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1、點(diǎn)擊 Experiment setup”彈出實(shí)驗(yàn)設(shè)置選項(xiàng)。1.2.3.4.5.6.7.8.9.10.11.12.13.14.15.16.17.18.CFX96 Real-Time PCR檢測(cè)系統(tǒng)快速操作指南確認(rèn)系統(tǒng)數(shù)據(jù)線和電源線連接正常后,打開CFX96電源開關(guān),系統(tǒng)進(jìn)入自檢。自檢完成后啟動(dòng)CFX96 Manager,軟件將自動(dòng)搜索設(shè)備,完成連接后“ DetectedInstruments列表出現(xiàn)設(shè)備名稱,PCR儀器屏幕顯示紅色44 Under remote control 文字。四J標(biāo)簽下,“ate New”可新建熱循環(huán)程序,“Select ExistingM可調(diào)用已有熱循環(huán)程序,“Expr
2、ess load”下拉菜單中可選擇各種標(biāo)準(zhǔn)熱循環(huán)程序,“Edit Selected”可對(duì)選中的 熱循環(huán)程序進(jìn)行編輯。新建或編輯熱循環(huán)程序時(shí),可在圖形或文字區(qū)域輸入各步驟設(shè)定溫度、時(shí)間值。:插入一個(gè)普通溫控步驟::插入溫度梯度步驟;:插入熱循環(huán)范弗I,須在插入后輸入循環(huán)起始步驟和循環(huán)次數(shù);:插入熔解曲線分析步驟;:插入熒光采集步驟::對(duì)當(dāng)前溫控步驟的變溫速率及方式進(jìn)行調(diào)節(jié)::刪除當(dāng)前溫控步驟:Sample Volume 25j里應(yīng)輸入PCR反應(yīng)液體積(此例為25微升)編輯好熱循環(huán)程序后點(diǎn)擊OK保存。確左熱循環(huán)程序后點(diǎn)擊“Next”或國(guó)叫讓標(biāo)簽進(jìn)入樣品位置及類型設(shè)泄。“Create New”可新建
3、樣品設(shè)置,“Select”可調(diào)用已有樣品設(shè)置,“Express load”下拉菜單可選擇各種標(biāo)準(zhǔn)樣 品設(shè)置,“EditSelected”可對(duì)選中的熱循環(huán)程序進(jìn)行編輯。新建和編借按下而步驟進(jìn)行:從0 Scan Mode里選擇熒光掃描模式,“SYBR/FAMOnly”為單通道快速掃描模式,適用于 僅使用核酸染料或/和FAM標(biāo)左探針的情況?!癆ll Channels”為全通道掃描模式,適用于任何 檢測(cè)情況。“FRET”模式使用于特殊的FRET探針的情況。點(diǎn)擊|毎。kg Fhixophor髓 I,可在彈岀的對(duì)話框里選擇與檢測(cè)方法一致的熒光素。 注意“SYBR/FAM only模式下只有FAM/SYBR
4、可用。選擇欲使用的樣品孔位置后,在$斜電竺業(yè)_下拉菜單里指左樣品類型,此LoadTarget Name在 SYBR、例為standard標(biāo)準(zhǔn)品。打勾,為所選樣品指立熒光類型(此例為SYBR),根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,還可在后而的輸入擴(kuò)增基因名稱。19.20.21.22.23.24.25.26.27.28.29.30.LoadSample Name根據(jù)需要可在駅為輸入所選樣品孔位的樣品名稱Lo adRepli cate #,可在1苗如果樣品設(shè)置有重復(fù)里逐一指左或者點(diǎn)擊SeriesReplicate Si ze:快速設(shè)置重復(fù)。Starting Replicate中分別填入重復(fù)的數(shù)量以勺 Hori zonta
5、及起始重復(fù)編號(hào),滄蟲沁 聆$何指立重復(fù)放置的方向,點(diǎn)擊匚亜口即嘰Lo ad 如果設(shè)置了標(biāo)準(zhǔn)品,需要為標(biāo)準(zhǔn)品賦值,可在口Concentration; L0OE+O6中逐一輸入,或者上 +Dilution Series 皿、十口.八.點(diǎn)擊快速設(shè)足。Clear Wells可為相對(duì)左量數(shù)據(jù)分析時(shí)指左內(nèi)參基因的需稱??山獬x樣品的重復(fù)設(shè)置狀態(tài)??蓜h除當(dāng)前選定的樣品孔設(shè)置。有疑問可點(diǎn)擊Plate Loading Guide,參考在線幫助。編借好板位文件后,點(diǎn)OK保存。確左樣品設(shè)置后點(diǎn)擊“Next”或者吟Start E準(zhǔn)備運(yùn)行系統(tǒng)。點(diǎn)擊乙 “級(jí)衛(wèi)設(shè)備自動(dòng)打開樣品槽,按照設(shè)置好的樣品位置放宜好樣品,然后點(diǎn)擊關(guān)閉樣品槽。熱蓋閉合后點(diǎn)擊 R,m,設(shè)備詢問數(shù)據(jù)存放的位置,確定后開始運(yùn)行。程序運(yùn)行時(shí)可對(duì)PCR程序循環(huán)數(shù)、樣品類型進(jìn)行實(shí)施再編輯,也可編輯新的實(shí)驗(yàn)方案或者分 析數(shù)據(jù)。注意事項(xiàng):1. 設(shè)備長(zhǎng)時(shí)間不使用時(shí)請(qǐng)勿將熱蓋打開,以免灰塵在block上長(zhǎng)期積累,影響熱傳遞。2. )5-熱蓋開閉時(shí)讓設(shè)備自由運(yùn)行,不得強(qiáng)行掰開或壓合。4. 不要同時(shí)使用不同規(guī)格的耗材。5. 避免意外斷電,建議為設(shè)備配苣在線式UPS系統(tǒng)。6. 程序未結(jié)束前不得關(guān)閉系統(tǒng)電源,不得帶電扳動(dòng)設(shè)備背后的鎖定桿。7. PCR運(yùn)行
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