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課題2月季的花藥培養(yǎng) 一 課題目標(biāo) 說(shuō)出被子植物花粉發(fā)育的過(guò)程及花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑 說(shuō)出影響花藥培養(yǎng)的因素 學(xué)習(xí)花藥培養(yǎng)的基本技術(shù) 嘗試用月季或其他植物的花藥進(jìn)行培養(yǎng) 二 課題重點(diǎn)和難點(diǎn) 選取適宜的培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基 三 技能目標(biāo) 知道被子植物花粉發(fā)育的過(guò)程 說(shuō)出產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑 記住影響花藥培養(yǎng)的因素 嘗試花藥培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程 并進(jìn)行無(wú)菌操作 知道花藥培養(yǎng)在育種上的意義 一 自學(xué)導(dǎo)引 閱讀課本p37 p40 完成 優(yōu)化設(shè)計(jì) 的自學(xué)導(dǎo)引 1 基礎(chǔ)知識(shí) 被子植物的花粉發(fā)育 1 雄蕊由花絲和花藥兩部分組成 花藥是雄蕊的主要部分 多數(shù)被子植物的花藥由4個(gè)花粉囊組成 花粉囊外由囊壁包圍 內(nèi)生許多花粉粒 當(dāng)花粉囊的壁組織逐步發(fā)育分化時(shí) 會(huì)形成大量的花粉母細(xì)胞 小孢子母細(xì)胞 2 花粉粒是由花粉母細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂而形成 因此 花粉粒是單倍體的生殖細(xì)胞 花粉的發(fā)育要經(jīng)歷四分體時(shí)期 單核期和雙核期等階段 實(shí)例一 關(guān)于被子植物花粉發(fā)育的說(shuō)法 不正確的是 a 花粉粒是在花藥中的花粉囊里形成的b 被子植物精子的形成是直接減數(shù)分裂的結(jié)果c 被子植物的花粉的發(fā)育要經(jīng)歷四分體時(shí)期 單核期 雙核期等階段d 花粉粒在發(fā)育過(guò)程中 核先位于細(xì)胞一側(cè) 再移到細(xì)胞中央 注 花粉母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成4個(gè)單核花粉粒 每個(gè)花粉粒的細(xì)胞核進(jìn)行一次有絲分裂形成1個(gè)花粉管細(xì)胞核和1個(gè)生殖細(xì)胞核 每個(gè)生殖細(xì)胞核再進(jìn)行一次有絲分裂生成2個(gè)精子 bd 基礎(chǔ)知識(shí) 產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑 途徑一 花粉通過(guò)胚狀體階段發(fā)育為植株 途徑二 花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成愈傷組織 再將其誘導(dǎo)分化成植株 人工種子是由外植體通過(guò)組織培養(yǎng)而獲得的胚狀體 然后加上人造胚乳 人造種皮而制成 外植體進(jìn)行的是有絲分裂 無(wú)須通過(guò)兩性生殖細(xì)胞結(jié)合而發(fā)育成的個(gè)體 屬于無(wú)性生殖 基礎(chǔ)知識(shí) 影響花藥培養(yǎng)的因素 1 主要的影響因素 材料的選擇與培養(yǎng)基的組成 1 接種的花藥時(shí)期 一般來(lái)說(shuō) 在單核期 細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)時(shí) 花藥培養(yǎng)成功率最高 選擇完全未開(kāi)放的花蕾 可挑選到單核期的花藥 菌少 易消毒 花瓣松動(dòng) 菌多 消毒困難 2 此外 親本植株的生長(zhǎng)條件 材料的低溫預(yù)處理以及接種密度對(duì)誘導(dǎo)成功率都有一定的影響 一 材料的選取1 選擇花藥一般通過(guò)鏡檢來(lái)確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期 2 確定花粉發(fā)育時(shí)期最常用方法 醋酸洋紅法 焙花青 鉻礬法 注 花粉細(xì)胞核內(nèi)有染色體 染色體主要由dna和蛋白質(zhì)組成 醋酸洋紅為堿性染色劑 染色體容易被染色 通過(guò)染色 可以確定細(xì)胞核為單核期還是雙核期 是單核居中期還是單核靠邊期 一般單核靠邊期的花藥培養(yǎng)成功率最高 實(shí)驗(yàn)操作 二 材料的消毒三 接種和培養(yǎng)四 結(jié)果分析與評(píng)價(jià)1 能夠通過(guò)鏡檢找到處于適宜的發(fā)育期的花粉 用醋酸洋紅法或焙花青 鉻礬法檢測(cè)單核靠邊期的花粉粒 2 花藥出現(xiàn)污染的原因 1 消毒不徹底 2 接種室污染 3 人為因素的交叉污染等 3 略 課后習(xí)題 1 f2代紫色甜玉米的基因型組成可能為aasusu或aasusu 如果運(yùn)用常規(guī)育種方法 將f2代中的紫色甜玉米與白色甜玉米 aasusu 進(jìn)行測(cè)交 可以選擇出基因型為aasusu純種紫色甜玉米 但這種方法比較繁瑣 耗時(shí)較長(zhǎng) 需要至少三年的選種和育種時(shí)間 如果利用花藥離體培養(yǎng)的技術(shù) 在f1代產(chǎn)生的花粉中就可能有asu的配子組合 再將花粉植株進(jìn)行秋水仙素處理 使染色體加倍 就可以直接得到紫色甜玉米的純合體 aasusu 這種方法可以大大縮短育種周期 2 植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的相同之處是 培養(yǎng)基配制方法 無(wú)菌技術(shù)及接種操作等基本相同 兩者不同之處在于 花藥培養(yǎng)的選材非常重要 需事先摸索時(shí)期適宜的花蕾
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