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文檔簡介

1、高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 項(xiàng)目內(nèi)容要求 考點(diǎn) 1.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 2.土壤中分解尿素的細(xì)菌 分離與計(jì)數(shù) 3.分解纖維素的微生物的 分離 重難 點(diǎn) 微生物的培養(yǎng)和分離方法及微生 物培養(yǎng)的具體操作 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 年份及高考卷考查知識點(diǎn) 2010年山東 2009年安徽、江蘇 微生物的培養(yǎng)和 利用 2010年重慶、安徽 2009年廣東 微生物的培養(yǎng)及 分離方法 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 1(2009安徽理綜)下列是關(guān)于“檢測土壤中 細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述,其中錯(cuò)誤的是 () A用蒸餾水配制牛肉膏

2、蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高 溫、高壓滅菌后倒平板 B取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水 各0.1mL,分別涂布于各組平板上 C將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置,37恒溫培 養(yǎng)2448小時(shí) D確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在300以上 的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù) 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 答案D 解析檢測土壤中細(xì)菌總數(shù),用蒸餾水配 制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高溫、高壓滅 菌后倒平板,取104、105、106倍的土壤 稀釋液和無菌水各0.1mL,分別涂布于各 組平板上,將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置, 37恒溫培養(yǎng)2448小時(shí),在確定對照 組無菌后,選擇菌落數(shù)在30300的一組 平板為代表進(jìn)行計(jì)數(shù)。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)

3、課件 2(2010重慶理綜,31)炭疽病是由炭疽桿 菌引起的一種人畜共患傳染病,炭疽桿菌兩端 截平、呈竹節(jié)狀排列,菌落呈卷發(fā)狀,對炭疽 病疑似患者,可根據(jù)噬菌體的宿主專一性,通 過實(shí)驗(yàn)確診。 (1)細(xì)菌培養(yǎng):采集疑似患者的樣本,分離培養(yǎng), 獲得可疑菌落。 (2)細(xì)菌鑒定:實(shí)驗(yàn)流程下圖所示 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 對配制的液體培養(yǎng)基需采取_方法滅 菌;實(shí)驗(yàn)所用液體培養(yǎng)基的碳源為 _(填“無機(jī)碳”或“有機(jī)碳”)。 挑選可疑菌落制片后,用_觀察,可 看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。 接種可疑菌后,35培養(yǎng)24小時(shí),液體培養(yǎng) 基變渾濁,原因是_,對照組試管中應(yīng) 加入_,與實(shí)驗(yàn)組同時(shí)培養(yǎng)6小時(shí)后, 若實(shí)驗(yàn)組液體

4、培養(yǎng)基的渾濁度比對照組 _(填“高”或“低”),則可明確疑似 患者被炭疽桿菌感染;反之則排除。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 對排除的疑似患者及易感人群,可接種 炭疽桿菌疫苗,刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體, 與產(chǎn)生抗體相關(guān)的細(xì)胞除T細(xì)胞、B細(xì)胞 外,還有_。 答案(2)高壓蒸汽(98kPa蒸汽);有機(jī) 碳顯微鏡細(xì)菌大量繁殖;等量生 理鹽水;低吞噬細(xì)胞、效應(yīng)B細(xì)胞 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 解析(2)細(xì)菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基必須徹底滅菌,方法為 高壓蒸汽滅菌法;由于炭疽桿菌為寄生菌,為異養(yǎng)生物, 因此培養(yǎng)基中應(yīng)加入有機(jī)碳源。 觀察菌落特征時(shí),只有用顯微鏡才能看見桿菌的竹節(jié) 狀排列,肉眼、放大鏡都不能完成該過程。細(xì)菌在適

5、 宜條件下大量繁殖,使培養(yǎng)液渾濁;由過程圖可見,實(shí) 驗(yàn)組加入的是生理鹽水配置的澄清噬菌體溶液,而對照 組應(yīng)該只加入等量食鹽水;與實(shí)驗(yàn)組同時(shí)培養(yǎng)6小時(shí)后, 由于實(shí)驗(yàn)組噬菌體將細(xì)菌侵染消滅,因此實(shí)驗(yàn)組液體渾 濁度比對照組低,則可以說明培養(yǎng)液中有細(xì)菌(炭疽桿 菌)存在。在免疫預(yù)防的特異性免疫中,除相關(guān)的T、 B細(xì)胞外,還有吞噬細(xì)胞處理呈遞抗原和效應(yīng)B細(xì)胞產(chǎn) 生抗體。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 要點(diǎn)歸納 1培養(yǎng)基 (1)種類:按培養(yǎng)基的物理性質(zhì)分為 液體培養(yǎng)基:配制成的液體狀態(tài)的基質(zhì),一般用于生產(chǎn)。 固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑(如瓊脂),配制成固體 狀態(tài)的基質(zhì),瓊脂固體

6、培養(yǎng)基是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一。 (2)培養(yǎng)基配方及營養(yǎng)要素 基本營養(yǎng)要素:各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽。 此外還要滿足不同微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需 求。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 2無菌技術(shù) (1)消毒和滅菌的區(qū)別 條件結(jié)果常用的方法 消 毒 較為溫和的 物理或化學(xué) 方法 僅殺死物體表面 或內(nèi)部一部分對 人體有害的微生 物(不包括芽孢 和孢子) 煮沸消毒法、 巴氏消毒法、 紫外線或化學(xué) 藥物消毒法 滅 菌 強(qiáng)烈的理化 因素 殺死物體內(nèi)外所 有的微生物,包 括芽孢和孢子 灼燒滅菌、干 熱滅菌、高壓 蒸汽滅菌 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 (2)無菌技術(shù)具體操作 對實(shí)

7、驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手 進(jìn)行清潔和消毒。 將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和 培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實(shí)驗(yàn) 操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。 實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料 用具與周圍的物品相接觸。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 3純化大腸桿菌以及菌種的保藏 (1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基:計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒 平板。 (2)純化大腸桿菌 原理:在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞,使其長成單 個(gè)的菌落,這個(gè)菌落就是一個(gè)純化的細(xì)菌菌落。 方法:平板劃線法、稀釋涂布平板法。 (3)菌種的保藏 短期保存:固體斜面培養(yǎng)基上4保存,菌種易被污染或產(chǎn)生變 異。 長期保

8、存:20甘油管在冷凍箱中保藏。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 感悟拓展 酒精消毒時(shí),75%的酒精殺菌效果最好, 原因是:濃度過高,使菌體表面蛋白質(zhì)凝 固成一層保護(hù)膜,乙醇分子不能滲入其中; 濃度過低,殺菌力減弱。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 典例導(dǎo)悟 1產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是 () A一個(gè)細(xì)菌,液體培養(yǎng)基 B許多細(xì)菌,液體培養(yǎng)基 C一個(gè)細(xì)菌,固體培養(yǎng)基 D許多細(xì)菌,固體培養(yǎng)基 解析菌落是一個(gè)或幾個(gè)細(xì)菌的子細(xì)胞群體,在固體培 養(yǎng)基上肉眼可見,是作為菌種鑒定的重要依據(jù),若是多 種細(xì)菌形成的菌落則不是標(biāo)準(zhǔn)菌落。 答案C 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 消毒和滅菌是兩個(gè)不同的概念,滅菌是指徹底 殺滅

9、微生物使其永遠(yuǎn)喪失生長繁殖的能力。消 毒僅指殺死一部分對人體有害的病原菌而對被 消毒的物體基本無害。下列哪些事物適用于消 毒處理() 皮膚飲用水牛奶注射器培 養(yǎng)皿接種環(huán)培養(yǎng)基果汁醬油 手術(shù)刀 A B C D以上全部 答案A 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 解析消毒指用比較溫和的方法殺死微生 物的營養(yǎng)細(xì)胞,適用于那些不耐高溫的液 體。如牛奶、果汁、醬油,這樣可以使其 中的營養(yǎng)成分不被破壞。另外對要求不是 很嚴(yán)格的皮膚、飲用水也用消毒的方法處 理。而對于嚴(yán)格要求的接種環(huán)、手術(shù)刀等 必須進(jìn)行滅菌處理。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 要點(diǎn)歸納 一、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 1選擇合適的培養(yǎng)基 (1)根據(jù)培養(yǎng)

10、基的用途可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別 培養(yǎng)基 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 培養(yǎng)基 種類 特點(diǎn)用途 選擇培 養(yǎng)基 培養(yǎng)基中加入某 種化學(xué)物質(zhì),以 抑制不需要的微 生物的生長,促 進(jìn)所需要的微生 物的生長 培養(yǎng)、分離出特定微生物(如 培養(yǎng)酵母菌和霉菌,可在培 養(yǎng)基中加入青霉素;用尿素 為唯一氮源的培養(yǎng)基用于分 離分解尿素的細(xì)菌) 鑒別培 養(yǎng)基 根據(jù)微生物的代 謝特點(diǎn),在培養(yǎng) 基中加入某種指 示劑或化學(xué)藥品 鑒別不同種類的微生物,如 可用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別 飲用水或乳制品中是否有大 腸桿菌(若有,菌落呈深紫色 ,并帶有金屬光澤) 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 (2)分離分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基即為選 擇培養(yǎng)基。培養(yǎng)基

11、中的氮源只有尿素,理 論上只有能合成脲酶的微生物才能在上面 生長。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 2統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法 (1)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法 原理:利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,在顯微 鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量。 方法:用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 缺點(diǎn):不能區(qū)分死菌與活菌。 (2)間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法) 原理:當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長著 一個(gè)菌落,來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌,通過統(tǒng)計(jì) 平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活菌。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 操作 a設(shè)置重復(fù)組,增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性。 b為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在 30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。 計(jì)算公

12、式:每克樣品中的菌株數(shù)C/VM, 其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌 落數(shù),V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積 (mL),M代表稀釋倍數(shù)。 3細(xì)菌分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)流程 土壤取樣樣品稀釋取樣涂布微生物培養(yǎng) 觀察并記錄結(jié)果細(xì)菌計(jì)數(shù)。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 二、分解纖維素的微生物的分離 1纖維素酶 是一種復(fù)合酶,它包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷 酶,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三 種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。 2纖維素分解菌的篩選原理 (1)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并 不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。 (2)纖維素分解菌能增生纖維素酶分解纖維素, 從而使菌落周圍形成

13、透明圈。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 3土壤中纖維素分解菌的篩選 (1)方案 土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布 到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透 明圈的菌落。 (2)選擇培養(yǎng)的目的:增加纖維素分解菌的濃度, 確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。 (3)涉及的微生物技術(shù)主要有:培養(yǎng)基的制作、 無菌操作、稀釋涂布平板法、選擇培養(yǎng)基的作 用、土壤取樣等。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 感悟拓展 1培養(yǎng)基利用纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基和鑒別纖維 素分解菌的培養(yǎng)基。 (1)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基 培養(yǎng)基組成提供主要的營養(yǎng)物質(zhì) 纖維素粉(5 g)碳源(能源) NaNO3(1 g)氮源、無機(jī)鹽 Na2HPO

14、47H2O(1.2 g)、KH2PO4(0.9 g)、 MgSO4H2O(0.5 g), KCl(0.5 g) 無機(jī)鹽 酵母膏(0.5 g)生長因子、碳源、氮源 水解酪素(0.5 g)氮源、生長因子 上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容至1000 mL水 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 (2)鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基(固體培養(yǎng)基) 培養(yǎng)基組成 提供的主要營養(yǎng) 物質(zhì) CMCNa(510 g)碳源 酵母膏(1 g) 碳源、氮源、生 長因子 KH2PO4(0.25 g)無機(jī)鹽 土豆汁(100 mL)碳源、生長因子 瓊脂(15 g)凝固劑 上述物質(zhì)溶解后,加蒸 餾水定容至1000 mL 水 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 2

15、.兩種常用剛果紅(CR)染色法的比較 方法一方法二 過 程 培養(yǎng)基長出菌落覆蓋 CR(1mg/mL) 倒出 CR加入NaCI溶液(1moI/L) 倒掉NaCI溶液產(chǎn) 生透明圈 配制CR(10mg/mL)溶液滅菌按 照1mLCR溶液/200mL培養(yǎng)基比例混 勻倒平板培養(yǎng)透明圈 優(yōu) 點(diǎn) 顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖 維素分解菌的作用 操作簡便,不存在菌落的混雜問題 缺 點(diǎn) 操作繁瑣,加入剛果紅會(huì)使菌 落之間發(fā)生混雜 由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都 含淀粉類物質(zhì),可能使產(chǎn)生淀粉酶 的微生物也形成透明圈,即假陽性 反應(yīng) 有些微生物具有降解色素的能力 ,它們在長時(shí)間培養(yǎng)過程中會(huì)降解 剛果紅形成明顯透明圈,與

16、纖維素 分解菌不易區(qū)分 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 典例導(dǎo)悟 2在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長,同時(shí)抑制或 阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基稱做() A鑒別培養(yǎng)基 B加富培養(yǎng)基 C選擇培養(yǎng)基 D基礎(chǔ)培養(yǎng)基 解析基礎(chǔ)培養(yǎng)基是含有一般微生物生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物 質(zhì)的培養(yǎng)基,例如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基;加富培養(yǎng)基一般用來培 養(yǎng)營養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)型微生物;鑒別培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中 加入某種特殊化學(xué)物質(zhì),微生物的代謝產(chǎn)物與特殊化學(xué)物質(zhì)發(fā)生 特定化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生明顯特征變化;選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加 入特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì),抑制不需要微生物的生長,促進(jìn)所 需微生物的生長。 答案C 高考生物第一輪復(fù)習(xí)

17、課件 纖維素分解菌的培養(yǎng)基中酵母膏能提供的主要營養(yǎng)物質(zhì) 是() 碳源 氮源 生長因子 無機(jī)鹽 A B C D 答案C 解析酵母細(xì)胞的水溶液提取物濃縮而成的膏狀物質(zhì)為 酵母膏,富含B類維生素,也含有機(jī)氮化物和糖類。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 命題熱點(diǎn)1關(guān)于實(shí)驗(yàn)考查 【例1】有些微生物能合成纖維素酶,通過對 這些微生物的研究和作用,使人們能夠利用秸 稈等廢棄物生產(chǎn)酒精,用纖維素酶處理服裝面 料等。研究人員用化合物A、硝酸鹽、磷酸鹽 以及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功的篩選到能 產(chǎn)生纖維素酶的微生物。分析回答問題。 (1)培養(yǎng)基中加入的化合物A是_,為微 生物的生長提供_,這種培養(yǎng)基屬于 _培養(yǎng)基。 (2

18、)為了篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物,向培 養(yǎng)基中加入_。 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 (3)在篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物之前,可用液體 培養(yǎng)基培養(yǎng),增加微生物的濃度。為獲得純凈的菌株, 常采用平板劃線的方法進(jìn)行接種,此過程所用的接種工 具是_,操作時(shí)采用_滅菌的方法;還 可用_的方法接種。 (4)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后 才能倒掉,這樣做的目的是 _ _。 答案(1)纖維素碳源選擇(2)剛果紅(3)接種環(huán) 灼燒稀釋涂布平板(4)防止造成環(huán)境污染 高考生物第一輪復(fù)習(xí)課件 解析(1)纖維素酶能將纖維素水解成葡萄糖,為微生 物的生長提供營養(yǎng),同樣,也可以為人類所利用。要篩 選到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物,應(yīng)用選擇培養(yǎng)基,在培 養(yǎng)基中加入纖維作唯一的碳

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