實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌課件

1、實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌大腸桿菌：大腸桿菌：是引起家畜、家禽大腸桿菌病的病原。是引起家畜、家禽大腸桿菌病的病原。可導(dǎo)致家畜、家禽死亡；大腸桿菌是條件致病菌。可導(dǎo)致家畜、家禽死亡；大腸桿菌是條件致病菌。實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康模?、學(xué)習(xí)、學(xué)習(xí)大腸桿菌大腸桿菌與沙門氏菌與沙門氏菌常規(guī)微生物學(xué)診斷方法常規(guī)微生物學(xué)診斷方法。2、了解、了解大腸桿菌大腸桿菌與沙門氏菌的形態(tài)與與沙門氏菌的形態(tài)與染色特性染色特性。3、熟悉、熟悉大腸桿菌大腸桿菌與沙門氏菌的主要與沙門氏菌的主要培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性。實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌 大腸桿菌

2、與沙門氏菌的常規(guī)大腸桿菌與沙門氏菌的常規(guī) 實(shí)驗(yàn)室診斷可按階段劃分實(shí)驗(yàn)室診斷可按階段劃分實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌階段劃分（階段劃分（1 4階段）階段）第一階段：增菌、直接分離培養(yǎng)第一階段：增菌、直接分離培養(yǎng)第二階段：純培養(yǎng)、識別菌落、三糖鐵接種。第二階段：純培養(yǎng)、識別菌落、三糖鐵接種。第三階段：生化鑒定第三階段：生化鑒定（IMViC、H2S、硝酸鹽還原、運(yùn)動(dòng)力、五種糖）、硝酸鹽還原、運(yùn)動(dòng)力、五種糖）第四階段：血清學(xué)鑒定。第四階段：血清學(xué)鑒定。實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌病病 料料增菌（亞硒酸鹽湯等）增菌（亞硒酸鹽湯等）37、18-24h直直 接接 劃劃 線線 分分 離（麥離（麥 康康 凱凱 、 SS 瓊瓊 脂和脂和EM

3、B培養(yǎng)基）培養(yǎng)基）37、18-24h選可疑菌落，移植到以下培養(yǎng)基選可疑菌落，移植到以下培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂斜面營養(yǎng)瓊脂斜面三糖鐵瓊脂三糖鐵瓊脂37、18-24h純種檢驗(yàn)、革蘭氏染色鏡檢純種檢驗(yàn)、革蘭氏染色鏡檢生化反應(yīng)生化反應(yīng)血清學(xué)鑒定血清學(xué)鑒定沙門氏菌、大腸桿菌的一般診斷程序圖沙門氏菌、大腸桿菌的一般診斷程序圖實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌內(nèi)臟、淋巴結(jié)內(nèi)臟、淋巴結(jié)小家畜、家禽或胎兒小家畜、家禽或胎兒液態(tài)材料液態(tài)材料病毒材料病毒材料50%甘油磷酸鹽緩沖液甘油磷酸鹽緩沖液實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌【動(dòng)物尸體剖解的注意事項(xiàng)】n懷疑死于炭疽的動(dòng)物嚴(yán)禁尸體剖解。懷疑死于炭疽的動(dòng)物嚴(yán)禁尸體剖解。n有針對性的采集病料。有針對性的采集病料。n

4、作好個(gè)人的防護(hù)和環(huán)境消毒工作。作好個(gè)人的防護(hù)和環(huán)境消毒工作。n盛裝病料的容器要求無菌。盛裝病料的容器要求無菌。n無菌操作。無菌操作。n病料必須注明名稱。病料必須注明名稱。n必須低溫保存必須低溫保存, ,及早送檢。及早送檢。n動(dòng)物尸體必須妥善處理動(dòng)物尸體必須妥善處理( (深埋、焚燒深埋、焚燒) )。實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌成分和作用成分和作用：1 1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基：、基礎(chǔ)培養(yǎng)基：提供氮源和碳源提供氮源和碳源2 2、膽鹽、枸櫞酸鈉、煌綠：、膽鹽、枸櫞酸鈉、煌綠：可抑制腸道非致病菌的生可抑制腸道非致病菌的生長，而對腸道致病菌抑制作用弱。長，而對腸道致病菌抑制作用弱。3 3、乳糖，中性紅、乳糖，中性紅（pH6.8

5、-8.0pH6.8-8.0，紅紅橙黃橙黃） ：致病菌：致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨產(chǎn)生堿性物質(zhì)不分解乳糖，但分解蛋白胨產(chǎn)生堿性物質(zhì)菌落淡黃菌落淡黃色；大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸，菌落呈色；大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸，菌落呈紅色紅色 實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌解剖病死鴨解剖病死鴨本次實(shí)驗(yàn)操作步驟：本次實(shí)驗(yàn)操作步驟：心臟、肝臟等臟器的分離接種心臟、肝臟等臟器的分離接種（SS平板、三糖鐵瓊脂）平板、三糖鐵瓊脂）組織觸片（血片、肝片等）組織觸片（血片、肝片等） 、吉姆薩染色、鏡檢、吉姆薩染色、鏡檢37、18-24h觀察、記錄結(jié)果觀察、記錄結(jié)果出具實(shí)驗(yàn)報(bào)告出具實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌姬姆薩染色方法：

6、姬姆薩染色方法：1 1、觸片、干燥。用甲醇固定、觸片、干燥。用甲醇固定3-53-5分鐘。分鐘。2 2、將固定的觸片浸于盛有稀釋液的染色缸中、將固定的觸片浸于盛有稀釋液的染色缸中（姬姆薩原液（姬姆薩原液1010滴加于滴加于1010毫升中性或弱堿性蒸餾水中即可）毫升中性或弱堿性蒸餾水中即可），染色，染色30-6030-60分鐘，或過夜。分鐘，或過夜。3 3、水洗、干燥。、水洗、干燥。4 4、鏡檢：細(xì)菌呈藍(lán)黑色，組織、細(xì)胞等呈其他色。、鏡檢：細(xì)菌呈藍(lán)黑色，組織、細(xì)胞等呈其他色。實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌實(shí)驗(yàn)九大腸桿菌動(dòng)物尸體剖解順序觀觀 察察 體體 表表 皮膚消毒皮膚消毒 切開頸腹部皮膚切開頸腹部皮膚 剝剝 皮皮 觀觀 察皮下病察皮下病 變變 開開