真菌(1-3)-D葡聚糖檢測反應(yīng)機理

1、真菌(1-3)-D葡聚糖檢測反應(yīng)機理目前臨床上隨著廣譜抗生素、各類免疫抑制劑、移植插管等新技 術(shù)的不斷發(fā)展應(yīng)用，其真菌感染尤其是深部真菌感染出現(xiàn)明顯上升趨 勢,而作為臨床診斷的細菌培養(yǎng)其陽性率很低，且檢測周期長，不能適 應(yīng)臨床治療診斷的要求，因此迫切需要快速、準(zhǔn)確的檢測方法.因此對 血液中的早期(1-3)-D葡聚糖快速定量檢測，將對臨床對癥治療具有很深的現(xiàn)實意義。人體血漿中(1-3)- -D葡聚糖快速檢測對早期 診斷深部真菌感染具有重要的參考價值。該試驗的基本原理是試劑中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷凍干燥品.在適宜條件下，微量(1-3)-D葡聚糖能激活試劑中的凝固酶原產(chǎn)生凝集反應(yīng)，通過測定凝集反

2、應(yīng)過程中的濁度變化從而定量檢測血漿中(1-3)- -D葡聚糖含量內(nèi)毒素定量檢測的反應(yīng)機理細菌內(nèi)毒素作為革蘭陰性菌細胞壁外層中的脂多糖成份(LPS),具有多種的生物活性，微量的內(nèi)毒素進入機體將會出現(xiàn)發(fā)熱、血壓降低、寒戰(zhàn)、引起DIC、內(nèi)毒素敗血癥等一系列臨床反應(yīng)，因此對血液 中的早期內(nèi)毒素快速定量檢測，將對臨床對癥治療具有很深的現(xiàn)實意 義。人體血漿中內(nèi)毒素檢測對分別診斷革蘭陰性桿菌感染具有重要的 參考價值。反應(yīng)試劑中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷凍干燥品.在適宜條件下，微量革藍氏陰性菌內(nèi)毒素能激活試劑中的凝固酶原產(chǎn)生 凝集反應(yīng)形成凝膠,通過測定在形成凝膠過程中的濁度變化從而定量 檢測血漿中革藍氏陰性菌

3、內(nèi)毒素.一、檢測體液內(nèi)毒素的臨床意義由革蘭氏陰性菌所引起的內(nèi)毒素血癥及膿毒血癥是目前臨床上 的主要死亡原因之一。 在各類抗生素殺滅革蘭氏陰性菌的同時， 也會 使后者釋放出一定數(shù)量的內(nèi)毒素， 從而加重內(nèi)毒素血癥。 早期診斷的 細菌學(xué)培養(yǎng)需時長，而且由于抗生素的應(yīng)用，其培養(yǎng)陽性率低。早期 的數(shù)小時內(nèi)作為臨床上搶救感染性休克的關(guān)鍵， 臨床醫(yī)師僅能根據(jù)臨 床特征與體征推斷病源學(xué)而帶有一定的盲目性， 因此，早期體液中內(nèi) 毒素的正確、 快速定量檢測及相應(yīng)的對癥治療就顯得格外重要。 過去 的內(nèi)毒素檢測能定性而不能定量， 而且個體差異和實驗室間的誤差較 大，無法成為有價值的臨床檢驗項目，北京金山川公司研制的

4、MB-80 微生物快速動態(tài)檢測系統(tǒng)能定量檢測體液內(nèi)毒素的含量， 經(jīng)國內(nèi)多家 單位使用現(xiàn)已在其他省市開始作為臨床檢驗項目進行收費。 該儀器檢 測內(nèi)毒素具有結(jié)果穩(wěn)定、檢測快（ 1 小時）、重復(fù)性好、準(zhǔn)確率高、 不同的檢測人員操作引起的誤差小等優(yōu)點。內(nèi)毒素定量檢測在重癥病人、感染病人（如腦膜炎）以及其他有 嚴(yán)重創(chuàng)傷等疾病的病人均有重要的臨床意義， 這使得內(nèi)毒素研究一直 是熱點，但過去由于方法的限制，內(nèi)毒素檢測也是臨床的難點。、深部真菌檢測的臨床意義動態(tài)定量檢測體液中真菌含量是應(yīng)用 MB-80 微生物快速動態(tài)檢 測系統(tǒng)進行的。該方法可以快速診斷用常規(guī)方法難以確診的深部真菌 感染，應(yīng)用MB-80檢測真菌

5、，其檢出率遠遠高于傳統(tǒng)的血培養(yǎng)方法， 使病原體的監(jiān)測更加準(zhǔn)確，更快速， MB-8 0系統(tǒng)具有很高的靈敏度和 優(yōu)異的數(shù)據(jù)分析功能，檢測低限5pg/ml的真菌1-3- 3 -D葡聚糖量。因近年來， 一些罕見的條件致病真菌引起深部感染， 臨床重癥病 人，特別是廣譜抗生素和化療藥物的應(yīng)用， 真菌感染已成為感染導(dǎo)致 死亡的重要原因之一， 而有研究發(fā)現(xiàn)早期發(fā)現(xiàn)并給予適當(dāng)?shù)闹委煟?真 菌感染可以較好地得到控制， 這就要求一種能迅速確定有無深部真菌 感染的方法，因系統(tǒng)抗真菌藥物種類較少，抗菌譜較廣，不因真菌種 類而異。當(dāng)檢測到標(biāo)本中葡聚糖含量較高時，即刻予以系統(tǒng)治療，不 必等鑒定出種屬， 否則會貽誤最佳治療時

6、機。 而常規(guī)真菌血培養(yǎng)需時 長，鑒定過程復(fù)雜，陽性率低，不能快速提供明確臨床指示。 MB-80 應(yīng)用試劑盒及儀器檢測，能快速地檢測出體液中真菌 1-3- 3 -D 葡聚 糖的實際含量，對重癥病人，有著非常重要的臨床意義，對長期住院 病人應(yīng)用廣譜抗生物， 腫瘤化療等等病人， 必將帶來一定的臨床效益。三、MB-80微生物快速檢測系統(tǒng)技術(shù)指標(biāo)及功能1. 靈敏度：最小檢出值 1pg/ml；2. 精密度：批間差 CV10%；3. 準(zhǔn)確性：回收率 75-125%；4. 標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍： 1-9000pg/ml ；5. 相關(guān)系數(shù)r :絕對值0.980 ;6. 檢測時間： 60 分鐘。可定量檢測人體體液（血液、

7、尿液、腦積液、胸積液、腹水等）中細菌內(nèi)毒素、深部真菌的含量，為臨床醫(yī)生早期確診內(nèi)毒素血癥及真菌感染癥提供有價值的參考依據(jù)。一、MB-80微生物快速定量檢測系統(tǒng)原理采用光電轉(zhuǎn)換原理， 通過測定生物試劑與微生物細胞的特定成分 反應(yīng)產(chǎn)生的濁度變化，建立反應(yīng)時間（T）與微生物含量（C）關(guān)系的 標(biāo)準(zhǔn)曲線，從而定量測定樣品中細菌內(nèi)毒素、真菌葡聚糖的含量。二、MB-80微生物快速定量檢測系統(tǒng)用途1. 人體體液 （血液、 尿液、血清、腹水、 腦脊液等） 細菌內(nèi)毒素、 真菌葡聚糖、革蘭陽性菌肽聚糖定量檢測；2. 人用及獸用注射藥品、生物制品及醫(yī)療器械（一次性血袋、血 小板的一次性管道、一次性注射器、消毒棉棒、注射生理鹽水等）的 細菌內(nèi)毒素（熱原）的定量檢測；3. 血小板保存液、 紅細胞保存液及血液制品中的細菌內(nèi)毒素、 真 菌葡聚糖、革蘭陽性菌肽聚糖定量