促胃腸動力藥物篩選課件

1、促胃腸動力藥物篩選1 促胃腸動力藥物篩選促胃腸動力藥物篩選 離體組織、器官水平藥物篩選離體組織、器官水平藥物篩選 武漢大學藥學院武漢大學藥學院 藥理系藥理系 促胃腸動力藥物篩選2 1了解離體器官試驗特點及注意事項，掌握離體 器官試驗的基本技術。 2學習利用離體器官進行藥物篩選的方法，觀察 受試物對離體胃、腸平滑肌的影響。 3了解科研課題設計原則，科研課題立項需闡述 的相關內(nèi)容。 4了解科研論文寫作規(guī)范（包括圖表制作技巧 等）。 5掌握試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計、處理方法。 目的目的 促胃腸動力藥物篩選3 離體器官試驗常 用的離體器官有 心臟、血管、腸 段、子宮及神經(jīng) 肌肉標本，用離 體標本可比較直 觀地觀測

2、藥物的 作用。不同的動 物標本用于測定 不同類的藥物作 用。 背景知識背景知識 促胃腸動力藥物篩選4 在離體器官法中，不同動物的不同器官都要求最適宜的營養(yǎng) 環(huán)境，因此各種動物的人工生理溶液成份和配制都有區(qū)別。 在離體器官研究中應特別引起重視。 背景知識背景知識 滲透壓滲透壓：要等滲，但不同動物對同一物質(zhì)的等滲濃度要求不同。如生理鹽水溶液，冷血 動物用0.60.75%；溫血動物用0.8%0.9%。 各種離子：各種離子：一定比例的不同電解質(zhì)離子Na+、K+、Ca2+、Mg2+、H+、OH-等是維持 組織器官功能所必須。組織器官不同，對生理溶液中離子的成份和濃度要求亦不同。 pH影響：影響：人工生理

3、鹽水中pH一般要求為中性，對于哺乳動物心臟冠狀動脈，酸性生 理深夜可使平滑肌松馳；堿性則可使節(jié)律加快，振幅縮小。 其它條件：其它條件：葡萄糖提供組織活動所需能量，臨用時再加入，以防變質(zhì)；有的離體 器官需要氧氣，如離體子宮、離體兔心、乳頭肌等。而離體腸管通以空氣就可以了。 促胃腸動力藥物篩選5 世界衛(wèi)生組織調(diào)查表明，我國有80%的人患有不同程度胃腸病居世 界首位。近年來，功能性胃腸病已受到廣泛的關注，如功能性消化 不良、腸胃激綜合征、功能性便秘等，西方國家人群患病率為 5%24%，每年花費高額的醫(yī)療費用，患者的生存質(zhì)量亦受到不同程 度的影響。在最常見造成工作、學習缺勤的疾病中，腸易激綜合征 的發(fā)

4、病率僅次于普通感冒.目前主要采用解痙劑治療，但只能緩解腹 痛，不能治療便秘。而緩瀉劑能緩解便秘，但不能緩解腹痛、腹脹， 而且不能長期服用。因此，研究開發(fā)新的調(diào)節(jié)胃腸動力的藥物有重 要的社會效益和廣闊的市場前景。 背景知識背景知識 促胃腸動力藥物篩選6 背景知識背景知識 甲氧氯普胺甲氧氯普胺 第一代第一代第二代第二代 多潘立酮多潘立酮 它可作用于胃腸道 和中樞神經(jīng)系統(tǒng)， 兼有促動力和止吐 的功效。可增加食 管下端括約肌的張 力，使其壓力增加 加強胃內(nèi)固體和液 體的排空，還可協(xié) 調(diào)胃竇和十二指腸 運動，對腸道無明 顯作用 第三代第三代 西沙比利西沙比利 它對整個胃腸道包括 從食管到肛門括約肌 均有

5、促動力作用，能 增強生理反應，恢復 正常的動力模式。 臨床常用促動力藥臨床常用促動力藥 中藥中藥 百合、烏藥、百合、烏藥、 幟實、虎杖幟實、虎杖 最突出的特點在于標 本兼治 ，但作用機制 不明確，組方尚缺少 現(xiàn)代藥理學研究的支 持。通過離體胃腸平 滑肌試驗，探討藥物 作用機制、組方依據(jù) ，為新藥提供線索。 促胃腸動力藥物篩選7 教學試驗安排教學試驗安排 （一）教學分組（一）教學分組 在一個教學單元內(nèi)，根據(jù)學生人數(shù)，將學生分為在一個教學單元內(nèi)，根據(jù)學生人數(shù)，將學生分為8 8組，每組組，每組2 25 5人，并分成上下人，并分成上下 兩班，兩班，4 4組組/ /班。班。 （二）試驗方案（二）試驗方案

6、 1上半班采用胃平滑肌作為試驗材料，建議受試物：百合、或烏藥、或上半班采用胃平滑肌作為試驗材料，建議受試物：百合、或烏藥、或 幟實、或虎幟實、或虎 杖、或四藥合并的水提取物，也可采用各教學單位自行提取的物質(zhì)，用于篩選。西藥杖、或四藥合并的水提取物，也可采用各教學單位自行提取的物質(zhì)，用于篩選。西藥 對照：胃復安、西沙必利。對照：胃復安、西沙必利。 2下半班采用腸平滑肌作為試驗材料，建議受試物：百合、或烏藥、或幟實、或虎下半班采用腸平滑肌作為試驗材料，建議受試物：百合、或烏藥、或幟實、或虎 杖、或四藥合并的水提取物，也可采用各教學單位自行提取的物質(zhì)，用于篩選。西藥杖、或四藥合并的水提取物，也可采用

7、各教學單位自行提取的物質(zhì)，用于篩選。西藥 對照：胃復安、西沙必利。對照：胃復安、西沙必利。 促胃腸動力藥物篩選8 試驗方法及步驟試驗方法及步驟 （一）試驗材料（一）試驗材料 1動物：大鼠（動物：大鼠（220280g/只），雄性。只），雄性。 2器材：恒溫平滑肌槽器材：恒溫平滑肌槽1臺、通氣泵臺、通氣泵1個、鐵支架個、鐵支架1個、止水夾個、止水夾2個，生物信號采個，生物信號采 集處理系統(tǒng)，張力換能器，集處理系統(tǒng)，張力換能器，1ml注射器注射器4個，培養(yǎng)皿個，培養(yǎng)皿1個，個，50ml燒杯燒杯1個，組織剪、個，組織剪、 眼科剪各眼科剪各1把，止血鉗兩個，鑷子兩個，絲線若干，移液器一個，砝碼一個。把，

8、止血鉗兩個，鑷子兩個，絲線若干，移液器一個，砝碼一個。 3試劑：臺氏液。試劑：臺氏液。 4受試藥：受試藥：0.5%胃復安溶液；胃復安溶液；0.1%西沙必利溶液；西沙必利溶液；20%百合水提取物；百合水提取物；10% 烏藥水提取物；烏藥水提取物；15%幟實水提取物；幟實水提取物；15%虎杖水提取物；虎杖水提取物；15%四藥合并的水提取四藥合并的水提取 物。物。 促胃腸動力藥物篩選9 試驗方法及步驟試驗方法及步驟 （二）試驗步驟（二）試驗步驟 1對大鼠離體胃平滑肌正常張力的影響試驗。 （1）制備胃肌條標本：斷頭處死，立即剖取胃底部浸泡于臺氏液液中， 制備成“Z”型，長約2.5cm、寬約0.4cm的

9、胃肌條標本。 （2）沖洗浴槽，并在其中加入臺氏液30ml（標線處），加熱，維持水溫在37 38。調(diào)節(jié)通氣泵，緩慢通入氣泡，并調(diào)節(jié)12個氣泡/秒。 （3）取標本，兩端對角處用絲線結扎。一端掛在通氣鉤上，放入浴槽，另一端從張力 換能器的彈簧片小孔中穿出并掛上1g砝碼（給予負荷），打開計算機，進入生物信號 采集系統(tǒng)，選擇“張力通道”，觀察活動曲線。待其平衡后，用絲線將掛砝碼的絲線牢 牢固定于彈簧片上，除去砝碼。 （4）待標本在浴槽內(nèi)穩(wěn)定10min左右，記錄一段正常活動曲線，然后用注射器依次向浴 槽中滴加藥液0.2ml。每加一組藥時立即標記，并觀察、記錄2min頻率及收縮幅度。每 次藥物作用后，用溫暖

10、的臺氏液沖洗23次，待張力恢復基線（約5min）后再試驗其他 藥物。 （5）停止記錄曲線，保存數(shù)據(jù)。斷電斷氣，取出回腸，沖洗浴槽。 促胃腸動力藥物篩選10 試驗方法及步驟試驗方法及步驟 2對大鼠離體胃平滑肌正常張力的影響試驗。打開腹腔，找到回盲部，在離其23cm 的回腸處剪斷，取出回腸，置于盛有臺氏液的培養(yǎng)皿中，沿腸壁分離并剪去腸系膜，將 腸管剪成數(shù)段，輕輕沖出腸內(nèi)容物，最后將腸管剪成23cm的小段備用。加樣順序與操 作同上。 促胃腸動力藥物篩選11 試驗結果的原始記錄試驗結果的原始記錄 給藥前給藥前 1min1min內(nèi)內(nèi) 的平均值的平均值 給藥后給藥后 第第1min1min內(nèi)內(nèi) 的平均值的平

11、均值 給藥后給藥后 第第2min2min內(nèi)內(nèi) 的平均值的平均值 頻率頻率振幅振幅頻率頻率振幅振幅頻率頻率振幅振幅 0.5%0.5%胃復安溶液胃復安溶液 0.1%0.1%西沙必利溶液西沙必利溶液 20%20%百合水提物百合水提物 10%10%烏藥水提物烏藥水提物 15%15%幟實水提物幟實水提物 15%15%虎杖水提物虎杖水提物 15%15%四藥合并水提物四藥合并水提物 表表1 藥物對大鼠胃或腸平滑肌作用測定原始數(shù)據(jù)藥物對大鼠胃或腸平滑肌作用測定原始數(shù)據(jù) 促胃腸動力藥物篩選12 結果處理結果處理 上下班分別收集4組試驗結果，計算平均值及標準差，根據(jù)擬研究題目， 設計表格，并與給藥前相比，進行統(tǒng)計

12、學差異檢驗。示范表格如下。 促進率（%）=（給藥后值-給藥前值）/給藥前值100% 收縮頻率收縮頻率促進率（促進率（% %） 1min1min2min2min1min1min2min2min 0.5%0.5%胃復胃復 安溶液安溶液 0.1%0.1%西沙必西沙必 利溶液利溶液 20%20%百合水百合水 提物提物 10%10%烏藥水烏藥水 提物提物 15%15%幟實水幟實水 提物提物 15%15%虎杖水虎杖水 提物提物 15%15%四藥水四藥水 提物提物 表表2 受試物對大鼠胃或腸平滑肌收縮頻率的影響（受試物對大鼠胃或腸平滑肌收縮頻率的影響（SD，n=4） 促胃腸動力藥物篩選13 試驗報告內(nèi)容及格

13、式要求試驗報告內(nèi)容及格式要求 （一）題目（一）題目 根據(jù)你的理解或興趣，可將報告題目擬定為： 1“胃復安、西沙必利對胃腸平滑肌作用特征比較”或 2“中藥促胃腸動力藥篩選及組方依據(jù)研究”或 3“中、西藥促胃腸動力作用特征研究”或 4自定。 （二）研究背景及意義（二）研究背景及意義 根據(jù)選擇的題目，說明研究背景、立題依據(jù)、研究意義。 （三）試驗方法（三）試驗方法 根據(jù)選擇的題目，描述試驗方法（剔除不必要的試驗方法）。 （四）試驗結果（四）試驗結果 根據(jù)選擇的題目，選擇所需的試驗數(shù)據(jù)，并進行統(tǒng)計處理，以圖或表的形式描述結果。 （五）討論（五）討論 分析結果，引用相關文獻，并進行充分討論。 促胃腸動力藥物篩選14 注意事項注意事項 1沖洗和分離腸管時動作應輕柔，盡量避免牽拉腸管。 2標本制備好后，放在盛有溫暖臺氏液的培養(yǎng)皿中保存，以免影響標本的反應性。在整 個操作過程中，盡量使腸段在溫暖的臺氏液而不是在空氣中。 3腸管兩端穿線時，切勿將腸管縫死，只需穿過一層腸壁，靠端的位置恰到好處。 4通氣時使氣泡呈小米粒大小均勻上升，水泡不宜過