移液器的使用校準及日常維護

1、移液器（加樣槍）移液器（加樣槍） 使用使用、校準、校準及日常維護及日常維護 2021-7-4 河北醫(yī)科大學新藥安全評價研究中心河北醫(yī)科大學新藥安全評價研究中心 王勇 1，移液器的基礎(chǔ)知識，移液器的基礎(chǔ)知識 2，移液器的使用方法，移液器的使用方法 3，移液器的使用注意事項，移液器的使用注意事項 4，移液器快速校準的方法，移液器快速校準的方法 5，移液器的日常維護保養(yǎng)，移液器的日常維護保養(yǎng) 內(nèi)容簡介內(nèi)容簡介 移液器的基礎(chǔ)知識移液器的基礎(chǔ)知識 吸頭吸頭 套筒套筒 容量顯示窗容量顯示窗 吸頭脫卸按鈕吸頭脫卸按鈕 體積調(diào)節(jié)旋鈕體積調(diào)節(jié)旋鈕 移液器的基本結(jié)構(gòu)移液器的基本結(jié)構(gòu) 排氣式移液器排氣式移液器是指移

2、液器活塞與吸入液體上表面之間有空氣柱，在操作中，被 移取的液體與活塞體之間因為空氣柱的存在，將無法直接接觸； 容積式移液器容積式移液器是指移液器活塞與吸入液體上表面之間沒有空氣柱，在操作中， 被移取的液體與活塞體之間因為沒有空氣柱的存在，將可以直接接觸。 移液器的基本分類移液器的基本分類 標稱容量：在給定的有效量程范圍內(nèi)最大的容量標稱容量：在給定的有效量程范圍內(nèi)最大的容量 例如標稱容量為例如標稱容量為100l的可調(diào)式移液器，的可調(diào)式移液器， 其有效量程是其有效量程是10l-100l，但實際上，但實際上， 其最小值可調(diào)節(jié)到其最小值可調(diào)節(jié)到7l左右，最大值可左右，最大值可 調(diào)節(jié)到調(diào)節(jié)到110l左右

3、，但這個范圍左右，但這個范圍7l- 110l并不是廠家所宣稱的量程，也不并不是廠家所宣稱的量程，也不 是該移液器的有效量程。是該移液器的有效量程。 移液器的容量識別移液器的容量識別 移液器的使用移液器的使用 正向吸液正向吸液：吸液時，將移液器按鈕按到第一檔 吸液，釋放按鈕。放液時，先按到第一檔，打 出大部分液體，再按下第二檔， 將余液排出。 移液器的移液方式移液器的移液方式 反向吸液反向吸液：適用于粘稠液體和易揮發(fā)液體。吸液時 將按鈕直接按到第二檔再釋放，這樣會多吸入一些 液體，打出液體時只要按到第一檔即可。此時，吸 頭內(nèi)部還有多余液體，可以補償吸頭內(nèi)部的表面吸 附。 移液器的移液方式移液器的

4、移液方式 1 選擇量程合適的移液器選擇量程合適的移液器 移液器只能在特定量程范圍內(nèi)準確移取液體，移液器只能在特定量程范圍內(nèi)準確移取液體， 如超出最低或最大量程，會損壞移液器并導致計如超出最低或最大量程，會損壞移液器并導致計 量不準；量不準； 2 設(shè)定容量值設(shè)定容量值 2.1 粗調(diào)：通過調(diào)節(jié)旋鈕將容量值迅速調(diào)整至接粗調(diào)：通過調(diào)節(jié)旋鈕將容量值迅速調(diào)整至接 近自己的預想值；近自己的預想值； 2.2 細調(diào)細調(diào)：當容量值接近設(shè)定值以后，應將移液當容量值接近設(shè)定值以后，應將移液 器刻度顯示窗平行放至自己的眼前，通過調(diào)節(jié)旋器刻度顯示窗平行放至自己的眼前，通過調(diào)節(jié)旋 鈕慢慢地將容量值調(diào)至預想值，從而避免視覺誤

5、鈕慢慢地將容量值調(diào)至預想值，從而避免視覺誤 差所造成的影響；差所造成的影響； 2.3 設(shè)定容量值時的注意事項：在調(diào)節(jié)量程時，設(shè)定容量值時的注意事項：在調(diào)節(jié)量程時， 如果要從大體積調(diào)為小體積，則按照正常的調(diào)節(jié)如果要從大體積調(diào)為小體積，則按照正常的調(diào)節(jié) 方法，旋轉(zhuǎn)旋鈕即可。但如果要從小體積調(diào)為大方法，旋轉(zhuǎn)旋鈕即可。但如果要從小體積調(diào)為大 體積時，則應先旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度，體積時，則應先旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度， 再回調(diào)至設(shè)定體積，這樣可以保證量取的最高精再回調(diào)至設(shè)定體積，這樣可以保證量取的最高精 確度。確度。 移液器的操作移液器的操作方法方法 3 吸液嘴（吸液嘴（吸吸頭）的裝配：把白

6、套筒頭）的裝配：把白套筒 頂端插入吸液嘴，在輕輕用力下壓的頂端插入吸液嘴，在輕輕用力下壓的 同時，把手中的移液器按逆時針方向同時，把手中的移液器按逆時針方向 旋轉(zhuǎn)至吸液嘴卡緊。切記用力不能過旋轉(zhuǎn)至吸液嘴卡緊。切記用力不能過 猛，更不能采取剁吸頭的方法來進行猛，更不能采取剁吸頭的方法來進行 安裝。吸液嘴卡緊的標志是略為超過安裝。吸液嘴卡緊的標志是略為超過 O型環(huán)，并可以看到連接部分形成清型環(huán)，并可以看到連接部分形成清 晰的密封圈；晰的密封圈； 4 預洗吸液嘴：在安裝了新的吸液嘴預洗吸液嘴：在安裝了新的吸液嘴 或增大了容量值以后，應該把需要轉(zhuǎn)或增大了容量值以后，應該把需要轉(zhuǎn) 移的液體吸取、排放兩到

7、三次，確保移的液體吸取、排放兩到三次，確保 移液工作的精度和準度；移液工作的精度和準度； 移液器的操作方法移液器的操作方法 5 吸液：先將四指并攏握住移液吸液：先將四指并攏握住移液 器上部，用拇指按住塞桿頂端的器上部，用拇指按住塞桿頂端的 按鈕，向下按到第一停點，再將按鈕，向下按到第一停點，再將 吸頭垂直浸入液面吸頭垂直浸入液面23mm，緩，緩 慢平穩(wěn)松開按鈕，吸上液體，并慢平穩(wěn)松開按鈕，吸上液體，并 停留停留12秒鐘（粘性大的溶液可秒鐘（粘性大的溶液可 加長停留時間）；加長停留時間）； 移液器的操作方法移液器的操作方法 6 移液：緩慢抬起移液器取出吸液移液：緩慢抬起移液器取出吸液 嘴，確保吸

8、液嘴外壁無殘留液體。嘴，確保吸液嘴外壁無殘留液體。 可用定性濾紙抹去吸嘴外面可能黏可用定性濾紙抹去吸嘴外面可能黏 附的液滴。小心勿觸及吸液嘴口；附的液滴。小心勿觸及吸液嘴口； 7 目測吸入的液體體積是否合理；目測吸入的液體體積是否合理； 8 放液：將吸液嘴貼到容器內(nèi)壁并放液：將吸液嘴貼到容器內(nèi)壁并 保持保持20-40傾斜，平穩(wěn)地把按傾斜，平穩(wěn)地把按 鈕壓到第一停點，停鈕壓到第一停點，停1-2s（粘性大（粘性大 的液體要加長停留時間）后，繼續(xù)的液體要加長停留時間）后，繼續(xù) 按壓到第二停點，排出殘余液體。按壓到第二停點，排出殘余液體。 松開按鈕，然后將吸液嘴沿著內(nèi)壁松開按鈕，然后將吸液嘴沿著內(nèi)壁

9、向上移開；向上移開； 9 按吸頭彈射器除去吸頭，吸取不按吸頭彈射器除去吸頭，吸取不 同樣本液體時必須更換吸頭；同樣本液體時必須更換吸頭； 移液器的操作方法移液器的操作方法 1 正確填充吸頭正確填充吸頭 當某一吸頭的建議（標稱）范圍為最大吸頭容量（標當某一吸頭的建議（標稱）范圍為最大吸頭容量（標 稱容量）的稱容量）的 10% 至至 100% 時，可在時，可在 35% 至至 100% 這一這一 較小以及優(yōu)化的范圍內(nèi)實現(xiàn)最高精確度。較小以及優(yōu)化的范圍內(nèi)實現(xiàn)最高精確度。 在此范圍內(nèi)移液會減少對操作人員技法的要求，并在此范圍內(nèi)移液會減少對操作人員技法的要求，并 可將結(jié)果準確度提高?？蓪⒔Y(jié)果準確度提高。

10、當達到標稱容量的當達到標稱容量的 50% 時可提供最佳結(jié)果。時可提供最佳結(jié)果。 2 吸液時保持垂直入液角吸液時保持垂直入液角 使入液角盡可能地接近垂直位置，否則垂直液柱較使入液角盡可能地接近垂直位置，否則垂直液柱較 小，這樣將會吸入過多樣品。小，這樣將會吸入過多樣品。 分液時，吸頭應當與容器壁保持較小角度，從而確分液時，吸頭應當與容器壁保持較小角度，從而確 保良好的排液效果。保良好的排液效果。 3 分液技法分液技法 對于大多數(shù)應用而言，建議在分液時將吸頭的末端對于大多數(shù)應用而言，建議在分液時將吸頭的末端 貼靠容器壁。這可減少或者消除分液后殘留在吸頭上的樣貼靠容器壁。這可減少或者消除分液后殘留在

11、吸頭上的樣 品。沿側(cè)壁向上滑動吸頭末端將移液器撤下，從而去除吸品。沿側(cè)壁向上滑動吸頭末端將移液器撤下，從而去除吸 頭孔處的任何殘留液滴。頭孔處的任何殘留液滴。 移液器的使用注意事項移液器的使用注意事項 4 吸頭入液深度吸頭入液深度 正確的吸頭入液深度對于微量移液器正確的吸頭入液深度對于微量移液器 尤為重要。如果吸頭入液過深，則隨著壓力尤為重要。如果吸頭入液過深，則隨著壓力 的加大，吸液量將會增多。保留在吸頭表面的加大，吸液量將會增多。保留在吸頭表面 的液體會影響結(jié)果。如果吸頭入液太淺，則的液體會影響結(jié)果。如果吸頭入液太淺，則 會造成空氣進入，從而產(chǎn)生氣泡以及導致容會造成空氣進入，從而產(chǎn)生氣泡以

12、及導致容 量不準確。正確的入液深度可使準確度提高量不準確。正確的入液深度可使準確度提高 達達 5%。 移液器容量移液器容量 入液深度入液深度 2 與 10ul 1mm 20 與 100ul 2-3mm 200 與 1000ul 3-6mm 5000ul 與 10ML 6-10mm 移液器的使用注意事項移液器的使用注意事項 5 吸頭入液時間吸頭入液時間 在將樣品吸入吸頭時，在樣品中的入液在將樣品吸入吸頭時，在樣品中的入液 時間是良好移液技法中的關(guān)鍵因素。在平穩(wěn)時間是良好移液技法中的關(guān)鍵因素。在平穩(wěn) 松開定位銷按鈕之后，必須進行短暫暫停，松開定位銷按鈕之后，必須進行短暫暫停， 然后再從樣品中取出，

13、以確保將全量樣品吸然后再從樣品中取出，以確保將全量樣品吸 入吸頭中。如果量較大以及對于粘性物質(zhì)而入吸頭中。如果量較大以及對于粘性物質(zhì)而 言，必須在等候較長時間后再取出，因為移言，必須在等候較長時間后再取出，因為移 液器中的氣室需要一秒鐘的時間才能實現(xiàn)均液器中的氣室需要一秒鐘的時間才能實現(xiàn)均 衡。衡。 6 吸液速率吸液速率 移液器的吸液速率不盡相同，因此會移液器的吸液速率不盡相同，因此會 對結(jié)果的精度與準確度產(chǎn)生影響。用戶應使對結(jié)果的精度與準確度產(chǎn)生影響。用戶應使 用以一種平穩(wěn)并且受控的方式釋放移液器定用以一種平穩(wěn)并且受控的方式釋放移液器定 位銷按鈕。釋放過快的定位銷可能出現(xiàn)的最位銷按鈕。釋放過

14、快的定位銷可能出現(xiàn)的最 常見后果是：氣霧會進入移液器套柄中，從常見后果是：氣霧會進入移液器套柄中，從 而損壞移液器的內(nèi)部部件。而損壞移液器的內(nèi)部部件。 移液器的使用注意事項移液器的使用注意事項 使用使用設(shè)備設(shè)備及物品及物品：電子天平（測量范圍：電子天平（測量范圍200g；分度值；分度值0.1mg）；燒杯）；燒杯 （50ml）1個；燒杯（個；燒杯（100ml）1個；定性濾紙若干小塊個；定性濾紙若干小塊；超純水；超純水80ml 1 打開電子天平，空載調(diào)零打開電子天平，空載調(diào)零； 2 放入小燒杯待天平顯示穩(wěn)定后，按下歸零鍵歸零。給移液放入小燒杯待天平顯示穩(wěn)定后，按下歸零鍵歸零。給移液 器上安裝相應的

15、吸液嘴，對移液器的槍頭進行預洗器上安裝相應的吸液嘴，對移液器的槍頭進行預洗； 6 重復重復5次執(zhí)行次執(zhí)行3-5條。條。記錄完畢，將移液器的容量調(diào)至下一記錄完畢，將移液器的容量調(diào)至下一 被檢點繼續(xù)。被檢點遵循從小到大的原則進行調(diào)整；被檢點繼續(xù)。被檢點遵循從小到大的原則進行調(diào)整； 5 待天平顯示穩(wěn)定后，馬上讀取并記錄此時電子天平顯示出待天平顯示穩(wěn)定后，馬上讀取并記錄此時電子天平顯示出 的數(shù)值。記錄完畢將電子天平復零；的數(shù)值。記錄完畢將電子天平復零； 4 使用移液器移取被檢容量的超純水至天平的小燒杯內(nèi)使用移液器移取被檢容量的超純水至天平的小燒杯內(nèi)； 3 將移液器的容量調(diào)至被檢點將移液器的容量調(diào)至被檢

16、點。被檢被檢點一般選擇最小，中間點一般選擇最小，中間 和最大容量值。也可以是某一指定的容量點和最大容量值。也可以是某一指定的容量點； 移液器快速校準的方法移液器快速校準的方法 tKmV %100 V VV E V %100 1 V S n 移液器實際容量計算：將所測得的質(zhì)量值帶入以下公式，求得移液器在當前溫度下的實際容量值； 式中：V 在當前溫度下的移液器的實際容量，L； m 被檢移液器所排出的超純水質(zhì)量， mg； K(t) 測定值m和測定時超純水溫度的比例系數(shù)； 式中：V 標稱容量，L； 5次測量的算數(shù)平均值，L 移液器的容量重復性計算：將換算得到的實際容量值帶入以下公式，求得移液器在當前溫

17、度下的容量重復性； 式中：n-1 標準偏差； n 測量次數(shù)； S 重復性； 移液器的容量相對誤差計算：將換算得到的實際容量值帶入以下公式，求得移液器在當前溫度下的容量相對誤差； 移液器快速校準的數(shù)據(jù)處理移液器快速校準的數(shù)據(jù)處理 表一表一 移液器容量允許誤差和測量重復性移液器容量允許誤差和測量重復性 移液器移液器的評價標準的評價標準 1 將移液器調(diào)整至最小量程，按照校準方法得到當前的將移液器調(diào)整至最小量程，按照校準方法得到當前的 實際容量值，根據(jù)與標示容量值的差值，通過移液器上實際容量值，根據(jù)與標示容量值的差值，通過移液器上 的調(diào)準旋鈕進行調(diào)整；的調(diào)準旋鈕進行調(diào)整； 2 當調(diào)整后測得的實際容量值

18、與標示容量值符合表當調(diào)整后測得的實際容量值與標示容量值符合表1要求要求 時，將移液器容量調(diào)整至中間量程繼續(xù)測量。中間量程時，將移液器容量調(diào)整至中間量程繼續(xù)測量。中間量程 符合要求時，再調(diào)整至最大量程繼續(xù)測量。符合要求時，再調(diào)整至最大量程繼續(xù)測量。 3 如果中間量程或者最大量程有一個不符合表如果中間量程或者最大量程有一個不符合表1要求時，要求時， 則需重新調(diào)整至最小量程繼續(xù)修正。直到則需重新調(diào)整至最小量程繼續(xù)修正。直到3個量程的值都個量程的值都 符合表符合表1要求為止。要求為止。 4 修正完畢的移液器，需重新進行校準。修正完畢的移液器，需重新進行校準。 5 最小量程低于最小量程低于10L的，不進行修正。如果最大量程和的，不進行修正。如果最大量程和 中間量程符合校準要求的，繼續(xù)使用，否則返廠維修。中間量程符合校準要求的，繼續(xù)使用，否則返廠維修。 移液器的修正移液器的修正方法方法