專題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)與應(yīng)用_第1頁
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文檔簡介

1、 了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí),進(jìn)行無了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí),進(jìn)行無菌技術(shù)的操作,進(jìn)行微生物的培養(yǎng)。菌技術(shù)的操作,進(jìn)行微生物的培養(yǎng)。 一、課題目標(biāo):一、課題目標(biāo): 掌握掌握培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基的制備、高壓蒸氣滅菌高壓蒸氣滅菌和和平平板劃線法板劃線法等基本操作技術(shù),熟練、規(guī)范地進(jìn)等基本操作技術(shù),熟練、規(guī)范地進(jìn)行無菌操作,成功地培養(yǎng)微生物。行無菌操作,成功地培養(yǎng)微生物。無菌技術(shù)的操作。無菌技術(shù)的操作。二、課題重點(diǎn)和難點(diǎn):二、課題重點(diǎn)和難點(diǎn):三、技能目標(biāo):三、技能目標(biāo):一、一、微生物基礎(chǔ)知識(shí)微生物基礎(chǔ)知識(shí) ( (一一) )微生物微生物: :1.1.特點(diǎn):結(jié)構(gòu)都相當(dāng)簡單特點(diǎn):結(jié)構(gòu)都相當(dāng)簡單, ,個(gè)體多數(shù)十

2、分微小個(gè)體多數(shù)十分微小. .通常要通常要用光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡才能看到,有的甚至沒用光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡才能看到,有的甚至沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)有細(xì)胞結(jié)構(gòu). .且體內(nèi)一般不含有葉綠素且體內(nèi)一般不含有葉綠素. .不能進(jìn)行光不能進(jìn)行光合作用合作用. .微生物包括五類:微生物包括五類:真菌真菌原生動(dòng)物原生動(dòng)物 原核生物界原核生物界 原生生物界原生生物界真菌界真菌界病毒界病毒界(二)培養(yǎng)基1.分類(按物理形態(tài)分按物理形態(tài)分) )(1)(1)液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基(2)(2)固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基常用的固體培養(yǎng)基常用的固體培養(yǎng)基: : 瓊脂固體培養(yǎng)基瓊脂固體培養(yǎng)基. . 微生物在固體培養(yǎng)微生物在固體培養(yǎng)基表面生長

3、基表面生長, ,可以可以形成肉眼可見的形成肉眼可見的菌菌落落. .培養(yǎng)基(培養(yǎng)液):是由人工方法配制而成的,專供微培養(yǎng)基(培養(yǎng)液):是由人工方法配制而成的,專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)液。生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)液。2.2.培養(yǎng)基內(nèi)所含的基本物質(zhì)培養(yǎng)基內(nèi)所含的基本物質(zhì)(4(4種種) ) (1)水 (2)碳源 (3)氮源 (4)無機(jī)鹽 (1)ph值 如:培養(yǎng)霉菌需酸性、培養(yǎng)細(xì)菌需中性或微堿性 (2)特殊營養(yǎng)物質(zhì)- ? 如:培養(yǎng)乳酸桿菌需要在培養(yǎng)基中添加維生素 (3)氧氣的含量 如:培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)需要提供無氧的條件3.培養(yǎng)基內(nèi)所需的其他條件培養(yǎng)基內(nèi)所需的其他條件練習(xí)練習(xí)生長因子生長因子 小

4、結(jié):不同的微生物往往需要采用不小結(jié):不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方同的培養(yǎng)基配方 ( (參考教材附錄參考教材附錄3 3內(nèi)容內(nèi)容) )。 不管哪種培養(yǎng)基,一般都含有不管哪種培養(yǎng)基,一般都含有水水、碳源碳源、和和氮源氮源、 無機(jī)鹽無機(jī)鹽、等等營養(yǎng)物質(zhì),另外還營養(yǎng)物質(zhì),另外還需要滿足微生物生長對需要滿足微生物生長對phph、特殊營養(yǎng)物質(zhì)特殊營養(yǎng)物質(zhì), ,例如例如: :生長因子生長因子( (即細(xì)菌生長必需,而自身即細(xì)菌生長必需,而自身不能合成的化合物不能合成的化合物, ,如維生素、某些氨基如維生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶酸、嘌呤、嘧啶) )以及以及氧氣氧氣、二氧化碳二氧化碳、滲透壓滲透壓等的

5、要求。等的要求。 (三)無菌技術(shù)1 1、獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵、獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵: : 2 2、無菌技術(shù)包括的四大方面、無菌技術(shù)包括的四大方面( (參看教材參看教材1515頁頁) )3 3、消毒與滅菌、消毒與滅菌(1)(1)消毒:消毒: 概念:使用較為概念:使用較為溫和溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物。面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物。不包括芽孢和不包括芽孢和孢子。孢子。 方法方法: :a.a. 煮沸消毒法煮沸消毒法b.b. 巴氏消毒法巴氏消毒法: :如牛奶的消毒如牛奶的消毒c.c. 化學(xué)藥劑消毒化學(xué)藥劑消毒: :酒精、氯氣、石碳酸

6、、煤酚皂溶液等酒精、氯氣、石碳酸、煤酚皂溶液等d.d. 紫外線消毒紫外線消毒防止外來雜菌的入侵防止外來雜菌的入侵(2 2)滅菌)滅菌 概念:使用概念:使用強(qiáng)烈強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。生物,包括芽孢和孢子。 方法:方法:a a 灼燒滅菌灼燒滅菌 b b 干熱滅菌干熱滅菌 c c 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌a.a.灼燒滅菌灼燒滅菌 微生物的接種工具微生物的接種工具 ( (接種環(huán)、接種針接種環(huán)、接種針) )或或其他金屬用具直接在其他金屬用具直接在火焰的充分燃燒層灼火焰的充分燃燒層灼燒燒注意適用范圍注意適用范圍b.b.干熱滅菌干熱滅菌 160

7、160170 170 ;1 12h2h能耐高溫的需要保持干能耐高溫的需要保持干燥的物品燥的物品( ( 玻璃器皿玻璃器皿) )c.c.高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌 100kpa 121 100kpa 121 15-30min15-30min通常用于培養(yǎng)基的滅菌通常用于培養(yǎng)基的滅菌思考思考二、實(shí)驗(yàn)操作二、實(shí)驗(yàn)操作 (一)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(一)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 計(jì)算稱量計(jì)算稱量溶化溶化滅菌滅菌倒平板倒平板 (二)純化大腸桿菌(二)純化大腸桿菌 接種方法有:接種方法有: 平板劃線法平板劃線法和和稀釋稀釋涂布平板法涂布平板法 (三)將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接(三)將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未

8、接種的培養(yǎng)基放入種的培養(yǎng)基放入3737恒溫箱中培養(yǎng)恒溫箱中培養(yǎng)12h12h和和24h24h后,觀察并記錄后,觀察并記錄三、課題延伸:菌種的保藏三、課題延伸:菌種的保藏 1、斜面保藏、斜面保藏 (臨時(shí)保存臨時(shí)保存) 2、甘油保藏、甘油保藏 (長期保存長期保存)練習(xí)練習(xí)倒平板倒平板討論討論: (1).培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50 左右時(shí),才能左右時(shí),才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度? (2).為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰? (3).平板冷凝后,為什么要將平板倒置?平板冷凝后,為什

9、么要將平板倒置? (4).在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?生物嗎?為什么?提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了。下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了。答:通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。答:通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。答:平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的答:平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后

10、的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。1、平板劃線法、平板劃線法 (1).為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?在劃線操作

11、結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么? (2).在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線? (3).在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?劃線的末端開始劃線?討論討論:答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌

12、種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線結(jié)束使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污后灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。染環(huán)境和感染操作者。答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。答:劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次答:劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)

13、菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。2.稀釋涂布法稀釋涂布法: (1)系列稀釋操作:涂布平板操作涂布平板操作 討論討論:涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第想,第2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作?步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作?提示:應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證提示:應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌無菌”。例如,酒精燈。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管

14、頭不要接觸任何其他物體、與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。返回返回菌落: 單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí),就會(huì)形成基上大量繁殖時(shí),就會(huì)形成一個(gè)一個(gè)肉眼可見的肉眼可見的,具有一定,具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體群體,叫,叫做菌落做菌落。 不同的細(xì)菌的菌落特征不同不同的細(xì)菌的菌落特征不同 菌落是菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)鑒定菌種的重要依據(jù)。(2)碳源碳源 可作為碳源的物質(zhì)有可作為碳源的物質(zhì)有:a. 含碳無機(jī)物含碳無機(jī)物: 、 、b. 含碳有機(jī)物:含碳有機(jī)物:蛋白蛋白質(zhì)質(zhì) 脂肪脂肪

15、酸酸返回返回不同微生物所利用的碳源不同不同微生物所利用的碳源不同a.異養(yǎng)型微生物的碳源為異養(yǎng)型微生物的碳源為b.自養(yǎng)型微生物的碳源為自養(yǎng)型微生物的碳源為碳酸鹽碳酸鹽碳酸氫鹽碳酸氫鹽二氧化碳二氧化碳糖類(主要)糖類(主要)含碳有機(jī)物(有機(jī)碳)含碳有機(jī)物(有機(jī)碳)含碳無機(jī)物(無機(jī)碳)含碳無機(jī)物(無機(jī)碳)(3)氮源氮源 可作為氮源的物質(zhì)可作為氮源的物質(zhì)有有:a. 含氮無機(jī)物:含氮無機(jī)物: 、 、 、b. 含氮有機(jī)物:含氮有機(jī)物:蛋白蛋白胨胨牛肉膏牛肉膏尿素尿素返回返回固氮微生物所利用的氮源是固氮微生物所利用的氮源是氮?dú)獾獨(dú)獍睔獍睔庀跛猁}硝酸鹽氨鹽氨鹽氮?dú)獾獨(dú)饩毩?xí)1(多項(xiàng)選擇) 1、下列細(xì)菌中,能利用

16、含碳無機(jī)物作碳源的是 a 光合細(xì)菌 b 根瘤菌 c 硝化細(xì)菌 d 乳酸菌 2、培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基中,必需含有的碳源和氮源是 a 糖、有機(jī)酸等 b 二氧化碳、碳酸鹽 c 蛋白質(zhì) d 無機(jī)氮化物 3、下列敘述不正確的是 a 培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì) b 液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基所含的最基本物質(zhì)不相同 c 微生物在固體培養(yǎng)基上生長時(shí),可以形成肉眼可見的單個(gè)細(xì)菌a.ca.cb.c.思考:1)無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還有什么目的?生物污染外,還有什么目的? 2)消毒和滅菌有何不同?消毒和滅菌有何不同?3)為什

17、么消毒牛奶要用巴氏消毒為什么消毒牛奶要用巴氏消毒法法?4)請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要,請選擇合適的方法。需要,請選擇合適的方法。培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿玻棒、試管、燒瓶和吸管玻棒、試管、燒瓶和吸管實(shí)驗(yàn)操作者的雙手實(shí)驗(yàn)操作者的雙手消毒消毒滅菌滅菌條件條件溫和溫和強(qiáng)烈強(qiáng)烈作用作用范圍范圍物體表面或內(nèi)部一部物體表面或內(nèi)部一部分分,不包括芽孢和孢子不包括芽孢和孢子物體內(nèi)外所有微生物物體內(nèi)外所有微生物,包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微

18、生物感染。滅菌滅菌 滅菌滅菌 消毒消毒營養(yǎng)成分不被破壞營養(yǎng)成分不被破壞思考思考1 溶化時(shí)為什么要將牛肉膏連同稱量紙一起加熱? 答:加瓊脂的目的是什么?答:可保證粘附在稱量紙上的牛肉膏也能可保證粘附在稱量紙上的牛肉膏也能溶于水中溶于水中,減少誤差減少誤差作為凝固劑作為凝固劑思考思考2 在滅菌前, 用牛皮紙、舊報(bào)紙包緊盛有 培養(yǎng)基的錐形瓶的目的是什么?答: 培養(yǎng)皿能否用高壓蒸汽滅菌?答:在滅菌時(shí)能避免水蒸汽凝結(jié)時(shí)浸濕棉塞在滅菌時(shí)能避免水蒸汽凝結(jié)時(shí)浸濕棉塞,在在取出培養(yǎng)基錐形瓶時(shí)也起到隔絕空氣中取出培養(yǎng)基錐形瓶時(shí)也起到隔絕空氣中雜菌污染的作用雜菌污染的作用不能不能,因?yàn)榕囵B(yǎng)皿要保持干燥因?yàn)榕囵B(yǎng)皿要保

19、持干燥,應(yīng)該用干熱滅菌應(yīng)該用干熱滅菌.練習(xí)練習(xí)2: 1.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 a 將用于微生物培養(yǎng)的器皿.接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌 b 接種純種細(xì)菌 c 適宜環(huán)境條件下培養(yǎng) d 防止外來雜菌的入侵 2.下列操作與無菌技術(shù)無關(guān)的是 a 接種前用肥皂洗雙手,再用酒精擦拭雙手 b 接種前用火焰燒灼接種針 c 培養(yǎng)在50左右時(shí)擱置斜面 d 在酒精燈的火焰旁完成 3.外科手術(shù)器械和罐頭食品的處理,要以能夠殺死什么為標(biāo)準(zhǔn) a 球菌 b 桿菌 c 螺旋菌 d 芽孢dcd 4.某學(xué)校打算開辟一塊食用菌栽培基地某學(xué)校打算開辟一塊食用菌栽培基地,以豐富學(xué)生以豐富學(xué)生的勞動(dòng)技術(shù)課內(nèi)容的勞動(dòng)技術(shù)課內(nèi)容,首先對

20、食用菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清掃和首先對食用菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清掃和消毒處理消毒處理,準(zhǔn)備食用菌栽培所需的各種原料和用具準(zhǔn)備食用菌栽培所需的各種原料和用具,然然后從菌種站購來各種食用菌菌種后從菌種站購來各種食用菌菌種.請回答以下問題請回答以下問題:(1)對買回來的菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),首先制備試管培養(yǎng)基,寫出制備固體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需的原料 。其中提供氮源的主要 是 ;提供能源的主要物質(zhì)是 ;瓊脂的作用是 ,它不提供營養(yǎng)。(2)微生物在生長過程中對各種成分所需量不同,故制備培養(yǎng)基時(shí)各成分要有合適的 ,在燒杯加入瓊脂后要不停地 ,防止 .牛肉膏、蛋白胨、水、無機(jī)鹽、瓊脂牛肉膏、蛋白胨、水、無機(jī)鹽、瓊脂牛肉膏牛肉膏蛋

21、白胨蛋白胨凝固劑凝固劑比例比例攪拌攪拌瓊脂糊底引起燒杯破裂瓊脂糊底引起燒杯破裂(3)將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中,加棉塞后包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入 中滅菌,壓力為 ,溫度為 ,時(shí)間 ,滅菌完畢拔掉電源,待鍋內(nèi)壓力 ,將試管取出. (4)使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)注意,先向鍋內(nèi)倒入 ,把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將基中原有冷空氣徹底排除后將鍋密閉.(5) 從一支試管向另一支試管接種時(shí)注意,接種環(huán)要在酒精燈 焰滅菌.并且待接種環(huán) 后沾取菌種,試管口不能離開酒精燈火焰附近,將接種的試管放入 冰箱中保藏.高壓滅菌鍋高壓滅菌鍋100kpa121 自然降至零后自然降至零后 適量水適量水外外冷卻冷卻415-30min(

22、1 1)按物理狀態(tài)來分:培養(yǎng)基可分為)按物理狀態(tài)來分:培養(yǎng)基可分為固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基和和液體液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基。其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定菌落等。其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定菌落等。(2 2)按功能來分,可分為)按功能來分,可分為選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基和和鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基。(3 3)按成分來分,可分為)按成分來分,可分為天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基和和合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的類型和用途培養(yǎng)基的類型和用途屬于選擇培養(yǎng)基有:加入青霉素的培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基: : 分離酵母菌、霉菌等真菌分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基: : 分離金黃色葡萄球菌分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無氮培養(yǎng)基不加氮源的無氮培養(yǎng)基: : 分離固氮菌分離固氮菌不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基: : 分離自養(yǎng)型微生物分離自養(yǎng)型微生物 根據(jù)細(xì)胞生存所需物質(zhì)的種類和根

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