檢驗(yàn)本科畢業(yè)論文－臨檢

1、 r457.12 單位代碼：10660學(xué) 號(hào)：05005001037 成都醫(yī)學(xué)院2005級(jí)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系本科畢業(yè)生論文微柱凝膠法和凝聚胺法在交叉配血中聯(lián)合應(yīng)用的探討學(xué) 生： 肖 俊導(dǎo) 師： 張 彤年 級(jí)： 2005級(jí)專(zhuān) 業(yè)： 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)2010年 3月25日目 錄摘 要 3前 言 3 材料與方法 3-4結(jié) 果 4討 論 5參考文獻(xiàn) 6致 謝 6略縮詞表 6論文原創(chuàng)性聲明 6英文摘要 7附：綜 述 7-9 微柱凝膠法和凝聚胺法在交叉配血中聯(lián)合應(yīng)用的探討醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè) 學(xué)生：肖俊 導(dǎo)師：張彤 【摘要】目的 探討微柱凝膠法(mgt)和凝聚胺法(mpt)在交叉配血中聯(lián)合應(yīng)用的價(jià)值，確保輸血安全。方法 用mgt

2、法和mpt法對(duì)需要輸血的732例受血者進(jìn)行交叉配血，對(duì)交叉配血不合者再同時(shí)用兩種方法作不規(guī)則抗體的篩選。結(jié)果 微柱凝膠法(mgt)檢測(cè)出不規(guī)則抗體2例，交叉配血不合者10例；凝聚胺法(mpt)法檢測(cè)出不規(guī)則抗體1例，交叉配血不合者7例。微柱凝膠法，不受非特異性因素及溫度等的影響，但高脂血及高纖維蛋白原血清對(duì)試驗(yàn)干擾明顯，凝聚胺法靈敏度不及微柱凝膠法，但對(duì)高纖維蛋白原和高脂血影響小。結(jié)論 在臨床交叉配血中，提倡推廣微柱凝膠法。將兩種配血方法聯(lián)合起來(lái)應(yīng)用，有利于提高臨床輸血治療的安全性?！娟P(guān)鍵詞】 微柱凝膠法；凝聚胺法；交叉配血；不規(guī)則抗體1.前 言 準(zhǔn)確的交叉配血試驗(yàn)(cross matchin

3、g test，cmt)是確保臨床安全、有效輸血的重要手段。傳統(tǒng)的鹽水配血法雖然簡(jiǎn)便快速，但只能檢出不相配合的完全抗體(天然抗體igm)而不能發(fā)現(xiàn)不完全抗體(免疫性抗體igg)。酶法和抗人球蛋白法雖能檢出抗體igg，但操作步驟煩瑣、耗時(shí)，易耽誤危重患者的搶救治療工作。微柱凝膠技術(shù)融合了分子篩技術(shù)、離心技術(shù)和免疫反應(yīng)技術(shù)，具有標(biāo)本用量少，靈敏度高，特異性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便，便于觀察且結(jié)果可長(zhǎng)期保存等優(yōu)點(diǎn)，近年來(lái)臨床診療中已得到了廣泛應(yīng)用。本文就微柱凝膠法與凝聚胺法對(duì)本院住院部需要輸血的患者進(jìn)行交叉配血，如下。2.材料與方法2.1材料2.1.1檢測(cè)對(duì)象 受血者為2009年5月至2009年12月期間本院住院

4、部需要輸血的患者732例，其中男351例，女381例，部分有輸血史及妊娠史。2.1.2 主要試劑 微柱凝膠卡、篩選細(xì)胞、譜細(xì)胞，抗人球試劑由長(zhǎng)春博訊生物技術(shù)有限公司提供。凝聚胺試劑由珠海生物技術(shù)有限公司(baso公司)生產(chǎn)。2.1.3 主要儀器 微柱凝膠卡專(zhuān)用離心機(jī)及孵育器（長(zhǎng)春博訊生物技術(shù)有限公司提供）2.2方法 所有的需輸血患者均用mgt法和mpt法進(jìn)行交叉配血，對(duì)交叉配血不合者再同時(shí)用兩種方法作不規(guī)則抗體的篩選。兩種方法的操作均按說(shuō)明書(shū)要求嚴(yán)格進(jìn)行.3.結(jié)果3.1不規(guī)則抗體試驗(yàn) 732例需要輸血的患者中共檢出不規(guī)則抗陽(yáng)性者共2例，其中mgt法測(cè)出2例，mpt法測(cè)出1例，另1例抗體太弱未測(cè)

5、出。結(jié)果見(jiàn)表l。表1 不規(guī)則抗體分析結(jié)果table 1 analysis of irregular antibodies results微柱凝膠卡法(mgt)凝聚胺法(mpt)抗-c11抗-a110合計(jì)2132兩種方法交叉配血不合比較及解決方法見(jiàn)表2。表2 兩種方法交叉配血不合比較及解決方法table 2 are two ways to compare and cross matching sub-solution影響因素例數(shù)（%） mgtmpt解決方法高纖維蛋白原3（22）31抽抗凝血，用促凝管或延長(zhǎng)血清析出時(shí)間脂血5（36）51洗滌供受者雙方紅細(xì)胞后，重新配血非特異性凝集2（14）02用凝

6、膠法配血，排除非特異性物質(zhì)的干擾受血者有不規(guī)則抗體2（14）21用多袋血交叉配血，選擇相合的血液供血者冷抗體陽(yáng)性2（14）02用凝膠法配血或凝聚胺法在37下配血4.討論在732例交叉配血中，微柱凝膠法(mgt) 交叉配血不合者10例，凝聚胺法(mpt)法檢測(cè)交叉配血不合者7例；mgt檢測(cè)出不規(guī)則抗體2例而mpt只檢出不規(guī)則抗體1例，漏檢了1例含量較弱的抗體?？梢?jiàn)mgt試驗(yàn)較mpt試驗(yàn)敏感度高，這與王梁平等1對(duì)mgt法與mpt法抗體檢出分析結(jié)果相符。試驗(yàn)中，受冷凝集和非特異性物質(zhì)的干擾，凝聚胺法有4例配血出現(xiàn)凝集，而微柱凝膠法不受這些因素的影響。但在3例高纖維蛋白和5例高脂血中樣本中，微柱凝膠法

7、檢出8例，mpt法檢出2例，可能是因?yàn)闃?biāo)本中纖維蛋白原含量高或?yàn)橹獣r(shí)，此時(shí)制備紅細(xì)胞懸液容易出現(xiàn)小凝塊2，影響了微柱凝膠試驗(yàn)。但凝聚胺法在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中加入第二液后相對(duì)地將血清中的纖維蛋白原、脂蛋白和紅細(xì)胞懸液進(jìn)行了稀釋?zhuān)允芨呃w維蛋白血和高脂血干擾較小。mgt法是近年來(lái)興起的一項(xiàng)免疫學(xué)檢測(cè)新技術(shù)，是生物化學(xué)凝膠過(guò)濾技術(shù)、離心技術(shù)與免疫化學(xué)抗原抗體反應(yīng)相結(jié)合的產(chǎn)物，敏感度高，紅細(xì)胞濃度、離心時(shí)間和離心力等都會(huì)影響導(dǎo)致假陽(yáng)性發(fā)生。mpt法試劑來(lái)源和保存容易，操作簡(jiǎn)便快速為優(yōu)選3，特別是在急診配血中為首選。因此，在進(jìn)行交叉配血時(shí)，最好能將mgt法和mpt法結(jié)合起來(lái)同時(shí)應(yīng)用，分析原因，得出準(zhǔn)確的結(jié)果

8、，為臨床提供可靠的診斷依據(jù)，更能確保輸血的安全性和準(zhǔn)確性。5.結(jié)論,凝聚胺法受冷凝集和非特異性物質(zhì)的干擾，而微柱凝膠法不受這些因素影響; ,高纖維蛋白原和高脂血對(duì)微柱凝膠法檢測(cè)干擾較大，而凝聚胺法所受干擾較小;,微柱凝膠法較凝聚胺法敏感度高，兩種方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，應(yīng)將兩種配血方法聯(lián)合起來(lái)應(yīng)用，有利于提高臨床輸血治療的安全性。參 考 文 獻(xiàn)1 王梁平，彭道波，趙暉，等，微柱凝膠法與凝聚胺法抗體檢出比較分析臨床檢驗(yàn)雜志，2001，19(6)：3552武建柱凝膠技術(shù)的臨床應(yīng)用及其實(shí)驗(yàn)研究現(xiàn)狀j中國(guó)輸血雜志，2003，16（5）：370. 3王培華.輸血技術(shù)學(xué).北京.人民衛(wèi)生出版社，1998：204.致

9、 謝： 在我畢業(yè)論文完成過(guò)程中，張彤老師和胡昭宇主任對(duì)我論文從選題、構(gòu)思、資料收集到最后定稿的各個(gè)環(huán)節(jié)給予細(xì)心指引與教導(dǎo)，使我對(duì)論文的書(shū)寫(xiě)有了深刻的認(rèn)識(shí)，使我得以最終完成畢業(yè)論文，在此表示衷心感謝，再次感謝各位老師在百忙之中抽出時(shí)間來(lái)對(duì)我們論文的指導(dǎo)。 略縮詞表：英文縮寫(xiě)全稱(chēng)中文mgtmicrocolumn gel test微柱凝膠法mptpolybrene test凝聚胺法論文原創(chuàng)性聲明：本人鄭重聲明：所呈交的論文微柱凝膠法和凝聚胺法在交叉配血中聯(lián)合應(yīng)用的探討，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)的成

10、果作品。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。作者： 日期：study on linked-application of the cross matching test by both mgt and mptxiaojun department of laboratory medical science,guiyang medical university 550004.zhangtong department of laboratory medical science, 44 hospital of pla.【abstrac

11、t】 objective: the value of the thesis is to explore linked-application of the cross matching test by both the microcolumn gel test(mgt) and polybrene test (mpt) in order to ensure transfusion safety .method: the 732 patients are accepted to cross matching test by both mgt and mpt .if the result of w

12、hich is mismatched ,the samples of theirs are tested the cross matching test to screen irregular antibody by both mgt and mpt at the same time again .result: 2 cases are irregular antibody detected by mgt ,10 cases are mismatched cross matching test by mgt; 1cases are irregular antibody detected by

13、mpt, 7 cases are mismatched cross matching test by mpt .the mgt is not affected by both non-specific factor and temperature ,but the result of test is interfered by both lipohemia and high fibrinogen significantly ;the sensitivity of the mpt is inferior to that of the mgt ,but the mpt produces a lit

14、tle effect on both lipohemia and high fibrinogen .conclusion: the mgt is advocated to use in the course of the clinical cross matching blood popularly ,and the combined application of both mgt and mpt is favorable to improve the transfusion safety.【keywords】 mgt, mpt, cross matching test, irregular

15、antibody 附：綜述微柱凝膠卡法（mgt）與凝聚胺法（mpt）在交叉配血試驗(yàn)中運(yùn)用綜述學(xué)生：肖 俊 指導(dǎo)老師：張 彤交叉配血是臨床輸血的重要保證，交叉配血試驗(yàn)又稱(chēng)不配合試驗(yàn)，是確?；颊甙踩斞夭豢缮俚脑囼?yàn)，也是安全輸血的關(guān)鍵步驟。交叉配血試驗(yàn)的方法較多，現(xiàn)在有不少醫(yī)院采用微柱凝膠卡法與凝聚胺法進(jìn)行交叉配血，更進(jìn)一步的確保了輸血的安全。mgt法是近年來(lái)興起的一項(xiàng)免疫學(xué)檢測(cè)新技術(shù)，是生物化學(xué)凝膠過(guò)濾技術(shù)、離心技術(shù)與免疫化學(xué)抗原抗體反應(yīng)相結(jié)合的產(chǎn)物，敏感度高，但影響因素較多，如紅細(xì)胞濃度、離心時(shí)間和離心力等都會(huì)影響結(jié)果，導(dǎo)致假陽(yáng)性發(fā)生。1紅細(xì)胞濃度過(guò)高時(shí)王梁平等學(xué)者認(rèn)為紅細(xì)胞懸液濃度過(guò)高時(shí)，

16、離心力不足或離心時(shí)間過(guò)短，以及血清中所含纖維蛋白出現(xiàn)細(xì)胞的凝塊或血液標(biāo)本被細(xì)菌污染等，均可能導(dǎo)致mgt法出現(xiàn)假陽(yáng)性1；2脂血、高纖維蛋白質(zhì)標(biāo)本纖維蛋白原含量高或?yàn)橹獣r(shí)，對(duì)微柱凝膠實(shí)驗(yàn)影響較大，可能是此時(shí)制備紅細(xì)胞懸液容易出現(xiàn)小凝塊所致 2，而mpt法在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中加入第二液后相對(duì)地將血請(qǐng)中的纖維蛋白原、脂蛋白和紅細(xì)胞懸液進(jìn)行了稀釋?zhuān)箤?shí)驗(yàn)所受干擾減少。mpt法是一種經(jīng)典的操作簡(jiǎn)便而快速的方法，運(yùn)用凝聚胺技術(shù)進(jìn)行交叉配血，是利用低離子介質(zhì)減少紅細(xì)胞周?chē)年?yáng)離子云，以促進(jìn)紅細(xì)胞與血清或血漿中抗體結(jié)合。凝聚胺是一種高價(jià)陽(yáng)離子季胺鹽多聚物，溶解產(chǎn)生的正電荷能中和紅細(xì)胞膜表面帶有負(fù)電荷的唾液酸，使紅細(xì)胞

17、的zete電位降低，紅細(xì)胞之間距離縮短，使紅細(xì)胞發(fā)生非特異性凝集，此凝集是可逆的。當(dāng)再加入懸浮液，懸浮液主要是枸櫞酸鈉，枸櫞酸根離子的負(fù)電荷能與凝聚胺上的正電荷中和，使非免疫性的可逆聚合現(xiàn)象消失，結(jié)果為陰性，而真正的凝集無(wú)法散開(kāi)為陽(yáng)性結(jié)果。但存在著很多影響因素1止血敏影響 金燕等學(xué)者認(rèn)為止血敏藥物在水溶液中帶有負(fù)電荷，能使紅細(xì)胞膜表面的zete電位上升，增加紅細(xì)胞之間的排斥力3。實(shí)驗(yàn)觀察到只有等止血敏的半衰期后方可消除其干擾作用。實(shí)際工作中滴注止血敏2 d3 d后重新抽取患者血樣本，止血敏的干擾得以完全消除。2肝素 在水溶液中具有強(qiáng)負(fù)電荷，能與一些陽(yáng)離子結(jié)合生成絡(luò)合物，因此肝素的干擾作用可能是

18、由于肝素與血標(biāo)本中帶正電荷的纖維蛋白原和血漿球蛋白結(jié)合，是紅細(xì)胞膜表面的負(fù)電荷不再受紙維蛋白原和血漿球蛋白等大分子作用，從而增加紅細(xì)胞相互之間的排斥力最后導(dǎo)致液體中紅細(xì)胞非免疫性的可逆聚合反應(yīng)受到抑制4 。腎病患者在進(jìn)行血液透析時(shí)均要使用肝素，因此在對(duì)腎病透析患者進(jìn)行凝聚胺法交叉配血時(shí)，加入凝聚胺試劑后，均不能引出紅細(xì)胞非免疫性的可逆聚合。3紅細(xì)胞的濃度紅細(xì)胞鹽水懸液比例達(dá)不到35低于此濃度凝集反應(yīng)不明顯5濃度過(guò)高則影響觀察結(jié)果 血清滴量的影響血清滴量增加1倍如試劑組成中的低離子介質(zhì)加量不變將影響紅細(xì)胞igg的致敏使紅細(xì)胞不能很好的靠近并發(fā)生非特異性凝集且抗d抗體的檢測(cè)靈敏度降低48倍。4反應(yīng)時(shí)間因素的影響由凝聚胺引起的紅細(xì)胞非特異性凝集一般在1分鐘內(nèi)完全散開(kāi)若是由免疫抗體引起的凝集反應(yīng)則不會(huì)完全散開(kāi)同時(shí)弱凝集可能則30分鐘內(nèi)明顯減弱或消失6。因此，結(jié)果應(yīng)以立刻觀察為準(zhǔn)嚴(yán)格掌握結(jié)果判讀時(shí)間。5離心速度因素的影響交叉配血試驗(yàn)離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或離心速度偏高可使血細(xì)胞比容過(guò)緊，不易充分搖勻，易將聚集誤認(rèn)是凝集；離心時(shí)間或離心力不足，不利于凝集反應(yīng)。筆者認(rèn)為，微柱凝膠卡法mgt與凝聚胺法mpt在臨床配血工作中都有自已的優(yōu)缺點(diǎn)，因而建議在交叉配血過(guò)程中將兩種方法進(jìn)行結(jié)合運(yùn)用，以便提高臨床輸血的安全性。參考文獻(xiàn)1 王梁平，彭道波，趙暉，