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文檔簡介
1、2017屆人教版細胞工程單元檢測1“白菜一甘藍”是用細胞工程的方法培育出來的蔬菜新品種,它具有生長期短、耐熱性強 和易于儲藏等優(yōu)點。如圖是“白菜 一甘藍”的雜交過程示意圖。以下說法正確的是()門菜細咆質(zhì)體A態(tài)傷“白東一廿藍” 戕細胞原生冊/生質(zhì)怵細胞砌酗A. 除去細胞壁形成原生質(zhì)體,可運用的酶是纖維素酶、淀粉酶和果膠酶B. 通??烧T導上述原生質(zhì)體相互融合的方法是PEG和滅活的病毒誘導C. 雜種細胞形成的標志是誘導產(chǎn)生了新的細胞壁D. 愈傷組織形成“白菜一甘藍”植物體必須經(jīng)過脫分化和再分化兩個過程 答案 C解析除去細胞壁的酶有纖維素酶和果膠酶;誘導植物原生質(zhì)體融合不能用滅活的病毒;雜種細胞形成的
2、標志是誘導產(chǎn)生了新的細胞壁;愈傷組織形成“白菜一甘藍”植物體屬于再分化過程。2某研究小組為測定某種藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性,準備對某種動物的肝腫瘤細胞(甲)和正常肝細胞(乙)進行動物細胞培養(yǎng)。下列敘述正確的是()A. 制備肝細胞懸液時,可用胃蛋白酶處理肝組織塊B. 恒溫培養(yǎng)箱中的 CO2濃度維持在5%左右,以促進細胞呼吸C. 為了保證細胞培養(yǎng)所需的無毒環(huán)境,需大量添加各種抗生素D. 本實驗應設置對照實驗,以檢測藥物對甲、乙細胞的毒性大小 答案 D解析 在利用肝組織塊制備肝細胞懸液時,常用胰蛋白酶,不能使用胃蛋白酶,因為胃蛋白酶需要在強酸環(huán)境下才能起作用,但這樣的環(huán)境不適于細胞生存,A錯誤;細胞
3、培養(yǎng)應在含5% CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行,CO2的作用是維持培養(yǎng)液的 pH,B錯誤;抗生素是用來殺菌的,不是殺病毒的,C錯誤;本實驗應設臵對照實驗,用添加藥物的培養(yǎng)液分別培養(yǎng)甲、乙 細胞,根據(jù)變異細胞占培養(yǎng)細胞的比例,以檢測藥物對甲、乙的毒性大小,D正確。3如圖所示為哺乳動物生殖的過程。其中b為卵細胞,c為體細胞。下列敘述不正確的是()動物!動物2A. 形成動物的過程分別屬于有性生殖和無性生殖B. 產(chǎn)生動物的過程中可發(fā)生基因突變、基因重組等C. 動物的產(chǎn)生表明動物細胞的細胞核具有全能性D. a、b、c細胞的形成過程,僅 c細胞為有絲分裂答案 B解析 動物通過受精作用形成, 屬于有性生殖,動物通
4、過細胞核移植技術(shù)形成,利用的原理是動物細胞的細胞核具有全能性,形成動物的過程屬于無性生殖,A、C正確;a、b細胞分別由精原細胞和卵原細胞通過減數(shù)分裂形成,c細胞是體細胞,通過有絲分裂形成,D正確;產(chǎn)生動物的過程中并沒有發(fā)生基因重組,故B錯誤。4、關(guān)于下面制備單克隆抗體過程示意圖的敘述,不正確的是()瘤細胞的細胞辟的細胞培養(yǎng) 犬址抗怵A. 表示已免疫的 B淋巴細胞和骨髓瘤細胞均是從小鼠的脾臟中提取的B. 促進細胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導C. 中的篩選是通過抗原 一抗體反應進行的D. 可以無限增殖答案 A解析 已免疫的B淋巴細胞可以從小鼠的脾臟中提取,也可以從血漿中提取,骨髓瘤細胞 是從小
5、鼠的骨髓中提取的。單克隆抗體是利用已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成的雜交瘤細胞得到的,融合方法可以用化學方法 一一聚乙二醇,生物方法一一滅活的病毒等。 如果要篩選能產(chǎn)生特定抗體的細胞群,可以通過檢測抗原一抗體反應,如果有反應說明產(chǎn)生了抗體。融合細胞具有雙親的特點,既能無限增殖又能產(chǎn)生單一抗體。誘導 胚狀體海藻醸鈉瀋液心【:1胳被無苗水沖旣5、.(2015江蘇,20)如圖為制備人工種子部分流程示意圖,下列敘述正確的是()A. 胚狀體是外植體在培養(yǎng)基上脫分化形成的一團愈傷組織B. 該過程以海藻酸鈉作為營養(yǎng)成分,以CaCb溶液作為凝固劑C. 可在海藻酸鈉溶液中添加蔗糖,為胚狀體提供碳源D. 包
6、埋胚狀體的凝膠珠能夠隔絕空氣,有利于人工種子的儲藏答案 C解析 A項錯,胚狀體是愈傷組織再分化得到的;B項錯,海藻酸鈉作為包埋的材料,不提供營養(yǎng)成分;C項對,在海藻酸鈉溶液中添加蔗糖,不僅為胚狀體提供能量,而且是培養(yǎng)物 滲透壓的主要調(diào)節(jié)物;D項錯,凝膠珠具有空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),不隔絕空氣。6、.關(guān)于動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述,不正確的是()A. 動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同B. 動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C. 煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體,小鼠雜交瘤細胞可離體培養(yǎng)增殖D. 動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì),莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒答案 B解析 動物細胞培養(yǎng)和植
7、物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同,動物細胞培養(yǎng)采用的是液體培養(yǎng)基、植物組織培養(yǎng)采用的是固體培養(yǎng)基,A正確;動物細胞培養(yǎng)需要用胰蛋白酶處理,但植物組織培養(yǎng)過程不需要胰蛋白酶處理,B錯誤;植物細胞具有全能性,因此煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體;小鼠雜交瘤細胞可以在體外培養(yǎng)條件下無限增殖,因此小鼠雜交瘤細胞可離體培養(yǎng)增殖,C正確;動物細胞培養(yǎng)可以用于檢測有毒物質(zhì),莖尖(幾乎不含病毒)培養(yǎng)可用于植物脫除病毒,D正確。7、.如圖為細胞融合示意圖(只考慮細胞兩兩融合),若A、B分別是基因 型為Hhrr、hhRr兩個煙草品種的花粉,兩對基因獨立遺傳,由于一對隱 性純合基因(rr或hh)的作用,在光照強度大于800 l
8、x時,都不能生長。下列敘述正確的是()誘導細胞融合的方法是用滅活病毒處理,原理是細胞膜的流動性 實驗開始時必須用纖維素酶(或果膠酶)除去不利于原生質(zhì)體融合的結(jié)構(gòu)在大于800 lx光照下培養(yǎng),可淘汰5種融合細胞,篩選出基因型為 HhRr的雜種細胞利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可將融合細胞培養(yǎng)成雜種煙草植株,原理是細胞具有全能性A. B.C.D.答案 D解析誘導植物原生質(zhì)體融合的方法沒有滅活的病毒,滅活的病毒只能誘導動物細胞的融合,錯誤;實驗開始時必須用纖維素酶(或果膠酶)除去不利于原生質(zhì)體融合的結(jié)構(gòu)一一細 胞壁,正確;根據(jù)基因的自由組合定律可以看出,A的花粉即配子的基因型為 Hr、hr,B的花粉基因型為h
9、R、hr,誘導融合產(chǎn)生的雜種細胞(只考慮兩個原生質(zhì)體的融合 )共有6種基 因型,即 HHrr、hhrr、hhRR、HhRr、Hhrr、hhRr,在大于 800 lx 光照下培養(yǎng),其中 HHrr、 hhrr、hhRR、Hhrr、hhRr的個體不能生長,只有同時具備了H和R基因才能夠生長,可淘汰5種融合細胞,篩選出基因型為HhRr的雜種細胞,正確;利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可將融合細胞培養(yǎng)成雜種煙草植株,原理是細胞具有全能性,正確。8、.如圖為將胡蘿卜的離體組織在一定條件下培育形成試管苗的過程示意圖。有關(guān)敘述正確的是()A. 利用此過程獲得的試管苗可能為雜合子B. 過程中都會發(fā)生細胞的增殖和分化C. 多
10、倍體植株的培育必須經(jīng)過如圖所示過程D此過程依據(jù)的生物學原理是細胞膜具有流動性答案 A解析利用此過程獲得的試管苗的基因型與親本的基因型相同,可能為雜合子,也可能為純合子,A正確;是脫分化過程,沒有發(fā)生細胞分化,B錯誤;此過程采用的是植物組織培養(yǎng)技術(shù),其依據(jù)的原理是細胞的全能性,多倍體植株的培育不需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),C、D錯誤。9、.下面為番茄植物組織培養(yǎng)過程的流程圖解。以下相關(guān)敘述不正確的是()fill倉生根卷芽1 能力人工e JKMfrM片的胚崢種r1 EliA. 脫分化發(fā)生在b步驟,形成愈傷組織,在此過程中植物激素發(fā)揮了重要作用B. 再分化發(fā)生在d步驟,是愈傷組織重新分化成根或芽等器官
11、的過程C從葉組織塊到種苗形成的過程說明番茄葉片細胞具有全能性D. 人工種子可以解決有些作物品種繁殖能力差、結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題 答案 B 解析 由圖可知,b代表的是脫分化,在此過程中發(fā)揮作用的植物激素有生長素和細胞分裂素,A正確;c表示再分化,即由愈傷組織形成胚狀體,B錯誤;由體細胞形成完整的植株,體現(xiàn)了植物細胞的全能性,因為其具有本物種全部的遺傳信息,C正確;人工種子是一種人工制造的代替天然種子的顆粒體,可以直接播種于田間。特點是周期短,易儲存和運輸,完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性,不受氣候和地域的限制,D正確。10、用動、植物體的體細胞進行離體培養(yǎng),下列敘述正確的是()A. 都需用CO2培
12、養(yǎng)箱B. 都必須用液體培養(yǎng)基C. 都要在無菌條件下進行D. 都可體現(xiàn)細胞的全能性答案 CCO2培養(yǎng)箱,A錯誤;B錯誤;動、植物細解析動物細胞培養(yǎng)需要用 CO2培養(yǎng)箱,但植物細胞培養(yǎng)不需要用 動物細胞培養(yǎng)必須用液體培養(yǎng)基,而植物組織培養(yǎng)需要用固體培養(yǎng)基,胞培養(yǎng)都要在嚴格的無菌條件下進行,C正確;植物細胞培養(yǎng)能體現(xiàn)細胞的全能性,而動物細胞培養(yǎng)的原理是細胞增殖,不能體現(xiàn)全能性,D錯誤。11、某實驗室做了如圖所示的實驗研究,下列與實驗相關(guān)的敘述正確的是()小鼠成纖 導人譜導荃閡 0“吟 造血F細胞.脂肋 維廊細胞細胞.骨細胞尊HINI病產(chǎn)外芫 注人小鼠體內(nèi)甲細胞乙細胞I單克隆抗體 亠丙略胞A.過程導入
13、的誘導基因使成纖維母細胞發(fā)生基因突變B.丙細胞既能持續(xù)分裂,又能分泌單一的抗體 C過程屬于動物細胞培養(yǎng)過程中的原代培養(yǎng)D.過程所用的培養(yǎng)基中都含有聚乙二醇 答案 B解析外源基因的導入過程屬于基因重組, A錯誤;丙細胞能產(chǎn)生單克隆抗體,說明丙細胞 具有連續(xù)分裂且能分泌單一抗體的能力, B正確;表示細胞分化過程,C錯誤;是誘導 細胞融合的過程,所用的培養(yǎng)基含有聚乙二醇,而 過程不用聚乙二醇,D錯誤。12、.如圖為動物細胞培養(yǎng)過程中細胞增殖情況的變化曲線,圖中B、E兩點表示經(jīng)篩選、分裝后繼續(xù)培養(yǎng)。下列判斷錯誤的是A. B點之前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng),之后的培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)B. 接觸抑制現(xiàn)象主要發(fā)生在 A
14、B段和DE段C. 分瓶后的每個培養(yǎng)瓶中的細胞群稱為一個克隆D. E點后的細胞大多數(shù)具有異倍體核型,可連續(xù)傳代 答案 C解析 人們通常將動物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng),分瓶后的培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng); 當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時,細胞就會停止分裂增殖, 即會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象如AB段;B點之后細胞繼續(xù)生長,可見 B點之后進行了傳代培養(yǎng), A正確;在AB段和DE 段細胞幾乎生長停滯,可能發(fā)生了接觸抑制,B正確;細胞克隆的最基本要求是必須保證分 離出來的是一個細胞而不是多個細胞,C錯誤;已獲無限繁殖能力能持續(xù)生存的細胞系,稱連續(xù)細胞系或無限細胞系,無限細胞系大多已發(fā)生異倍化,具異倍體核型,D正
15、確。確的是()已免痕的 Hitt巴細胞13、.下列各圖表示單克隆抗體制備過程的各階段圖解。請根據(jù)圖分析下列四個選項中不正弩/ 0*0注射培養(yǎng)雜交描細胞休外培養(yǎng)特定航原骨題瘤細胞陽性細胞抗體檢驗呈 單克睫扌兀體陽性的細胞GH用陽性細胞 注射小鼠IBCDE4*4骨髓痼細胞FA. 單克隆抗體制備過程的順序是:B. 在單克隆抗體制備過程中之所以選用B淋巴細胞和骨髓瘤細胞,是因為它們?nèi)诤虾蟮碾s交瘤細胞具有在體外大量繁殖、產(chǎn)生特異性抗體的特性C. 由圖中可看出,此過程運用的技術(shù)手段有動物細胞融合和動物組織培養(yǎng)D. 單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高,并且可以大量制備的優(yōu)點,所以可以制成“生物導彈”答案 C解
16、析單克隆抗體的制備過程所運用的技術(shù)手段包括動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合,而非動物組織培養(yǎng)。14、F圖是通過植物細胞工程技術(shù)獲得紫杉醇的途徑,下列敘述不正確的是紫杉 外植體|產(chǎn)細胞提取8細胞群口分巒物A. 該途徑依據(jù)的原理是植物細胞具有全能性B. 過程需控制好培養(yǎng)基中植物激素的比例C. 經(jīng)過程細胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化D. 過程需使用液體培養(yǎng)基,有利于細胞增殖答案 A解析該過程是為了得到細胞群及細胞產(chǎn)物, 依據(jù)的原理是植物組織培養(yǎng),沒有體現(xiàn)細胞的 全能性,A錯誤;過程為脫分化,在培養(yǎng)基中應加入適量的生長素和細胞分裂素,B正確;愈傷組織是無定形的薄壁細胞,所以經(jīng)過程 細胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯變化,
17、 C正確; 過程是細胞大量增殖的過程,需要液體培養(yǎng)基,D正確。15、在培育克隆多利羊的過程中,下列哪項技術(shù)沒有運用到()A .細胞培養(yǎng)技術(shù)B .細胞核移植C. 胚胎移植技術(shù)D .基因工程技術(shù)解析 克隆技術(shù)需利用核移植以產(chǎn)生重組細胞,重組細胞經(jīng)細胞培養(yǎng)形成早期胚胎后,需移植到母體子宮發(fā)育成個體。答案 D16、植物體細胞雜交與動物細胞工程中所用技術(shù)與原理不相符的是( )A 纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理一一酶的專一性B .植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng) 一一細胞的全能性C.原生質(zhì)體融合和動物細胞融合 一一生物膜的流動性D .紫草細胞培養(yǎng)和雜交瘤細胞的培養(yǎng)一一細胞分裂 解析植物組織培養(yǎng)的原理是細胞的
18、全能性,而動物細胞培養(yǎng)的原理是細胞的增殖。答案 B17、 下列關(guān)于植物體細胞雜交的敘述,錯誤的是()A .不同種植物原生質(zhì)體融合的過程屬于植物體細胞雜交過程B 原生質(zhì)體仍具有再生細胞壁,連續(xù)分裂并長成完整植株的能力C 參與雜種細胞的細胞壁形成的細胞器主要是線粒體和核糖體D .植物體細胞雜交技術(shù)可克服不同種植物之間的不親和障礙 解析 參與雜種細胞的細胞壁形成的細胞器主要是線粒體和高爾基體。答案 C18、某同學在學習細胞工程”時,列表比較了動植物細胞工程的有關(guān)內(nèi)容,你認為有幾處是不正確的()植物細胞工程動物細胞工程技術(shù)手段植物組織培養(yǎng),植物體細胞雜交動物細胞培養(yǎng)和融合,單克隆抗體的 制備特殊處理機
19、械法去除細胞壁胰蛋白酶處理,制成細胞懸液融合方法物理方法、化學方法物理方法、化學方法、生物方法典型應用人工種子、雜種植株單克隆抗體的制備培養(yǎng)液生長素和細胞分裂素影響愈傷組織動物血清不可缺少區(qū)別的生長和分化A.1B . 2C. 3D . 4解析 動物細胞工程的技術(shù)手段是動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合、動物體細胞核移植, 單克隆抗體是細胞融合的特殊應用。植物細胞壁的去除應使用纖維素酶和果膠酶。答案 B19、將無根的非洲菊幼苗轉(zhuǎn)入無植物激素的培養(yǎng)基中, 段時間后,應出現(xiàn)的現(xiàn)象是在適宜的溫度和光照等條件下培養(yǎng))解析 由題意知,培養(yǎng)基中無植物激素,故無法進行正常的植物組織培養(yǎng)過程。而非洲 菊可通過扦插方式用
20、莖進行繁殖,故此過程可相當于植物扦插過程,最終可形成一完整 植株。答案 B 20、下列有關(guān)現(xiàn)代生物科技的敘述中,錯誤的是( )A .植物體細胞雜交技術(shù)克服了不同生物遠緣雜交不親和的障礙B .動物細胞融合技術(shù)開辟了制備單克隆抗體的新途徑C.利用基因工程技術(shù)可以使哺乳動物生產(chǎn)人類所需的藥品D .胚胎移植技術(shù)的優(yōu)勢是可以充分發(fā)揮雄性優(yōu)良個體的繁殖潛力 解析胚胎移植技術(shù)的優(yōu)勢是可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力。答案 D(1) 步驟是使植物細胞形成 階段,其關(guān)鍵技術(shù)是 。(2) 步驟一般要用。(3) 為過程之后,兩者最終融合為一體成為一個新的雜種細胞。(4) 在形成再生植株的過程中,與組織培養(yǎng)相似的步
21、驟是 。培養(yǎng)的雜種植株在形態(tài)上表現(xiàn)為 ,其根本原因是親本A細胞與親本B細胞兩兩融合后的細胞有 種,具體為 。解析植物細胞首先要用纖維素酶和果膠酶去掉細胞壁,然后用聚乙二醇誘導劑誘導融合,形成雜種細胞。A細胞和B細胞融合后形成 AA、BB和AB三種融合細胞。答案(1)原生質(zhì)體使用纖維素酶和果膠酶去掉細胞壁(2) 聚乙二醇(PEG)等誘導劑誘導融合(3)原生質(zhì)體融合(4)(5)雜種特性具有雙親的全部遺傳物質(zhì)(6)3 AA、BB、AB22、下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。舸踹f赳感F:菇卿Cl細鬼辿.辭番數(shù)亡砂宵出特并性機悻髙產(chǎn)細胞 t不橇觀HAT培 ;*搾庭上生朗(1) 技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的
22、基礎。(2) 根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類,圖中HAT培養(yǎng)基屬于 培單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比,最大的優(yōu)越性是(4)動物細胞融合除了采用植物細胞原生質(zhì)體融合常用的誘導劑外,還可以采用(5)選出的雜交瘤細胞既具備骨髓瘤細胞 的特點,又具備淋巴細胞 的特點。(6)淋巴細胞是由動物 中的細胞分化而來的。雜交瘤細胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是解析(1)單克隆抗體制備是動物細胞融合的重要應用之一,其技術(shù)基礎是動物細胞的培養(yǎng)。(2)由圖示中文字 骨髓瘤細胞(不能在HAT培養(yǎng)基上生長)”和混合并進行細胞融合, 轉(zhuǎn)到HAT培養(yǎng)基上培養(yǎng)”可知:使用的 HAT培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基。(3)單克隆抗體來源 于單
23、個效應B細胞與骨髓瘤細胞融合的雜交瘤細胞,與血清中常規(guī)抗體比較,其具有靈敏度高、專一性強等特點。(4)動物細胞融合最常用誘導方法是利用滅活的病毒誘導。(5)骨髓瘤細胞與單個效應B細胞融合形成的雜交瘤細胞具備了骨髓瘤細胞體外能無限增殖和效應B細胞能產(chǎn)生特異性抗體的特點。(6)淋巴細胞來源于動物骨髓中的造血干細胞 的分裂、分化。(7)葡萄糖、氨基酸被動物細胞吸收的主要方式是主動運輸。答案 動物細胞培養(yǎng)(2)選擇 特異性強、靈敏度高滅活的病毒在體外大量增殖 分泌特異性抗體(6)骨髓 造血干 (7)主動運輸(主動吸收)W血聲辭論復惴腭込型圳IM1蛍單執(zhí)23、下圖是某實驗室做的通過動物纖維母細胞等獲得單
24、抗的實驗研究。據(jù)圖回答相關(guān)問題。羈11.N, 毒標X、Y、Z細胞的名稱分別是 、(2)過程類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的 過程。與纖維母細胞相比,誘導干細胞的全能性較。過程的實質(zhì)是。(3)過程中需用到的生物誘導劑是 。(4)處需要篩選,其目的是 。3232(5)若用含放射性P標記的核苷酸的培養(yǎng)基培養(yǎng)Z細胞,能測到放射性P的細胞器是、 。解析(1)由于單抗是由雜交瘤細胞產(chǎn)生的,根據(jù)示意圖可知,Z是雜交瘤細胞,X細胞是由誘導干細胞形成的,因此為骨髓瘤細胞,Y細胞是由病毒刺激產(chǎn)生的效應 B細胞。(2)過程是將高度分化的纖維母細胞誘導形成誘導干細胞,類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的脫分化過程,與纖維母細胞相比,
25、誘導干細胞的全能性較高。過程的實質(zhì)是基因的選擇性表達。(3)過程中的誘導方法有物理法、化學法和生物法,需用到的生物誘導劑 是火活的病毒。答案(1)骨髓瘤細胞 抗原刺激過的(效應)B細胞雜交瘤細胞 (2)脫分化高基因 的選擇性表達 (3)滅活的病毒 (4)篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞(5)核糖體線粒體24、.某研究小組進行藥物試驗時,以動物肝細胞為材料,測定藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性。供培養(yǎng)的細胞有甲、乙兩種,甲細胞為肝腫瘤細胞,乙細胞為正常肝細胞。請回答下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的問題。(1)將數(shù)量相等的甲細胞和乙細胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同。一段時間后,觀察到甲細胞數(shù)量
26、比乙細胞數(shù)量 。(2)在動物細胞培養(yǎng)時,通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清,其原因是。細胞培養(yǎng)應在含 5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中 進行,CO2的作用是。(3)在兩種細胞生長過程中,當乙細胞鋪滿瓶壁時,其生長 。藥物試驗需要大量細胞,兩種細胞頻繁傳代,甲細胞比乙細胞可以傳代的次數(shù)更 。若用動物的肝臟組織塊制備肝細胞懸液,需用 處理。為了防止基因培養(yǎng)過程中細菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的。(5) 已知癌基因 X 過量表達與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān),要試驗一種抗腫瘤藥物 Y 對甲細 胞生長的影響,可將甲細胞分為A、B兩組,A組細胞培養(yǎng)液中加入 , B組細胞培養(yǎng)液中加入無菌生理鹽水,經(jīng)培養(yǎng)后,從 A、 B
27、兩組收集等量細胞,通過分別檢測 X 基因在 A、 B 兩組細胞中的 或合成水平的差異,確定 Y 的藥效。解析 (1)甲細胞為肝腫瘤細胞,乙細胞為正常肝細胞。腫瘤細胞為無限增殖的細胞,細 胞周期短。在相同條件下,培養(yǎng)相同的時間,甲細胞的數(shù)量多于乙細胞。(2)動物細胞培養(yǎng)液中必須加入動物血清,血清中含有血清蛋白、生長因子、促進細胞貼壁的因子、激 素等合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)。細胞培養(yǎng)應在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)中進行,C02的作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)液 pH。 (3)甲為腫瘤細胞,能無限增殖,傳代的次數(shù)要比乙細胞多,乙細 胞(正常肝細胞 )在培養(yǎng)瓶中貼壁生長,當鋪滿瓶壁時,生長停止。為得到更多的肝細胞, 需要定
28、期地用胰蛋白酶使細胞脫離瓶壁, 進行傳代培養(yǎng)。 (4)培養(yǎng)液中加入抗生素來抑制 和殺滅細菌,抗生素對動物細胞沒有影響。(5)設計一組加入抗癌藥物的實驗組,一組不加藥物的對照組,通過檢測藥物影響 X 基因的表達過程,即轉(zhuǎn)錄形成 mRNA 、翻譯形 成蛋白質(zhì)的量來檢驗藥效。答案 (1)多 (2)血清可以補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)維持培養(yǎng)液 pH (3)停止多 胰蛋白酶 (4) 抗生素 (5)Y mRNA 蛋白質(zhì)25、我國目前臨床使用的乙肝疫苗大多為基因工程疫苗, 其有效成分是一種叫做乙肝表面抗 原的蛋白質(zhì)(S蛋白,對應的基因為 S基因),請回答下列問題。在這項技術(shù)中,S基因?qū)儆凇?2) 用處理S基
29、因和運載體,并用 使之結(jié)合,這里的 DNA片段兩兩結(jié)合的產(chǎn)物有 種,除了 S基因,構(gòu)建好的表達載體還應具有 等結(jié)構(gòu)。(3) 將表達載體導入到哺乳動物細胞,篩選得到工程細胞。 使用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)工程細胞時,通常需要加入 等天然成分。工程細胞在生長過程中有 現(xiàn)象,需要定期使用 酶處理,以便于分瓶繼續(xù)培養(yǎng),在培養(yǎng)過程中,定期收集培養(yǎng)液,分離純化即可得到所需產(chǎn)品。(4) 由于哺乳動物細胞嬌嫩挑剔,培養(yǎng)較難,成本較高,近些年科學家們又發(fā)明了“乳腺生物發(fā)生器”,從飼養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因動物分泌的乳汁中提取所需產(chǎn)品。在這種技術(shù)中,構(gòu)建 表達載體時需要將 S 基因與 等調(diào)控組件重組在一起,并將表達載體通過的方式,導入到
30、哺乳動物的 (填細胞名稱 )。(5) 人的腸道具有獨立的黏膜免疫系統(tǒng),這使得口服疫苗成為可能, 但有效的口服疫苗必須要在到達腸道的過程中躲避胃酸和蛋白酶的降解,否則就會失效。如果要生產(chǎn)口服的 乙肝疫苗,理想的受體是植物細胞,理由是 。可食的轉(zhuǎn)基因的植物疫苗的優(yōu)點有 (至少答出兩點 ) : 。解析(1)S基因為目的基因。(2)用同一種限制酶切割 S基因和運載體會使其產(chǎn)生相同的 黏性末端,用 DNA 連接酶連接時會出現(xiàn)目的基因 運載體、目的基因 目的基因、運 載體運載體 3種兩兩連接產(chǎn)物;基因表達載體應含有目的基因、標記基因、啟動子和 終止子等結(jié)構(gòu)。 (3)動物細胞培養(yǎng)液中需加入動物血清,動物細胞
31、培養(yǎng)時,會出現(xiàn)貼壁生 長和接觸抑制現(xiàn)象,需要用胰蛋白酶定期處理。 (4)為保證目的基因表達,需將目的基因 和啟動子、終止子調(diào)控組件重組在一起,常用顯微注射法把基因表達載體注射到動物受 精卵中。 (5)因植物細胞有細胞壁,可以使疫苗成分避開胃酸和蛋白酶的降解;可食的轉(zhuǎn) 基因植物疫苗具備可以直接口服、使用簡便、便于推廣;運輸方便、貯存簡單等優(yōu)點。答案 (1)目的基因 (2)同一種限制酶DNA 連接酶 3 啟動子、終止子、標記基因(3) 動物血清 貼壁生長和接觸抑制 胰蛋白 (4)乳腺蛋白基因的啟動子 顯微注射 受精卵 (5)植物細胞有細胞壁, 可以使細胞中的疫苗成分避開胃酸和蛋白酶的降解生產(chǎn)簡單、
32、成本低廉,容易大量生產(chǎn)制造;直接口服、使用簡便,便于推廣;運輸方便, 貯存簡單(其他合理答案亦可)26、植物葉肉細胞原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的主要過程可用下面所示圖解簡單表示:o biIc葉片丨洗凈、滅菌、切條、酶解I原生質(zhì)體懸液過濾、離心I純凈的原生質(zhì)匸I培養(yǎng)基中培養(yǎng) 愈傷組織胚狀體|二植株(1)培育胚狀體利用了 這一項生物技術(shù),胚狀體再繼續(xù)培養(yǎng),則可培育出完整的植株,這體現(xiàn)了。培養(yǎng)基中除了含有一定的營養(yǎng)外,還必須含有等植物激素,還需要對培養(yǎng)基進行嚴格的 。(2)如果愈傷組織是三七葉肉細胞培養(yǎng)產(chǎn)生的,若為了獲得三七的細胞產(chǎn)物,則只需要培養(yǎng)到;若為了獲得三七的人工種子,則需要培養(yǎng)到。如果愈傷組織是
33、棉花葉肉細胞培養(yǎng)產(chǎn)生的,通過基因工程要獲取抗蟲棉,目的基因?qū)朊藁ㄓ鷤M織細胞常用的方法是 法。(3)從葉片的葉肉細胞到獲得胚狀體的過程中,必須要經(jīng)過 。無絲分裂 有絲分裂 減數(shù)分裂 原代培養(yǎng) 傳代培養(yǎng) 植物體細胞雜交細胞融合脫分化再分化答案 (1)植物組織培養(yǎng)植物細胞的全能性細胞分裂素、生長素 滅菌 (2)愈傷組織胚狀體農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(3)解析(1)離體植物細胞通過脫分化形成愈傷組織,通過再分化形成具有根和芽的胚狀體, 再通過細胞分裂、分化發(fā)育成一個完整的植株。該技術(shù)稱為植物組織培養(yǎng),其原理為植物細 胞的全能性。培養(yǎng)基的成分包括水、無機鹽、維生素、氨基酸、蔗糖、植物激素(生長素和細胞分裂素等)等
34、;培養(yǎng)基要求進行嚴格的滅菌。(2)三七的細胞產(chǎn)物為細胞的代謝產(chǎn)物,將三七葉肉細胞培養(yǎng)到愈傷組織即可;獲得人工種子需培養(yǎng)至胚狀體;棉花為雙子葉植物, 導入抗蟲基因常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(3)離體葉肉細胞培養(yǎng)到胚狀體的過程中必須經(jīng)過脫分化和有絲分裂形成愈傷組織,再分化和有絲分裂形成具有根和芽的胚狀體。27、野生黑芥(染色體數(shù)為2A)具有黑腐病的抗性基因,而花椰菜 (染色體數(shù)為2B)易感染黑 腐病菌而患病,用生物工程技術(shù)獲得抗黑腐病雜種黑芥 一花椰菜植株,操作流程如圖。請據(jù) 圖回答下列問題:(1)圖中涉及到的生物工程技術(shù)有 。過程PEG的作用是,此時培養(yǎng)液需要保持一定滲透壓的目的是 。(2)經(jīng)過操作后,
35、篩選出融合的雜種細胞,進而脫分化形成,經(jīng)過形成雜種植株。(3)若要分析雜種植株的染色體變異類型,應剪取該植株根尖和雙親植株的根尖,制成臨時裝片,然后在顯微鏡下觀察比較有絲分裂中期染色體的 。(4)用上述方法培養(yǎng)的該雜種植株含有的染色體數(shù)目是 ;用黑腐病菌感染雜種植株,篩選出具有 的雜種植株。答案(1)植物體細胞雜交誘導原生質(zhì)體融合維持原生質(zhì)體的形態(tài)(2)愈傷組織再分化(3)形態(tài)和數(shù)目(4)2A + 2B 抗黑腐病解析(1)圖中涉及到的生物工程技術(shù)有植物體細胞雜交(原生質(zhì)體融合與植物組織培養(yǎng)),過程PEG的作用是誘導原生質(zhì)體融合。此時培養(yǎng)液需要保持一定滲透壓的目的是維持原生 質(zhì)體的形態(tài)。(2)經(jīng)
36、過操作后,篩選出融合的雜種細胞,進而脫分化形成愈傷組織,經(jīng)過 再分化形成雜種植株。(3)觀察染色體的形態(tài)最好是觀察分生組織細胞有絲分裂中期的臨時 裝片,此時期染色體的形態(tài)和數(shù)目最清晰。(4)用上述方法培養(yǎng)的該雜種植株含有的染色體數(shù)目是2A + 2B,用黑腐病菌感染雜種植株,篩選出具有抗黑腐病的雜種植株。28、科學家利用植物體細胞雜交技術(shù)成功獲得了番茄一馬鈴薯雜種植株,為了便于雜種細胞的篩選和鑒定,科學家利用紅色熒光和綠色熒光分別標記番茄和馬鈴薯的原生質(zhì)體膜上的蛋 白質(zhì),其培育過程如圖所示,請據(jù)圖回答下列問題:,倚菇紅色黃光掠時原生質(zhì)怵朵融匕融合的竺種 /!研原牛一質(zhì)體紬 嗎蟄轉(zhuǎn) 綠色熒龍標記/
37、胞原生匪體丄愈傷組織丄植物體(1)植物體細胞雜交依據(jù)的生物學原理有 。(2)過程常用的酶是 ,細胞融合完成的標志是 。(3)植物原生質(zhì)體融合過程常利用化學試劑 誘導融合,在鑒定雜種原生質(zhì)體時可用顯微鏡觀察,根據(jù)細胞膜表面熒光的不同可觀察到 種不同的原生質(zhì)體(只考慮細胞兩兩融合的情況),當觀察到時可判斷該原生質(zhì)體是由番茄和馬鈴薯融合而成的。(4)過程和過程依次為 ,過程中的培養(yǎng)基常添加的植物激素是 。(5)若番茄細胞內(nèi)有 m條染色體,馬鈴薯細胞內(nèi)有n條染色體,則“番茄 一馬鈴薯”細胞在有絲分裂后期含 條染色體。若雜種細胞培育成的“番茄 一馬鈴薯”植株為四倍體,則此雜種植株的花粉經(jīng)離體培育得到的植
38、株屬于 植株。答案(1)細胞膜的流動性、植物細胞的全能性纖維素酶和果膠酶再生出新的細胞壁(3)聚乙二醇(或PEG) 3融合的細胞表面既有紅色熒光又有綠色熒光(4)脫分化和再分化生長素和細胞分裂素(5)2(m + n) 單倍體解析(1)植物體細胞雜交包括原生質(zhì)體融合和培育雜種植株兩大步驟,兩者的原理分別是 細胞膜的流動性和植物細胞的全能性。(2)去除細胞壁常用的酶是纖維素酶和果膠酶,細胞融合完成的標志是再生出新的細胞壁。(3)化學促融劑是聚乙二醇,兩兩融合的原生質(zhì)體有三種:番茄一番茄、馬鈴薯一番茄、馬鈴薯一馬鈴薯,其中雜種細胞的細胞表面有兩種顏色 的熒光。(4)過程和過程分別表示脫分化和再分化,
39、誘導細胞分化所用的植物激素主要 是生長素和細胞分裂素。(5) “番茄一馬鈴薯”體細胞有m+ n條染色體,有絲分裂后期染色 體數(shù)目加倍;由配子發(fā)育成的個體均為單倍體。29、單克隆抗體的特點是特異性強、靈敏度高、可以大量制備,已被廣泛應用于疾病的診斷小鼠菠取和治療。用H7N9病毒制備單克隆抗體的流程如下圖所示:無限増殖 澗控基闔(1)過程常用的方法是 。向小鼠體內(nèi)注射抗原蛋白,使小鼠產(chǎn)生免疫。從小鼠體內(nèi)分離的細胞I是,細胞n應具有的特點是 。(3)體外培養(yǎng)細胞n,首先應保證其處于 的環(huán)境中,其次需要提供充足的營養(yǎng)和適宜的溫度。培養(yǎng)箱充入二氧化碳的作用是(4)對于轉(zhuǎn)基因成功的細胞n還要進行克隆化培養(yǎng)
40、和 檢測。(5)若要預防H7N9禽流感,可用圖中的 作為疫苗。答案(1)顯微注射技術(shù) (2)體液(只答特異性不可)B淋巴細胞(漿細胞或已免疫的 B淋巴 細胞)既能無限增殖,又能產(chǎn)生特異性抗體 (3)無菌、無毒(缺一不可) 維持培養(yǎng)液的pH(4)(專一)抗體 (5)抗原蛋白解析(1)將重組DNA導入動物細胞,常用顯微注射技術(shù)。(2)向小鼠體內(nèi)注射抗原蛋白,使小鼠產(chǎn)生相應的漿細胞,這是體液免疫,從小鼠體內(nèi)分離的細胞I是B淋巴細胞(漿細胞或已免疫的B淋巴細胞),將無限增殖的基因?qū)霛{細胞,得到的細胞n應具有的特點是既能無限增殖,又能產(chǎn)生特異性抗體。(3)體外培養(yǎng)細胞n ,首先應保證其處于無菌、無毒的
41、環(huán)境中,其次需要提供充足的營養(yǎng)和適宜的溫度。培養(yǎng)箱充入二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液的pH。(4)對于轉(zhuǎn)基因成功的細胞 n還要進行克隆化培養(yǎng)和檢測(專一)抗體。(5)疫苗為毒性 弱的抗原,因此要預防 H7N9禽流感,可以用圖中的抗原蛋白作為疫苗。O 10 20 30 406030、.(2014廣東,29節(jié)選)鐵皮石斛是我國名貴中藥,生物堿是其有效成分之一。應用組織 培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖(簡稱PLBs,類似愈傷組織)生產(chǎn)生物堿的實驗流程如下:在固體培養(yǎng)基上, 問題:PLBs的重量、生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時間的變化如圖所示,請回答下列 誘導增殖培養(yǎng)不同時間 |新生營養(yǎng)芽I導刁PLBs | | P
42、LBs |取樣、檢測|實驗結(jié)果O.O2S 也間PLBfiiEW 光嫁) 一生物瑚含訛I光閤) plbr 重 WM)培菲時間(天),誘 ?(1)選用新生營養(yǎng)芽為外植體的原因是 導外植體形成PLBs的過程稱 。與黑暗條件下相比,PLBs在光照條件下生長的優(yōu)勢體現(xiàn)在 答案(1)營養(yǎng)芽細胞分裂能力強,幾乎不含病毒 脫分化(2)開始增重的時間早增重持續(xù)的時間長PLBs增重的量更多解析(1)選用新生營養(yǎng)芽為外植體是因為其分裂能力旺盛且?guī)缀醪粩y帶病毒。誘導外植體形成類似愈傷組織的PLBs的過程稱為脫分化。(2)分析曲線圖可知,在光照條件下PLBs開始增重的時間早,增重持續(xù)的時間長,增重的量更多。31、.(2
43、014新課標I , 40)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、丫和Z),每只小鼠 免疫5次,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應的血清最大12伽24 CNX)21) (MX)1600012 INI)8 mo4 nonoX Y Z稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。Z誦一比 第二歡 珮二欣 誹同次 第血撫 葩疫若要制備雜交瘤細胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細胞(染色體數(shù)目為40條),并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞 (染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇 誘導細胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測,得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞?;卮鹣铝袉栴}:(1)制備融
44、合所需的B淋巴細胞時,所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16 000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過 次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備 B淋巴細胞的是 小鼠,理由是 c(2)細胞融合實驗完成后,融合體系中除含有未融合的細胞和雜交廇細胞外,還含有體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是 。(3)雜交瘤細胞中有 個細胞核,染色體數(shù)目最多是 條。(4)未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是 。答案(1)4 Y Y小鼠的血清抗體效價最高(2)B淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞細胞融合是隨機的,且融合率達不到100%1100不能無限增殖解
45、析(1)據(jù)圖分析可知,第四次注射后 X、Y、Z小鼠的血清抗體效價幾乎都達到16 000以上,小鼠Y的血清抗體的效價最高,最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細胞和雜交瘤細胞之外,還有骨髓瘤細胞的自身融合細胞和B淋巴細胞的自身融合細胞。細胞的融合是隨機的,并且不可能所有細胞都融合,故體系中會出現(xiàn)多種類型的細胞。(3)動物細胞融合后形成的是具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞。雜交瘤細胞的 細胞核中的染色體數(shù)目最多為40+ 60= 100(條)。(4)正常細胞的分裂次數(shù)是有限的,且經(jīng)過免疫的B淋巴細胞高度分化,不能無限增殖,故經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后逐漸衰老死亡。32、下圖為轉(zhuǎn)基因煙
46、草培育過程流程圖,請回答:外源越闔表達檢測(1)攜帶外源基因的質(zhì)粒除了含有外源基因外,還包括 、復制原點和標記基因,其中標記基因的作用是 ,構(gòu)建攜帶外源基因的質(zhì)粒時,需要使用的工具酶是 。圖中目的基因?qū)霟煵菁毎姆椒ㄊ?,感染過程是利用農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上的,使外源基因進入并整合到煙草細胞染色體DNA上。此外另一十分簡便經(jīng)濟的導入方法是 。(3)將含有目的基因的受體細胞培養(yǎng)成煙草植株的技術(shù)叫做 ,其理論基礎是,圖中的生根、長芽過程屬于 過程。(4)在培養(yǎng)過程中,除添加必要的營養(yǎng)物質(zhì),還需要向培養(yǎng)基中添加,同時除提供適宜的溫度、光照和氧氣等環(huán)境條件外,成功的另一關(guān)鍵是。答案(1)啟動子 終止子
47、鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細 胞篩選出來 限制酶和 DNA連接酶 (2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法T-DNA 花粉管通道法(3)植物組織培養(yǎng)植物細胞具有全能性再分化 (4)植物激素無菌操作解析(1)基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等,其中標記基因的作 用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來;構(gòu)建基因表達載體時,首先需用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和載體,其次還需用DNA連接酶將目的基因和載體連接形成重組DNA分子。(2)由圖可知,將目的基因?qū)胧荏w細胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其原理是:農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受
48、體細胞, 并且整合到受體細胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點,如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上,通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上。將目的基因?qū)胫参锛毎牧硪皇趾啽憬?jīng)濟的方法是花粉管通道法。(3)將轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因植株還需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),其理論基礎是植物細胞具有全能性。植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化兩個重要的步驟,圖中的生根、長芽過程屬于再分化過程。決定脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類及比例,因此在培養(yǎng)過程中,除添加必要的營養(yǎng)物質(zhì),還需要向培養(yǎng)基中添加植物激素;植物組織培養(yǎng)時除提供適宜的溫度、光照和氧氣等環(huán)境條件外,成功的另一關(guān)鍵是無菌操作。33、自然界中有一種含有葉綠體的原生動物眼蟲,這說明植物的細胞器同樣可以在某些動物細胞中存活。某同學提出問題:“動物細胞與植物細胞之間可以實現(xiàn)雜交嗎?”他嘗試 設計出下列具體的實驗方案。誘煒出愈傷組織除去細胞氓.得到原主質(zhì)體 動物胚胎細胞養(yǎng)將帰胎移植到代動植物雜孕母體的子它中 *童種出主結(jié)合實驗方案回答下列問題:實驗原理:根據(jù)眼蟲的特點, 動物細胞和植物細胞之間在理論上是可以實現(xiàn)雜交的。實驗步驟如下:(1)中選的植物材料細胞中,必須有的
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