提取兩次,20ml/次,合并乙酸乙

4、酯提取液,蒸干,殘?jiān)蛹状?1ml 使溶解,作為供試品溶液和陰性對(duì)照品溶液.另取黃芩對(duì)照藥材 1g,加水 50ml,煎煮 1h,濾過,取濾液30ml,自樣品加乙酸乙酯振搖提取起同法制備,作為對(duì)照藥材溶液.另取黃芩苷對(duì)照品,加甲醇制成每 1ml 含 1mg 溶液,作為對(duì)照品溶液.照薄層色譜法試驗(yàn)吸取上述溶液供試品溶液、陰性對(duì)照品溶液和對(duì)照藥材溶液及對(duì)照品溶液各 10μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上,以乙酸乙酯丁酮甲酸水(5311)為展開劑,展開、取出、晾干.噴以1% 三氯化鐵乙醇溶液.供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的 斑點(diǎn),在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的

5、斑點(diǎn),而陰性對(duì)照品溶液沒有.2.3 蒲公英的薄層色譜鑒別:照成品方法制備蒲公英的陰性對(duì)照液分別取樣品溶液和陰性對(duì)照液各 30ml,用乙酸乙酯振搖提取兩次,20ml/次,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,殘?jiān)蛹状?1ml使溶解,作為供試品溶液和陰性對(duì)照品溶液.另取蒲公英對(duì)照藥材1g,加水50ml,煎煮1h,濾過,取濾液30ml,自樣品加乙酸乙酯振搖提取起同法制備,作為對(duì)照藥材溶液.再取咖啡酸對(duì)照品,加甲醇制成每 1ml 含 0.5mg 溶液,作為對(duì)照品溶液.照薄層色譜法試驗(yàn)吸取上述溶液供試品溶液、陰性對(duì)照品溶液和對(duì)照藥材溶液及對(duì)照品溶液各 5μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上,以甲苯乙酸乙酯甲酸

6、(531)的上層液為展開劑,展開、取出、晾干.置碘蒸汽中熏至斑點(diǎn)顯色清晰.供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn),在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn),而陰性對(duì)照品溶液沒有.2.4 青黛的薄層色譜鑒別:照成品方法制備青黛的陰性對(duì)照液分別取樣品溶液和陰性對(duì)照液各 30ml,用氯仿振搖提取三次,20ml/次,合并氯仿提取液,揮干至約 1ml,作為供試品溶液和陰性對(duì)照品溶液.另取青黛對(duì)照藥材 1g,加水 50ml,煎煮 1h,濾過,取濾液30ml,自樣品加氯仿振搖提取起同法制備,作為對(duì)照藥材溶液.再取靛玉藍(lán)、靛玉紅對(duì)照品,加氯仿分別制成每 1ml 含 1mg的溶液,作為對(duì)

7、照品溶液.照薄層色譜法試驗(yàn)吸取上述溶液供試品溶液、陰性對(duì)照品溶液和對(duì)照藥材溶液及對(duì)照品溶液各 510μl,分別點(diǎn)于同一硅膠 G 薄層板上,以苯氯仿丙酮(541)為展開劑,展開、取出、晾干.供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn),在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn),而陰性對(duì)照品溶液沒有.2.5 黃柏的薄層色譜鑒別:照成品方法制備黃柏的陰性對(duì)照液分別取樣品溶液和陰性對(duì)照液各 20ml,加鹽酸 2ml,用乙酸乙酯振搖提取兩次,20ml/次,棄去乙酸乙酯液,水層用氨試液調(diào)節(jié) pH 至 12,用三氯甲烷振搖提取兩次,15ml/次,合并三氯甲烷液,蒸干,殘?jiān)蛹状?1m

8、l 使溶解,作為供試品溶液和陰性對(duì)照品溶液.另取黃柏對(duì)照藥材 1g,加水 50ml,煎煮 1h,濾過,取濾液30ml,自樣品加鹽酸 2ml起同法制備,作為對(duì)照藥材溶液.再取鹽酸小檗堿對(duì)照品,加甲醇制成每 1ml 含 0.1mg 溶液,作為對(duì)照品溶液.照薄層色譜法試驗(yàn)吸取上述溶液供試品溶液、陰性對(duì)照品溶液和對(duì)照藥材溶液及對(duì)照品溶液各3μl,分別點(diǎn)于同一硅膠 G 薄層板上,以二甲苯乙酸乙酯異丙醇甲醇濃氨試液(106331)為展開劑,另槽內(nèi)加入等體積的濃氨試液,預(yù)飽和數(shù)分鐘后,展開、取出、晾干.置紫外燈(365nm)下檢視.供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn),在與對(duì)照品

9、色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn),而陰性對(duì)照品溶液沒有.2.6 大黃的薄層鑒別:照成品方法制備大黃的陰性對(duì)照液分別取樣品溶液和陰性對(duì)照液各 10ml,加鹽酸 1ml,水浴加熱 30min,立即冷卻,用乙醚提取三次,每次 10ml,合并乙醚提取液,揮取乙醚,殘?jiān)蛹状?1ml 溶解,作為供試品溶液和陰性對(duì)照溶液.另取大黃對(duì)照藥材 1g,加甲醇 20ml,超聲處理 30min,冷卻,過濾,揮去甲醇,殘?jiān)铀?10ml 使溶解.照供試品溶液處理方法,自加鹽酸 1ml起,同法處理,作為對(duì)照藥材溶液.再取大黃素,大黃酚對(duì)照品,加甲醇分別制成每 1ml 含 1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液.照薄層色譜法試驗(yàn)吸取上述溶液供試品溶液和陰性對(duì)照品溶液各 10μl,對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液各 4μl,分別點(diǎn)于同一硅膠 G 薄層板上,以石油醚(3060)甲酸乙酯甲酸(1551)的上層溶液為展開劑,展開、取出、晾干,置紫外燈(365nm)下檢視.在供視品色譜中,與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯 5 個(gè)相同的橙黃色熒光斑點(diǎn),在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的橙黃色熒光斑點(diǎn),而陰性對(duì)照 品 溶 液 沒有.置氨蒸汽中熏蒸后,日光下檢視,斑點(diǎn)變?yōu)榧t色.3 討 論采用薄層色譜法鑒別黃柏、連翹、蒲公英、黃芩、大黃、青黛.結(jié)果顯示該方法簡便、專屬性強(qiáng)