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放射免疫分析Radioimmunoassay,一、原理：,Ag+AbAgAb+Ag+*Ag*AgAb+*Ag*Ag和Ab量恒定,競爭結(jié)合,+,+,+,+,6,8,X100=75%,X100=50%,X100=25%,X100=12.5%,8,4,8,2,8,1,結(jié)論,*AgAb復合物的量取決于Ag的量Ag量越大，*AgAb量越少Ag量越小，*AgAb量越大測量*AgAb量或測量多余*Ag量可推算出Ag量,二、測量步驟,恒量的*Ag、Ab加入反應管中加入待測樣品、或標準品（已知濃度）37或4溫育加入分離劑分離結(jié)合及游離部分測定以總放射性為分母，測定*AgAb為分子，計算結(jié)合%，以結(jié)合率為縱坐標，濃度為坐標，制作標準曲線待測樣品的結(jié)合率從標準曲線上求出濃度,0248163264128,8070605040302010,結(jié)合%,濃度,三、放免分析基本條件,標準品標記抗原特異抗體分離劑分離結(jié)合與游離部分,分離劑要求,快速而完全分離操作簡便、來源容易、價格便宜不受血清、外界條件及其它試劑的干擾適用于任何容積的反應液非特異結(jié)合率小,常用液相分離技術,雙抗體法特點：分離完全，非特異結(jié)合小，環(huán)境影響小，效價高，但成本高沉淀法聚乙二醇（w=6000）特點：快速，價廉，來源方便，受環(huán)境影響大,常用液相分離技術（續(xù)）,吸附法吸附游離部分，適用于分離小分子游離抗原。活性炭、纖維素粉末特點快速、簡便、準確性差鹽析法飽和硫酸胺、硫酸鈉固相分離技術，按材料不同，可分為試管法、顆粒法、小盤法、紙片法,四、放免分析的優(yōu)點,靈敏度高特異性強精確度高用血量少體外測量,單位換算,1g=1000mg1mg=1000g1g=1000ng1ng=1000pg,非放射性體外分析技術,非同位素標記的條件,靈敏度結(jié)合特性均一性穩(wěn)定性環(huán)境因素的不敏感性臨床應用安全性應用性,非放射性體外分析技術,酶免疫分析發(fā)光免疫分析化學發(fā)光免疫分析酶放大化學發(fā)光免疫分析電化學放光免疫分析熒光免疫分析時間分辨熒光免疫分析或解離增強鑭系熒光免疫分析BCPDA強熒光螯合物的時

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