臨床標本收集及保存Word編輯

1、傳播優(yōu)秀Word版文檔 ，希望對您有幫助，可雙擊去除！臨床樣本的收集與保存樣本類型采集方法處理方法保存方法血液樣 本l 根據(jù)研究需要采集治療前，治療中及治療后的空腹外周靜脈血。l 采集時盡量選擇與其他常規(guī)檢驗同時進行l(wèi) 分別采集抗凝血（依據(jù)研究目的選擇抗凝劑）和非抗凝（干燥或促凝）血液樣本l 腫瘤血液樣本采集英確保放/化療前有進行l(wèi) 血漿樣本分離應進行兩次離心l 依據(jù)科研需求確定樣本份數(shù)。l 分離提取血漿、血清、白細胞層、血凝塊進行分裝，每例樣本不少于3份。l 血清/血漿：分裝3管，0.5ml/管。l 血凝塊:分裝2管，1cm3/管。l EDTA抗凝：用于DNA提取、淋巴母細胞系建立和蛋白組學

2、研究。分裝3管、0.5ml/管l 血清：室溫血凝后30min內(nèi)進行分離、分裝；4，24h內(nèi)進行分離、分裝。l 血漿：4，24h內(nèi)進行分離、分裝。l 全血/血清/血漿/血凝塊-80長期保存。外周血單個核細胞樣 本l 血液樣本用EDTA抗凝采集l 全血樣本采集后應盡快用淋巴細胞分離液分離單個核細胞l 分離后的單個核細胞應加入細胞凍存液，并利用程序降溫儀或程序降溫盒進行梯度降溫。l 凍存液配置為90%FCS+10%DMSOl 依據(jù)科研需求確定樣本份數(shù)。l 水平室溫離心分離PBMC，4低溫洗滌。l 分離后單個核細胞加入細胞凍存液，混勻后進行分裝，每管0.5ml。l 單個核細胞：4，24h內(nèi)進行分離、分

3、裝。l 分裝后-150液氮中保存。組織樣 本l 樣本采集嚴禁影響臨床病理診斷。腫瘤直徑1cm3不建議采集或在病理醫(yī)生指導下采集，采集部位應與用于石蠟切片相一致。l 樣本采集應在離體后30min內(nèi)完成采集，采集時應避免壞死區(qū)及纖維化區(qū)，腫瘤細胞應50%。l 依據(jù)科研需求確定樣本份數(shù)。l 腫瘤、瘤旁及非瘤（正常）組織各2-3份。l 石蠟/OCT樣本1份或5張組織切片，用于形態(tài)學對照。l 需留取質(zhì)控樣本（）留取份數(shù)依據(jù)科研目的而定）l 每份樣本應0.5cm3或300mg或1*107細胞。l 樣本置于液氮內(nèi)轉(zhuǎn)運。l 石蠟樣本置于中性福爾馬林中常溫轉(zhuǎn)運，盡快制成蠟塊。l RNA later樣本常溫轉(zhuǎn)運（

4、24h），-20保存。l OCT樣本-20保存。l 新鮮組織樣本置于液氮中保存。傳播優(yōu)秀Word版文檔 ，希望對您有幫助，可雙擊去除！l 樣本采集時應在潔凈環(huán)境中操作，保存RNA時應盡量在無菌環(huán)境下進行；采集不同樣本時應更換采集器材、防止交叉污染。l 4.采集順序：標明“遠癌-近癌-癌灶”順序，正常組織（距癌灶邊緣3cm或最遠端）癌旁組織（距離癌灶邊緣3cm）癌組織l 采集后樣本置于液態(tài)液氮中應使用內(nèi)旋式凍存管，置于氣相液氮或-80冰箱中可使用外旋式凍存管。l 每份腫瘤樣本應有配對的血液樣本。l 石蠟樣本不小于0.5*0.5*0.2cm。l 樣本/福爾馬林液比例應1/5。培養(yǎng)細胞樣 本l 采集

5、容器應無菌、干燥、潔凈、具有防漏瓶蓋。l 吸出培養(yǎng)皿培養(yǎng)液，用PBS沖洗2次，加入胰蛋白酶37消化1min。l 除去胰蛋白酶，加入5ml培養(yǎng)液混勻后取出細胞液進行離心。l 除去上清液后加入細胞保護劑0.5ml，胎牛血清0.5ml及DMSO 0.1-0.2ml混勻放入內(nèi)旋式凍存管內(nèi)，進行程序降溫。l 干細胞保存加入特定細胞培養(yǎng)液及高濃度胎牛血清。l 依據(jù)科研需求確定樣本份數(shù)。l 每皿細胞對應1個凍存管保存。l 傳代細胞建議取處于指數(shù)生長期、較大瓶皿培養(yǎng)的80%-90%匯合單層細胞。l 收集培養(yǎng)液時，1000g/min離心5-10min。l 加入胰蛋白酶后需放入恒溫箱37恒溫1min。l 樣本置于

6、液氮內(nèi)轉(zhuǎn)運。l -150長期保存。尿液樣 本l 采集容器應無菌、干燥、潔凈、具有防漏瓶蓋。l 進行毒理分析時應使用高密度聚丙烯類容器。l 依據(jù)科研需求確定樣本份數(shù)。l 尿液樣本100ml。l 分裝5管，1ml/管。l 常溫保存：4hl 0-424h。l 全尿-80長期保存.傳播優(yōu)秀Word版文檔 ，希望對您有幫助，可雙擊去除！l 檢測特殊分析物時應在分管前加入EDTA或焦亞硫酸鈉等防腐劑。l 避免經(jīng)血、白帶、精液、前列腺液、糞便污染。l 特殊樣本應避光保存l 建議采集首次晨尿。l 尿液樣本含有細胞碎片等雜質(zhì)，應進行離心。l 尿液內(nèi)細胞采集/分離方法同血液樣本。l 不同時段尿樣研究方向：首次晨尿

7、：白細胞、紅細胞和激素濃度較高；隨機尿樣：適合常規(guī)篩查和細胞學檢測；分級尿樣：適用于分析物濃度；定時尿樣：可用于比較生物分子排泄模式。l 尿液樣本可處理為：全尿。l 細胞-150長期保存。糞便樣 本l 糞便應取新鮮標本，盛器應潔凈，不得混有尿液，不可有消毒劑及污水。l 采集標本時應用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等病變成分的糞便；外觀無異常的糞便需從表面、深處及糞端多處取材，其量至少指頭大小。l 冷凍采集后的樣本l 依據(jù)科研需求確定樣本份數(shù)。l 采集量30g。l 分裝3管，10g/管。l 冷凍干燥保存。l 2-80長期保存.膽汁樣 本l 采集容器應無菌、干燥、潔凈、具有防漏瓶蓋。l 采集清晨膽汁

8、、采集時盡量選擇與其他常規(guī)檢驗同時進行。l 依據(jù)科研需求確定樣本份數(shù)。l 采集量10ml。膽汁/RPMI1640比例為：1/25。l 分裝5管，2ml/管。l 采集后4保存，時間12h內(nèi)進行分裝。l -150長期保存。傳播優(yōu)秀Word版文檔 ，希望對您有幫助，可雙擊去除！l 膽汁保存應加入細胞培養(yǎng)液(RPMI1640)l 膽汁內(nèi)細胞采集分離方法同血液樣本。腦脊液l 樣本采集后應轉(zhuǎn)入含有EDTA和氯化鈉混合液中。2.如果含有紅細胞或顆粒物時應低溫離心。3.采集細胞應使用專業(yè)采集方法。4.腦脊液保存應加入保護劑（DMSO）并使用程序降溫儀進行梯度降溫。l 依據(jù)科研需求確定樣本份數(shù)。2.采集量3ml。3.分裝3管，0.5-1ml/管。l 樣本置于液氮內(nèi)轉(zhuǎn)運。2.