蘇教版無茵操作技術(shù)實(shí)踐單元測試71

1、無茵操作技術(shù)實(shí)踐一、選擇題 (共 8小題，每小題 5分，共 40分)1對無菌操作轉(zhuǎn)接培養(yǎng)物的敘述中，正確的是 ( ) 接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌 在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞 打開棉塞的試管口通過火焰 將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液， 蘸取一環(huán)菌液轉(zhuǎn)移到一裝有無菌培養(yǎng)基的試 管中 將試管口塞上棉塞 接種環(huán)進(jìn)行滅菌A B C.D 【解析】 在無菌操作轉(zhuǎn)接培養(yǎng)物的過程中， 剛開始應(yīng)灼燒接種環(huán)進(jìn)行滅菌， 在操作過程中應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行， 轉(zhuǎn)接完成后還應(yīng)對接種環(huán)進(jìn)行滅菌， 以防 止培養(yǎng)物擴(kuò)散到環(huán)境中?！敬鸢浮?C2在農(nóng)田土壤的表層自生固氮菌較多。將用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可將自生固氮菌

2、與其他細(xì)菌分開，對培養(yǎng)基的要求是 () 加抗生素 不加抗生素 加氮素 不加氮素 加葡萄糖 不 加葡萄糖 37 C恒溫箱中培養(yǎng) 2830 C溫度下培養(yǎng)A B C D 【解析】 自生固氮菌有固氮功能， 因此培養(yǎng)基中不需要加氮素； 細(xì)菌對抗 生素敏感，因此，不能加抗生素；自生固氮菌是異養(yǎng)型的，應(yīng)加葡萄糖；其生長 繁殖的適宜溫度是2830 C?！敬鸢浮?C3關(guān)于用涂布平板法培養(yǎng)和計(jì)數(shù)土壤中僅以尿素為氮源的微生物的實(shí)驗(yàn)， 以下操作不正確的是 ()A 需制備系列濃度梯度的土壤懸液B 所選用的培養(yǎng)基中，尿素為唯一氮源C. 接種時(shí)從濃度最低的土壤懸液開始，每個(gè)濃度設(shè)置 3個(gè)重復(fù)D. 涂布平板上形成的每個(gè)菌落，

3、都是由樣品中的單個(gè)個(gè)體形成的【解析】 由于待測樣品往往不易完全分散成單個(gè)個(gè)體， 長成的菌落，也有 可能來源于樣品中的23個(gè)或更多個(gè)個(gè)體?！敬鸢浮?D4 某學(xué)者欲研究被石油污染過的土壤中的細(xì)菌數(shù)并從中篩選出能分解石油 的細(xì)菌。下列有關(guān)操作錯(cuò)誤的是（）A 利用平板劃線法對細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)B 利用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選能分解石油的細(xì)菌C 采用涂布平板法分離菌種D 稱取土壤和稀釋土壤溶液時(shí)應(yīng)在火焰旁操作【解析】平板劃線法能對細(xì)菌分離純化但不能計(jì)數(shù)，通常將被石油污染過 的土壤浸出液稀釋后，采用涂布平板法分離分解石油的細(xì)菌菌種， 并對菌種進(jìn)行 計(jì)數(shù)；篩選能分解石油的細(xì)菌只能利用以石油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)

4、基； 稱取土 壤和稀釋土壤溶液過程中的每一步都要在火焰旁操作?！敬鸢浮?A5下面為植物組織培養(yǎng)過程的示意圖：對上圖的下列敘述，錯(cuò)誤的是（）A 將經(jīng)脫分化培養(yǎng)成時(shí)，再植上人造種皮即可獲得人造種子B 植物組織培養(yǎng)所依據(jù)的生物學(xué)原理為細(xì)胞的全能性C.f過程指植物的營養(yǎng)生長和生殖生長階段D 一的再分化過程中，誘導(dǎo)生根的激素為生長素【解析】人工種子是由通過植物組織培養(yǎng)將離體的植物組織培養(yǎng)成的具有 生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu) 包裹上人造種皮制成的，而不是由愈傷組織 包上人 造種皮形成的?！敬鸢浮?A6 用高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)可以形成愈傷組織。 下列敘述不正確的是（）A 該愈傷組織是細(xì)胞經(jīng)

5、過脫分化和分裂形成的B.該愈傷組織的細(xì)胞沒有全能性C 該愈傷組織是由排列疏松的薄壁細(xì)胞組成的D.該愈傷組織可以形成具有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu)【解析】植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性。植物細(xì)胞只有在脫離 了植物體，在一定的外部因素的作用下，細(xì)胞經(jīng)脫分化和分裂形成愈傷組織， 才 能表現(xiàn)出全能性，由愈傷組織分化形成胚狀體或叢芽，從而形成新的植物體?！敬鸢浮?B7.甲、乙、丙是三種微生物，下表I、U、川是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在川中正常生長繁殖；甲能在I中正常生長繁殖，而乙和 丙都不能；乙能在U中正常生長繁殖，而甲和丙都不能。下列說法正確的是（）培養(yǎng)基粉狀硫10 gK2HPO4

6、4 gFeSO40. 5 g蔗糖10 g(NH 4)2SO40. 4 gH2O100 mLMgSO49. 25 gCaCl20. 5 gI+一+n+一+出+注：“ + ”表示培養(yǎng)基中加入了這種物質(zhì)，“”表示培養(yǎng)基中沒有加入這種物質(zhì)。A .甲、乙、丙都是異養(yǎng)型微生物B. 甲、乙都是自養(yǎng)型微生物，丙是異養(yǎng)型微生物C. 甲是異養(yǎng)型微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)型微生物D. 甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)型微生物，丙是異養(yǎng)型微生物【解析】I中缺少N，U中缺少有機(jī)物，川中營養(yǎng)全面。N是微生物生長的必需元素，每一種微生物正常生長都需要 N，但自己能夠固氮的微生物可以生 活在無氮培養(yǎng)基中。甲能在I中生長繁殖，而

7、乙，丙都不以，說明甲是能夠固氮 的微生物。乙能在U中生長繁殖，而甲、丙不能，說明乙不需要培養(yǎng)基為它的正 常生命活動(dòng)提供能源物質(zhì)，則乙為自養(yǎng)型微生物，甲、丙都為異養(yǎng)型微生物。【答案】 D8抗生素可由微生物產(chǎn)生，具有抑菌作用，能在瓊脂培養(yǎng)基中擴(kuò)散。在篩選產(chǎn)生抗生素的菌種時(shí)，先在瓊脂培養(yǎng)基平板上劃線接種一種從土壤中獲得的甲 菌，在27 C下培養(yǎng)3 d,形成菌落。然后接種乙、丙、丁三種致病菌（如下圖a）, 繼續(xù)在同樣條件下培養(yǎng)3 d,結(jié)果如下圖b。分析結(jié)果，得出的結(jié)論是（）ab 甲菌產(chǎn)生了抗生素 丁菌的生長被丙菌產(chǎn)生的抗生素抑制 乙菌的生長被甲菌產(chǎn)生的抗生素抑制 丙菌產(chǎn)生的抗生素抑制了乙菌的生長A B

8、 C D 【解析】由圖可得出，乙、丙、丁三種致病菌不會產(chǎn)生抗生素，否則靠近乙、丙、丁的甲菌落不能生長。從圖b來看，乙菌的生長被抑制，最可能的原因 是甲菌產(chǎn)生了抗生素，此種抗生素只能抑制乙菌的生長， 而對丙、丁兩種致病菌 沒有影響?！敬鸢浮緼二、非選擇題（共60分）9. （10分）有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某 同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。回答問題：（1）在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以 唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。從功能上講，該培養(yǎng)基屬于 養(yǎng)基。（2）純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即 和。（3）為了篩選出高效菌株，可

9、比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力。（4）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、 和。無菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈 附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。【解析】（1）可以將所需要的微生物從混雜的微生物群中分離出來的培養(yǎng) 基為選擇培養(yǎng)基。欲篩選出能降解原油的菌株，則培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無其 他碳源，這樣不能降解原油的細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生存，能降解原油的細(xì)菌才能在只含原油這一碳源的培養(yǎng)基上生存。（2）分離純化菌種時(shí)，接種的方法有平板劃線法和涂布平板法，其目的都是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單菌落，以便于純化菌種

10、。（3）降解原油能力越強(qiáng)的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大。（4）實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種 環(huán)）、干熱滅菌（如培養(yǎng)皿）和高壓蒸汽滅菌（如培養(yǎng)基）等。無菌技術(shù)要求整個(gè)實(shí)驗(yàn) 操作都要在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染?！敬鸢浮浚?）原油 選擇（2）平板劃線法 涂布平板法 強(qiáng)（4）干熱滅 菌高壓蒸汽滅菌火焰10. （16分）將基因型為AaBb的水稻（具有24條染色體）的葉肉細(xì)胞通過無菌 操作接入含有營養(yǎng)成分全面的培養(yǎng)基的試管中，在一定條件下培養(yǎng)形成試管幼 苗，其過程如下圖所示：滬國一畫|水稻的某|旦|種細(xì)胞|（1）圖中的1過程為圖中的2過程為。（2）在形成愈傷組織的過程

11、中，細(xì)胞必須不斷地從培養(yǎng)基中獲得 、 口小分子有機(jī)物等營養(yǎng)物質(zhì)。（3）如果4是無病毒植株，則“水稻的某種細(xì)胞”應(yīng)選用或細(xì)胞，這種繁殖方式實(shí)際上是 ，培養(yǎng)成的植株的基因型為（4）如果某種細(xì)胞選用的是水稻花粉細(xì)胞，貝U 4稱為植株，基因型可能是，植株特點(diǎn)為，需用處理，使其恢復(fù)正常體細(xì)胞染色體數(shù)，對應(yīng)的基因型為 。脫分化再分化【解析】(1)植物組織培養(yǎng)的基本過程為：外植體 愈傷組織 根、芽一T植物體。(2)在形成愈傷組織的過程中，細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用，必須 從培養(yǎng)基中獲取水、無機(jī)鹽和小分子有機(jī)物等營養(yǎng)物質(zhì)。 (3)根尖或莖尖細(xì)胞不 含病毒，因此可用根尖或莖尖通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒植株， 這種繁

12、殖方 式屬于無性生殖，其培養(yǎng)成的新植株的基因型與母本一致。 (4)該水稻的基因型 為AaBb,可產(chǎn)生四種花粉：AB、Ab、aB、ab,通過花藥離體培養(yǎng)可獲得四種 基因型的單倍體植株：AB、Ab、aB、abo單倍體植株長得弱小，且高度不育， 用秋水仙素處理后使其染色體加倍后獲得可育植株，對應(yīng)的基因型有 AABB、 AAbb、 aaBB、 aabbo【答案】 (1)脫分化 再分化 (2)水分 無機(jī)鹽 (3)莖尖 根尖 無性生 殖 AaBb (4)單倍體 aB、 ab、 Ab、 AB 植株弱小，高度不育 秋水仙素 aaBB、 aabb、 AAbb 、 AABB11. 某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料

13、分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸 鈣?；卮鹣铝袉栴}：(1) 分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用 對泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是 o(2) 推測在分離純化所用的 培養(yǎng)基中 加入碳酸鈣的作用有和。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出的菌落作為候選菌。(3) 乳酸菌在-20 C長期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的 填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣” )o【解析】 (1)分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用無菌水對泡菜濾液進(jìn)行梯度 稀釋，這樣既可避免雜菌污染， 又可將乳酸菌分散成單個(gè)細(xì)胞， 以便在培養(yǎng)基表 面形成單個(gè)菌落。(2)乳酸的積累影響乳酸菌的增殖，

14、加入碳酸鈣可以中和乳酸 菌代謝(無氧呼吸 )過程中產(chǎn)生的乳酸，另外，乳酸和碳酸鈣反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致碳酸 鈣分解形成透明圈，有利于乳酸菌的鑒別和分離。(3)對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。在3 mL的甘油瓶中，裝入1 mL甘油后滅菌。將1 mL 培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在-20 C的冷凍箱中保存。【答案】(1)無菌水 泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落(2)鑒別乳酸菌中和產(chǎn)生的乳酸(或酸)具有透明圈(3)甘油12. (16分)耐高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選了能高效產(chǎn)生耐高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示：嗜熱

15、曲樣品10(1) 從用途上來說，I號培養(yǎng)基屬于 養(yǎng)基，僅以淀粉作為源；從物理狀態(tài)上來說，U號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時(shí)一般加入 作為凝固劑。(2) 進(jìn)行過程的目的是 ;過程所使用的接種方法是 法。(3) 1、U號培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是; 一般對配制的培養(yǎng)基采用 滅菌。(4) 部分嗜熱菌在I號培 養(yǎng)基一 上生長時(shí)可釋放淀粉酶分解培 養(yǎng)基 中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，應(yīng)挑出透明圈 填“大”或“小”)的菌落，接種到U號培 養(yǎng)基上。(5) 下圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請分 析接種的具體方法。獲得圖A效果的接種方法是 ，獲得圖 B效果的接種方法是。一同學(xué)用涂布平板法純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成 一片，最可能的原因是，應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此現(xiàn)象？ ?！窘馕觥?1)篩選特定微生物的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。淀粉酶能催化淀粉分解，故篩選能高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌要以淀粉為唯一碳源。采用平板劃線法接種的是固體培養(yǎng)基，通常用瓊脂作為凝固劑。(2)、過程為將樣品稀釋后用涂布平板法接種。(3)制備培養(yǎng)基時(shí)先調(diào)pH后滅菌，培養(yǎng)基的滅菌方法 是高壓蒸汽滅菌法。(4)嗜熱菌可產(chǎn)生淀粉酶以分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周 圍出現(xiàn)透明圈，透明圈越大，說明該嗜熱菌分解