實體瘤單克隆抗體治療

1、實體瘤單克隆抗體治療 【關鍵詞】單克隆抗體 【摘要】單克隆抗體是以腫瘤的特異性蛋白為靶點，在腫瘤治療中具有特異性、有效性、低毒性的特點。單克隆抗體治療的靶點包括細胞表面抗原和生長因子受體等。單克隆抗體單一治療和聯(lián)合化療、放療在實體瘤治療中顯示出了很好的療效，抗體與放射性核素結合的放射免疫性治療也有明顯的療效。本文通過單抗治療機制和臨床治療試驗兩方面介紹了幾種單克隆抗體以及抗體的治療戰(zhàn)略。 【關鍵詞】單克隆抗體;實體瘤；免疫治療 【abstract】monoclonalantibodieshaveemergedasanimportanttherapeuticpropertiesfortumorb

2、ytargetingspecificproteinsoftumor.thosereagentshavetheadvantageofspecificity,andefficiency,lowtoxicity.thosetargetsformonoclonalantibodiestherapyincludecellulargrowthfactorreceptorsandcellsurfaceantigens,etc.unconjugatedantibodiesshowsignificantefficacyinthetreatmentofsolidtumorsbymonotherapyandcomb

3、iningwithchemotherapyorradiotherapy.radioimmunotherapyisthatantibodiesconjugatetoradionuclidesshowssignificantefficacy,too.thisreviewpresentssomeofthemoloclonalantibodiesandmab-guidedstrategiesbyfocusingonthemechanismsandsomeofexperiencesreportedformabevaluatedinclinicaltrials. 【keywords】monoclonala

4、ntibody;tumor;immunetherapy 腫瘤的免疫治療和放射免疫治療開始于20世紀50年代，早期用于治療的抗體是多克隆抗體，但因為其異質性和藥學特性不適宜而被淘汰。1975年kohler和milstein利用雜交瘤技術成功制備出單克隆抗體，成為20世紀生物領域的一大技術革命。隨著單克隆抗體在制備技術和應用方面的發(fā)展，目前單克隆抗體已在生物學及醫(yī)學領域中廣泛應用，尤其是在腫瘤的診斷和治療方面發(fā)揮了重要作用。 單克隆抗體抗腫瘤的機制包括抗體依賴性細胞介導的細胞毒效應（cdcc）或補體依賴性細胞毒效應（cdc）殺死腫瘤細胞；通過抗體競爭地與受體結合，干擾配體-受體的結合和相互作用，影

5、響其發(fā)揮生物效應，抑制腫瘤生長；和受體結合直接誘導腫瘤細胞凋亡等。由于單克隆抗體大部分為鼠源性抗體，在人體內會產生人抗鼠抗體（hama）,與單抗結合后降低了抗腫瘤效應。單克隆抗體對血液腫瘤的治療取得了顯著的療效，而實體瘤治療療效不如前者。這可能和抗體分子很難通過毛細血管的內皮層，組織穿透力差，腫瘤攝取率低以及實體瘤內部的“高壓狀態(tài)有關。隨著抗體技術的發(fā)展和新的靶點的發(fā)現，近年來fda批準了數個單克隆抗體用于實體瘤臨床治療，實體瘤的免疫導向治療取得了飛速的發(fā)展。下面對幾種用于實體瘤治療的單克隆抗體進行介紹。 1抗cd20單克隆抗體 cd20抗原是分子量為35kd的非糖基化跨膜蛋白。cd20表達在

6、前-b細胞和成熟b細胞膜上，同時有超過90%的b細胞非霍奇金淋巴瘤（nhl）細胞也表達cd20，而漿細胞、造血干細胞及t細胞則無cd20的表達。cd20可能對ca2+的跨膜運輸、b淋巴細胞的分化、增殖具有調節(jié)作用。在血清中無游離cd20存在，最重要的是b淋巴細胞上的cd20很少內化和脫落，是b淋巴細胞瘤免疫導向治療的理想靶點。 利托昔（rituximab）是1997年fda批準用于治療b淋巴細胞nhl的抗cd20嵌合型單克隆抗體，是由鼠抗cd20的可變區(qū)fab和人igg1抗體的穩(wěn)定區(qū)fc段構成。rituximab能夠有效地降低淋巴瘤患者血液循環(huán)中的b細胞數量，其機制包括：(1)cdc效應；(2

7、)adcc效應；(3)誘導瘤細胞凋亡，同時它還增加細胞對化療藥物的敏感性。在期臨床試驗中對166例復發(fā)性、難治性和濾泡型nhl進行治療觀察，每周的治療劑量為375mg/m2，經過4周治療，有效率為48%,其中完全緩解率（cr）為6%，部分緩解率（pr）為42%。腫瘤體積縮小的患者126例，占總數的76%，平均藥效持續(xù)時間為11.6個月1。聯(lián)合其他的化療藥物進行治療的期試驗中，40例患者接受rituximab和chop方案的聯(lián)合治療6周，結果表明35例患者（其中5例患者因其他原因退出試驗）有效率為100%，其中cr為63%，pr為37%。平均藥效持續(xù)時間為39.7+個月。運用pcr技術分析發(fā)現8

8、例bcl-2陽性患者經治療后7例患者轉陰，這些治療效果是單一使用chop方案達不到的。目前，rituximab已在臨床廣泛運用。 2抗cd22單克隆抗體 cd22是一個135kd的限制性唾液酸糖蛋白，表達在生長期b細胞細胞質中。只有分化成熟以后的b細胞表面出現。在人類，大部分循環(huán)系統(tǒng)中的免疫球蛋白igm陽性和igd陽性的b細胞在細胞表面表達cd22。cd22在濾泡型、套型和緣區(qū)型b細胞中強烈表達。通過免疫組化、流式細胞儀計數得出，在b細胞淋巴瘤中至少60%80%的細胞表達cd22。cd22的功能尚不確定，最近的研究表明cd22是b細胞活化復合物的一個連接分子。在對cd22缺乏的小鼠的研究中發(fā)現

9、骨髓和循環(huán)中成熟的b細胞數量減少，進一步研究發(fā)現這些b細胞壽命較短，易凋亡。說明cd22是b細胞生長和成熟的關鍵因子。在與天然配體和抗體結合以后，cd22迅速內化，給b淋巴瘤細胞提供凋亡前信號2。 ll2抗體（以前叫hpb-2）是一個igg2a型抗cd22的鼠源單克隆抗體，體外免疫組化證實ll2抗體和51個nhl的b細胞樣本中的50個樣本抗原反應，但不和其他的惡性非淋巴組織反應3。人源化的ig1型ll2是epratuzumab,它降低了免疫原性，延長了半衰期，增強了功能。在單一使用epratuzumab的/臨床試驗研究中，對55例套性nhl患者連續(xù)4周使用epratuzumab單一治療，劑量分

10、別為120、240、360、480、600、1000mg/(m2week)。對51例患者（其中4例患者因其他原因退出試驗）進行評價，9例患者治療有效(or)，有效率為18%；3例患者達到cr，占6%；6例患者達到pr，占12%；20例患者處于穩(wěn)定期，占39%；22例患者病情惡化，占43%。53%的患者腫瘤的體積有一定的減小。平均藥效持續(xù)時間為79.3周。治療有效的患者的用藥劑量分別在360mg/m2和480mg/m2兩個水平。sharkeyrm等用111in和90y標記epratuzumab比較治療nhl，發(fā)現90y-dota-epratuzumab半衰期較短，對機體的損傷相對較小，是一種很有

11、前途的放射免疫治療藥物4。 3抗her-2/neu抗體 her-2/neu是一種原癌基因，位于人染色體17q21，編碼185kd的跨膜糖蛋白受體，具有酪氨酸激酶活性，屬于表皮生長因子受體（egfr）家族。已發(fā)現20%30%的晚期乳腺癌患者her-2/neu過度表達和擴增，同樣在卵巢癌、前列腺癌、肺癌、胃癌、膀胱癌中也有表達。在乳腺癌的研究中發(fā)現her-2的過表達與預后不良有關，有資料表明her-2過表達的乳腺癌患者緩解率和生存率降低，復發(fā)率增高5。而且her-2的過表達的乳腺癌具有抗藥性，研究表明這類腫瘤對激素治療缺乏反應，特別是tamoxifen聯(lián)合化療藥如cmf(環(huán)磷酰胺、甲氨蝶呤、5-氟

12、尿嘧啶)治療時效差6。 herceptin（trastuzumab）是采用生物工程技術制作人源化的單克隆抗體，1998年9月fda批準上市。herceptin能有效地抑制過表達her-2的細胞的增生效應，其作用機制還不完全清楚，可能包括：(1)與her-2受體蛋白特異性結合阻斷配體與其結合而產生的促進腫瘤細胞生長的作用，降低細胞周期s期的腫瘤細胞的比例，使大部分細胞停留在g0/g1期；(2)促進her-2的內化；(3)通過抗體依賴性細胞毒作用（cdcc）殺死腫瘤細胞；(4)下調血管內皮生長因子的表達，抑制異常細胞dna的修復功能，從而增加腫瘤細胞對放療和化療的敏感性7。 在期臨床試驗早期單一使

13、用herceptin對43例her-2陽性的已有遠處轉移乳腺癌患者進行治療，結果總有效率為12%，其中cr1例，pr4例8。在后期的臨床試驗對222例同樣的患者進行的治療觀察，總有效率為15%。其中cr8例，pr26例，治療效果持續(xù)時間為9.1個月，其他患者中30%病情穩(wěn)定無惡化，優(yōu)于使用二線化療藥物治療的結果9。在期臨床試驗中，對her-2陽性的轉移性乳腺癌患者進行治療，herceptin與anthracycline聯(lián)合治療和單一用anthracycline相比有效率分別為52%、43%；聯(lián)合taxane和單一使用taxnae相比有效率分別為42%、16%。聯(lián)合治療效果優(yōu)于單一使用herce

14、ptin治療10。herceptin作為靶向藥物治療her-2陽性轉移性乳腺癌取得了可觀的療效。無論單用還是聯(lián)合運用，都能產生理想的臨床效果。 4抗co17-1a（ep-cam）抗體 edrecolomab是一種鼠源性ig2a單克隆抗體，它能識別人腫瘤相關抗原co17-1a。co17-1a廣泛表達在多種腫瘤細胞表面，包括直腸癌、結腸癌、胰腺癌和胃癌，正常上皮組織細胞也有少量表達。edrecolomab的作用機制包括抗體依賴細胞介導的細胞毒作用（adcc）和抗體依賴補體介導的細胞毒作用（adcmc）。在體外試驗研究其adcc作用中，發(fā)現孵化出的加入了edrecolomab的大腸癌細胞可以被人的單

15、核細胞和巨噬細胞溶解破壞。進一步研究edrecolomab的adcc作用表明，干擾素-、干擾素-、白細胞介素-2與edrecolomab共同孵化大腸癌細胞系ht29時明顯地增加edrecolomab的抗腫瘤作用，而粒細胞巨噬細胞-集落刺激因子（gm-csf）、巨噬細胞集落刺激因子、腫瘤壞死因子-沒有這種作用11。edrecolomab聯(lián)合其他非競爭性的鼠源單克隆抗體孵化大腸癌細胞可以產生adcmc效應，然而單獨用edrecolomab孵化就不會產生這種效應12。 對166例經過手術切除原發(fā)灶的dukesc期大腸癌患者運用edrecolomab單一治療研究，隨訪5年發(fā)現和對照組相比，死亡率下降了

16、30%;腫瘤的復發(fā)率下降了27%;研究還表明edrecolomab對原發(fā)灶的大腸癌的復發(fā)率沒有影響。然而，遠處轉移作為復發(fā)的第一信號，edrecolomab明顯降低其發(fā)生率13。punt等用5-fu與edrecolomab聯(lián)合治療試驗表明二者聯(lián)用沒有增加藥物的毒性，但聯(lián)合用藥和單一使用5-fu相比生存率并沒有增加14。dellam等用edrecolomab與capecitabine聯(lián)合治療co17-1a陽性的腺癌包括乳腺癌、大腸癌、胃癌、肺癌、膽囊癌等，表明二者聯(lián)合治療對進展性和轉移性腺癌有效，毒、副作用沒有增加15。目前，edrecolomab被用于結腸癌的輔助治療，在延長存活期和抑制腫瘤轉

17、移具有很好的效果. 5實體瘤的放射免疫治療(rit) 放射免疫治療是利用放射性核素和單克隆抗體結合，放射性核素對腫瘤的殺傷依靠電離輻射，再借助高特異親腫瘤的抗體為載體，不僅對與標記抗體直接結合細胞，而且對周圍一定射程內未結合的腫瘤細胞都有殺傷作用。由于抗體在腫瘤組織中濃度比周圍組織高，使放射性核素主要聚集在腫瘤組織內，從而降低了核素對機體的毒性，提高了療效。目前，放射免疫治療實體瘤顯示出了令人鼓舞的前景?？筩d20的90y標記的鼠源性單抗zevalin和131i標記的單抗bexxar已被美國fda批準用于非霍奇金淋巴瘤臨床治療并取得良好的治療效果，特別是使用化療藥物和利托昔治療無效的nhl。許

18、多新的放療藥物正在進行臨床試驗和評價中，預計這些藥物將相繼問世。 6小結 使用單克隆抗體治療惡性腫瘤是一個正在迅速發(fā)展的領域。大量文獻表明單克隆抗體在實體瘤的治療中取得了很好的療效，特別是在小的轉移灶和術后殘余瘤的治療中。隨著上世紀90年代抗體工程和噬菌體展示技術的迅速發(fā)展，基因工程抗體，如嵌合抗體、小分子抗體、雙特異性抗體和人源化抗體等相繼獲得成功。這些改造過的抗體在免疫原性、穿透性以及對各種水解酶的抵抗力等方面都優(yōu)于常規(guī)單抗。并且隨著分子生物學、免疫學的發(fā)展以及對免疫耦合物的藥理學的不斷探討，新型抗體將在抗原性、特異性、藥代動力學等方面趨于完善，單抗導向治療實體腫瘤定會取得更大的突破。 【

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