中圖版蛋白質(zhì)和DNA技術(shù)單元測(cè)試

1、蛋白質(zhì)和DNA技術(shù)章末測(cè)試中圖版選修1 （時(shí)間：45分鐘滿分：100分） 考查知識(shí)點(diǎn)及角度 難度及題號(hào) 基礎(chǔ) 中檔 稍難 提取分離蛋白質(zhì)的方法原理 1、2 7 提取分離蛋白質(zhì)的過(guò)程 3、5 12 4 PCR技術(shù)的原理 8、9 11 禾U用PCR擴(kuò)增DNA的過(guò)程 6 10 13 、選擇題洪10小題，每小題5分，共50分） 1 下列關(guān)于蛋白質(zhì)提取的措施中，不正確的是（）。 A 酸性蛋白質(zhì)可用稀堿性溶液提取 B .水溶性蛋白質(zhì)可用透析液（屮性緩沖液）提取 C 脂溶性蛋白質(zhì)可用有機(jī)溶劑提取 D .堿性蛋白質(zhì)可用強(qiáng)酸性溶液提取 解析提取蛋白質(zhì)的基本原理是根據(jù)蛋白質(zhì)的物理性質(zhì)，加入不同的試劑后，使蛋白質(zhì)溶

2、于試劑中 而提取蛋白質(zhì)。強(qiáng)酸、強(qiáng)堿都會(huì)使蛋白質(zhì)變性而沉淀。 答案D 2.下列關(guān)于蛋白質(zhì)提取的敘述中，不正確的是（）。 A 分離與純化蛋白質(zhì)之前首先要用適當(dāng)?shù)姆椒ㄊ沟鞍踪|(zhì)釋放出來(lái) B 提取時(shí)要依據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性選擇不同的溶劑 C 蛋白質(zhì)的粗提取物離心可除去一些小分子雜質(zhì) D 蛋白質(zhì)的粗制品可能是多種蛋白質(zhì)的混合物 解析對(duì)提取得到的粗提取物離心可除去固體雜質(zhì)。 答案C 3下列關(guān)于脫色時(shí)的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（）。 A .染色液用0. 05%的考馬斯亮藍(lán)R250 B 染色與固定同時(shí)進(jìn)行 C .染色3 min D 染色與固定同時(shí)進(jìn)行，使染色液沒(méi)過(guò)膠板 答案c 丙 相對(duì)分子質(zhì)量 乙 丁 戊 甲. 電荷量 4

3、已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分 子，其分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如右圖所 示，下列有關(guān)蛋白質(zhì)分離的敘述正確的是 ()。 A 將樣品裝入透析袋中透析12 h,若分子 乙保留在袋內(nèi)，則分子丙也保留在袋內(nèi) B 若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì)，則分子甲移動(dòng)速度最快 C.若將樣品以2 000 r/min的速度離心10 min,分子戊存在于沉淀屮，則分子甲也存在于沉淀中 D若用SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品屮的蛋白質(zhì)分子，則分子甲和分子戊形成 的電泳帶相距最遠(yuǎn) 在利用凝膠電泳法 ()O 答案C 5. 分離蛋白質(zhì)時(shí)，一定要加入緩沖溶液，起到的作用是 A .使酶的活性最咼 B 使蛋白

4、質(zhì)的活性最高 C 維持蛋白質(zhì)所帶電荷 D 使蛋白質(zhì)帶上電荷 解析加緩沖液的目的是維持蛋白質(zhì)所帶電荷不發(fā)生改變而不是使蛋白質(zhì)帶 上電荷。 答案C 6. 了 DNA熱變性的原理，PCR儀實(shí)際上也是一種能自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器， PCR利用 對(duì)PCR 過(guò)程屮“溫度的控制”的說(shuō)法錯(cuò)誤的是()。 A 酶促反應(yīng)需要高的溫度，是為了確保模板是單鏈 B 延伸的溫度必須大于退火復(fù)性溫度，而小于變性溫度 C D7A聚合酶不能熱變性，要用耐高溫的聚合酶 D DNA解旋酶不能熱變性，為了確保模板是單鏈 解析PCR是體外DNA擴(kuò)增，DNA雙鏈的解開(kāi)不需要解旋酶，靠高溫使其 變性，雙螺旋結(jié)構(gòu)解體，雙鏈分開(kāi)。在復(fù)性后，在耐高溫

5、的DNA聚合酶的 作用下根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA,因此延伸的溫度要大于復(fù)性溫 度小于變性溫度。 答案D 7.下列關(guān)于電泳的說(shuō)法不正確的是（ ）o A電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程 B 帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng) C 蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠屮的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少 D 用SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳，蛋白質(zhì)的電泳遷移率完全取決于分子的大小 解析蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠屮的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少以及分子的大小等因素。 SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)一 SDS復(fù)合物，SDS所 帶負(fù)電荷的量大大超過(guò)了蛋白質(zhì)分子原有 的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間

6、的電荷差異，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。 答案C &PCR的反應(yīng)過(guò)程中，引起變性的因素是（ ）o A pH過(guò)高B pH過(guò)低 C 升高溫度D 加入酒精 解析各選項(xiàng)的條件均能導(dǎo)致DNA分子變性，但在PCR反應(yīng)屮，高溫變性后還要進(jìn)行低溫復(fù)性和 中溫延伸等過(guò)程，過(guò)酸、過(guò)堿、酒精等能夠?qū)е路磻?yīng) 過(guò)程中的酶變性失活，使DNA擴(kuò)增不能進(jìn) 行，因此，在PCR反應(yīng)中，選用 升高溫度使DNA變性。 答案C 9.下列有關(guān)DNA分子復(fù)制的敘述，正確的是（ ）o A. DNA分子在解旋酶的作用下水解成脫氧核昔酸 B .在復(fù)制過(guò)程屮，解旋和復(fù)制是同時(shí)進(jìn)行的 C 解旋后以一條母鏈為模板合成兩條新的子鏈 D兩條新的子鏈

7、通過(guò)氫鍵形成一個(gè)新的DNA分子 解析在DNA分子復(fù)制過(guò)程屮，解旋酶的作用是破壞堿基對(duì)之間的氫鍵，形成兩條脫氧核昔酸長(zhǎng) 鏈。邊解旋邊復(fù)制也是DNA復(fù)制的一個(gè)特點(diǎn)。以解開(kāi)的每一條母鏈為模板，按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原 貝IJ,各合成一條子鏈，最后每條新合成的子鏈與對(duì)應(yīng)的模板鏈盤(pán)繞，形成兩條一樣的 DNA分 子。 答案B 10在DNA復(fù)制過(guò)程中，保證復(fù)制準(zhǔn)確無(wú)誤進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是 A 解旋酶破壞氫鍵并使DNA雙鏈解開(kāi) B 游離的脫氧核昔酸與母鏈堿基互補(bǔ)配對(duì) C .與模板鏈配對(duì)的脫氧核昔酸連接成子鏈 D 子鏈與模板鏈盤(pán)繞成雙螺旋結(jié)構(gòu) 解析在DNA復(fù)制過(guò)程中，有解旋、合成子鏈和螺旋化等過(guò)程，但是能保 證復(fù)制得到的

8、兩個(gè)DNA分子相同的機(jī)制是在復(fù)制過(guò)程中嚴(yán)格按照堿基互補(bǔ) 配對(duì)原則合成了鏈。 答案B 二、非選擇題（共3小題，共50分） 11. （15分）PCR （聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成 技術(shù)，下圖表示合成過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖分析回答下面的問(wèn)題。 DNA樣品兩個(gè)DNA分子 （1）A過(guò)程高溫使 DNA變性解旋，對(duì)該過(guò)程的原理敘述正確的是。 A 該過(guò)程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵 B 該過(guò)程用到限制酶破壞磷酸二酯鍵 C 該過(guò)程不需要解旋酶的作用 D 該過(guò)程與人體細(xì)胞的過(guò)程完全相同 （2）C過(guò)程要用到的酶是。這種酶在高溫下 仍保持活性，因此在PCR擴(kuò)增時(shí)可 以加入， （需要/不需要

9、）添加。PCR反應(yīng)除提供酶外，還需要滿足的基 本條件有：。 解析（1）高溫所起的作用類(lèi)似于解旋酶，使雙鏈DNA變?yōu)閱捂?。?） C過(guò)程屮PCR技術(shù)的延伸 階段，當(dāng)系統(tǒng)溫度上升到72 C左右，溶液中的四種脫氧 核昔酸在耐高溫的DNA聚合酶的作用下合成新的DNA鏈。這種DNA聚合 酶在高溫下不變性，所以 一次性加入即可。 答案（1） C （2） TaqDNA聚合酶一次不需要DNA模板、兩種引物、四種脫氧核昔酸，通過(guò)控制 7 溫度和酸堿度使 DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行 電 方 _ 一 -二一二 12. （15分）PCR技術(shù)可擴(kuò)增DNA分子，電泳技術(shù)是將待測(cè)樣品放在光滑的凝膠薄膜上，并加上直流 電場(chǎng)，可

10、利用分子帶電荷不同分離和分析氨基酸和多核昔酸片段等有機(jī)物。這兩項(xiàng)技術(shù)綜合應(yīng)用 于現(xiàn)代刑偵，可以獲得最可靠的證據(jù)。 乙：DNA指紋圖譜 （F.-F4為待測(cè)男性，具中一位是 如圖是一次尋找嫌疑犯的測(cè)試結(jié)果：圖甲是把遺跡屮含有21個(gè)氨基酸的多肽進(jìn)行水解，將氨基 酸混合物進(jìn)行電泳的結(jié)果；圖乙是通過(guò)提取罪犯 B遺跡DNA和四位嫌疑犯的 DNA進(jìn)行擴(kuò)增，并采用特定限制酶處理后進(jìn)行電泳所得到的一組DNA指紋圖譜。 在同一電場(chǎng)下，由于蛋白質(zhì)或DNA的以及不同而產(chǎn)生不同的遷移 方向或速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品的分離。 （2）在電泳過(guò)程中，帶電分子會(huì)向著 的電極移動(dòng)。 （3）由甲圖可知，多肽由種氨基酸組成；由乙圖可知，B

11、最可 能的對(duì)象是 解析（1）在同一電場(chǎng)下，由于各種分子的帶電性質(zhì)及分子本身大小、形狀不 同，而產(chǎn)生不同的遷移方向或速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。（2）電 泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程。在電場(chǎng)屮帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的 電極移動(dòng)。（3）不同種類(lèi)氨基酸所帶電荷不同，在電場(chǎng)力 的作用下會(huì)做定向移動(dòng)，同種氨基酸在勻強(qiáng)電場(chǎng)屮的運(yùn)動(dòng)方向和移動(dòng)距離相 同，所以七條帶則表明21個(gè)氨基酸的多肽分解形成7種氨基酸。同理，不同 的DNA片段的帶電荷的數(shù)量及鏈的長(zhǎng)短不同，電泳時(shí)也可以將樣品分成不 同組分的條帶，比較條帶的異同程度，可以鑒別出罪犯為F2。 答案（1）帶電性質(zhì)、本身大小 形狀（

12、2）與其所帶電荷相反（3） 7 F2 13. （20分）生物柴油是一種可再生的清潔能源，其應(yīng)用在一定程度上能夠減緩人類(lèi)對(duì)化石燃 料的消耗，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應(yīng)能夠合成生物柴油 （如下圖）。 （1）用于生產(chǎn)生物柴油的植物油不易揮發(fā)， 宜選用、方 法從油料作物中 提取。 （2）篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M時(shí)，選擇培養(yǎng)基屮的添加的植物油為微生物生長(zhǎng)提供 ，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是法。 （3）測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用法直接計(jì) 數(shù)；從微生物M分離提取的脂 肪酶通常需要檢測(cè),以確定其應(yīng)用價(jià)值；為降低生物柴油生產(chǎn)技術(shù)，可利用 技術(shù)使脂肪酶能夠重復(fù)使用。 （4）若需克隆

13、脂肪酶基因，可應(yīng)用耐高溫 DNA聚合酶催化的 技術(shù)。 解析（1）因?yàn)橹参镉筒粨]發(fā)，所以不適合采用蒸館法提取，應(yīng)用壓榨法或萃 取法提取。（2）植物油 屮不含礦物質(zhì)元素，只為微生物提供碳源。培養(yǎng)基適合 用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。（3）測(cè)定微生物的數(shù)量，可以用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。 分離出的脂肪酶要對(duì)其活性進(jìn)行檢測(cè)，以確定其實(shí)用價(jià)值?？梢岳霉潭ɑ讣夹g(shù)重復(fù)使用脂肪酶。 （4）利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增基因。 答案壓榨萃?。ㄗⅲ簝煽枕樞驘o(wú)先后）（2）碳源高壓蒸汽滅菌 （3）顯微鏡直接計(jì)數(shù) 酶活性（或酶活力）固定化酶（或固定化細(xì)胞）（4） PCR （或多聚酶 鏈?zhǔn)椒磻?yīng)或聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)） B卷 （時(shí)間:45分鐘滿

14、分:100分） 考查知識(shí)點(diǎn)及角度 難度及題號(hào) 基礎(chǔ) 屮檔 稍難 提取分離蛋白質(zhì)的方法原理 1 2 提取分離蛋白質(zhì)的過(guò)程 3、4 13 12 PCR技術(shù)的原理 5、7 & 9 利用PCR擴(kuò)增DNA的過(guò)程 6 10 11 -、選擇題（共10小題，每小題5分，共50分） 1. 下列有關(guān)蛋白質(zhì)提取和分離的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（ ）o A .透析法分離蛋白質(zhì)的原理是利用蛋白質(zhì)不能通過(guò)半透膜的特性 B 采用透析法使蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離開(kāi)來(lái) C 離心沉降法通過(guò)控制離心速率使分子大小、密度不同的蛋白質(zhì)分離 D 蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中可以向與其自身所帶電荷相同的電極移動(dòng) 解析蛋白質(zhì)在電場(chǎng)屮應(yīng)向與其自身所帶電荷相反的電

15、極移動(dòng)。 答案D 2. 蛋白質(zhì)的分離與純化技術(shù)是蛋白質(zhì)研究的重要技術(shù)。下列有關(guān)敘述不正確的是 （）o A .根據(jù)蛋白質(zhì)分子不能透過(guò)半透膜的特性，可將樣品中各種不同的蛋白質(zhì)分離 B 根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小等，可通過(guò)電泳分離蛋白質(zhì) C 根據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小，可通過(guò)凝膠色譜法分離蛋白質(zhì) D 根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同，可通過(guò)離心沉降法分離蛋白質(zhì) 解析蛋白質(zhì)分子不能透過(guò)半透膜，而溶液屮的小分子物質(zhì)則可以透過(guò)半透 膜，因此可以將蛋白質(zhì) 和溶液屮的小分子物質(zhì)分離。 答案A 3. 在蛋白質(zhì)的提取和 分離中，下對(duì)樣品處理過(guò)程的分析正確的是（ ）o A 洗滌紅細(xì)胞的目的是去除.血漿中

16、的葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽 B .洗滌時(shí)離心速度過(guò)小，時(shí)間過(guò)短，白細(xì)胞等會(huì)沉淀，達(dá)不到分離的結(jié)果 C .洗滌過(guò)程選用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0. 1%的NaCI溶液（生理鹽水） D .透析的目的是去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 解析 洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中除血紅蛋白以外的雜蛋白；洗滌時(shí)離 心速度過(guò)大，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，白細(xì)胞等會(huì)沉淀，達(dá)不到分離的效果；洗滌過(guò)程選用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的 生理鹽水。 答案D 卜列是有關(guān).血紅蛋 4. 白提取和分離的相關(guān)操作，其屮正確的是 ()o A .可采集豬血作為實(shí)驗(yàn)材料 B 用蒸鐳水重復(fù)洗滌紅細(xì)胞 C .血紅蛋白釋放后應(yīng)低速短時(shí)間離心 D .洗脫液接近色譜柱底端時(shí)開(kāi)始收集流岀液 解析

17、為防止細(xì)胞吸水漲破，洗滌時(shí)要用生理鹽水；釋放出血紅蛋白后，以 2 000 r/min進(jìn)行高速離心；在分離時(shí)，要等到紅色蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí) 開(kāi)始收集流出液。 答案A 5下圖所示為PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物，請(qǐng)分析此產(chǎn)物是哪次循環(huán)的產(chǎn)物()o 匸 丄二二丄二二二=：=“丄=二二 “ :一 丄 引物I 丨 丨 CT 引物U A.第一次循環(huán)B.第二次循環(huán) C 第三次循環(huán)D 第四次循環(huán) 解析本題考查PCR的過(guò)程。在PCR反應(yīng)中，以引物為標(biāo)記，第一次循環(huán) 時(shí)，以加入的DNA為模板，兩條DNA鏈可分別由引物I和引物H與其結(jié)合 并在DNA聚合酶的作用下延伸，所以形成的每個(gè) DNA中只有一種引物；從 第二次循環(huán)開(kāi)始，

18、上次產(chǎn)生的DNA分子又可作為模板參與反應(yīng)，所以會(huì)形 成DNA分子兩端均含引物的情況，如下圖所示，因此題干中所出現(xiàn)的情況 是第一次循環(huán)的產(chǎn)物。 引糾I 引物I 答案A & PCR反應(yīng)的最大特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問(wèn)題是易污染, 極其微量的污染即可造成假陽(yáng)性的產(chǎn)生。防止污染的辦法不包括 ()。 A .將樣品的處理、配制PCR反應(yīng)液、PCR循環(huán)擴(kuò)增及PCR產(chǎn)物的鑒定等步驟分區(qū)或 13 分室進(jìn)行 B 吸樣槍吸樣要慢，吸樣時(shí)盡量一次性完成，槍頭小套、小離心管應(yīng)一次性使用，以 免交叉污染 C.所有PCR試劑都應(yīng)放置于大瓶分裝，以減少重復(fù)加樣次數(shù)，避免污染機(jī)會(huì) D. PCR試劑、P

19、CR反應(yīng)液應(yīng)與樣品及PCR產(chǎn)物分開(kāi)保存，不應(yīng)放于同一冰盒或同一 冰箱 解析所有的PCR試劑都應(yīng)放置于小瓶分裝，一次性用完，避免因多次使用 造成污染。 答案C 7.下圖表示DNA變 性和復(fù)性過(guò)程，下列相關(guān)敘述中，正確的是（）。 1 A .向右的過(guò)程為加熱（80100 C）變性的過(guò)程 B .向左的過(guò)程是DNA雙鏈迅速致冷復(fù)性 C 變性與在生物體內(nèi)解旋過(guò)程的條件、實(shí)質(zhì)都相同 D .圖中DNA片段共有4個(gè)游離的磷酸基、4個(gè)3端 解析變性后的DNA在緩慢降溫后才會(huì)復(fù)性；變性與在生物體內(nèi)解旋過(guò)程 的條件不同、實(shí)質(zhì)相同；任一 DNA片段都有兩個(gè)游離的磷酸基（5端）和兩個(gè) 3端。 下列關(guān)于DNA復(fù)制 （）O

20、答案A 8. 的敘述屮正確的是 A . DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成DNA,只能從5端延伸DNA鏈 B . DNA復(fù)制不需要引物 C .引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)進(jìn)行結(jié)合 D . DNA的合成方向總是從子鏈的3端向5端延伸 解析本題主要考查了 DNA聚合酶的作用特點(diǎn)。由于DNA聚合酶不能從頭 開(kāi)始合成DNA,只能從引物的3端延伸DNA鏈。由于模板鏈?zhǔn)紫葟?fù)制的是 3端，即復(fù)制方向3 5 而DNA分子是反向平行的，子鏈?zhǔn)且罁?jù)堿基互補(bǔ) 配對(duì)原則，在DNA聚合酶作用下合成的，其合成方向從子鏈5 3。 答案C 9在進(jìn)行基因工程時(shí)，已經(jīng)得到一個(gè)目的基因，要人工復(fù)制，使數(shù)量增多，需要的復(fù)制條件是（ ）

21、O CTAGGGC或GATCCCG模板鏈 含A、U、C、G堿基的核昔酸 含A、T、C、 G堿基的核昔酸核糖脫氧核糖酶ATP磷酸蛋白質(zhì) A .B . C.D. 解析DNA復(fù)制需要模板、原料、能量和酶等基本條件。 答案D 10. 下列關(guān)于PCR的敘 述，不正確的是（）。 A .在DNA的復(fù)制過(guò)程中，雙鏈的解開(kāi)是進(jìn)行DNA復(fù)制的前提 B . PCR儀實(shí)質(zhì)上是一臺(tái)能夠自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器 C . PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，DNA的復(fù)制過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制完全相同 D . PCR的引物長(zhǎng)度通常為20-30個(gè)核昔酸 答案C 二、非選擇題（共3小題，共50分） 11. （16分）在遺傳病及刑偵破案中常需要對(duì)

22、樣品 DNA進(jìn)行分析，PCR技術(shù)能快速擴(kuò)增DNA 片段，在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝，有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量 太低而難以對(duì)樣品進(jìn)行分析研究的問(wèn)題。據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題。 a 鏈 5 G G, T C 3，5 G G 0H （引物 I ） b 鏈 3 - C-C, A G 5（引物 H ） 5, 3 9 C G G, TC- -3 C, A G 5,) -By V 5, G G, T C - 3， -3 一C C, A G5 72 c (1) 在相應(yīng)的橫線上寫(xiě)出引物n,并在復(fù)性這一步驟屮將引物n置于合適的位置。 (2) 在相應(yīng)的橫線上寫(xiě)出循環(huán)一次后生成的DNA分子。 (3) PC

23、R反應(yīng)過(guò)程的前提條件是 PCR技術(shù)利用了 DNA的 原理解決了這個(gè)問(wèn)題。 解析引物的作用是提供DNA聚合酶的起點(diǎn)3端；DNA體外擴(kuò)增同細(xì)胞內(nèi) DNA復(fù)制一樣都是半保留復(fù)制，DNA分子的兩條母鏈分別作為模板，合成 新的DNA鏈。 答案(1)5 - G A 0H H0 - -A G 5， 5 - -G G, T c - - 3 3 C - 一 C, , A - -G - -5， (2) 3 C A G一5 廠， 5 G T C G,3 5 G G, 3 _ C _ C, T C 3， A G5 1 DNA解旋熱變性 12. (18分)材料飼料原料中的磷元素有相當(dāng)一部分存在于植酸中，豬禽等動(dòng)物由于缺

24、乏有 關(guān)酶，無(wú)法有效利用植酸，造成磷源浪費(fèi)，而且植酸隨糞便排出后易造成環(huán)境有機(jī)磷污 染。植酸 酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸，因此成為目前重要的飼料添加劑Z。 (1) 商品化植酸酶主要來(lái)自微生物。在產(chǎn)酶菌株篩選過(guò)程中，常 在基本培養(yǎng)基中添加不溶 于水的植酸鈣制成固體平板，植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產(chǎn)生,可 根據(jù)其大小選擇目的菌株，所得菌株需要進(jìn)一步測(cè)定植酸酶活性。活性測(cè)定可以植酸鈉 作為底物，活性可用一定條件下單位時(shí)間內(nèi)表示。 (2) 利用上述所得菌株制備植酸酶的流程如圖: 發(fā)酵液T離心含響：發(fā)酵透析 粗提取(n) T純化T純酶 菌體去除透析液（I ）去除 I屮的主要成分為 ； n中包含植酸酶等多種蛋白質(zhì)。請(qǐng)寫(xiě)出一種純化得到植酸 酶的方法及其依據(jù)。 （3）為制備基因工程菌，可用PCR等技術(shù)從上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反應(yīng)包含 多次循環(huán)，每次循環(huán)包括三步：o反應(yīng)過(guò)程中打開(kāi)模板DNA 雙鏈的方法是 o 解析（1）選擇目的菌株，可采用選擇培養(yǎng)基來(lái)操作。通過(guò)在培養(yǎng)基屮添加特 定成分，使其他微生物死亡或不能呈現(xiàn)特定現(xiàn)象來(lái)篩選。含有植酸酶基因的 菌株可產(chǎn)生植酸酶分解培養(yǎng)基屮的植酸鈣，產(chǎn)生透明圈。 （2）題干屮的生產(chǎn)流程為酶純化的過(guò)程。含酶的發(fā)酵液通過(guò)透析，即以半透膜過(guò)濾發(fā)酵液，使一 些小分子物質(zhì)被過(guò)濾掉，再通過(guò)電泳法或凝膠色譜法分離純化混合的酶液，獲取純的植酸酶。 答案（1）透明