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文檔簡介
1、專題九生物技術(shù)實踐,第18講微生物的應用和生物技術(shù)在食品加工中的應用,-3-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,命題點一微生物的培養(yǎng)與應用 1.基本技術(shù) (1)制備培養(yǎng)基:計算稱量溶化滅菌倒平板。 (2)無菌技術(shù):主要指消毒和滅菌。 消毒方法:常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。 常用滅菌方法: 灼燒滅菌接種環(huán)、接種針等金屬器具; 干熱滅菌主要針對玻璃器皿等; 高壓蒸汽滅菌主要針對培養(yǎng)基等。 (3)倒平板操作:待培養(yǎng)基冷卻至50 左右時,在酒精燈火焰附近倒平板。,-4-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,(4)平板劃線操作:通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,
2、將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。 (5)稀釋涂布平板法:先將菌液進行一系列梯度稀釋后涂布平板,在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散到培養(yǎng)基的表面,從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。如下圖所示:,-5-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,2.微生物的分離與計數(shù),-6-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,-7-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,-8-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,思維拓展 (1)平板劃線法適用于微生物的純化,但不能用于微生物的計數(shù)。 (2)土壤中纖維素分解菌的篩選流程中的“選擇培養(yǎng)”是否需要,
3、應根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定。,-9-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,運用不同培養(yǎng)基的原理解答有關(guān)微生物分離和鑒定的題 (2017全國理綜)某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用?;卮鹣铝袉栴}。 (1)有些細菌能分解尿素,有些細菌則不能,原因是前者能產(chǎn)生。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源,原因是。但可用葡萄糖作為碳源,進入細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是(答出兩點即可)。,-10-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,(2)為了篩選可分解尿素的細菌,在配制培養(yǎng)基時,應選擇(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO
4、3”)作為氮源,不選擇其他兩組的原因是。 (3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有(答出兩點即可)。,-11-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,答案 (1)脲酶分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物,不能利用CO2來合成有機物為細胞生命活動提供能量,為其他有機物的合成提供原料(2)尿素其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用(3)為細菌生長提供無機營養(yǎng),作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定 解析 (1)有些細菌能分解尿素是因為其能產(chǎn)生分解尿素的酶,即脲酶。能分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物,不能利用C
5、O2來合成有機物。葡萄糖既能作為能源,為細胞的代謝提供能量,也能作為碳源,為其他有機物的合成提供原料。(2)利用尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基可篩選分解尿素的細菌。其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用。(3)培養(yǎng)基中的KH2PO4和Na2HPO4既可為細菌生長提供無機營養(yǎng),又可作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定。,-12-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,方法規(guī)律 選擇培養(yǎng)基及鑒別培養(yǎng)基的運用技巧 (1)分離纖維素分解菌的實驗中先用選擇培養(yǎng)基,再用鑒別培養(yǎng)基。該實驗中使用的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基,以纖維素作為唯
6、一碳源,以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長,而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長;利用液體培養(yǎng)基能使營養(yǎng)成分被充分利用,以增加纖維素分解菌的濃度。 (2)鑒別培養(yǎng)基含瓊脂,為固體培養(yǎng)基,因為要在培養(yǎng)基上形成肉眼可見的菌落。剛果紅染色法就是應用的此培養(yǎng)基。,-13-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,(2017江蘇)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中,對環(huán)境有嚴重危害。小明同學準備依據(jù)下圖操作步驟,從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題。 (1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳源的有。 (2)將采集到的樣品接
7、種培養(yǎng),苯酚用量應隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸,以達到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集,應進一步,以便于菌落計數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質(zhì)外,還必須添加。,-14-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,(3)下圖為連續(xù)劃線法示意圖,在圖中(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。 (4)采用比色測定法(使用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進行顯色反應,下表中15號比色管的苯酚濃度應分別為。 如果廢水為50 mg/L 苯酚溶液,降解后約有21%的苯酚殘留,則需將殘留液稀釋(填序號:51020)倍后,再進行比色。,-15-,命題點一,命題點
8、二,整合提升,題型突破,題組訓練,答案 (1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀釋涂布凝固劑(3)(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8 解析 (1)培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)一般都包括H2O、無機鹽、碳源、氮源,蛋白胨和苯酚中含有C元素,可作為碳源。(2)要富集該菌,應提高營養(yǎng)物質(zhì)含量。若菌落過于密集,說明稀釋倍數(shù)不夠,應進一步稀釋,然后再涂布平板。制備固體培養(yǎng)基時需加入凝固劑瓊脂。(3)用平板劃線法接種菌體,隨劃線次數(shù)的增加,菌體數(shù)量逐漸減少,故區(qū)域更易獲得單菌落。,-16-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,(4)題中已給出6號比色管中的苯酚濃度為1 mg/L,根據(jù)濃度梯度的設(shè)計原則和空
9、白對照原則,15號比色管中的苯酚濃度應依次為0 mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L、0.8 mg/L。廢水中苯酚的濃度為50 mg/L,降解后約有21%的苯酚殘留,則降解后廢水中苯酚的濃度為5021%=10.5(mg/L),因為比色管中苯酚的濃度范圍為01 mg/L,若將降解后的廢水稀釋5倍或10倍,則稀釋后廢水中苯酚的濃度均大于1 mg/L,若稀釋20倍,則稀釋后廢水中苯酚的濃度為0.525 mg/L,介于01 mg/L之間,故需將降解后的廢水稀釋20倍后再進行比色。,-17-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,命題點二傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應用 1.制作
10、果酒、果醋、腐乳、泡菜所需菌種的比較,-18-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,2.果酒、果醋、腐乳及泡菜的制作原理及過程,-19-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,-20-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,掌握微生物發(fā)酵原理,解答有關(guān)果醋、果酒、腐乳、泡菜制作的題 微生物在人們的生活生產(chǎn)中無處不在,為人們生活增添了諸多樂趣。 (1)很多家庭都會釀酒,請完成下列相關(guān)問題。 釀酒時先將米煮熟的目的是。 冷卻到30 后才能加酒藥的原因是。 如果時常開壇蓋舀酒,不久酒就會變酸,其原因是。,-21-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練
11、,(2)中國的臭豆腐馳名中外,歷史悠久。臭豆腐外觀青色,“聞著臭,吃著香”。在臭豆腐的制備過程中,常用的微生物主要是,在此過程中,豆腐相當于微生物生長的。 (3)在腌制泡菜的過程中,起主要作用的微生物是,用水封壇的作用是;欲檢測泡菜在腌制過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量,使用檢測試劑后顏色的變化是。,答案: (1)殺滅其他雜菌,使淀粉發(fā)生一定程度的水解太高的溫度會抑制甚至殺死酵母菌醋酸菌在有氧條件下,將酒精氧化為醋酸(2)毛霉培養(yǎng)基(3)乳酸菌制造缺氧環(huán)境出現(xiàn)玫瑰紅色,-22-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,方法規(guī)律 微生物發(fā)酵過程中的滅菌措施 應該從原料、裝置和實驗過程三個層次進
12、行無菌操作。 (1)果酒與果醋制作中原料的消毒 榨汁前葡萄應先沖洗再去枝梗,因為若先去梗,則會使一些微生物侵入果實內(nèi)部,影響果酒的制作;體積分數(shù)為70%的酒精殺菌效果最強,若酒精濃度過低,則殺菌效果差,而濃度過高,又會使菌體表面蛋白質(zhì)凝固形成一層保護膜,乙醇分子不能滲入其中,從而使殺菌效果受到影響。 (2)腐乳制作過程中的殺菌消毒 制作腐乳的玻璃瓶洗刷干凈后用沸水消毒;酒、鹽、香辛料都有殺菌作用;接種、封瓶時都要進行無菌操作。,-23-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,1.(2016全國理綜)某同學用新鮮的泡菜濾液為實驗材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣
13、而不透明,乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?;卮鹣铝袉栴}: (1)分離純化乳酸菌時,首先需要用對泡菜濾液進行梯度稀釋,進行梯度稀釋的理由是。 (2)推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有和。分離純化時應挑選出的菌落作為候選菌。 (3)乳酸菌在-20 長期保存時,菌液中常需要加入一定量的(填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”)。,-24-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,答案: (1)無菌水泡菜濾液中菌的濃度高,直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落 (2)鑒別乳酸菌中和產(chǎn)生的乳酸(或酸)具有透明圈 (3)甘油 解析: (1)分離純化乳酸菌時,首先需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀
14、釋,原因是在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的乳酸菌被分散,培養(yǎng)后能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。 (2)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有鑒別乳酸菌和中和乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸;乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣,故分離純化時應挑選出具有透明圈的菌落作為候選菌。 (3)乳酸菌在-20 長期保存時,菌液中常需要加入一定量的甘油。,-25-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,2.蘋果除鮮食外,還可深加工為果酒、果醋、果汁、果醬等,使產(chǎn)品附加值成倍提高。下圖是某廠進行蘋果酒和蘋果醋生產(chǎn)的基本工藝流程。請回答下列問題。,-26-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,
15、題組訓練,(1)蘋果的出汁率是果酒、果醋產(chǎn)量的保證。在制備蘋果酒的過程中,為了提高蘋果的出汁率,在壓榨前可加入一定濃度的酶和果膠酶,理由是這兩種酶能,從而提高蘋果的出汁率。 (2)發(fā)酵一定時間后,觀察到甲罐內(nèi)液面不再有,說明發(fā)酵基本完畢。 (3)在制備蘋果醋的過程中,乙罐內(nèi)先填充經(jīng)滅菌處理后的木材刨花,然后加入含菌的培養(yǎng)液,使該菌附著在刨花上,再讓甲罐中發(fā)酵完畢的蘋果酒流入乙罐,并在A處通入。蘋果醋發(fā)酵時控制的適宜溫度一般比制蘋果酒時的適宜溫度(填“高”“相等”或“低”)。,-27-,命題點一,命題點二,整合提升,題型突破,題組訓練,答案: (1)纖維素能破除果肉細胞壁(促進細胞壁中纖維素和果
16、膠的水解) (2)氣泡冒出 (3)醋酸無菌空氣高,-28-,失分誤區(qū),對選擇培養(yǎng)基的選擇方法辨析不清 防范策略 (1)在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)。例如,加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌;加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的加入是在主要營養(yǎng)成分完整的基礎(chǔ)上加入。 (2)改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。例如,缺乏氮源時可以分離出固氮微生物;石油作為唯一碳源時,可以分離出能消除石油污染的微生物。 (3)改變微生物的培養(yǎng)條件。例如,將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境下培養(yǎng),可以得到耐高溫的微生物。,-29-,失分誤區(qū),防范演練 某實驗小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌,設(shè)計實驗步驟如下,請給予合理的補充。 (1)采樣與培養(yǎng):將采集的土樣混勻后稱取1 g,置于經(jīng)過法滅菌處理的(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基中,28 振蕩培養(yǎng)。 (2)接種與選擇:為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高,需將培養(yǎng)液進行處理。之后,將菌液涂布接種于以為唯
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