不同產(chǎn)地佩蘭揮發(fā)油化學(xué)成分分析及對(duì)比

1、 二一七屆學(xué)生畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）題 目：不同產(chǎn)地佩蘭揮發(fā)油化學(xué)成分分析與對(duì)比 系 別： 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院 專 業(yè)： 應(yīng)用化學(xué) 班 級(jí)： 134班 學(xué) 號(hào)： 26號(hào) 姓 名： 陶偉 指導(dǎo)教師： 趙彩虹 完成日期： 2017 年 05 月 05 日 不同產(chǎn)地佩蘭揮發(fā)油化學(xué)成分分析與對(duì)比不同產(chǎn)地佩蘭揮發(fā)油化學(xué)成分分析與對(duì)比摘 要研究和開發(fā)中藥中的有效成分，對(duì)人類的發(fā)展具有重要的意義。不同地區(qū)生長(zhǎng)的相同的藥材在化學(xué)物質(zhì)的成分上有顯著的差異。南北地區(qū)的氣候、生長(zhǎng)環(huán)境的差別會(huì)造成同類藥材在品質(zhì)和藥效上的巨大差異。本論文以不同產(chǎn)地的中藥佩蘭作為研究對(duì)象，考察不同產(chǎn)地?fù)]發(fā)油含量和化學(xué)成分的差別。采用水蒸氣蒸餾

2、法提取佩蘭中的揮發(fā)油，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）對(duì)佩蘭揮發(fā)油中的化學(xué)組分進(jìn)行詳細(xì)的分析。通過(guò)檢G170LB化學(xué)站檢索NIST98譜圖庫(kù)，確認(rèn)樣品中的化學(xué)成分，并以色譜峰面積歸一化法計(jì)算樣品中不同成分的相對(duì)含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明廣東產(chǎn)佩蘭共鑒定出30種成分，廣西產(chǎn)佩蘭共鑒定出35種成分，江蘇產(chǎn)佩蘭鑒定出41種成分。經(jīng)過(guò)對(duì)比分析，佩蘭揮發(fā)油的穩(wěn)定成分為石竹烯和 -柏木烯。關(guān)鍵詞：佩蘭；揮發(fā)油；對(duì)比；氣相色譜-質(zhì)譜ANALYSIS AND COMPARISON OF CHEMICAL CONSTITUENTS OF VOLATILE OIL FROM PERRIN IN DIFFERENT

3、 AREASABSTRACTResearch and development of active ingredients in traditional Chinese medicine, the development of mankind is of great significance. There are significant differences in the chemical composition of the same medicinal herbs grown in different areas. The difference between the climate an

4、d the growth environment in the north and south regions can cause the great difference in the quality and efficacy of the similar medicinal materials.The different areas of traditional Chinese medicine Perrin as the research object, to study the different areas of volatile oil content and chemical c

5、omposition of the difference. The chemical components in the volatile oil of Perrin were analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). The chemical constituents of the samples were confirmed by the NIST98 library, and the relative content of the different components in the samples was ca

6、lculated by the normalized peak area method. The results show that Guangdong produced Perrin identified 30 kinds of ingredients, Guangxi produced Perrin identified a total of 35 kinds of ingredients, produced in Jiangsu Perrin identified 41 kinds of ingredients. After the comparative analysis, the s

7、table components of volatile oil of Perrin were caryophyllene and - cedrene. Key words: Perrin; volatile oil; Comparison; gas chromatography-mass spectrometry目 錄1 前 言11.1 揮發(fā)油簡(jiǎn)介11.2 揮發(fā)油的化學(xué)成分11.2.1 芳香族化合物11.2.2 脂肪族化合物11.2.3 萜類化合物11.2.4 其它成分21.3 揮發(fā)油的生理活性及其應(yīng)用21.4 揮發(fā)油的提取方式21.4.1 水蒸氣蒸餾法31.4.2 溶劑萃取法31.4.3

8、油脂吸收法31.4.4 榨取法31.4.5 CO2超臨界流體萃取法31.4.6 酶提取法41.4.7 同時(shí)蒸餾萃取法41.5 菊科類植物概述41.6 佩蘭揮發(fā)油的研究現(xiàn)狀41.7 佩蘭揮發(fā)油成分基礎(chǔ)研究51.8 本實(shí)驗(yàn)研究的主要內(nèi)容51.9 本實(shí)驗(yàn)研究的目的與意義52 佩蘭揮發(fā)油的提取及化學(xué)組成分析62.1 實(shí)驗(yàn)儀器、材料和方法62.1.1 實(shí)驗(yàn)材料62.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器62.2 揮發(fā)油的提取62.3 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析72.3.1 定性分析72.3.2 定量分析82.3.3 氣相色譜-質(zhì)譜條件83 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析93.1 提取佩蘭揮發(fā)油及其含量93.2 不同產(chǎn)地分析與對(duì)比93.2.1 廣

9、東產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油成分分析93.2.2 廣西產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油成分分析113.2.3 江蘇產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油成分分析134 結(jié)論與討論154.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)論154.1.1 揮發(fā)油的出油率154.1.2 不同產(chǎn)地?fù)]發(fā)油主要成分154.2 不同產(chǎn)地佩蘭揮發(fā)油成分及含量對(duì)比164.2.1 佩蘭揮發(fā)油對(duì)比164.2.2 綜合分析17參考文獻(xiàn)18致 謝19IV1 前 言中草藥中的揮發(fā)油是重要的藥用成分，具有多種生物活性。下面我們對(duì)揮發(fā)油進(jìn)行簡(jiǎn)要的概述。1.1 揮發(fā)油簡(jiǎn)介植物揮發(fā)油，又稱植物精油，揮發(fā)性較強(qiáng)且大部分都有香味或辣味，一般在室溫下可揮發(fā)。不溶于水，溶于乙醚、乙醇、氯仿等有機(jī)溶劑，可以隨水蒸氣一起蒸餾且大多無(wú)色或

10、淡黃色油狀液體。天然植物在進(jìn)行光合作用的時(shí)候，一些植物細(xì)胞可以產(chǎn)生和分泌各種芳香分子。當(dāng)產(chǎn)出的芳香分子聚集成一起形成類似香囊的存在，分布在植物的花、葉、果實(shí)甚至枝干上。我們將這種芳香分子集聚部位進(jìn)行提煉、濃縮和萃取后，就得到了“植物精油”。揮發(fā)油大多數(shù)都具有祛痰止咳、平喘、祛風(fēng)除濕、理脾健胃、降熱、止痛、抗菌、消炎等作用。1.2 揮發(fā)油的化學(xué)成分揮發(fā)油由各種化學(xué)物質(zhì)的混合物組成，各種揮發(fā)性油通常含有幾十種甚至幾百種成分，這些成分通常是以一種或多種物質(zhì)占有較大比例的存在。多數(shù)揮發(fā)油主要是由脂肪類、芳香族和萜類化合物組成，其中萜類主要是由單萜和倍半萜組成，大多數(shù)情況下它們含量較高，但它們不具備芳香

11、性氣味，不是芳香油的芳香成分1。1.2.1 芳香族化合物揮發(fā)油中的芳香化合物主要是苯的含氧或不含氧的衍生物，如沙姜揮發(fā)油的主要成分為肉桂酸乙酯，鼠尾草揮發(fā)油的主要成分為丁香烯或帶有一個(gè)丙烷基基團(tuán)的苯酚化合物，佩蘭中的主要成分是石竹烯和-柏木烯，茴香醚在八角油和茴香油中均有出現(xiàn)。1.2.2 脂肪族化合物脂肪族化合物一般廣泛分布在植物的果實(shí)中，主要成分大多數(shù)是烴、醇、醛、酮、脂肪，有的時(shí)候一些揮發(fā)油中會(huì)含有少量的小分子脂肪、醛類、酸類。如肉桂油中有桂皮醛的存在。1.2.3 萜類化合物 此類化合物是揮發(fā)油的主要成分，具有特定的芳香氣味。根據(jù)其結(jié)構(gòu)，可分為單萜，萜類，倍半萜及其含氧衍生物等。陳光靜等人

12、發(fā)現(xiàn)在紅花椒揮發(fā)油的主要成分是其中含有很高比例的檸檬烯、月桂烯、-石竹烯、桉樹酮等單萜類化合物2。1.2.4 其它成分揮發(fā)油除了上述幾種物質(zhì)外。還有包含一些其它物質(zhì)。1.3 揮發(fā)油的生理活性及其應(yīng)用揮發(fā)油大多數(shù)都具有祛痰止咳、平喘、祛風(fēng)除濕、理脾健胃、降熱、止痛、抗菌、消炎等作用。例如，荊芥揮發(fā)油和桂枝揮發(fā)油對(duì)大腸桿菌、白色念珠菌、金黃色葡萄球菌等有良好的殺滅控制作用，平均殺滅率高達(dá)99%。薄荷油在祛風(fēng)、涼爽、抗炎有極好的效果，茉莉油含有中樞神經(jīng)興奮的成分。樟腦、冰片、薄荷腦、丁香酚等已在臨床應(yīng)用?。植物揮發(fā)油還具有促進(jìn)細(xì)胞的新陳代謝的作用，對(duì)人體的生理活動(dòng)及心理健康的良好發(fā)展有著良好的促進(jìn)作

13、用。因而，隨著人們對(duì)高質(zhì)量生活的追求，植物精油的芳香療法又重新崛起。芳香療法是一種通過(guò)按摩、抽吸和水浴來(lái)處理芳香植物揮發(fā)油的美容、保健和心理情緒的療法。這種療法大多是在專業(yè)美容院中被采用，具有較好效果的同時(shí)價(jià)格也是十分的昂貴。目前市場(chǎng)上也有各種植物精油，人們可以在家里做簡(jiǎn)單的香薰浴，這樣會(huì)給人親近自然的感覺(jué)，在自然植物中芳香，可以放松神經(jīng)，有利于身心的和諧與健康。植物揮發(fā)油不僅廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥和化妝品，而且廣泛應(yīng)用于香料工業(yè)。植物精油也是天然香精、香料的重要組成部分，天然香料有著合成香料無(wú)法擁有的獨(dú)特香韻，并且大多天然香料并沒(méi)有毒副作用等原因，市場(chǎng)需求十分龐大。目前在歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家地區(qū)，純天然香

14、料在各個(gè)領(lǐng)域全面取代人工合成香料市場(chǎng)的已經(jīng)是大勢(shì)所趨3-5。1.4揮發(fā)油的提取方式1.4.1 水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾是提取天然藥物揮發(fā)油的常用方法。先將藥材用中草藥粉碎機(jī)破碎，然后加適量的蒸餾水浸泡，直接通入水蒸氣或者將破碎的草藥放入揮發(fā)油提取器裝置進(jìn)行蒸餾提取。一般情況下餾出液分為油層和水層，向餾出液中加入鹽溶液進(jìn)行鹽析后用乙醇進(jìn)行萃取，再將萃取液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)提純揮發(fā)油并回收萃取液，將提純后溶液用固體Na2SO4干燥去水，得到所含揮發(fā)油。水蒸氣蒸餾法設(shè)備簡(jiǎn)單，使用成本低，操作簡(jiǎn)便，回收率高，是工業(yè)生產(chǎn)揮發(fā)油常用的方法。該方法缺陷在于系統(tǒng)開放，溫度較高，容易導(dǎo)致原料因?yàn)槭艿礁邷囟够虺煞职l(fā)生

15、改變，成品中還也有可能含有些許在蒸餾過(guò)程中揮發(fā)性物質(zhì)的分解產(chǎn)物，從而降低提取物的價(jià)值6-9。1.4.2 溶劑萃取法溶劑萃取法利用植物各成分在溶劑中溶解度不同，將目標(biāo)成分從植物中萃取出來(lái)。對(duì)于那些不應(yīng)該采用蒸汽蒸餾法的原料，我們可以選擇采用有機(jī)溶劑浸出法，常用的有機(jī)溶劑包括石油醚、四氯化碳、苯等。該方法的優(yōu)點(diǎn)是可通過(guò)一步提取法從植物揮發(fā)油中提取。主要缺點(diǎn)是需要大量高純度有機(jī)溶劑，同時(shí)要做大量的工作，萃取時(shí)間很長(zhǎng)，需要提取濃縮，而且提取過(guò)程中損失比較大，有機(jī)溶劑的存在將影響色譜分析的結(jié)果。溶劑萃取法是指通過(guò)向藥品中加入石油醚或乙醚后經(jīng)低溫冷浸或連續(xù)回流將粗產(chǎn)品從其中蒸餾出來(lái)，而后利用乙醇或水蒸氣蒸

16、餾進(jìn)行純化，即可得到植物揮發(fā)油的純品。溶劑萃取法的優(yōu)點(diǎn)是萃取組分不易改變，但成本高，不適合工業(yè)化生產(chǎn)，常用于實(shí)驗(yàn)室研究。1.4.3 油脂吸收法油脂吸收法的實(shí)驗(yàn)原理是，大部分的油都有吸收植物揮發(fā)油的能力，能將油中提取出來(lái)的植物揮發(fā)油更有價(jià)值，這種方法更適合熱敏性揮發(fā)油。香料工業(yè)可以直接使用石油吸收植物揮發(fā)油后，或添加無(wú)水乙醇，然后通過(guò)減壓法將醇溶液去除乙醇，得到純植物揮發(fā)油。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是它能持久吸收揮發(fā)油，但技術(shù)要求高，提取過(guò)程耗時(shí)長(zhǎng)，設(shè)備昂貴。1.4.4 榨取法使用榨取法是用機(jī)械的方式將含量高的揮發(fā)油原料粉碎，然后通過(guò)擠出方式從原料擠出揮發(fā)油，然后分層或離心將得到揮發(fā)油，這就是揮發(fā)油的粗分

17、離。用壓榨法所得的植物精油能夠保持植物原有的新鮮芳香。適合一些本身含有大量揮發(fā)油物質(zhì)，如橘皮、柚子皮、沙姜等。該方法的優(yōu)點(diǎn)是實(shí)驗(yàn)在室溫下進(jìn)行，不受溫度的影響，能保持原有的香氣。但是榨取法會(huì)將藥材中的水分及其他組織等雜質(zhì)一同壓榨出來(lái)，需要做進(jìn)一步處理；而且榨取法提取不完全，還需水蒸氣蒸餾法進(jìn)一步提取剩余部分揮發(fā)油。1.4.5 CO2超臨界流體萃取法二氧化碳超臨界流體萃取，作為國(guó)內(nèi)高科技技術(shù)簡(jiǎn)單，便宜，快速高效，幾乎沒(méi)有溶劑用于樣品預(yù)處理。原理是在近臨界點(diǎn)溫度或二氧化碳?jí)毫ο鲁R界流體的變化可以使流體溶解度發(fā)生變化，使溶質(zhì)和溶劑分離，從而實(shí)現(xiàn)分離的目的。CO2超臨界流體萃取法提取植物揮發(fā)油，萃取溫

18、度低，能有效保護(hù)香料或中草藥中有效成分使其免遭破壞，還具有防氧化、防熱解、保持生物活性，提高揮發(fā)油品質(zhì)等突出優(yōu)點(diǎn)。而且CO2無(wú)毒，也不會(huì)殘留有機(jī)溶劑，可以節(jié)約有機(jī)溶劑，也可以減少環(huán)境污染10-13。1.4.6 酶提取法酶具有在溫和條件下分解植物組織能力，可以提高收油率。現(xiàn)在中草藥中提取揮發(fā)油的酶主要是纖維素酶。纖維素酶可以對(duì)植物細(xì)胞產(chǎn)生影響，能夠在纖維素之間降解細(xì)胞壁和細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞壁和間質(zhì)細(xì)胞之間的結(jié)構(gòu)出現(xiàn)松散，膨脹，塌陷等變化，傳質(zhì)障礙，如細(xì)胞壁和間隙質(zhì)量，減少傳質(zhì)阻力的揮發(fā)性成分的傳質(zhì)和提高揮發(fā)油的提取率。1.4.7 同時(shí)蒸餾萃取法同時(shí)蒸餾萃取法是萃取和精餾兩者合二為一。這樣做的目的具有提

19、取時(shí)間短、提取物收率高、儀器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)單、使用的萃取溶劑少、污染樣品的機(jī)會(huì)相對(duì)較低。但提取出的揮發(fā)油中存在有機(jī)溶劑，使得在器壁上吸附的少量揮發(fā)油難以轉(zhuǎn)移，所以會(huì)造成一定損失。但總的來(lái)說(shuō)同時(shí)蒸餾萃取法是一項(xiàng)具有較好應(yīng)用前景的新技術(shù)。1.5 菊科類植物概述菊科植物遍布全國(guó)，其中在中國(guó)特有的有畫筆菊屬、華蟹甲草、異裂菊屬、復(fù)芒菊屬、太行菊屬、螞蚱腿子屬、重羽菊屬、黃纓菊屬、華千里光屬、葶菊屬、川木香屬、球菊屬、櫨菊木屬、花佩屬、紫菊屬、君范菊屬等15菊屬。其中藥用植物有澤蘭、火絨草、天名精、野菊、菊花、艾納香、款冬、千里光、白術(shù)、蒼術(shù)、牛蒡、雪蓮花、紅花、旋復(fù)花、蒲公英、佩蘭等。菊科大多數(shù)是多

20、年生草本植物，主要分布在溫帶?？勺鳛樗幱弥参铮土献魑锖陀^賞植物。根莖葉均能提出芳香性揮發(fā)油，常用于醫(yī)藥、保健品和日用化工品中。佩蘭為菊科植物佩蘭的地上部分，多年生草本植物，高40到100厘米。又名雞骨香、水香。生長(zhǎng)于路邊灌叢或溪邊。野生或盆栽。喜歡溫暖濕潤(rùn)的氣候，對(duì)土壤要求不高。主要產(chǎn)于江蘇、浙江、河北、山東、廣東、廣西等地。1.6 佩蘭揮發(fā)油的研究現(xiàn)狀到現(xiàn)在為止國(guó)內(nèi)對(duì)菊科揮發(fā)油成分都有深入的研究，菊科植物不僅種類多、分布廣而且化學(xué)成分復(fù)雜多樣，總計(jì)約30余類，幾乎包括了所有的生物活性物質(zhì)，其中以倍半萜內(nèi)酯、聚炔類、黃酮及多糖為其突出特點(diǎn)。很多菊屬類植物可以清心除煩，對(duì)腫瘤細(xì)胞具有抑制作用，

21、抑止組胺、乙酰膽堿和治療血吸蟲病、瘧疾、敗血癥、胃腸道疾病等腦血管和冠狀血管擴(kuò)張、血小板聚集、降低血液粘度、改善微循環(huán)、抗癌、抗炎、鎮(zhèn)痛、解熱、改善記憶和衰老的作用。1.7 佩蘭揮發(fā)油成分基礎(chǔ)研究佩蘭揮發(fā)油的化學(xué)成分十分復(fù)雜，其中有多種有機(jī)物組成。是菊科植物不可或缺的主要藥效成分之一，按其結(jié)構(gòu)主要可分為四大類：萜烯類化合物、芳香族化合物、脂肪族化合物以及含氮含硫化合物，其中萜烯類化合物為主要成分，其次是脂肪族化合物。目前已知佩蘭揮發(fā)油中成分主要多為烯烴類與醇類，石竹烯、-柏木烯、-紅沒(méi)藥醇、(E)-金合歡烯、氧化石竹烯、香芹酚等。佩蘭的氣味，不同菊花香味，如茶味，許多學(xué)者進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)研究佩

22、蘭，對(duì)佩蘭在揮發(fā)油成分進(jìn)行分離和鑒定，采用GC-MS技術(shù)通常分析。佩蘭揮發(fā)油的主要成分是石竹烯和-柏木烯。1.8 本實(shí)驗(yàn)研究的主要內(nèi)容本實(shí)驗(yàn)的主要研究?jī)?nèi)容包括以下兩個(gè)方面：1.8.1 揮發(fā)油化學(xué)成分分析對(duì)佩蘭揮發(fā)油中的化學(xué)組分進(jìn)行詳細(xì)分析采用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）技術(shù)。鑒定樣品中的化學(xué)成分采用檢G170LB化學(xué)站檢索NIST98譜圖庫(kù)。計(jì)算樣品中不同成分的相對(duì)含量采用色譜峰面積歸一化法。1.8.2 不同產(chǎn)地佩蘭揮發(fā)油化學(xué)成分對(duì)比本實(shí)驗(yàn)選取廣西、廣東、江蘇三個(gè)產(chǎn)地的佩蘭提取揮發(fā)油，并對(duì)這三個(gè)產(chǎn)地佩蘭揮發(fā)油的化學(xué)成分進(jìn)行對(duì)比分析。1.9 本實(shí)驗(yàn)研究的目的與意義菊科植物中大多數(shù)種類不僅是重要的

23、觀賞類植物，還具有極高的藥用價(jià)值，具有較高的預(yù)防保健價(jià)值。衛(wèi)生部認(rèn)定其中很多種既是食品又是藥品。到目前為止，人們已經(jīng)對(duì)姜科植物進(jìn)行了大量分析與研究，發(fā)現(xiàn)并證明其具有多種藥理作用，但對(duì)其揮發(fā)油的研究報(bào)道尚少。本實(shí)驗(yàn)選用廣東、廣西、江蘇三個(gè)地方菊科植物佩蘭，進(jìn)行揮發(fā)油提取實(shí)驗(yàn)，分析鑒定其揮發(fā)油的化學(xué)成分并將廣東、廣西、江蘇產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油的化學(xué)成分進(jìn)行對(duì)比。為開發(fā)佩蘭揮發(fā)油的藥用價(jià)值提供依據(jù)及借鑒。2 不同產(chǎn)地佩蘭揮發(fā)油的提取及化學(xué)組成分析2.1 實(shí)驗(yàn)儀器、材料和方法2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料廣東產(chǎn)佩蘭：購(gòu)于珠海市立康中藥引片有限公司廣西產(chǎn)佩蘭：購(gòu)于廣西同濟(jì)大藥房江蘇產(chǎn)佩蘭：購(gòu)于江蘇金霞中草藥有限公司無(wú)水硫

24、酸鈉：分析純，購(gòu)于斯特恩化學(xué)制劑有限公司水：娃哈哈純凈水色譜柱：HP-5彈性石英毛細(xì)管柱（30 m 0.25 mm，0.25 m）載氣：氦氣 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器揮發(fā)油提取器（肯堡博美（北京）實(shí)驗(yàn)器皿有限公司）HP 6890-5973氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國(guó)安捷倫公司）98-1-B型可調(diào)恒溫電熱套（天津市泰斯特儀器有限公司）BS124S型電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司）1000b-2型中草藥粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司）圓底燒瓶、玻璃管（北京欣維爾玻璃器材有限公司）2.2 揮發(fā)油的提取將購(gòu)買的廣西產(chǎn)佩蘭放入中草藥粉碎機(jī)中粉碎30 s后，將藥粉用500 mL圓底燒瓶?jī)?chǔ)存?zhèn)溆?。?/p>

25、電子天平準(zhǔn)確稱取佩蘭粉末100 g，裝入1000 mL圓底燒瓶中，加入700ml純凈水浸泡一定時(shí)間后，用電熱套加熱至回流后，恒溫回流一定時(shí)間?；亓鹘Y(jié)束之后，停止加熱。將裝置靜置冷卻至室溫，從揮發(fā)油提取器中分離出上層揮發(fā)油，加入少量無(wú)水硫酸鈉充分震蕩，取上清液封管后，于4保存揮發(fā)油樣品。將購(gòu)買的廣東產(chǎn)佩蘭放入中草藥粉碎機(jī)中粉碎30 s后，將藥粉用500 mL圓底燒瓶?jī)?chǔ)存?zhèn)溆谩Ｓ秒娮犹炱綔?zhǔn)確稱取佩蘭粉末100 g，裝入1000 mL圓底燒瓶中，加入700ml純凈水浸泡一定時(shí)間后，用電熱套加熱至回流后，恒溫回流一定時(shí)間?；亓鹘Y(jié)束之后，停止加熱。將裝置靜置冷卻至室溫，從揮發(fā)油提取器中分離出上層揮發(fā)油，

26、加入少量無(wú)水硫酸鈉充分震蕩，取上清液封管后，于4保存揮發(fā)油樣品。將購(gòu)買的江蘇產(chǎn)佩蘭放入中草藥粉碎機(jī)中粉碎30 s后，將藥粉用500 mL圓底燒瓶?jī)?chǔ)存?zhèn)溆?。用電子天平?zhǔn)確稱取佩蘭粉末100 g，裝入1000 mL圓底燒瓶中，加入700ml純凈水浸泡一定時(shí)間后，用電熱套加熱至回流后，恒溫回流一定時(shí)間。回流結(jié)束之后，停止加熱。將裝置靜置冷卻至室溫，從揮發(fā)油提取器中分離出上層揮發(fā)油，加入少量無(wú)水硫酸鈉充分震蕩，取上清液封管后，于4保存揮發(fā)油樣品。2.2.1 實(shí)驗(yàn)裝置圖圖1 實(shí)驗(yàn)裝置圖2.2.2出油率的計(jì)算公式X式中：X為出油率（%） m1為實(shí)驗(yàn)所用佩蘭的質(zhì)量（g） m2為所稱螺旋瓶的質(zhì)量（g） m3為

27、提取出的揮發(fā)油的質(zhì)量與所稱螺旋瓶的質(zhì)量之和（g）2.3 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析2.3.1 定性分析分別取各條件下提取的揮發(fā)油0.2L，通過(guò)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行分析鑒定。由G170LB化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行處理后，結(jié)合NIST98譜圖庫(kù)檢索，確定各個(gè)樣品中的化學(xué)成分。2.3.2 定量分析樣品在經(jīng)過(guò)G170LB化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)后，按峰面積歸一化法進(jìn)行定量分析，確定佩蘭揮發(fā)油中各化學(xué)成分的相對(duì)百分含量。2.3.3 氣相色譜-質(zhì)譜條件：色譜條件：初始溫度50，以5/min升至200，恒溫4 min；進(jìn)樣量0.2 L；分流比為 20:1；溶劑延遲 3 min。質(zhì)譜條件：離子源為電子轟擊源

28、；離子源溫度230；電離電壓70eV；電子倍增器電壓1341V；發(fā)射電流 34.6 A；接口溫度 230；掃描范圍m/z 30500。3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析3.1佩蘭揮發(fā)油及其含量稱取佩蘭100g，裝入1000 mL圓底燒瓶中加入純凈水700 mL，浸泡12 h后在調(diào)溫電熱套上加熱至回流后恒溫8 h，靜置冷卻至室溫，得到廣東、廣西、江蘇產(chǎn)揮發(fā)油。以出油率為縱坐標(biāo)，不同產(chǎn)地為橫坐標(biāo)得到圖1。圖1 三個(gè)產(chǎn)地?fù)]發(fā)油的出油率Figure 1 Oil yield of volatile oil from three producing areas3.2 不同產(chǎn)地分析3.2.1 廣東產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油成分分析通過(guò)氣

29、相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用技術(shù)得到廣東產(chǎn)揮發(fā)油總離子流圖如圖2，經(jīng)過(guò)鑒定其具體化學(xué)成分與含量分析如表3-1。圖2 廣東產(chǎn)揮發(fā)油總離子流圖Figure 2 Total ion flow graph of volatile oil produced in Guangdong表3-1廣東產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油成分及相對(duì)含量Table 3-1 Components and relative content of volatile oil from Perrin Guangdong序號(hào)No保留時(shí)間Rt(min)化合物Compound英文名English name分子式Formula相對(duì)含量（%）相似度Simi

30、larity18.21間異丙基甲苯1-methyl-3-(1-methylethyl)-benzenC10H140.359528.32右旋萜二烯d-LimoneneC10H163.839439.143-蒈烯3-careneC10H160.3494412.86-松油醇-TerpineolC10H140.3990513.57間苯乙酯m-Isopropyl ethyl benzeneC11H162.2890614.022-異丙基-5-甲基茴香醚2-methoxy-4-methyl-1-(1-methylethyl)-BenzeneC11H16O1.9093715.292-羥基-5-甲基苯乙酮2-Hy

31、droxy-5-methyl acetophenoneC9H10O25.7887815.45百里香酚ThymolC10H14O0.6187915.63香芹酚CarvacrolC10H14O5.44931016.98-瓊脂峽喃-GurjuneneC15H240.95621117.346-甲基-4-苯并二氫呋喃-4-酮6-Methylchroman-4-oneC10H10O21.68831219.01石竹烯CaryophylleneC15H2420.07901319.33-杜松烯-cadineneC15H240.93911419.51東莨菪內(nèi)酯4-CarvomenthenolC10H8O40.49

32、821519.80(E)-金合歡烯(E)-FarneseneC15H242.98681620.52香芹酚5-Isopropyl-2-methylphenolC10H14O9.0283續(xù)表3-1序號(hào)No保留時(shí)間Rt(min)化合物Compound英文名English name分子式Formula相對(duì)含量（%）相似度Similarity1720.59(E)-金合歡烯(E)-b-FarneseneC15H242.48811820.79-柏木烯-Cedrene;C15H241.18911921.11 -紅沒(méi)藥醇 -BisaboleneC15H241.26962021.56 -柏木烯 -Cedrene

33、C15H2416.53972122.40綠葉醇Paehouli aleohoC15H26O0.90912220.704-異丙基苯甲醚4-IsopropylanisoleC10H14O0.86842322.99氧化石竹烯Caryophyllene oxideC15H24O4.86962423.54溴代環(huán)己烷Cyclohexyl bromideC15H2410.44902524.19乙酸瑞香草酯5-methyl-2-(1-methylethyl)-1-acetateC12H16O20.30892624.57古芭烯copaenoeC15H240.73652724.74阿爾泰米夏酮Artemisia

34、ketone acid ethyl esterC10H16O0.34852825.314-氨基-3-甲基苯酚4-Amino-m-cresol;C7H9NO0.3295293026.6727.09溴代環(huán)己烷溴環(huán)己基Cyclohexyl bromideBromocyclohexaneC6H11BrC6H11Br0.490.4985843.2.2 廣西產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油成分分析通過(guò)氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用技術(shù)得到廣東產(chǎn)揮發(fā)油總離子流圖如圖3，經(jīng)過(guò)鑒定其具體化學(xué)成分與含量分析如表3-2。圖3 實(shí)驗(yàn)2揮發(fā)油總離子圖Figure 3 Total ion diagram of volatile oil i

35、n Experiment 2表3-2廣西產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油成分及相對(duì)含量Table 3-2 Components and relative content of volatile oil from Perrin Guangxi序號(hào)No保留時(shí)間Rt(min)化合物Compound英文名English name分子式Formula相對(duì)含量（%）相似度Similarity18.21間異丙基甲苯p-isopropyltolueneC10H140.349728.32雙戊烯1-Methyl-4-(1-methylethenyl)cyclohexeneC10H160.2987310.27芳樟醇LinaloolC1

36、0H18O0.4493412.88-松油醇(-)-TerpineolC10H18O0.5490513.50-甲基肉桂醛-MethylcinnamaldehydeC10H10O0.2190613.63-甲基苯丙醛-methyl-benzenepropanaC10H12O2.6280714.062-異丙基-5-甲基茴香醚2-methoxy-4-methyl-1-(1-methylethyl)-BenzeneC11H16 O2.1891815.414-羥基-3-甲基苯乙酮4-Hydroxy-3-methylacetophenoneC9H10 O25.0791915.48香芹酚CarvacrolC10

37、H14 O0.76921015.765-異丙基-2-甲基苯酚5-Isopropyl-2-methylphenolC10H14O5.09741117.00-瓊脂峽喃-GurjuneneC15H241.34831217.18(+)-長(zhǎng)葉蒎烯(+)-LongipineneC15H240.70981317.486-甲基-4-苯并二氫呋喃-4-酮6-Methylchroman-4-oneC10H10O23.64871419.14石竹烯CaryophyllenC15H2416.57921519.251-石竹烯l-CaryophylleneC15H240.70931619.40草烯醇valenianulC1

38、5H26O1.48761720.59香豆素CoumarinC9H6O22.48811819.85(E)-金合歡烯E)-FarneseneC15H241.59891919.91丁香烯-CaryophylleneC15H241.98982020.64-柏木烯2-ethyl-4,5-dimethylC10H14O10.20722120.85香楹醇torreyolC15H26O1.23912221.17-紅沒(méi)藥醇l-BisaboleneC15H241.58952321.76-柏木烯(+)-CedreneC15H2415.78992421.862,5-二甲氧基苯乙酮2,5-Dimethoxyacetop

39、henoneC10H12O30.40782522.47S-(Z)-3,7,11-三甲基-1,6,10-十二烷三烯-3-醇1,6,10-Dodecatrien-3-ol,3,7,11-trimethylC15H16O21.17912622.774-異丙基苯甲醚4-IsopropylanisoleC12H14O31.15852723.10氧化石竹烯4,5-Epoxy-4,11,11-trimethyl-8-methylenebicycloC15H24O4.29962824.07巴倫西亞橘烯4bH,5a-EremophilaC15H240.44862920.17桉油烯醇SpathulenolC15H

40、24O0.37913024.26乙酸瑞香草酯PhenolC12H16O20.31853124.801-甲基-1,2,4-三唑1H-1,2,4-TriazoleC3H5N30.28903226.732-氟-4-三氟甲基苯甲醛3-Hexen-2-oneC6H10O0.82843327.025-異丙基-2-甲基苯酚5-Isopropyl-2-methylphenolC10H14O0.52763427.141-甲基-1,2,4-三唑1-MethyltriazoleCH14O0.8281續(xù)表3-2序號(hào)No保留時(shí)間Rt(min)化合物Compound英文名English name分子式Formula相對(duì)含

41、量（%）相似度Similarity3530.93棕櫚酸Palmitic acidC16H32O21.25993.2.3 江蘇產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油成分分析通過(guò)氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用技術(shù)得到江蘇產(chǎn)揮發(fā)油總離子流圖如圖4，經(jīng)過(guò)鑒定其具體化學(xué)成分與含量分析如表3-3。圖4 實(shí)驗(yàn)3揮發(fā)油總離子流圖Figure 4 Total ion flow graph of volatile oil in Experiment 3 表3-3江蘇產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油成分及相對(duì)含量Table 3-3 Components and relative content of volatile oil from Perrin Jian

42、gsu序號(hào)No保留時(shí)間Rt(min)化合物Compound英文名English name分子式Formula相對(duì)含量（%）相似度Similarity14.092-甲基-5-(1-甲基乙基)-1,3-環(huán)己二烯;3-Cyclohexadiene, 2-methyl-5-(1-methylethyl)-1;C10H160.249024.66右旋萜二烯D-(+)-LimoneneC10H160.519436.00鄰異丙基甲苯Linalool1-isopropyl-2-methylbenzeneC10H140.4497410.12蓽澄茄油烯-CubebeneC15H241.4497510.46庫(kù)貝醇Cu

43、benolC10H26O0.2891610.90(1)-蒎烯-Copaene propaneC15H241.3198714.062-異丙基-5-甲基茴香醚2-methoxy-4-methyl-1-(1-methylethyl)-BenzeneC11H16O1.1496續(xù)表3-3序號(hào)No保留時(shí)間Rt(min)化合物Compound英文名English name分子式Formula相對(duì)含量（%）相似度Similarity812.12環(huán)己烯1，3-二甲基4-Hydroxy-3-methylacetophenoneC8H140.2183912.22芳樟醇Linalool;C10H18O0.289310

44、12.60-柏木烯-Cedrene phenolC15H241.13971113.32N,N-二乙基對(duì)苯二胺p-AminodiethylanilineC10H16N20.33831213.38石竹烯CaryophylleneC15H2412.35991314.03d-杜松烯d-CadineneC15H240.49931419.14g -杜松烯(-)-g-CadineneC15H2416.57921514.82-石竹烯-CaryophylleneC15H240.85971614.984-烯丙基苯甲醚4-AllylanisoleC10H12O0.28951715.20(E)-金合歡烯(E)-b-F

45、arneseneC15H241.20901815.51-萜品烯-TerpinenC10H160.26911915.58-松油醇-TerpineolC10H18O0.39952015.75大根香葉烯Germacrene C15H240.35972115.84g -杜松烯(-)-g-CadineneC15H241.38952216.12古芭烯copaenoeC15H240.92982316.22(E)-7,11-二甲基-3-亞甲(E)-7,11-Dimethyl-3-methylene-1,6,10-dodecatrieneC15H240.94892416.46檸檬醛CitralC10H16O0.

46、32962516.85d-杜松烯d-CadineneC15H243.99932617.15-柏木烯b-Cedrene (6CI,7CI)C15H241.85962717.44乙酸橙花酯nerol acetateC12H20O22.95812817.81橙花醇Neryl alcoholC10H18O1.10812918.10(+)-花側(cè)柏烯(+)-CupareneC15H220.24993018.361,2,3,4-四氫-1,1,6-三甲基萘Ionene(6CI)C13H180.68863118.50茴香腦cis-AnetholC10H18O0.59983219.90香芹酚Hydroxy-p-c

47、ymeneC10H14O2.38833320.442,3,5,6-四甲基苯酚2,3,5,6-TetramethylphenolC10H14O10.12903421.53氧化石竹烯4,5-Epoxy-4,11,11-trimethyl-8-methylenebicycloC15H24O5.97983521.82百里香酚alpha-TerpineolC10H14O1.18903623.57環(huán)己基三氯硅烷CyclohexaneC6H11Cl3Si3.96843723.74對(duì)異丙基苯甲醇Cuminic alcoholC10H14O0.58983824.06柏木腦;CedrolC15H26O4.1597

48、3924.15桉油烯醇SpathulenolC15H24O0.95954024.40二環(huán)己基二硫化物Cyclohexyl disulfideC12H22S3.38844126.66棕櫚酸Palmitic acid;C16H32O22.91994 結(jié)論與討論4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)論4.1.1 揮發(fā)油的出油率經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)可得出三個(gè)產(chǎn)地佩蘭的揮發(fā)油的出油率分別是：廣東產(chǎn)佩蘭出油率為0.38%，廣西產(chǎn)佩蘭出油率為0.55%，江蘇產(chǎn)佩蘭出油率為0.42%。4.1.2 不同產(chǎn)地?fù)]發(fā)油主要成分從廣東產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油中分離出30種成分。由表3-1可知，廣東產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油含量主要成分有9種，占揮發(fā)油總含量的78.63%。具體含量

49、見(jiàn)表4-1。表4-1 廣東產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油主要成分含量Table 4-1 Main components of volatile oil from Perrin Guangdong名稱 占揮發(fā)油總量 石竹烯 25.98% -柏木烯 16.53% 香芹酚 14.46% 溴代環(huán)己烷 10.44% 氧化石竹烯 4.48% -紅沒(méi)藥醇 1.26% (E)-金合歡烯6.46% 棕櫚酸 1.25% -柏木烯 1.18% 從廣西產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油中分離出35種成分。由表3-2可知，占廣西產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油含量主要成分有9種，占揮發(fā)油總含量的60.96%。具體含量見(jiàn)表4-2。表4-2 廣西產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油主要成分含量Table

50、4-2 Main components of volatile oil from Perrin Guangxi名稱 占揮發(fā)油總量 -柏木烯 20.07% 石竹烯16.57% 續(xù)表4-2名稱 占揮發(fā)油總量 5-異丙基-2-甲基苯酚5.09% 氧化石竹烯 4.29% -甲基苯丙醛 2.62% 香豆素2.48% (E)-金合歡烯1.59% -紅沒(méi)藥醇 1.58% 香芹酚 0.76% 從廣東產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油中分離出41種成分。由表3-3可知，占江蘇產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油含量主要成分有14種，占揮發(fā)油總含量的78.74%。具體含量見(jiàn)表4-3。表4-3 江蘇產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油主要成分含量Table 4-3 main comp

51、onents of volatile oil from Perrin Jiangsu名稱 占揮發(fā)油總量 g -杜松烯 16.57% 石竹烯 13.20% -柏木烯 12.98% 2,3,5,6-四甲基苯酚10.12% 氧化石竹烯 5.97% 柏木腦4.15% 乙酸橙花酯2.95% 棕櫚酸 2.91% 香芹酚 2.38% 丁香烯1.98%-紅沒(méi)藥醇1.58%蓽澄茄油烯1.44%-蒎烯1.31%(E)-金合歡烯1.20%4.2 不同產(chǎn)地佩蘭揮發(fā)油成分及含量對(duì)比4.2.1 佩蘭揮發(fā)油對(duì)比由表4-1、4-2、4-3可以知道，三個(gè)產(chǎn)地佩蘭揮發(fā)油中主要成分是石竹烯、 -柏木烯。具體如下：廣東的石竹烯（20.07%）和 -柏木烯（16.53%），廣西的石竹烯（16.57%）和 -柏木烯（25.98%），江蘇的石竹烯（13.20%）和 -柏木烯（12.98%）。廣東、廣西、江蘇產(chǎn)佩蘭揮發(fā)油的成分共有六種物質(zhì)相同，說(shuō)明這三種產(chǎn)地的佩蘭揮發(fā)油成分差異較大。這六種物質(zhì)分別是石竹烯、-柏木烯、-紅沒(méi)藥醇、(E)-金合歡烯、氧化石竹烯、香芹酚。這六種物質(zhì)的