凝血基礎(chǔ)知識(shí)ppt課件

.,臨檢部RD2282017.01.19,凝血基礎(chǔ)知識(shí),.,1,凝血概述,2,凝血項(xiàng)目簡介,3,凝血儀原理,4,5,6,4,凝血產(chǎn)品市場情況,4,.,凝血概述,1,.,血栓與止血,血栓和止血(thrombosisandhemostasis)是機(jī)體出血、血液凝固和血液凝固調(diào)節(jié)的動(dòng)態(tài)平衡過程。若止血、血液凝固活性增強(qiáng)或血液凝固調(diào)節(jié)機(jī)制活性減弱，將會(huì)導(dǎo)致血栓前狀態(tài)（Pre-thromboticstate）或血栓形成（thrombosis）；相反便會(huì)引起低凝狀態(tài)（hypocoagulability）或者出血傾向（hemorrhagictendency）。,.,止血過程,組織因子釋放凝血因子激活,.,出血疾病分類,組織因子釋放凝血因子激活,凝血以及纖溶異常,.,凝血瀑布流,纖維蛋白溶解,.,凝血項(xiàng)目,2,.,常用凝血項(xiàng)目,凝固法,膠乳免疫比濁,底物顯色法,磁珠法和散色法,透射法,反應(yīng)原理,檢測方法,具體項(xiàng)目,.,活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）,活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）：秒數(shù):32-43s，需與正常對(duì)照比較超過10s以上異常。APTT：主要反映內(nèi)源性凝血系統(tǒng)狀況，常用于監(jiān)測肝素用量。增高見于血漿因子、因子和因子XI水平減低：如血友病A、血友病B及因子XI缺乏癥；降低見于高凝狀態(tài)：如促凝物質(zhì)進(jìn)入血液及凝血因子的活性增高等情況。原理：APTT：在37下以白陶土為激活因子，以腦磷脂(部分凝血活酶)代替血小板提供凝血的催化表面，在Ca2+參與下，觀察乏血小板血漿凝固所需的時(shí)間。APTT是內(nèi)源性凝血系統(tǒng)較敏感和常用的篩選試驗(yàn)。,.,凝血酶原時(shí)間（PT）,凝血酶原時(shí)間（PT）：秒數(shù):11-14s，需與正常對(duì)照超過3s以上異常?；顒?dòng)度:80-120%INR:0.8-1.2。PT：主要反映外源性凝血系統(tǒng)狀況，其中INR常用于監(jiān)測口服抗凝劑。延長見于先天性凝血因子、缺乏及纖維蛋白原缺乏，后天凝血因子缺乏主要見于維生素K缺乏、嚴(yán)重的肝臟疾病、纖溶亢進(jìn)、DIC、口服抗凝劑等；縮短見于血液高凝狀態(tài)和血栓性疾病等。原理：PT：在待價(jià)血漿中加入過量的組織凝血活酶(重組/兔腦、人腦、胎盤、肺組織等浸出液)和Ca2+，使凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟?，后者使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白。,.,纖維蛋白原（FIB）：,纖維蛋白原（FIB）：2-4g/LFib：主要反映纖維蛋白原的含量。增高見于急性心肌梗死減低見于DIC消耗性低凝溶解期、原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎、肝硬化。原理：Fib：根據(jù)纖維蛋白原與凝血酶作用最終形成纖維蛋白的原理。以國際標(biāo)準(zhǔn)品為參比血漿制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，用凝血酶來測定血漿凝固時(shí)間，所得凝固時(shí)間與血漿中纖維蛋白原濃度呈負(fù)相關(guān)，從而得到纖維蛋白原的含量。,.,凝血酶時(shí)間（TT）,凝血酶時(shí)間（TT）：秒數(shù):13-18s，需與正常對(duì)照超過3s以上異常。TT：主要反映纖維蛋白原轉(zhuǎn)為纖維蛋白的時(shí)間。增高見于DIC纖溶亢進(jìn)期，低（無）纖維蛋白原血癥，異常血紅蛋白血癥，血中纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物（FDPs）增高；降低無臨床意義。原理：TT：待測血漿加入標(biāo)定的凝血酶溶液，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，測定凝固所需的時(shí)間，即為待測血漿凝血酶時(shí)間。,.,D-Dimer和FDP,FDP：纖維蛋白/纖維蛋白原降解產(chǎn)物(Fibrin/FibrinogenDegradationProducts）是在纖溶亢進(jìn)時(shí)產(chǎn)生的纖溶酶的作用下，纖維蛋白或纖維蛋白原被分解后產(chǎn)生的降解產(chǎn)物的總稱。主要原發(fā)性和繼發(fā)性纖維蛋白溶解活性增高時(shí)，血中纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物含量升高，可出現(xiàn)明顯的沉淀峰。纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物主要反映纖維蛋白溶解功能。D-Dimer：D-二聚體是纖維蛋白單體經(jīng)活化因子XIII交聯(lián)后，再經(jīng)纖溶酶水解所產(chǎn)生的一種特異性降解產(chǎn)物，是一個(gè)特異性的纖溶過程標(biāo)記物。D-二聚體來源于纖溶酶溶解的交聯(lián)纖維蛋白凝塊。增高或陽性見于繼發(fā)性纖維蛋白溶解功能亢進(jìn)，如高凝狀態(tài)、彌散性血管內(nèi)凝血、腎臟疾病、器官移植排斥反應(yīng)、溶栓治療等。DD和FDP用的膠乳免疫比濁方法，參數(shù)（波長，加樣量等）根據(jù)體系而定。,.,3,凝血儀原理,.,常規(guī)四項(xiàng)檢測原理,SysmexCA7000,CS5100，積水CP-2000等系列，雷杜,STAGOCOMPACT和R系列，普利生系列（邁瑞）,散色法,磁珠法,羅氏康固凝血儀,電化學(xué)法,.,散色法：SYSMEX為例,散射法：散射比濁法是根據(jù)待驗(yàn)樣品在凝固過程中散射光的變化來確定檢測終點(diǎn)。在該方法中檢測通道的單色光源與光探測器呈90直角，當(dāng)向樣品中加入凝血激活劑后,隨著樣品中纖維蛋白凝塊的形成過程，樣品的散射光強(qiáng)度逐步增加，儀器把這種光學(xué)變化描繪成凝固曲線，當(dāng)樣品完全凝固以后，散射光的強(qiáng)度不再變化。,123,凝固反應(yīng)進(jìn)行,凝固反應(yīng)進(jìn)行,光源,散色光,90,.,散色法：SYSMEX為例,當(dāng)測定含有干擾物（高脂血癥、黃疸和溶血）或低纖維蛋白原血癥的特殊樣本時(shí)，由于本底濁度的存在，其作為起始點(diǎn)0%的基線會(huì)隨之上移或下移，儀器在數(shù)據(jù)處理過程中用本底扣除的方法來減少了這類標(biāo)本對(duì)測定的影響。,通常是把凝固的起始點(diǎn)作為0%，凝固終點(diǎn)作為100%，把50%作為凝固時(shí)間。光探測器接收這一光的變化，將其轉(zhuǎn)化為電信號(hào)，經(jīng)過放大再被傳送到監(jiān)測器上進(jìn)行處理，描出凝固曲線。,.,磁珠法：STAGO為例,雙磁路磁珠法的測試原理如下：測試杯兩側(cè)的有一組驅(qū)動(dòng)線圈，它們產(chǎn)生恒定的交替電磁場，使測試杯內(nèi)特制的去磁小鋼珠保持等幅振蕩運(yùn)動(dòng)。凝血激活劑加入后，隨著纖維蛋白的產(chǎn)生增多，血漿的粘稠度增加，小鋼珠的運(yùn)動(dòng)振幅逐漸減弱，儀器根據(jù)另一組測量線圈感應(yīng)到小鋼珠運(yùn)動(dòng)的變化，當(dāng)運(yùn)動(dòng)幅度衰減到50%時(shí)確定凝固終點(diǎn)。雙磁路磁珠法進(jìn)行凝血測試，完全不受溶血、黃疸及高血脂癥的影響，甚至加樣中產(chǎn)生氣泡也不會(huì)影響測試結(jié)果。,電磁鐵,電磁鐵,.,電化學(xué)：羅氏康固凝血儀,原理：它是由組織凝血活酶和縮氨酸組成的干試帶。當(dāng)接觸到待測樣本時(shí)。凝血活酶發(fā)揮凝血作用產(chǎn)生凝血酶，與此同時(shí)監(jiān)測器開始計(jì)時(shí)。凝血酶再催化縮氨酸底物分解產(chǎn)生電信號(hào)，根據(jù)信號(hào)第一次出現(xiàn)所用的時(shí)間，經(jīng)過特定的運(yùn)算方法將電信號(hào)轉(zhuǎn)換成INR報(bào)告。小巧輕便，真正的手掌式儀器，指尖采血，簡便易用快速測試，約1分鐘得出結(jié)果機(jī)外滴血，以防交叉感染。儀器自檢，減少出錯(cuò)率。干擾因素少，確保結(jié)果精準(zhǔn)。,.,4,凝血產(chǎn)品市場情況,.,中國的血凝市場容量大約為27億元，外資企業(yè)在該領(lǐng)域具有絕對(duì)優(yōu)勢，預(yù)計(jì)占有其中90%以上的市場份額。相對(duì)于免疫的ARDS四大巨頭，血凝是WSS三大巨頭，分別為美國國家儀器實(shí)驗(yàn)室（IL，Werfen集團(tuán)）、日本希森美康（Sysmex集團(tuán)）、法國思塔高（Stago集團(tuán)），其他外資企業(yè)，如日本積水、德國BE等具有一小部分的市場份額。國內(nèi)企業(yè)市場份額較少，塞克希德，普利生（邁瑞集團(tuán)成員）及上海太陽，長島為其中的佼佼者。,市場情況,.,5,40,3,542,2,356,1.沃芬（Werfen)美國國家儀器實(shí)驗(yàn)室(InstrumentationLaboratory,IL)創(chuàng)建于1959年。1991年，IL公司被沃芬集團(tuán)全資收購。2012年之前，貝克曼庫爾特公司是美國國家儀器實(shí)驗(yàn)室的全球范圍合作伙伴，前者負(fù)責(zé)IL血凝產(chǎn)品在全球的推廣。沃芬中國成立于2003年，在2012年后從貝克曼手中收回IL血凝產(chǎn)品在中國的業(yè)務(wù)。IL血凝的優(yōu)勢在于其非常完整的產(chǎn)品線及廣泛專業(yè)的測試項(xiàng)目，在北方部分區(qū)域的中高端市場具有廣泛的客戶基礎(chǔ)。過去一年多時(shí)間，IL在全球范圍內(nèi)率先引進(jìn)針對(duì)血凝項(xiàng)目的化學(xué)發(fā)光分析儀及血凝流水線產(chǎn)品，業(yè)內(nèi)反響巨大。,.,5,40,3,542,2,356,2.希森美康（Sysmex）希森美康集團(tuán)創(chuàng)建于1968年，原名為日本東亞醫(yī)用電子株式會(huì)社。希森美康醫(yī)用電子（上海）有限公司于2000年成立，成立之后，利用產(chǎn)品的價(jià)格優(yōu)勢、強(qiáng)大的代理商渠道資源以及強(qiáng)勢的市場推廣，很快在國內(nèi)血球、尿液、血凝等IVD細(xì)分領(lǐng)域高速發(fā)展。Sysmex血凝在全球與西門子合作，主要的試劑項(xiàng)目均由西門子生產(chǎn)。Sysmex血凝產(chǎn)品銷售模式以代理商分銷為主，主要代理商包括威士達(dá)醫(yī)療設(shè)備（上海）有限公司及廣州的華鑫科技，分別代理高端血凝和低端血凝產(chǎn)品。Sysmex血凝利用其價(jià)格優(yōu)勢和渠道優(yōu)勢，在中國的西部、東南部占據(jù)非常高的市場份額,.,5,40,3,542,2,356,3.思塔高（Stago）思塔高創(chuàng)建于1945年，總部位于法國，起家于藥物分析，致力于血栓與止血研究50余年，擁有員工約2000人。Stago中國2003年在北京成立，是Stago全球除美國以外的第二個(gè)分公司。Stago進(jìn)入中國后，非常重視血凝產(chǎn)品與試劑項(xiàng)目的推廣，很早就與國內(nèi)外學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)與組織建立了聯(lián)系，在血凝領(lǐng)域內(nèi)獲得學(xué)術(shù)組織的廣泛認(rèn)可。相對(duì)于Werfen和Sysmex的光學(xué)方法，Stago采用機(jī)械法測試血凝，機(jī)械法也是其推廣的主要工具。Stago瞄準(zhǔn)高端市場，同時(shí)具有分銷及直銷模式，目前其在南方部分省市高端市場占有率較高。2015年底，Stago面向中小型實(shí)驗(yàn)室的專業(yè)血凝品牌Emoliz成功上市，隨后成為全領(lǐng)域、全覆蓋的血凝診斷專業(yè)領(lǐng)導(dǎo)者。,.,5,40,希森美康（Sysmex）產(chǎn)品,CS-5100(CS系列有流水線)CS1300/CS1600/CS2100i/CS2000i,CA-7000(CA系列)CA1500/CA500/CA600,.,2,356,希森美康（Sysmex）產(chǎn)品,質(zhì)控凝血3個(gè)水平/FDP/D-Dimer,標(biāo)準(zhǔn)血漿