最新各種緩沖液的配制方法資料

1、各種緩沖液的配制方法NazHPQ-檸檬酸鈉緩沖液PH0.2mol/LNa 2HPO(ml)0.1mol/L檸檬酸 鈉(ml)PH0.2mol/LNa 2HPO4(ml)0.1mol/L檸檬酸鈉(ml)2.20.419.65.210.729.282.41.2418.765.411.158.852.62.1817.825.611.608.402.83.1716.835.812.097.913.04.1115.896.012.637.373.24.9415.066.213.226.783.45.7014.306.413.856.153.66.4413.566.614.555.453.87.1012.

2、906.815.454.554.07.7112.297.016.473.534.28.2811.727.217.392.614.48.8211.187.418.171.834.69.3510.657.618.731.274.89.8610.147.819.150.855.010.309.708.019.450.55NazHPO 2出0,分子量=178.05 0.2mol/L 溶液含 35.61g/L檸檬酸.H2O，分子量=210.14 0.1mol/L 溶液含 21.01g/L檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖溶液（0.1mol/L）PH0.1mol/L檸檬酸（ml）0.1mol/L檸檬酸鈉（ml）PH0.

3、1mol/L檸檬酸（ml）0.1mol/L檸檬酸鈉(ml)3.018.61.45.08.211.83.217.22.85.27.312.73.416.04.05.46.413.63.614.95.15.65.514.53.814.06.05.84.715.34.013.16.96.03.816.24.212.37.76.22.817.24.411.48.66.42.018.04.610.39.76.61.418.64.89.210.8檸檬酸.H2O，分子量=210.14 0.1mol/L 溶液含 21.01g/L 檸檬酸鈉.2HO,分子量=294.12; 0.1mol/L溶液含29.4 g/L

4、醋酸緩沖液(0.2mol/L, 18 C)PH0.2mol/LNaAC(ml)0.2mol/LHAC(ml)PH0.2mol/LNaAC(ml)0.2mol/LHAC(ml)3.60.759.254.85.904.103.81.208.805.07.003.004.01.808.205.27.902.104.22.657.355.48.601.404.43.706.305.69.100.904.64.905.105.89.400.60NaAC.3 H2O,分子量=136.090.2mol/L 溶液含 27.22g/L(1)醋酸鹽溶液的配制：醋酸醋酸鈉緩沖液(pH3.6)取醋酸鈉5.1g,加冰醋

5、酸20ml，再加水稀釋至250ml,即得。醋酸醋酸鈉緩沖液(PH3.7)取無水醋酸鈉20g,加水300ml溶解后，加溴酚藍指示液1ml及冰醋酸6080ml，至溶液 從藍色轉變?yōu)榧兙G色，再加水稀釋至1000ml，即得。醋酸醋酸鈉緩沖液(pH3.8)取2mol/L醋酸鈉溶液13ml與2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含銅1mg的硫酸銅溶液 0.5ml,再加水稀釋至1000ml，即得。醋酸醋酸鈉緩沖液(PH4.5)取醋酸鈉18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀釋至1000ml,即得。醋酸醋酸鈉緩沖液(pH4.6)取醋酸鈉5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至4.6，再加水稀釋至100

6、ml,即得。醋酸醋酸鈉緩沖液(pH6.0)取醋酸鈉54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀釋至 500ml，即得。用醋酸和醋酸鈉配制的緩沖溶液的PH=PKa+lgC(NaAc)/C(HAc)(在此，C(HAc指醋酸的濃度，C(NaAc指醋酸鈉的濃度，Ka是醋酸的解離常數(shù) =1.8*10-5 (1.8乘10的-5次方)， PKa=-lgKa=4.75,將 PH=5.5代入，可得 C(NaAc)/C(HAc)=5.6通常我們配制 時會使 C(HAc)=0.1mol/L,或是 C(HAc)=0.2mol/L 等。若是配制 C(HAc)=0.1mol/L,則 C(NaAc)=0.56m

7、ol/L 稱量醋酸鈉固體質(zhì)量為82*0.56=46克量取冰醋酸體積為 0.1*1000/17.5=5.7mL。將稱好的醋酸鈉和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、攪拌均勻即可。當然若想配制其它的濃度，也可照公式計算即可，通常緩沖溶液不能配的太稀，否則緩沖能力要下降，太濃的話又浪 費試劑。苯二甲酸氫鉀-氫氧化鈉緩沖液PH0.1mol/LNaOH(ml)0.2mol/L苯二甲酸氫鉀(ml)加水至(ml)4.00.4025.00100.004.23.6525.00100.004.47.3525.00100.004.612.0025.00100.004.817.5025.00100.005.023.

8、6525.00100.005.229.7525.00100.005.435.2525.00100.005.639.7025.00100.005.843.1025.00100.006.045.4025.00100.006.247.0025.00100.000.2mol/L苯二甲酸氫鉀溶液：稱取在硫酸干燥器中干燥過24小時的苯二甲酸氫鉀 20.44g溶于水中，稀釋至 500ml。磷酸緩沖液(0.2mol/L )PH0.2mol/LNa 2HPO4(ml)0.2mol/LNaH 2PO4 (ml)PH0.2mol/LNa 2HPO4(ml)0.2mol/LNaH 2PO4(ml)5.88.092.0

9、7.061.039.06.012.387.77.272.028.06.218.581.57.481.019.06.426.573.57.687.013.06.637.562.57.891.58.56.849.051.08.094.75.3NazHPQ .2 H2O 分子量=178.05,0.2mol/L 溶液含 35.61g/L0.2mol/L 溶液含 31.21g/L0.2mol/L 溶液含 27.6g/L0.2mol/L 溶液含 71.64g/LNaH2PO . 2 H2O，分子量=156.03，NaH2PO4 . H2O,分子量=138.03，NazHPO .12 H2O,分子量=358

10、.22，磷酸鹽緩沖液(PBS配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4 pH 7.2)PBS緩沖液(pH7.2 7.4)： NaCl 137mmol/L , KCl 2.7mmol/L, Na2HPO4 4.3mmol/L , KH2PO4 1.4mmol/L稱 7.9g NaCl, 0.2g KCl, 0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和 1.8g K2HPO4,溶于 800 ml 蒸餾 水中，用HCI調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.4，最后加蒸餾水定容至 1 L。保存于4

11、C冰箱中即可。需要注意的是，通常所說的濃度0.01 M指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度，而非Na離子或K離子的濃度，Na離子和K離子只是用來調(diào)節(jié)滲透壓的。母液的配制：0.2M Na2HPO4 :稱取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4 :稱取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于 1000ml 水各種濃度PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml) ：取 19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。然后只需將0.2M PB (pH=7.4)按

12、相應比例適當稀釋即可，如：0.1M PB ( PH=7.4):取 500ml 0.2M PB ,加水稀釋至 1000ml 即可。0.01M PB ( PH=7.4):取 50ml 0.2M PB，加水稀釋至 1000ml 即可。0.02M PB ( PH=7.4):取 100ml 0.2 M PB，加水稀釋至 1000ml 即可。 若需要 NaCI的話，加入 NaCI至0.9% (g/100ml )即可。另：其它各種另 PH值的0.2M PB (100ml)配方：pH0.2M NaH2PO5.793.55.8925.9906.087.76.1856.281.56.377.56.473.56.5

13、68.56.662.56.756.56.8516.9457.0387.1337.2287.3237.419ml7.5167.6137.710.57.88.57.978.05.3ml)0.01M磷酸鹽緩沖液（PBS配制方法0.2M Na2HPO4(ml)6.581012.31518.522.526.531.537.543.549556267727781ml848790.591.59394.7稱取 8g NaC、0.2g KC、1.44g Na2HPO4 和 0.24g KH2PO4溶于 800ml 蒸餾水中，用 HCI 調(diào)節(jié) 溶液的pH值至7.4，最后加蒸餾水定容至 1L即可。在15lbf/in

14、2（1034 X 105Pa）高壓下蒸氣滅 菌（至少20分鐘），保存存于室溫或 4C冰箱中。PH7.67.47.27.0需要注意的是，通常所說的濃度 0.01M 指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度，而非 Na 離 子或 K 離子的濃度， Na 離子和 K 離子只是用來調(diào)節(jié)滲透壓的。 如果是用于免疫組化的話， 則需要在配置的時候分別加入100 u/ml青霉素和鏈霉素之后再調(diào)PH、定容、滅菌消毒。H2O1000100010001000NaCl8.58.58.58.5Na2HPO4 2.22.22.22.2NaH2PO4 0.10.20.30.4根據(jù)經(jīng)驗來看，新鮮配置的PBS攪勻后其PH 值約在 7.

15、2-7.4 之間， 可是在溫度的影響下， 尤其在夏天，其電離常數(shù)發(fā)生了改變，在經(jīng)過晝夜的時間后， PH 值會明顯改變（我親自測過 偏酸）。所以做實驗的同學可要注意了， PH 值可能會影響實驗結果，甚至可能導致陰性。所 以務必記得這個時候和天氣， 要加強實驗條件控制問題。 每次使用前最好用試紙測一下過夜 了的PBS如果發(fā)生偏酸或偏堿，注意重新?lián)Q新液。PBS緩沖液稱取 NaCI 8g, KCI 0.2g, Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g 溶于 900ml 雙蒸水中，用鹽 酸調(diào)pH值至7.4,加水定容至1L,常溫保存?zhèn)溆谩BST緩沖液取300卩l(xiāng) Tween-2

16、0加入PBS 100ml中，混勻后即刻使用?，F(xiàn)用現(xiàn)配。如果是把所有固體加大十倍， 配置為濃縮液， 工作時候十倍稀釋， 那么，在剛配好濃縮液時， PH 在 6.5 左右，明顯偏酸。不能用鹽酸調(diào)。雖然可以用氫氧化鈉顆粒調(diào)，但是有更方便的 方法。十倍稀釋以后， PH 自動升高到所需要的值。不需要其它任何處理。這個可以先取少量試一 試，配好之后再測一次 PH8.0的PBS配方詳細1. NaCl 1 37mmol/L ， KCl 2.7mmol/L， Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L2. 向燒杯中加入約 800 ml 的去離子水，充分攪拌溶解。3. 滴加濃鹽酸將 p

17、H 值調(diào)節(jié)至 8.0，然后加入去離子水將溶液定容至 1 L。4. 高溫高壓滅菌后，室溫保存。注意：上述PBS Buffer中無二價陽離子，如需要，可在配方中補充 1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。0.05mol/L PBS（磷酸緩沖液 Phosphate Buffer Solution , PBS的配制：甲液：0.05mol/L Na2HPO4溶液：稱取磷酸氫二鈉 9.465g 7.099g,加蒸 餾水至1000ml ; 乙液：0.05mol/L KH2P04溶液：稱取磷酸二氫鉀,9.07g 6.803g,加蒸餾水至1000m1。將甲乙液分裝在棕色瓶內(nèi)，于4C冰箱中保存，用時甲、

18、乙兩液各按不同比例混合，即可得所需 pH 的緩沖液 ,見下表 ： pH 甲液 ml 乙液 mI5.292.597.55.595.095.05.9110.090.06.2420.080.06.4730.070.06.6440.060.06.8150.050.06.9860.040.07.1770.030.07.3880.020.07.7390.010.08.0495.05.0你要配制pH=6.8的PBS可用甲、乙液各 50ml混合即可。硼酸緩沖液（0.2mol/L硼酸鹽）PH0.05mol/L 硼砂(ml)0.2mol/L 硼酸 (ml)PH0.05mol/L 硼砂(ml)0.2mol/L 硼酸

19、(ml)7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.0硼砂 Na2B46.10H2O,分子量=381.43,0.05mol/L 溶液=0.2mol/L 硼砂含 19.07g/L 硼酸，分子量=61.84,0.2mol/L溶液含12.37g/L硼砂易失去結晶水，必須在帶塞得瓶中保存；硼砂溶液也可以用半中和的硼酸溶液代替鹽酸-氯化鉀緩沖液PH0.1mol/LHCl(ml)0.02mol/LKCl(ml)加 水 至(ml)PH0.1mol/LHCl(ml)0.02mol/LKCl(ml)加水至（ml）1

20、.194.562.701001.723.7638.101001.275.1012.451001.818.6840.601001.359.6820.151001.914.9842.501001.447.4026.301002.011.9044.051001.537.6431.201002.19.4645.031001.629.9035.001002.27.5246.251000.02mol/LKCl溶液：溶7.455g氯化鉀于水中，稀釋至500ml苯二甲酸氫鉀-鹽酸緩沖液PH0.1mol/LHCl(ml)0.02mol/L 苯二甲酸氫鉀（ml）加 水 至（mi）PH0.1mol/LHCl(ml)0.02mol/L 苯二 甲酸氫鉀（ml）加水至（mi）2.246.6025.001003.214.8025.001002.439.6025.001003.49.9525.001002.633.0025.001003.66.0025.001002.826.5025.001003.82.6525.001003.020.4025.001000.02mol/L苯二甲酸氫鉀溶液：稱取在硫酸干燥器中干燥過24小時額苯二甲酸氫鉀20.44g溶于水