第七章 抗生素的提取PPT課件

.,第七章抗生素的提取,四川理工生藥2011,抗生素的提取,提取要求：1)時(shí)間短；2)溫度低；3)pH宜選擇對(duì)抗生素較穩(wěn)定的范圍；4)勤清洗消毒提取方法：1)溶媒萃取法；2)離子交換法；3)吸附法；4)沉淀法,藥物的一般分離純化方法,第一節(jié)溶媒萃取法提取抗生素,定義：利用抗生素在水及與水互不相溶的溶媒中其溶解度不同的特性，使抗生素從一種液相(如發(fā)酵濾液)轉(zhuǎn)移到另一種液相(如有機(jī)溶媒)中去，以達(dá)到濃縮和提純的目的。,料液：在溶劑萃取中，被提取的溶液，溶質(zhì)：其中欲提取的物質(zhì)，萃取劑：用以進(jìn)行萃取的溶劑，萃取液：經(jīng)接觸分離后，大部分溶質(zhì)轉(zhuǎn)移到萃取劑中，得到的溶液，萃余液：被萃取出溶質(zhì)的料液稱為。,萃取的基本概念,萃取常數(shù),一、萃取原理,有機(jī)相中濃度,水相中濃度,E萃取效率,有機(jī)相中總量,水相中總量,100%,E萃取效率,100%,水有,二、工業(yè)萃取方式,萃取過(guò)程：1）混和2）分離3）溶劑回收操作方式單級(jí)萃取多級(jí)萃取多級(jí)錯(cuò)流多級(jí)逆流,1.單級(jí)萃取,單級(jí)萃取流程示意圖,單級(jí)萃?。褐话ㄒ粋€(gè)混合器和一個(gè)分離器,.多級(jí)順流（錯(cuò)流）萃取,F一料液S一溶劑L一萃取液R萃余液下標(biāo)1，2，3級(jí)別,多級(jí)錯(cuò)流萃取的理論收率高于單級(jí)萃取，即萃取完全。但多級(jí)萃取流程長(zhǎng)，萃取劑用量大，因而得到的萃取液濃度低。,3多級(jí)逆流萃取,多級(jí)逆流萃取中，料液移動(dòng)方向和萃取劑移動(dòng)方向相反，故稱逆流萃取。,多級(jí)逆流萃取與同級(jí)錯(cuò)流萃取相比，在相同的萃取劑用量下，可獲得更高的收得率。在逆流萃取中，由于只在最后一級(jí)中加入萃取劑，故與錯(cuò)流萃取相比，萃取劑用量少，因而萃取液濃度高。,例1：利用乙酸乙酯萃取發(fā)酵液中的放線菌素D,pH3.5時(shí)分配系數(shù)K=57。令料液體積為450l/h,單級(jí)萃取劑流量為39l/h。計(jì)算單級(jí)、三級(jí)順流、三級(jí)逆流萃取的萃取率。,解:單級(jí)萃取的萃取效率：E=57/(57+450/39)100%=83.2%三級(jí)順流E=94.6%三級(jí)逆流E=99.3%,水有,4.影響萃取操作的因素,(1)有機(jī)溶劑的選擇(2)pH的范圍(3)溫度的確定(4)鹽析(5)乳化作用,（）有機(jī)溶劑的選擇,根據(jù)相似相溶的原理，選擇與目標(biāo)產(chǎn)物極性相近的有機(jī)溶劑為萃取劑，可以得到較大的分配系數(shù)；有機(jī)溶劑與水不互溶，與水有較大的密度差，黏度小，表面張力適中；應(yīng)當(dāng)價(jià)廉易得，容易回收，毒性低，腐蝕性小，不與目標(biāo)產(chǎn)物反應(yīng)。常用于抗生素萃取的有機(jī)溶劑有丁醇、丁酯、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸戊酯等。,（）pH的影響,pH對(duì)表觀分配系數(shù)的影響（pHK）pH低有利于酸性物質(zhì)分配在有機(jī)相，堿性物質(zhì)分配在水相。,（）溫度TT，分子擴(kuò)散速度，故萃取速度一般生化物質(zhì)的萃取在室溫或較低溫度下進(jìn)行。,（）鹽析無(wú)機(jī)鹽氯化鈉、硫酸銨，作用：生化物質(zhì)在水中溶解度；兩相比重差兩相互溶度,（）乳化和破乳（去乳化）,1乳化乳化是一種液體(分散相)分散在另一種不相混溶的液體(連續(xù)相)中的現(xiàn)象。這樣形成的分散體系稱乳濁液。原因：是發(fā)酵液中存在的蛋白質(zhì)和固體顆粒等物質(zhì)，這些物質(zhì)具有表面活劑性的作用，使有機(jī)溶劑和水的表面張力降低，水易于以微小液滴的形式分散于油相稱為油包水型W/O乳濁液；相反，為O/W型乳濁液。,.害處：乳化產(chǎn)生后會(huì)使有機(jī)溶劑相和水相分層困難，并出現(xiàn)兩種夾帶：發(fā)酵液中夾帶有機(jī)溶劑微滴，使目標(biāo)產(chǎn)物受到損失；有機(jī)溶劑中夾帶發(fā)酵液給后處理操作帶來(lái)困難。,破乳,由蛋白質(zhì)引起的乳化多為O/W型，其粒徑在2.530微米之間。表面活性劑的親水基團(tuán)強(qiáng)度大于親油基團(tuán)。破乳方法：1.過(guò)濾或離心分離破乳法；2.化學(xué)法：加電解質(zhì)中和離子型乳油液的電荷；3.物理法：加熱、稀釋、吸附等；4.頂替法：加入表面活性更大，但因其碳鏈較短難以形成堅(jiān)固的保護(hù)膜的物質(zhì)，取代界面上的乳化劑；,5.轉(zhuǎn)型法：如在O/W中加入親油性乳化刑，使乳化液有生成W/O的傾向，但又不穩(wěn)定，從而達(dá)到破乳目的。常用的去乳化劑醇類（戊醇最好）溴代十五烷基吡啶十二烷基三甲基溴化氨（1231)十二烷基磺酸鈉最好的方法是防止乳化，如蛋白質(zhì)是乳化起因，就應(yīng)設(shè)法去除蛋白質(zhì)。,二、萃取設(shè)備,1、萃取體系的組成及功能液-液萃取設(shè)備應(yīng)包括3個(gè)部分：混合設(shè)備、分離設(shè)備和溶劑回收設(shè)備。混合設(shè)備：（）管式混合器（）噴嘴式混合器（）攪拌混合罐,（）管式混合器混合管工作原理萃取劑及料液在一定流速下進(jìn)入管道一端，混合后從另一端導(dǎo)出，依靠管內(nèi)特殊設(shè)計(jì)的內(nèi)部單元和流體流動(dòng)實(shí)現(xiàn)液體混合。強(qiáng)迫湍流狀態(tài)；料液在管內(nèi)平均停留時(shí)間1020s。特點(diǎn)混合管的萃取效果高于混合罐，且為連續(xù)操作。流程簡(jiǎn)單、結(jié)構(gòu)緊湊、能耗小、萃取效率高。適于各種黏度的流體。,（a）交錯(cuò)射流混合,（b）同向射流混合,（2）噴嘴式混合器噴嘴式混合器是一種體積小,簡(jiǎn)單方便的混合裝置，特別適用于低黏度、易分散的料液。這種設(shè)備投資小，但需要料液在較高的壓力下進(jìn)入混合器。且效率較低。,（3）混合罐,混合罐的結(jié)構(gòu)類似于帶機(jī)械攪拌的密閉式反應(yīng)罐。對(duì)化學(xué)腐蝕性強(qiáng)的液體，可采用氣流攪拌。,三、分離設(shè)備,高速離心機(jī)：碟片式，40006000rpm超速離心機(jī)：管式，10000rpm,第二節(jié)離子交換法,離子交換法：是利用某些抗生素能在溶液中形成帶電粒子，與合成離子交換樹脂之間結(jié)合力的差異來(lái)進(jìn)行分離的方法。帶電粒子與離子支換樹脂間的作用力是靜電力，它們的結(jié)合是可逆的。,固體球形顆粒，多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)；不溶于水；具有離子交換特性的有機(jī)高分子聚電解質(zhì)。,一.原理,1、組成,2、離子交換過(guò)程,離子交換：RA+B+=RB+A+洗脫：RB+C+=RC+B+再生：RC+A+=RA+C+,骨架：接功能基團(tuán)，惰性固定基團(tuán)：接于骨架上，與相反離子結(jié)合活性離子：可移動(dòng)離子待交換離子：吸附階段與活性離子交換,按材料不同,按結(jié)構(gòu),二.離子交換樹脂,（聚）苯乙烯樹脂,多糖類骨架,DEAE、凝膠（葡聚糖、瓊脂糖，多糖蛋白,751、722等離子型小分子,按離子屬性及強(qiáng)弱,三、離子交換樹脂的理化性質(zhì),外觀珠球形顆粒度（粒度）顆粒度是指樹脂顆粒在溶脹狀態(tài)下的直徑大小,粒度小其交換速度快，但流體阻力增加，粒度過(guò)大會(huì)使交換速度降低。膨脹性確定樹脂裝填量時(shí)應(yīng)考慮到其膨脹性能。密度干樹脂的密度稱真密度，而膨脹樹脂酌密皮稱視密度，由視密度可以估計(jì)樹脂的裝填量和離子交換柱所承受的壓力。交聯(lián)度指離子交換樹脂中交聯(lián)劑（二乙烯苯簡(jiǎn)稱DVB）含量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。一般來(lái)說(shuō)交聯(lián)度大，機(jī)械強(qiáng)度高，樹脂的孔度小，大分子的物質(zhì)就不易被交換。交換容量表征樹脂交換能力的重要參數(shù)。所謂交換容量是指一定量樹脂所能交換離子的毫克當(dāng)量數(shù)（meq），其表示方法有質(zhì)量交換容量（meq/g干樹脂）和體積交換容量（meq/ml濕樹脂）兩種。,四、離子交換樹脂選擇依據(jù),1、帶正電荷的堿性抗生素用陽(yáng)離子交換樹脂，反之，用陰離子、強(qiáng)酸性或強(qiáng)堿性抗生素，宜選用弱堿性及弱酸性交換樹脂、交換樹脂有酸、堿型和鹽型，對(duì)弱酸、堿型離子交換樹脂用鹽型、工業(yè)離子交換樹脂宜選用容量高，選擇性好，特別是易再生的樹脂。,五、離子交換方法,1、靜態(tài)交換法：工業(yè)上（間歇式工藝）：交換罐。實(shí)驗(yàn)室中：燒杯。,2、動(dòng)態(tài)交換法：工業(yè)上：離子交換器將樹脂裝入柱狀交換器中，使待交換溶液流過(guò)交換柱。,實(shí)驗(yàn)室中：交換柱或滴定管,裝柱,離子交換,洗脫,樹脂再生,六、離子交換柱式操作過(guò)程：,預(yù)處理,研磨、過(guò)篩使粒度符合要求浸泡使其充分溶脹洗滌減少雜質(zhì),一般經(jīng)過(guò)研磨、溶脹、洗滌等步驟。,.樹脂的預(yù)處理,裝柱：樹脂洗至中性后借助水的重力使樹脂自然沉積，避免夾雜氣泡現(xiàn)象。,裝柱與裝樣交換,洗脫,洗脫一般采取分步淋洗或梯度淋洗，其中分步洗脫，是指先采用洗脫能力較弱的溶液，使易洗脫組分流出，然后依次使用洗脫能力更強(qiáng)的溶液，洗脫較難洗脫的組分。,七、工業(yè)離子交換提取方法,（1）分批法：交換罐。（2）固定床：樹脂上柱或交換器，動(dòng)態(tài)洗脫。（3）流動(dòng)床：樹脂與料液在柱床內(nèi)同時(shí)逆向流動(dòng)。,八、抗生素離子離子交換工藝選擇,（1）pH：交換時(shí)pH值抗生素離子化抗生素穩(wěn)定性適宜。（2）吸附與洗脫：條件相反（逆過(guò)程），eg.酸性吸附則堿性洗脫（3）為防止洗脫過(guò)程pH變化過(guò)大，可選用緩沖劑作為洗脫液（）工業(yè)常用洗脫劑,1、概念：吸附是利用吸附劑對(duì)液體或氣體中某一組分具有選擇性吸附的能力，使其富集在吸附劑表面的過(guò)程。被吸附的流體稱為吸附質(zhì)，多孔固體顆粒稱為吸附劑。吸附達(dá)到平衡時(shí)，吸附劑內(nèi)的流體稱為吸附相，剩余的流體本體相稱為吸余相,第三節(jié)吸附法分離抗生素,吸附法的發(fā)展,吸附法在各種層析技術(shù)中應(yīng)用最早，如一戰(zhàn)期間發(fā)展起來(lái)的活性炭吸附，后來(lái)使用的硅膠、凝膠型離子交換樹脂、分子篩和纖維素等近些年發(fā)展的大網(wǎng)格吸附劑,、吸附法的特點(diǎn)：常用于從稀溶液中將溶質(zhì)分離出來(lái)，由于受固體吸附劑的限制，處理能力較小；對(duì)溶質(zhì)的作用較小；可直接從發(fā)酵液中分離所需的產(chǎn)物，成為發(fā)酵與分離的耦合過(guò)程，從而可消除某些產(chǎn)物對(duì)微生物的抑制作用；溶質(zhì)和吸附劑之間的相互作用及吸附平衡關(guān)系通常是非線性關(guān)系，故設(shè)計(jì)比較復(fù)雜，實(shí)驗(yàn)的工作量較大。,、吸附法的優(yōu)缺點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：分離效果好操作簡(jiǎn)便，安全，設(shè)備簡(jiǎn)單pH變化小，適于穩(wěn)定性差的物質(zhì)缺點(diǎn)：收率低成本高無(wú)機(jī)吸附劑性能不穩(wěn)定不能連續(xù)操作，勞動(dòng)強(qiáng)度大,、吸附的類型,（1）物理吸附:放熱，可逆，單分子層或多分子層，選擇性差（2）化學(xué)吸附:放熱量大，單分子，選擇性強(qiáng)（3）交換吸附:吸附劑吸附后同時(shí)放出等當(dāng)量的離子或氫鍵到溶液中,物理吸附：基于范德華力、氫鍵和靜電力，它相當(dāng)于流體中組分分子在吸附劑表面上的凝聚，可以是單分子層，也可以是多分子層。物理吸附一般速度較快且是可逆的。,化學(xué)吸附：基于在固體吸附劑表面發(fā)生化學(xué)反應(yīng)使吸附質(zhì)和吸附劑之間以化學(xué)鍵力結(jié)合的吸附過(guò)程，因此選擇性較強(qiáng)?；瘜W(xué)吸附一般速度較慢，只能形成單分子層且不可逆。,無(wú)論是物理吸附，還是化學(xué)吸附，吸附都是發(fā)生在吸附劑表面的一種表面現(xiàn)象，為了增大吸附容量，吸附劑應(yīng)具有大的比表面積。,、吸附劑通常應(yīng)具備以下特征：對(duì)被分離的物質(zhì)具有較強(qiáng)的吸附能力;有較高的吸附選擇性；機(jī)械強(qiáng)度高；再生容易；性能穩(wěn)定、價(jià)格低廉。,常用的吸附劑有極性的和非極性的兩種。羥基硅燥土、硅膠、氧化鋁等屬前者，活性炭屬后者。人工合成的如大網(wǎng)格吸附劑、分子篩等兩種都有。但大多屬非極性的。,、常用吸附劑種類,硅膠是應(yīng)用很廣的一種極性吸附劑。是具有硅氧交聯(lián)結(jié)構(gòu)，表面有許多硅醇基的多孔性微粒。硅醇基可與極性化合物或不飽和化合物形成氫鍵而使硅膠具較強(qiáng)的吸附力。主要優(yōu)點(diǎn)是化學(xué)惰性，具有較大的吸附量，易制備不同類型的多孔硅膠，一般以SiO2.xH2O通式表示。硅膠的活性與含水量有關(guān)：含水量高則吸附力減弱。當(dāng)游離水含量17%以上時(shí)，吸附能力極低，可作為分配色譜的載體。硅膠具有微酸性，適用于分離酸性和中性物質(zhì)，如有機(jī)酸、氨基酸、甾體等。,|OO|SiOSiOH|OO|,（）硅膠,（）氧化鋁,氧化鋁的吸附能力很強(qiáng)，可以活化到不同程度，重演性好，再生容易，故是常用的吸附劑之一。氧化鋁的活性與其含水量有很大的關(guān)系。水分會(huì)掩蓋活性中心，故含水量愈高，活性愈低。分酸性、堿性和中性三種，酸性氧化鋁(pH4-5)適合于分離酸性化合物，堿性氧化鋁(pH9-10)適合于分離堿性化合物，中性氧化鋁(pH7)適合于分生物堿、揮發(fā)油、萜類、甾體及在酸、堿中不穩(wěn)定的甙類、酯類等化合物。,硅藻土是由硅藻類植物死亡后的硅酸鹽遺骸形成的，基本質(zhì)是含水的無(wú)定形SiO2，并含有少量Fe2O3、C2O、MgO、Al2O3及有機(jī)雜質(zhì)，外觀一般呈淺黃色或淺灰色，優(yōu)質(zhì)的呈白色，質(zhì)軟，多孔而輕。硅藻土的多孔結(jié)構(gòu)使它成為一種良好吸附劑，在食品、化工生產(chǎn)中常用來(lái)作助濾劑及脫色劑。,（）硅藻土,活性炭是一類碳質(zhì)吸附劑的總稱，品種很多。幾乎所有的有機(jī)物都可以作為制造活性炭的原料，如泥炭、褐煤、煙煤、重質(zhì)石油餾分、木材、果殼、紙漿廢液等。將原料在隔絕空氣的條件下加熱至600左右（有時(shí)還加添加劑），使其熱分解，得到的殘?zhí)荚僭?00以上高溫下與空氣、水蒸氣或二氧化碳反應(yīng)使其燒蝕，便生成多孔的活性炭。,()活性炭（Activecarbon）,）活性炭吸附的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)活性炭具有吸附力強(qiáng)，分離效果好，來(lái)源比較容易，價(jià)格便宜。缺點(diǎn)但由于活性炭生產(chǎn)原料和制備方法不同，因此吸附性能的可重復(fù)性很難控制。另外活性炭色黑質(zhì)輕，有時(shí)會(huì)造成環(huán)境污染。,活性炭類型活性炭的分類可分為粉末狀活性炭、顆粒狀活性炭和錦綸-活性炭三類。,）活性炭對(duì)物質(zhì)的吸附規(guī)律,活性炭是非極性吸附劑，因此在水中吸附能力大于有機(jī)溶劑中的吸附能力。針對(duì)不同的物質(zhì)，活性炭的吸附遵循以下規(guī)律：對(duì)極性基團(tuán)吸附力大于非極性基團(tuán)對(duì)芳香族化合物的吸附能力大于脂肪族化合物對(duì)相對(duì)分子量大的化合物的吸附力大于相對(duì)分子量小的化合物抗生素生產(chǎn)中應(yīng)用主要除雜質(zhì),）操作,靜態(tài)吸附動(dòng)態(tài)吸附。,）注意事項(xiàng),活性炭的選擇吸附與pH的關(guān)系。活性炭的用量吸附時(shí)間,、大孔吸附樹脂技術(shù),是20世紀(jì)60年代未在離子交換劑和其它吸附劑應(yīng)用的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新型樹脂。是一種具有多孔立體結(jié)構(gòu)，人工合成的有機(jī)高分子聚合物。是多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，巨大的比表面積使其具有良好的吸附性能。能吸附液體中的特質(zhì)，又稱為大孔吸附樹脂(macroporousabsorbingresin),大孔樹脂（MacroporousResin，MR）,、主要應(yīng)用,生物化學(xué)制品的凈化、分離、回收植物活性成份的純化如：皂苷、黃酮、內(nèi)酯、生物堿中藥復(fù)方精制及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定工業(yè)廢水、廢液的處理,、主要理化性質(zhì),性狀：白色、乳白色至微黃色顆粒粒度：2060目。穩(wěn)定性：不溶于水、酸、堿及有機(jī)溶劑，加熱不溶，可在150以下使用。含水量：4075%。,按其極性和所選用單體分子結(jié)構(gòu)的不同，可分為：1非極性吸附樹脂：為苯乙烯-二乙烯聚合物AmberliteXAD-4DiaionHP-20上海試劑廠的D101、D102、D401南開大學(xué)的D1、D2、D3、D42中等極性吸附樹脂：為聚丙烯酸酯型聚合物AmberliteXAD-6、XAD-7、XAD-83極性吸附樹脂：含硫氧、酰胺等基團(tuán)AmberliteXAD-9；南大化工廠的X-5、S-8天津試劑二廠的GDX-501、GDX-601等4強(qiáng)極性吸附樹脂：含氨基、吡啶、氧化氮等極性基因AmberliteXAD-11、AmberliteXAD-12、天津試劑二廠的GDX-402、GDX-403等,、類型,、制備,骨架類型：苯乙烯、丙烯酸酯、丙烯腈、異丁烯等致孔劑：甲苯、石蠟、溶劑汽油、煤油、碳醇、聚乙烯醇等交聯(lián)劑：二乙烯苯等分散劑：明膠等,、大孔樹脂優(yōu)缺點(diǎn),1.應(yīng)用范圍廣許多生物活性物質(zhì)對(duì)pH較為敏感，易受酸堿作用而失去活性，限制了離子交換法的應(yīng)用，而采用大孔吸附樹脂，既能選擇性吸附，又便于溶劑洗脫，整個(gè)過(guò)程pH不變；另外，可從存在有大量無(wú)機(jī)鹽的發(fā)酵液中分離提取抗菌素等物質(zhì)。理化性質(zhì)穩(wěn)定大孔樹脂穩(wěn)定性高，機(jī)械強(qiáng)度好，經(jīng)久耐用，且又避免了溶劑法對(duì)環(huán)境的污染和離子交換法對(duì)設(shè)備的腐蝕等不良影響。,3分離性能優(yōu)良大孔樹脂對(duì)有機(jī)物的選擇性良好，分離效能高，且脫色能力強(qiáng)，效果不亞于活性炭。4.使用方便大孔樹脂一般系小球狀，直徑在0.20.8mm之間，因此流體阻力小于粉狀活性炭，使用方便。5.溶劑用量少溶劑法是液液萃取，溶劑消耗大，回收較難，而大孔樹脂吸附法僅用少量溶劑洗脫即達(dá)到分離目的，不僅溶劑用量少，而且又避免了嚴(yán)重的乳化現(xiàn)象，提高了效率。,6.可重復(fù)使用，降低成本大孔吸附樹脂再生容易，一般用水、稀酸、稀堿或有機(jī)溶劑如低濃度乙醇、丙酮對(duì)樹脂進(jìn)行反復(fù)清洗，即可再生重復(fù)使用。7.確定大孔吸附樹脂價(jià)格較貴，吸附效果易受流速和溶質(zhì)濃度的影響；品種有限，不能滿足中藥多成分、多結(jié)構(gòu)的需求；操作較為復(fù)雜，對(duì)樹脂的技術(shù)要求較高。,、分離規(guī)律,分子量相似的成分極性越小，吸附能力越強(qiáng)，則越難洗脫下來(lái)；極性越大，吸附能力越弱，則越易洗脫下來(lái)。極性相似的成分分子量越大，越易洗脫下來(lái)。（分子篩原理）,73,藥液,水,洗脫劑,再生劑,分段收集,泵,檢測(cè)器/過(guò)程控制器,儲(chǔ)罐,、流程,樹脂預(yù)處理上樣吸附洗脫收集洗脫液回收、濃縮干燥成品,74,（）預(yù)處理,大孔樹脂,乙醇浸泡小時(shí),蒸餾水洗至無(wú)醇味,待用,（）裝柱,乙醇濕法裝柱,乙醇沖洗,蒸餾水洗乙醇,待用,乙醇洗脫液與水混合無(wú)白色渾濁,（）上樣,蒸餾水稀釋樣品,緩慢上樣,或濕樣品與樹脂混合烘干,（）洗脫,090乙醇梯度洗脫,濃縮,不同極性的流分,收集洗脫液,（）再生,一般用乙醇洗滌至流出液無(wú)色，如污染嚴(yán)重，也可用酸或堿進(jìn)行處理，最后乙醇和蒸餾水洗滌,、樹脂的強(qiáng)化再生,當(dāng)樹脂正常使用一段時(shí)間后，吸附能力下降或嚴(yán)重污染，需要進(jìn)行強(qiáng)化再生。,（）高濃度鹽酸浸泡、洗滌（）純水洗至中性（）高濃度氫氧化鈉浸泡、洗滌（）純水充分淋洗，直至中性,（）樹脂類型：極性、中性、非極性樹脂親脂性成分選用中性、非極性樹脂；苷類等極性大的成分選用極性樹脂（）氣泡：易產(chǎn)生。采用梯度洗脫可減少。（）再生：大孔樹脂再生效果好。但再生次數(shù)不是無(wú)限。標(biāo)準(zhǔn)：與新樹脂比較，吸附能力下降30%。,、注意事項(xiàng),、沉淀法定義：利用沉淀劑使抗生素在溶液中的溶解度降低而形成無(wú)定形固體沉淀的過(guò)程。、沉淀法的目的：通過(guò)沉淀達(dá)到濃縮的目的；沉淀方法可有選擇地沉淀雜質(zhì)或有選擇地沉淀所需成分，初步純化；將已純化的產(chǎn)品由液態(tài)變成固態(tài)，加以保存或進(jìn)一步處理。沉淀法是最古老的分離和純化生物物質(zhì)的方法，但目前在抗生素生產(chǎn)中的應(yīng)用不多，主要在四環(huán)素類。,一、概述,第四節(jié)、沉淀法提取抗生素,、沉淀法的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、濃縮倍數(shù)高缺點(diǎn)：針對(duì)復(fù)雜體系而言，分離度不高、選擇性不強(qiáng),沉淀操作常在發(fā)酵液經(jīng)過(guò)