總糖實(shí)驗(yàn)報(bào)告范本

1、總糖實(shí)驗(yàn)報(bào)告范本 糖在我們?nèi)粘Ｉ钪须S處可見，我們吃的米飯、水果、 零食中或多或少都含有一些糖類。同時(shí)，糖也是我們維持機(jī) 體運(yùn)動(dòng)所必不可少的物質(zhì)， 沒有了它， 就沒有了能量的來(lái)源。 我們這次便走進(jìn)實(shí)驗(yàn)室探索糖類的奧秘。本次實(shí)驗(yàn)我們將用 3,5 二硝基水楊酸法測(cè)定總糖和還原糖中的含糖量。本次 實(shí)驗(yàn)中，我們除了要掌握還原糖和總糖的測(cè)定基本原理還要 學(xué)習(xí)比色法測(cè)定還原糖的操作方法以及分光度法測(cè)定的原 理和方法。 首先，讓我們一起來(lái)了解一下它們的測(cè)定方法吧。還原 糖的測(cè)定是糖定量測(cè)定的基本方法。還原糖是指含有自由醛 基或酮基的糖類，單糖都是還原糖，雙糖和多糖不一定是還 原糖，其中乳糖和麥芽糖是還原糖，

2、 蔗糖和淀粉是非還原糖。 利用糖的溶解度不同，可將植物樣品中的單糖、雙糖和多糖 分別提取出來(lái)，對(duì)沒有還原性的雙糖和多糖，可用酸水解法 使其降解成有還原性的單糖進(jìn)行測(cè)定，再分別求出樣品中還 原糖和總糖的含量（還原糖以葡萄糖含量計(jì)） 。還原糖在堿 性條件下加熱被氧化成糖酸及其它產(chǎn)物， 3,5- 二硝基水楊酸 則被還原為棕紅色的 3-氨基-5- 硝基水楊酸。 在一定范圍內(nèi)， 還原糖的量與棕紅色物質(zhì)顏色的深淺成正比關(guān)系，利用分光 光度計(jì)，在540nm波長(zhǎng)下測(cè)定光密度值，查對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì) 算，便可求出樣品中還原糖和總糖的含量。由于多糖水解為 單糖時(shí)，每斷裂一個(gè)糖苷鍵需加入一分子水，所以在計(jì)算多 糖含量時(shí)

3、應(yīng)乘以 0.9 。 、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1、掌握還原糖和總糖的測(cè)定的基本原理 2、學(xué)習(xí)比色法測(cè)定還原糖的操作方法3 、學(xué)習(xí)分光光 度法測(cè)定的原理和方法 二、實(shí)驗(yàn)原理 還原糖的測(cè)定是糖定量測(cè)定的基本方法。還原糖是指含 有自由醛基或酮基 的糖類， 單糖都是還原糖， 雙糖和多糖不一定是還原糖， 其中乳糖和麥芽糖是還原糖，蔗糖和淀粉是非還原糖。利用 糖的溶解度不同，可將植物樣品中的單糖、雙糖和多糖分別 提取出來(lái)，對(duì)沒有還原性的雙糖和多糖，可用酸水解法使其 降解成有還原性的單糖進(jìn)行測(cè)定，再分別求出樣品中還原糖 和總糖的含量(還原糖以葡萄糖含量計(jì)) 。 還原糖在堿性條件下加熱被氧化成糖酸及其它產(chǎn)物， 3,5- 二

4、硝基水楊酸則被還原為棕紅色的3- 氨基-5- 硝基水楊 酸。在一定范圍內(nèi)，還原糖的量與棕紅色物質(zhì)顏色的深淺成 正比關(guān)系，利用分光光度計(jì)，在540nm波長(zhǎng)下測(cè)定光密度值， 查對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算，便可求出樣品中還原糖和總糖的含 量。由于多糖水解為單糖時(shí)，每斷裂一個(gè)糖苷鍵需加入一分 子水，所以在計(jì)算多糖含量時(shí)應(yīng)乘以 0.9 。 三、材料與器具的準(zhǔn)備。 實(shí)驗(yàn)材料：面粉。 實(shí)驗(yàn)試劑 (1) 、1mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液 準(zhǔn)確稱取80 C烘至恒重的分析純葡萄糖 100mg,置于小 燒杯中，加少量蒸餾水溶解后，轉(zhuǎn)移到100mL容量瓶中，用 蒸餾水定容至100mL,混勻，4C冰箱中保存?zhèn)溆谩?(2) 、3,5-二

5、硝基水楊酸(DNS試劑 將6.3g DNS和262mL 2M NaOH溶液，加到 500mL含有 185g酒石酸鉀鈉的熱水溶液中， 再加5g結(jié)晶酚和5g亞硫酸 鈉，攪拌溶解，冷卻后加蒸餾水定容至 1000mL，貯于棕色瓶 中備用。 (3) 、碘-碘化鉀溶液：稱取 5g碘和10g碘化鉀，溶于 100mL蒸餾水中。 (4)、酚酞指示劑：稱取 0.1g酚酞，溶 于 250mL 70%乙醇中。 (5)、6M HCl 和 6M NaOH各 100mL 實(shí)驗(yàn)器材 (1)具塞玻璃刻度試管：20mLX 11 (2)大離心管：50mL X 2 (3)燒杯：100mLX 1 (4)三角瓶：100mLX 1 (5)

6、 容量瓶： 100mLX 3 (6)刻度吸管： 1mLX 1；2mLX 2；10mLX 1(7)恒溫 水浴鍋 ( 8)沸水浴 ( 9)分光光度計(jì) 分光光度計(jì)的基本原理是溶液中的物質(zhì)在光的照射下， 產(chǎn)生了對(duì)光吸收的效應(yīng)，物質(zhì)對(duì)光的吸收是具有選擇性的。 各種不同的物質(zhì)都具有其各自的吸收光譜，因此當(dāng)某單色光 通過(guò)溶液時(shí)，其能量就會(huì)被吸收而減弱，光能量減弱的程度 和物質(zhì)的濃度有一定的比例關(guān)系，也即符合比色原理 Lambert-Beers law: 數(shù)學(xué)表達(dá)式 : A=lg（1/T）=KCL A為吸光度T為透射率，是投射光強(qiáng)度比上入射光強(qiáng)度 C 為吸光物質(zhì)的濃度 L 為吸收層厚度 K 為吸收系數(shù) 物 理

7、意義是當(dāng)一束平行單色光垂直通過(guò)某一均勻非散射的西 光物質(zhì)時(shí) , 其吸光度 A 與吸光物質(zhì)的濃度 C 及吸收層厚度 L 成正比 . 四、實(shí)驗(yàn)步驟。 器材與材料準(zhǔn)備完畢之后，便開始按照以下步驟進(jìn)行實(shí) 驗(yàn)。首先，制作葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線。取 6 支 20mL 具塞刻度試 管編號(hào)，按下表分別加入濃度為 1mg/mL 的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液、 蒸餾水和3,5-二硝基水楊酸（DNS試劑，配成不同葡萄糖 含量的反應(yīng)液。 接下來(lái)，提取還原糖。準(zhǔn)確稱取 2.00g 食用面粉，放入 100mL 燒杯中，先用少量蒸餾水調(diào)成糊狀， 然后加入 50mL 蒸 餾水，攪勻，置于 50 C恒溫水浴中 保溫 20min ，使還原糖浸出。 過(guò)

8、濾， 將濾液收集在 100ml 容量瓶中， 用蒸餾水定容至刻度， 混勻， 作為還原糖待測(cè)液。 緊接著，提取總糖。準(zhǔn)確稱取 1.00g 食用面粉，放入 100mL 三角瓶中，加15mL蒸餾水及10mL 6M HCI，置沸水浴中加熱 水解30min （水解是否完全可用碘-碘化鉀溶液檢查）。待三 角 瓶 中 的 水 解 液 冷 卻 后 ， 加 入 1 滴 酚 酞 指 示 劑 ， 用 6moI/LNaOH 中和至微紅色，用蒸餾水定容在 100mL 容量瓶 中，混勻。將定容后的水解液過(guò)濾，取濾液10mL,移入另一 100mL容量瓶中定容，混勻，作為總糖待測(cè)液。 然后，取 4支 20mL 具塞刻度試管，編號(hào)， 6、7、8、9， 按下表所示分別加入待測(cè)液和顯色劑。 最后，用分光光度計(jì)進(jìn)行比色。先將機(jī)器打開預(yù)熱 20 分鐘。