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1,實(shí)驗(yàn)室七 革蘭染色 Gram Stain,一、原理,1、原理,鑒別染色法,于1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立,G:肽聚糖層較薄,交聯(lián)度低,含較多脂質(zhì),用乙醇等有機(jī)溶劑脫色時(shí)類脂質(zhì)融解,增加了細(xì)胞的通透性,薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫和碘復(fù)合物溶出,呈復(fù)染后的紅色。 G:細(xì)胞壁厚且結(jié)構(gòu)交聯(lián)致密,用脫色劑處理時(shí),肽聚糖層孔徑縮小,且不含類脂,通透性降低,結(jié)晶紫和碘復(fù)合物牢固結(jié)合在細(xì)胞壁上,呈初染時(shí)的紫色,初染-媒染-脫色-復(fù)染,3,初染:結(jié)晶紫1分鐘,水沖甩干; 媒染:盧戈氏碘液1分鐘,水沖甩干; 脫色:95%酒精30秒鐘,水沖甩干; 復(fù)染:稀釋復(fù)紅1分鐘,水沖甩干,涂片,干燥,固定,染色,鏡檢,二、步驟,4,三、結(jié)果,鑒別細(xì)菌,指導(dǎo)臨床用藥,研究細(xì)菌的致病性,四、意義,6,革蘭氏染色成敗與否與許多因素有關(guān) 1、菌齡 2、涂片厚薄 3、脫色時(shí)間(最為關(guān)鍵
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