天然藥物化學顯色反應

1、.0644814 許叢宇 2008/12/30生物堿 (1)Vitali反應 紫色(2)DDL反應 黃色（3）沉淀反應 書本P155糖Molish 反應（試劑：濃硫酸，-萘酚。常用色譜顯色劑：鄰苯二甲酸和苯胺）糠醛衍生物和許多芳胺、酚類及具有活性次甲基的基團化合物縮合成有色的化合物香豆素：（1）異羥肟酸鐵反應-內酯的顯色反應堿性條件下，香豆素內酯開環(huán)，并與鹽酸羥胺縮合成異羥肟酸，再在酸性條件下與三價鐵離子絡合成鹽而顯紅色。（2）與酚類試劑的反應具有酚羥基，可與FeCl3試劑產(chǎn)生顏色反應；若酚羥基的對位未被取代，或6-位上沒有取代，其內酯環(huán)堿化開環(huán)后，可與Gibbs試劑、Emerson試劑反應。

2、機制如下：Gibbs反應：符合以上條件的香豆素乙醇溶液在弱堿條件下，2,6-二氯(溴）醌氯亞胺試劑與酚羥基對位活潑氫縮合成藍色化合物。Emerson反應：符合以上條件的香豆素的堿性溶液中，加入2%的4-氨替比林和8%的鐵氰化鉀試劑與酚羥基對位活潑氫縮合成紅色化合物。醌類顏色反應: 取決于其氧化還原性質以及分子中的酚羥基的性質。（1）Feigl反應-醌的通性，所有具醌核的化合物均可反應。（方法、機理：見書 312頁）醌類化合物在堿性條件下，經(jīng)加熱能迅速與醛類及鄰二硝基苯反應，生成紫色化合物（2）無色亞甲藍顯色試驗-可區(qū)別蒽醌與苯醌萘醌 苯醌和萘醌因醌核上有活潑質子，可反應，而蒽醌無。無色亞甲基藍

3、溶液，樣品在白色背景上作為藍色斑點出現(xiàn)。（3）與堿的反應(Borntrger反應-可區(qū)別含羥基的蒽醌與蒽酚衍生物反應、機理、應用：見書 313 頁。羥基醌類在堿性溶液中發(fā)生顏色變化，會使顏色加深。多呈橙、紅、紫紅色及藍色。例如羥基蒽醌類遇堿顯紅紫紅色的反應稱Borntrger反應（4）與活性次甲基試劑的反應-可區(qū)別蒽醌與苯醌萘醌（Kesting-Craven法） 反應、機理、應用：見書 313 頁。苯醌及萘醌類化合物當其醌環(huán)上有未被取代的位置時，可在氨堿性條件下與一些含有活性次甲基試劑（乙酰醋酸酯、丙二酸酯、丙二腈等）的醇溶液反應，生成藍綠色或藍紫色（5）與金屬離子的反應-可初步鑒定蒽醌的取代

4、情況 機理：見書 314 頁 常用0.5醋酸鎂的乙醇溶液，可根據(jù)結果初步判斷取代情況：A母核中只有一個-或-酚羥基，或有兩個-酚羥基但不在同一環(huán)上，呈黃橙色至橙色。B鄰位酚羥基的蒽醌，呈紫色藍紫色。C. 對位二酚羥基蒽醌，呈紫紅色紫色。D. 每個苯環(huán)上各有一個-酚羥基，或含有間位二羥基者，呈紅色至紅色。黃酮1）鹽酸-鎂粉（或鋅粉）反應：多數(shù)黃酮、黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類化合物顯橙紅紫紅色，少數(shù)顯紫藍色。查耳酮、橙酮、兒茶素類不顯色。異黃酮類一般不顯色。2） 四氫硼鈉（鉀）反應：NaBH4是對二氫黃酮類化合物專屬性較高的一種還原劑。與二氫黃酮類化合物產(chǎn)生紅紫色。其它黃酮類化合物均不顯色。二

5、氫黃酮與磷鉬酸試劑顯棕褐色。3）鋁鹽：生成的絡合物多為黃色（lmax=415nm），并有熒光，可用于定性及定量分析。常用試劑為1%三氯化鋁或硝酸鋁溶液。4） 鉛鹽：常用1%醋酸鉛及堿式醋酸鉛水溶液，堿式醋酸鉛反應能力更強，可生成黃紅色沉淀。5） 鋯鹽：多用2%二氯氧化鋯（ZrOCl2）甲醇溶液。黃酮類化合物分子中有游離的3-或5-OH存在時，均可反應生成黃色的鋯絡合物。3-OH，4-酮基絡合物的穩(wěn)定性5-OH，4-酮基絡合物（僅二氫黃酮醇除外）。當反應液中接著加入枸櫞酸后，5-羥基黃酮的黃色溶液顯著褪色，而3-羥基黃酮溶液仍呈鮮黃色（鋯枸櫞酸反應）。6）鎂鹽：二氫黃酮、二氫黃酮醇類與醋酸鎂的甲

6、醇溶液，加熱可顯天藍色熒光，若具有C5-OH，色澤更為明顯。而黃酮、黃酮醇及異黃酮類等則顯黃橙黃褐色。7）氯化鍶（SrCl2）：在氨性甲醇溶液中，可與分子中具有鄰二酚羥基結構的黃酮類化合物生成綠色棕色乃至黑色沉淀。8）三氯化鐵反應：多數(shù)黃酮類化合物因分子中含有游離酚羥基，與三氯化鐵水溶液或醇溶液可產(chǎn)生正反應，呈現(xiàn)顏色；當含有氫鍵締合的酚羥基時，顏色更明顯。9）堿性試劑顯色：二氫黃酮類在堿液中開環(huán)，轉變成查爾酮類化合物，顯橙黃至黃色。黃酮醇類在堿液中先呈黃色，通入空氣后變?yōu)樽厣?，與其他黃酮類區(qū)別。黃酮類分子中有鄰二酚羥基取代或3，4-二羥基取代時，在堿液中不穩(wěn)定，易被氧化，產(chǎn)生黃色深紅色綠棕色沉

7、淀卓酚酮能與多種金屬離子形成絡合物結晶體，并顯示不同的顏色，可用于不同的顏色，可用于鑒別。如銅絡合物為綠色結晶，鐵絡合物為赤紅色結晶。環(huán)烯醚萜游離苷元遇酸、堿、羰基化合物和氨基酸等都能變色。如遇到氨基酸類加熱，即顯深紅色至深藍色，最后變成藍色沉淀。還有冰醋酸-銅離子反應，shear試劑（1體積濃鹽酸與1.5體積苯胺混合）反應(車前草苷：黃棕深綠)藇類揮發(fā)油分餾時，高沸點餾分如見美麗的藍色、紫色或綠色，表明可能有藇類三萜類三萜化合物（苷元和苷）在無水條件下，與強酸、三氯乙酸或Lewis酸（氯化鋅、三氯化鋁、三氯化銻）作用，會產(chǎn)生顏色變化或熒光。但全飽和、且3位又無羥基或羰基的化合物呈陰性反應：*

8、（1）醋酐-濃硫酸反應（Liebermann-Burchard反應）將樣品溶于冰醋酸中，加硫酸-醋酐（1：20），可產(chǎn)生黃紅紫藍等顏色變化，最后褪色。（甾體皂苷也有此反應，但顏色變化快，在顏色變化的最后出現(xiàn)污綠色；而三萜皂苷顏色變化稍慢，且不出現(xiàn)污綠色。）*（2）五氯化銻反應（Kahlenberg反應）將樣品氯仿或醇溶液點于濾紙上，噴以20%五氯化銻的氯仿溶液，干燥后6070加熱，顯藍色、灰藍色，灰紫色等多種顏色斑點。紫外燈下顯藍色熒光（甾體皂苷則顯黃色熒光）另：三氯化銻（Carr-Price反應）薄層色譜顯色用。其余一樣。（3）三氯醋酸反應（Rosen-Heimer反應） 將樣品溶液滴在濾紙

9、上，噴25%三氯醋酸乙醇溶液，加熱至100，生成紅色漸變?yōu)樽仙＃訜嶂?00度，甾體是60度。）（4）氯仿-濃硫酸反應（Salkowski反應） 樣品溶于氯仿，加入濃硫酸后，在氯仿層呈現(xiàn)紅色或藍色，氯仿層有綠色熒光出現(xiàn)。（甾體也有，一樣）（5）冰醋酸-乙酰氯反應（Tschugaeff反應） 樣品溶于冰醋酸中，加乙酰氯數(shù)滴及氯化鋅結晶數(shù)粒，稍加熱，則呈現(xiàn)淡紅色或紫紅色。（甾體也有，一樣）三萜化合物的沉淀反應皂苷的水溶液可以和一些金屬鹽類如鉛鹽、鋇鹽、銅鹽等產(chǎn)生沉淀。三萜皂苷多含羧基，可用酸性醋酸鉛沉淀，而甾體皂苷則為中性皂苷，須用堿性醋酸鉛或者氧化鋇沉淀。揮發(fā)油官能團鑒定：酚類：將少許溶于乙醇

10、中，加三氯化鐵的乙醇溶液，如產(chǎn)生藍色，藍紫或綠色反應，表示揮發(fā)油中有酚類物質存在。羰基化合物：銀鏡反應（硝酸銀的氨溶液）醛類物質。揮發(fā)油的乙醇液中加2，4-二硝基苯肼，氨基脲，羥胺等試劑，若產(chǎn)生晶形衍生物沉淀表明有醛或酮類化合物存在。不飽和化合物和藇類衍生物揮發(fā)油的三氯甲烷加溴的三氯甲烷液紅色褪去有不飽和化合物，繼續(xù)加溴的三氯甲烷，若產(chǎn)生藍色紫色或綠色，表明油中有藇類。此外在揮發(fā)油的無水乙醇液中加濃硫酸時，如有藇類衍生物應產(chǎn)生藍色或紫色反應。內酯類：揮發(fā)油吡啶溶液中加亞硝酰氰化鈉試劑及氫氧化鈉液，若出現(xiàn)紅色并逐漸消失，則表明有甾體1. Salkowski反應 樣品溶于氯仿，沿試管壁滴加濃硫酸，

11、氯仿層顯血紅色或青色，硫酸層顯綠色熒光。2. 三氯乙酸-氯胺T反應 25%三氯乙酸乙醇液和3%氯胺T水液4：1混合，噴在濾紙上與強心苷反應，干后加90度加熱數(shù)分鐘紫外燈下觀察，顯黃綠色、藍色、灰藍色熒光，反應較穩(wěn)定，用于毛地黃強心苷類的區(qū)別。3. ，不飽和內酯環(huán)反應（區(qū)別甲乙型強心苷）甲型強心苷：C17側鏈上有不飽和內酯環(huán)，堿液中，雙鍵移位形成活性次甲基，與某些試劑反應顯色。乙型無。Legal反應 亞硝酰鐵氰化鈉 深紅或藍 【NaFe（NO）(CN)52H2O】Kedde反應 3，5-二硝基苯甲酸乙醇液 紫紅或紅Raymond反應 1%間-二硝基苯乙醇液 紫紅或藍Baljet反應 苦味酸（2，

12、4，6-三硝基甲苯） 橙或橙紅4.去氧糖的反應（1）占噸氫醇反應 分子中有2-去氧糖能顯色（2）對二甲氨基苯甲醛反應 灰紅色（3）KellerKiliani反應（游離的2-去氧糖或者該條件下能水解得到2-去氧糖的強心苷） 強心苷溶于含少量Fe3+的冰醋酸中，沿管壁滴加濃硫酸，觀察界面和醋酸層的顏色變化，若有2-去氧糖，醋酸層漸呈藍色或藍綠色，但是對此反應不顯色的，并非結構中無2-去氧糖。（4）過碘酸對硝基苯胺反應 黃色與強心苷有關的一些鑒別方法:1、甲型強心苷的不飽和五元內酯環(huán)，在堿性溶液中，雙鍵轉位可產(chǎn)生活性次甲基，可與Legalsh試劑、Kedde試劑等發(fā)生顯色反應；2、基于2去氧糖的顯色反應：可用Keller-Kiliani試劑鑒別，顯藍綠色。3、UV法：不飽和五元內酯環(huán)在220nm處不飽和六元內酯環(huán)在300nm處有最大吸收；4、IR法：在17001800cm-1都有兩個強吸收峰，但不飽和六元內酯環(huán)的，向低移40cm 1。鞣質（還原性）極易被氧化，為強還原劑。與高價金屬離子和鹽，如Fe3+、Vd6+、Ce4+、重鉻酸鉀、高錳酸鉀、鎢酸鈉等發(fā)生氧化還原反應，大部分產(chǎn)生顏