（醫(yī)學(xué)課件）尿蛋白檢驗(yàn)

尿液化學(xué)檢查 尿蛋白的檢驗(yàn) 1 尿液化學(xué)檢查 尿液化學(xué)檢驗(yàn)包括酸堿度 蛋白質(zhì) 糖 酮體 膽色素 酶 激素等檢查pH PRO GLU KET BIL URO 2 本節(jié)要點(diǎn) 了解尿液特殊化學(xué)檢驗(yàn)的項(xiàng)目方法及臨床意義掌握尿液一般化學(xué)檢驗(yàn)的原理重點(diǎn)掌握尿液一般化學(xué)檢驗(yàn)中蛋白 糖 酮體及三膽等的注意事項(xiàng)及臨床意義 3 尿液蛋白質(zhì) 4 尿液蛋白質(zhì)檢查 健康人尿中的蛋白質(zhì)含量甚微 30 130mg 24h 當(dāng)尿液中蛋白質(zhì) 100mg L或150mg 24h時 蛋白定性為陽性 稱為蛋白尿 5 尿蛋白定性檢測方法 加熱乙酸法磺基水楊酸法干化學(xué)試帶法 6 干化學(xué)法 指示劑蛋白質(zhì)誤差原理 1909年Soerensen發(fā)現(xiàn)成分主要酸堿指示劑溴酚藍(lán) 閾值 2 檸檬酸緩沖系統(tǒng)表面活性劑1971年日本生產(chǎn)對白蛋白 球蛋白 本周氏蛋白均反應(yīng)1993年生產(chǎn)出免疫學(xué)方法 7 干化學(xué)法 指示劑蛋白質(zhì)誤差原理 1909年Soerensen發(fā)現(xiàn) 3 3 5 5 四溴苯酚磺酰酞 8 尿蛋白試劑帶組成及特性 9 試帶法檢測尿蛋白的干擾因素 僅作為過篩實(shí)驗(yàn) 10 不同 對尿蛋白的影響 11 青霉素對蛋白質(zhì)測定影響 12 大劑量青霉素滴注后對試帶法測定尿蛋白的影響 h后檢測尿蛋白 13 加熱醋酸法測定尿蛋白 加熱可使蛋白質(zhì)變性凝固 加酸使蛋白質(zhì)接近等電點(diǎn) 在含有適量無機(jī)鹽的情況下 蛋白沉淀 14 標(biāo)本要新鮮 陳舊尿液因大量細(xì)菌生長可引起假陽性 其他分泌物也可能出現(xiàn)假陽性加酸過多或過少遠(yuǎn)離蛋白質(zhì)等電點(diǎn) 可呈假陰性無鹽或低鹽飲食的病人 因尿內(nèi)電解質(zhì)含量少 不利蛋白質(zhì)沉淀 可致假陰性 可先加 滴飽和氯化鈉液后再操作嚴(yán)格按照加熱 加酸 再加熱程序 否則假陰性 加熱乙酸法 注意事項(xiàng) 15 磺基水楊酸法 試管法玻片法 16 磺基水楊酸法 干擾因素 假陽性尿液混濁含有大量尿酸 尿酸鹽 草酸鹽一些藥物如大劑量青霉素 含碘造影劑 降血糖藥可呈假陽性混入生殖系統(tǒng)分泌物假陰性尿液過堿 PH 9 或過酸 PH 3 17 大劑量青霉素滴注后對磺基水楊酸法測定尿蛋白的影響 18 尿蛋白定性實(shí)驗(yàn)方法學(xué)評價(jià) 在疾病發(fā)展過程中需要系統(tǒng)觀察尿蛋白含量的 建議使用磺基水楊酸 加熱醋酸 和雙縮尿法 對單純球蛋白有特殊反應(yīng) 19 尿液蛋白質(zhì)的定量檢驗(yàn) 比濁法 磺基水楊酸三氯乙酸鎢酸氯化芐甲乙氧胺氯化苯甲烴胺 雙縮脲法 經(jīng)典方法 通過加酸于尿液中使蛋白質(zhì)沉淀而形成一定的濁度 堿性環(huán)境下 蛋白質(zhì)與季胺鹽結(jié)合形成不溶性沉淀 染料結(jié)合法 直接法 考馬斯亮藍(lán)G 250鄰苯三酚紅 染料和蛋白質(zhì)結(jié)合時 其最大吸收峰發(fā)生漂移 沉淀法 麗春紅S苯胺藍(lán) 蛋白質(zhì)與結(jié)合的染料在TCA的作用下共沉淀 然后堿性環(huán)境使沉淀復(fù)溶 測定吸光度 20 免疫法電泳法 21 尿液蛋白質(zhì)定量檢驗(yàn)方法評價(jià) 22 臨床意義 定性試驗(yàn) 定量試驗(yàn) 150mg 24h 100mg L 23 臨床意義 生理性蛋白尿功能性蛋白尿直立性蛋白尿攝入性蛋白尿老年性蛋白尿妊娠性蛋白尿 24 臨床意義 病理性蛋白尿腎前性蛋白尿腎性蛋白尿腎小球性蛋白尿腎小管性蛋白尿腎后蛋白尿 25 臨床意義 腎前性蛋白尿 溢出性蛋白尿血液中低分子量蛋白質(zhì)如血紅蛋白 肌紅蛋白 本周氏蛋白等增加超出腎小管重吸收能力 26 臨床意義 腎性蛋白尿腎小球性蛋白尿選擇性蛋白尿非選擇性蛋白尿腎小管性蛋白尿混合性蛋白尿 27 腎小球性蛋白尿 選擇性蛋白尿4 9萬中分子量蛋白 以清蛋白為主可見分子量接近的AT Tf PA 1 AG 1 AT以及低分子量蛋白 2 M FC片段等不見分子量大的蛋白如IgG IgA IgM C3尿免疫球蛋白 清蛋白的比值3 5g L主要見于腎病綜合癥 28 腎小球性蛋白尿 非選擇性蛋白尿可見 9萬的蛋白如IgG IgA IgM C3和中分子量以及小分子量蛋白 2 MG免疫球蛋白 清蛋白比值 0 5尿蛋白 定量0 5 3g L 多見于原發(fā)性腎小球疾病 激進(jìn)性腎炎 慢性腎炎 膜性或膜增生性腎炎繼發(fā)性腎小球腎炎 糖尿病 紅斑狼瘡提示預(yù)后差 29 腎小管性蛋白尿 尿中蛋白以 1 M 2 M LZM RNase增多為主 清蛋白正常或輕度增多尿蛋白 定量 2g L試帶法可出現(xiàn)假陰性 其他方法陽性 30 腎小管性蛋白尿 腎小管間質(zhì)病變間質(zhì)性腎炎 腎盂腎炎 遺傳性腎小管疾病 慢性失鉀性腎病中毒性腎間質(zhì)性腎病重金屬中毒 苯 四氯化碳有機(jī)溶劑抗生素中草藥 馬兜鈴 木通c 器官移植 馬兜鈴 31 混合性蛋白尿 腎臟病變累及腎小球和腎小管 由此產(chǎn)生的蛋白尿稱為混合性蛋白尿標(biāo)題1非選擇性腎小球性蛋白尿伴游離輕鏈 2腎小管性蛋白尿伴游離輕鏈3生理性蛋白尿4混合性蛋白尿5選擇性腎小球性蛋白尿 圖1SDS PAGE電泳圖譜 32 腎后蛋白尿 組織性蛋白尿在尿液代謝過程中 腎