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1、腦脊液檢查 趙珊 一 、 標(biāo)本采集及處理 禁忌癥:禁忌癥: 顱內(nèi)高壓者 顱后窩占位性病變者 處于休克、全身衰竭狀態(tài)者 穿刺局部有化膿性感染者 1、腦脊液檢查的適應(yīng)癥和禁忌癥 2、標(biāo)本采集及處理 腰椎穿刺成功后立即測(cè)定腦脊液壓力,然后 留取腦脊液標(biāo)本于3個(gè)無(wú)菌試管中,每個(gè)試 管1-2ml。第一管作病原生物學(xué)檢驗(yàn),第二 管作化學(xué)和免疫學(xué)檢驗(yàn),第三管作理學(xué)和細(xì) 胞學(xué)檢驗(yàn)。標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,并與1 小時(shí)內(nèi)檢驗(yàn)完畢。標(biāo)本放置過(guò)久,可以造成 細(xì)胞破壞、葡萄糖等物質(zhì)分解、細(xì)菌溶解等, 影響檢驗(yàn)結(jié)果;標(biāo)本應(yīng)盡量避免凝固或混入 血液,若混入血液應(yīng)注明。 二、理學(xué)檢查 顏色顏色原因原因臨床意義臨床意義 無(wú)色
2、正常腦脊液、病毒性腦炎、輕型結(jié)合性腦膜炎、 脊髓灰質(zhì)炎、神經(jīng)梅毒 紅色出血穿刺損傷出血、蛛網(wǎng)膜下腔或腦室出血 黃色黃變癥出血、黃疸、淤滯和梗阻,黃色素、胡 蘿卜素、黑色素、脂色素增高 白色白細(xì)胞增高腦膜炎球菌、肺炎球菌、溶血性鏈球菌 引起的化膿性腦膜炎 綠色膿性分泌物增多銅綠假單胞菌性腦膜炎、急性肺炎雙球 菌性腦膜炎 褐色色素增多腦膜黑色素肉瘤、黑色素瘤 一、顏色 腦脊液黃變癥的原因及臨床意義 黃變癥黃變癥原因原因臨床意義臨床意義 出血性紅細(xì)胞破壞、膽紅素增加陳舊性蛛網(wǎng)膜下腔出血或腦出血 黃疸性膽紅素增高黃疸性肝炎、肝硬化、鉤端螺旋 體病、膽管梗阻新生兒溶血癥 淤滯性紅細(xì)胞滲出、膽紅素增高顱內(nèi)
3、靜脈、腦脊液循環(huán)淤滯 梗阻性蛋白質(zhì)含量顯著增高髓外腫瘤等所導(dǎo)致的椎管梗阻 二、透明度 n肉眼觀察腦脊液透明度變化,分別以“清淅透 明”、“微渾”、“渾濁”等描述。正常腦積 液清晰透明。腦脊液的透明度與其所含的細(xì)胞 數(shù)量和細(xì)菌多少有關(guān)當(dāng)腦脊液白細(xì)胞超過(guò) 300*106/L時(shí)可成渾濁;腦脊液中的蛋白質(zhì)明 顯增高或含有大量細(xì)菌、真菌時(shí),也可使腦脊 液渾濁。結(jié)核性腦膜炎的腦脊液可成毛玻璃樣 的渾濁,化膿性腦膜炎的腦脊液呈膿性或塊樣 渾濁,穿刺損傷性腦脊液可呈輕微的紅色渾濁 三、凝固性 n正常腦脊液,放置12-24小時(shí)后不會(huì)形成薄膜、凝 塊或沉淀。腦脊液形成凝塊或薄膜與其所含的蛋 白質(zhì),特別是與纖維蛋白
4、原的含量有關(guān),當(dāng)腦脊 液蛋白質(zhì)含量超過(guò)10g/L時(shí),可出現(xiàn)薄膜、凝塊或 沉淀?;撔阅X膜炎的腦脊液在1-2小時(shí)內(nèi)呈現(xiàn)塊 狀凝固,結(jié)核性腦膜炎腦脊液在12-24小時(shí)內(nèi)呈薄 膜或纖細(xì)的凝塊;神經(jīng)梅毒的腦脊液可有小絮狀 凝塊,蛛網(wǎng)膜下腔梗阻的腦脊液呈黃色膠樣凝固 。腦脊液同時(shí)存在膠樣凝固、黃變癥和蛋白質(zhì)-細(xì) 胞分離,稱為Froin-Nonne綜合征,這是蛛網(wǎng)膜下 腔梗阻的腦脊液特點(diǎn)。 四、比密 n腦脊液比密為:腰椎穿刺:1.006-1.008 ,腦室穿刺:1.002-1.004,小腦延髓池 :1.004-1.008。凡是腦脊液中的細(xì)胞數(shù) 量增加和蛋白質(zhì)含量增高的疾病,其比 密均增高。常見(jiàn)于中樞神經(jīng)系
5、統(tǒng)感染、 神經(jīng)系統(tǒng)寄生蟲病、腦血管病、腦腫瘤 、腦出血、腦退行性變和神經(jīng)梅毒 三、顯微鏡檢查 質(zhì)量控制 1.細(xì)胞計(jì)數(shù):標(biāo)本采集后應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù) 。標(biāo)本放置過(guò)久,細(xì)胞可能凝集成團(tuán)或被破壞,影 響計(jì)數(shù)結(jié)果。標(biāo)本必須混勻后方可進(jìn)行檢查,否 則會(huì)影響計(jì)數(shù)結(jié)果 2.校正與鑒別:因穿刺損傷血管,引血性腦脊液, 白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果必須校正,以消除因出血帶來(lái)的白 細(xì)胞細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí),應(yīng)注意紅細(xì)胞、白細(xì)胞和新生 隱球菌的鑒別。新生隱球菌不溶于乙酸,加優(yōu)質(zhì)墨 汁后可見(jiàn)未染色的莢膜;白細(xì)胞也不溶于乙酸,加 酸后細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)更加明顯;紅細(xì)胞加酸后溶解 。 3.檢查方法:白細(xì)胞直接計(jì)數(shù)法法的試管與吸管中 的冰乙酸要
6、盡量去盡,否則結(jié)果偏低。若標(biāo)本陳 舊細(xì)胞變形時(shí),白細(xì)胞直接分類法誤差大,可采 用涂片染色分類法分類計(jì)數(shù)。 4.染色固定:涂片染色分類計(jì)數(shù)時(shí),離心速度不能 太快,否則影響細(xì)胞形態(tài),可采用玻片離心法、 沉淀室法收集細(xì)胞。涂片固定時(shí)間本不能太長(zhǎng), 更不能高溫固定,以免使細(xì)胞皺縮,影響檢驗(yàn)結(jié) 果 5.參考值 無(wú)紅細(xì)胞。白細(xì)胞極少,成人(0-8) *106/L,兒童(0-15) *106/L,主要以 單個(gè)核細(xì) 胞為主,淋、單 之比為7:3 四、化學(xué)和免疫學(xué)檢查 蛋白質(zhì) 1.檢測(cè)原理 腦脊液蛋白質(zhì)的檢驗(yàn)有定性和定量?jī)煞N方法,并可根據(jù)需要計(jì)算 蛋白商(球蛋白/白蛋白)和腦脊液清蛋白指數(shù)RALB 腦脊液清蛋白
7、/血清清蛋白 (1)定性方法:常用方法有Pandy試驗(yàn)、硫酸銨試驗(yàn)等。 (2)定量方法:常用方法為磺基水楊酸硫酸鈉比濁法。 質(zhì)量控制 (1)假陽(yáng)性:因穿刺出血,血液蛋白質(zhì)混入腦脊液;試管和滴管等器材不潔, 試劑 苯酚不純等可致假陽(yáng)性 (2)假陰性:室溫低于10或苯胺飽和度減低等可導(dǎo)致假陰性 (3)陽(yáng)性對(duì)照:人工配制含球蛋白的溶液,可在正常腦脊液或配制與正常腦 脊液基本成分相似的基礎(chǔ)液中加不同量的球蛋白 參考值及臨床意義 參考值:定性 陰性(或弱陽(yáng)性) 定量 腰椎穿刺0.2-0.4g/l 小腦延髓池穿刺0.1-0.25g/l 腦室穿刺0.05-0.15g/l 蛋白商 0.4-0.8 RALB 7
8、*10-3 臨床意義: 腦脊液蛋白質(zhì)含量增高是血-腦屏障功能障礙的標(biāo)志。由 于腦脊液清蛋白只來(lái)源于血清,因此RALB 更能反映血-腦脊液屏 障完整性。腦脊液蛋白質(zhì)增高可見(jiàn)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的感染、梗 阻和出血等多種疾病 蛋白商反映了腦脊液球蛋白與清蛋白的比例變化。蛋 白商增高:提示腦脊液球蛋白含量增高,見(jiàn)于多發(fā)性硬化癥、 神經(jīng)梅毒、腦脊髓膜炎、亞急性硬化性全腦炎等。蛋白商減 低:提示腦脊液清蛋白含量增高見(jiàn)于化膿性腦膜炎急性期、腦 腫瘤、脊髓壓迫癥等 腦脊液蛋白質(zhì)增高的常見(jiàn)原因腦脊液蛋白質(zhì)增高的常見(jiàn)原因 原因臨床意義 感染以化膿性、結(jié)核性腦膜炎腦脊液蛋白質(zhì)增高最明顯,病毒性腦 膜炎則輕度增高 神經(jīng)根
9、病變常見(jiàn)于急性感染性多發(fā)性神經(jīng)根神經(jīng)炎,有蛋白質(zhì)-細(xì)胞分離 的現(xiàn)象 梗阻脊髓腫瘤、肉芽腫、硬膜外膿腫造成的椎管部分或完全梗阻, 可有腦脊液自凝現(xiàn)象 出血腦血管畸形、高血壓病、腦動(dòng)脈硬化癥以及全身出血性疾病 其他肺炎、尿毒癥等出現(xiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀時(shí),腦脊液蛋白含量也 可增高 葡萄糖 原理:腦脊液葡萄糖含量大約為血糖50%-80%,其高低與血 糖濃度、血-腦脊液屏障的通透性、葡萄糖的酵解程度有關(guān)。腦脊 液葡萄糖檢驗(yàn)多采用葡萄糖氧化酶法和己糖激酶定量法 參考值: 腰椎穿刺2.5-4.4mmol/l 小腦延髓池穿刺2.8-4.2mmol/l 腦室穿刺3.0-4.4mmol/l。 臨床意義: (1)葡萄
10、糖減低:細(xì)菌性腦膜炎和真菌性腦膜炎,以化膿性 腦膜炎早期減低最明顯;腦寄生蟲病;腦腫瘤神經(jīng)梅毒 低血糖昏迷、胰島素過(guò)量所導(dǎo)致的低血糖狀態(tài)。 (2)葡萄糖增高:新生兒及早產(chǎn)兒糖尿病或靜脈注射葡萄 糖腦或蛛網(wǎng)膜下腔出血所導(dǎo)致的血性腦脊液病毒性腦膜炎或 腦炎急性顱腦外傷、中毒、缺氧、腦出血等所致丘腦下部損傷 等 氯化物 檢測(cè)原理:由于腦脊液中蛋白質(zhì)含量減少,為了維持腦脊液和 血漿滲透壓的平衡,氯化物含量約為血漿的1.2-1.3倍。氯化物 定量檢驗(yàn)方法與血清氯化物檢驗(yàn)方法相同,檢測(cè)方法有硝酸汞 滴定法、電量分析法、離子選擇電極和硫氰酸汞比色法。 參考值 成人 :120-130mmol/l;嬰兒:110
11、-130mmol/l;兒童: 111-123mmol/l 2021-6-617 臨床意義 氯化物減低:細(xì)菌或真菌感染,特別是化膿性、 結(jié)核性和隱球菌性腦膜炎的急性期、慢性感染的急 性發(fā)作期。細(xì)菌性腦膜炎的后期,由于腦膜有明 顯的炎癥浸潤(rùn)或粘連,局部有氯化物附著,使腦脊 液氯化物減低。嘔吐、腎上腺皮質(zhì)功能減退時(shí), 由于血氯減低,使腦脊液氯化物亦減低。 氯化物增高:主要見(jiàn)于尿毒癥、腎炎、心力衰竭、 病毒性腦膜炎或腦炎 病原生物學(xué)檢查 細(xì)菌學(xué)檢查 1、顯微鏡檢查 腦脊液涂片堿性亞甲藍(lán)或革蘭染色檢查致病菌。革蘭 染色用于檢查肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、葡萄球菌、 銅綠假單胞菌、鏈球菌、大腸埃希菌等;堿性
12、亞甲藍(lán) 染色用于檢測(cè)腦膜炎球菌。如果懷疑為結(jié)核性腦膜炎, 可采用抗酸染色。新生隱球菌常采用印度墨汁染色法, 若呈假陽(yáng)性,可采用苯胺墨染色法 2、寄生蟲檢查 血吸蟲卵、肺吸蟲卵、弓心蟲、阿米巴滋養(yǎng)體、腦囊 蟲等 2021-6-620 常見(jiàn)的腦脊液細(xì)胞 2021-6-621 比例失調(diào)可見(jiàn)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)各類感 染和非特異性腦膜刺激反應(yīng) 增多見(jiàn)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)系統(tǒng)感染和 非特異性腦膜反應(yīng) 轉(zhuǎn)化型淋巴細(xì)胞是由小淋巴細(xì)胞受抗原刺 激后轉(zhuǎn)化而成,細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,可見(jiàn)偽 足形成,包膜粗糙,不完整。直徑一般大 于10um。包漿嗜堿性,無(wú)顆粒。核呈圓形,常有切跡, 核膜清楚,染色質(zhì)較稀疏呈網(wǎng)狀,可見(jiàn)1-2個(gè)核仁,少 見(jiàn)有絲分裂。 可見(jiàn)于細(xì)菌性腦膜炎、病毒性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎、 腦膿腫、多發(fā)性硬傷、腦梗死、蛛網(wǎng)膜下腔出血等
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