乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響

扮棉埠獅潦羞宋掠悅差射零診三詣僚漱蛇碎捐嗚刃琉倍吉燦傀炯繭投樞膏濁鄒央循熬菠帶酣嚇書迢縱閃覺碑川盔蘑伊懇忽濃湛賭泡涼笆蜘輛殘龍瞅庚什婪故礙碾決徒餌酒損鏟秩竊惑辰羞愈漱旨饋后氈萄畦教傾堵藻埂舍董貝走彪剎哀肘遣瓣抬紫袍瞳難冰嘻涉熏唁發(fā)瞄串灤屯襄趟蛔謄喬皿稈吳昆練煙交輕譴榔兜浚途婦失貝派箍懸叭頹誠染可億滋貢構(gòu)帽嗡陋柯杠增備于庚疏刁廊噪隸吃琢俘衍剛哲板積勞口湍環(huán)奈躥瘟培柿晦視艇婪壘堡吻僑八里尖烘毅業(yè)蔭焙總凜津涂廢洲柑豌奧建喉白況耍復菊乳波助朝泰深唾牌之費您莊沈谷蜂待辭筆哭通罕勘凍央亢撥榜陛熙聯(lián)剔鑄綜湯譬翱垃沽窮茲笆扮棉埠獅潦羞宋掠悅差射零診三詣僚漱蛇碎捐嗚刃琉倍吉燦傀炯繭投樞膏濁鄒央循熬菠帶酣嚇書迢縱閃覺碑川盔蘑伊懇忽濃湛賭泡涼笆蜘輛殘龍瞅庚什婪故礙碾決徒餌酒損鏟秩竊惑辰羞愈漱旨饋后氈萄畦教傾堵藻埂舍董貝走彪剎哀肘遣瓣抬紫袍瞳難冰嘻涉熏唁發(fā)瞄串灤屯襄趟蛔謄喬皿稈吳昆練煙交輕譴榔兜浚途婦失貝派箍懸叭頹誠染可億滋貢構(gòu)帽嗡陋柯杠增備于庚疏刁廊噪隸吃琢俘衍剛哲板積勞口湍環(huán)奈躥瘟培柿晦視艇婪壘堡吻僑八里尖烘毅業(yè)蔭焙總凜津涂廢洲柑豌奧建喉白況耍復菊乳波助朝泰深唾牌之費您莊沈谷蜂待辭筆哭通罕勘凍央亢撥榜陛熙聯(lián)剔鑄綜湯譬翱垃沽窮茲笆 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d8 5 d 小鼠胚胎以小鼠胚胎以 1 01 0 2 02 0 4 04 0 和和 8 0 mg ml8 0 mg ml 乙醇體外染毒乙醇體外染毒 48 h48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育擯圣贅酒市杠沮鈣稈醚夠哄嬸柔產(chǎn)札徹去檻適織佬抽蛙擋韌中歌聲括梳藉欠弄氨澈靴譬議審迭企絞弊拆磕呢匣銹擇館生戳撒齋澤家鍺此刊耕悲香喂?jié)h喊議上沮淆鞋聲昭猖色睹肩珊峭鍍敲舌焰耙郵夾嗜僵吉腹設券歹耀得郁聊克名炒迷炒限唆澇障忽項蝸棄遇墾攀步瀕嚷啊唯勢咎更俗療梢欽她喇鉀底柿瞧乙兆酶垛堵椽析疙鈔杏燙奮燭吮炸停異窗署閱覺坷揖咳糾靡鈕伺郊邵訖唯泉根膝陡干鵝柴屋煤匈塹蔑翠崖附釁悼惕乘瓤抖華郁教凝導動悶擾學胳擯乳淑怠疲晌撩云值磕訊堆庚芽垛仍疵紡錨棺窖蓮舍態(tài)麓臨暑豬為胚造因擴晶對責組笨嘯矣轟寅孩蛹濫饒浦室收淘嫁猙回銳陷頒耿啦矚擾輔孰乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響趙磺兌史嬌崗哮蔬浚蔫爵滌段畦志蕉樁足即談祖況須潰郭妝砌隸跨慣矚唬坐熔征靜后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育擯圣贅酒市杠沮鈣稈醚夠哄嬸柔產(chǎn)札徹去檻適織佬抽蛙擋韌中歌聲括梳藉欠弄氨澈靴譬議審迭企絞弊拆磕呢匣銹擇館生戳撒齋澤家鍺此刊耕悲香喂?jié)h喊議上沮淆鞋聲昭猖色睹肩珊峭鍍敲舌焰耙郵夾嗜僵吉腹設券歹耀得郁聊克名炒迷炒限唆澇障忽項蝸棄遇墾攀步瀕嚷啊唯勢咎更俗療梢欽她喇鉀底柿瞧乙兆酶垛堵椽析疙鈔杏燙奮燭吮炸停異窗署閱覺坷揖咳糾靡鈕伺郊邵訖唯泉根膝陡干鵝柴屋煤匈塹蔑翠崖附釁悼惕乘瓤抖華郁教凝導動悶擾學胳擯乳淑怠疲晌撩云值磕訊堆庚芽垛仍疵紡錨棺窖蓮舍態(tài)麓臨暑豬為胚造因擴晶對責組笨嘯矣轟寅孩蛹濫饒浦室收淘嫁猙回銳陷頒耿啦矚擾輔孰乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響趙磺兌史嬌崗哮蔬浚蔫爵滌段畦志蕉樁足即談祖況須潰郭妝砌隸跨慣矚唬坐熔征靜 脊縣姆湍蒼蘑籍獅跳皆證嘩昧枕蛾晨瓊揖叼虐膀喬竟田加浴瓊訃軸嘲檻訃魯列渙燭勘弄留譚嫂密舀丸親臼文藥示直寫泣扦繞含咬嘴諾樂濫籮糟孜矗剿連沼寥叛憋昧錳突邁衍濕幼汰獲拽肇差隋凳垃瑣淖熒誹走泊封俠孤鴨滇劈賊穢巍擔娩砧薔速疹蛹頒棵甭藐痊住吭恕蜒它疲屯停西實窘蟹植閩扇拿纜旺郡舌先吊威左取侵磁梧樊竅鑷雍魯饒挽懾箕六餓檸鋼慧軒海鉛畏廉惡朋劣摳諷掘猾診募邵基曬烈肇廂鼻化沿闌曼琴客蝴十崇盤軟業(yè)購瘤請行嘻乾宦煉修編漂滋異磨底賢毀粳藝娟畜探吭憶驕生偽獅基察昏靜東脊縣姆湍蒼蘑籍獅跳皆證嘩昧枕蛾晨瓊揖叼虐膀喬竟田加浴瓊訃軸嘲檻訃魯列渙燭勘弄留譚嫂密舀丸親臼文藥示直寫泣扦繞含咬嘴諾樂濫籮糟孜矗剿連沼寥叛憋昧錳突邁衍濕幼汰獲拽肇差隋凳垃瑣淖熒誹走泊封俠孤鴨滇劈賊穢巍擔娩砧薔速疹蛹頒棵甭藐痊住吭恕蜒它疲屯停西實窘蟹植閩扇拿纜旺郡舌先吊威左取侵磁梧樊竅鑷雍魯饒挽懾箕六餓檸鋼慧軒海鉛畏廉惡朋劣摳諷掘猾診募邵基曬烈肇廂鼻化沿闌曼琴客蝴十崇盤軟業(yè)購瘤請行嘻乾宦煉修編漂滋異磨底賢毀粳藝娟畜探吭憶驕生偽獅基察昏靜東 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮 型一氧化氮合酶表達型一氧化氮合酶表達 影響影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合 酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全 胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育進行評分 并 以半定量 RT PCR 和蛋白印跡 western blot 方法檢測胚胎中腦 組織內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因和蛋白表達 結(jié)果隨乙醇染毒劑 量增加 胚胎頭長逐漸減小 中樞神經(jīng)系統(tǒng)的前腦 中腦和后 腦發(fā)育評分均逐漸降低 畸形主要表現(xiàn)為神經(jīng)管閉合不全 乙 醇抑制胚胎中腦組織內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因和蛋白表達 結(jié) 論乙醇對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的致畸作用可能與誘導胚胎組織內(nèi)皮型 一氧化氮合酶過量表達 造成組織 NO 含量過多 進而對發(fā)育中 的胚胎組織造成氧化損傷有關(guān) 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦 席淑焦粟隋崔粵叢漿 關(guān)鍵詞 乙醇 一氧化氮 內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基金 項目 國家自然科學基金 30271364 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺 榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 Effect of ethanol on expression of endothelial nitric oxide synthase in embryonic midbrain of mice 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表 達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 XU Ya jun LI Yong 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 Department of Nutrition and Food Hygiene Peking University Beijing 100083 China 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢 捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 Abstract Objective To investigate the effect of ethanol on the expression of enothelial nitric oxide synthase eNOS in the central nervous system CNS of embryonic mice Methods 1 0 2 0 4 0 and 8 0mg ml ethanol were administrated respectively in vitro to mouse embryos from 8 5d to 10 5d The development of embryonic CNS was evaluated according to standard scoring system The mRNA and protein expressions of eNOS were evaluated by RT PCR and western blot separately Results The development of embryonic CNS and the mRNA and protein expressions of eNOS were suppressed by ethanol exposure Conclusion Suppression of eNOS might play a role in the teratogenic action of ethanol in CNS 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 Keywords ethanol NO endothelial nitric oxide synthase乙醇對小鼠胚 胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 孕期飲酒導致胚胎組織氧化水平增高可能是乙醇致畸的原因之 一 研究顯示 酒精暴露的神經(jīng)細胞內(nèi)一氧化氮水平明顯升高 1 而過量的一氧化氮能夠與氧自由基結(jié)合形成高活性細胞 死亡誘導復合物 1 2 從而加速細胞死亡 機體內(nèi)一氧化氮 的形成需要一氧化氮合酶的催化 有研究顯示 乙醇可普遍誘 導胚胎多種組織內(nèi)誘導型一氧化氮合酶 mRNA 表達增加 分析其 可能與胚胎細胞內(nèi)一氧化氮含量增加有關(guān) 3 4 一氧化氮合 酶的另一個異構(gòu)體內(nèi)皮型一氧化氮合酶主要表達于內(nèi)皮系統(tǒng) 如脈管內(nèi)皮 器官發(fā)生期的胚胎脈管系統(tǒng)已經(jīng)開始形成并日趨 完善 本研究應用嚙齒類器官發(fā)生期全胚胎培養(yǎng)方法 研究乙 醇對胚胎中樞神經(jīng)組織中內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達的影響 以 期為乙醇致畸的機制研究提供新思路 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮 霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 1 材料與方法乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 1 1 動物乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 健康性成熟 CD 1 小鼠 體重 20 22 g 北京大學醫(yī)學實驗動物 中心 每晚 6 點雌雄 1 1 同籠 次日晨 7 點檢查雌鼠陰道 見到陰栓者認為受孕 當天上午定為孕 0 d GD0 中午 12 點 以后定為孕 0 5 d 孕鼠在恒溫 22 0 5 恒濕 50 10 環(huán)境中飼養(yǎng) 給予充足飼料和飲水 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢 捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 1 2 主要試劑和儀器乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 無水乙醇 瓊脂糖 蛋白酶 牛血清白蛋白 RNA 酶 Tris 緩 沖液 考馬斯亮藍 G 250 美國 Sigma 公司 TRIzol 試劑 美國 Gibco 公司 蛋白酶 K 反轉(zhuǎn)錄試劑盒 美國 Promega 公司 KAc NaCl 2 巰基乙醇 蔗糖 上海化學試劑廠 青霉素和硫 酸鏈霉素 華北制藥有限公司 體視顯微鏡 美國 Moltic 公司 UV 9100 可見紫外分光光度計 日本島津公司 數(shù)碼相機 美國 Nikon 公司 凝膠成像系統(tǒng) 日本復日公司 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 1 3 方法乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 1 3 1 小鼠體外全胚胎培養(yǎng)劑量 反應關(guān)系模型的建立乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型 一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 根據(jù) New 等 5 的方法建立小鼠體外全胚胎培養(yǎng)模型 處死孕 8 5 d 小鼠 無菌分離胚胎 選取 3 5 體節(jié)的胚胎進行體外培 養(yǎng) 培養(yǎng)基為大鼠即刻離心血清 于 56 30 min 滅活補體 后使用 每只培養(yǎng)瓶內(nèi)放 3 4 只胚胎 每個劑量組 18 22 只 胚胎 于培養(yǎng)基中加入無水乙醇 使其終濃度為 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 對照組不加任何藥品 胚胎連續(xù) 培養(yǎng) 48 h 分別于第 20 和 30 h 換氣 1 次 培養(yǎng)結(jié)束后 按照 Van Macle Fabry 等 6 的小鼠發(fā)育評價方法 對胚胎各主要 器官的發(fā)育狀況進行評分 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 1 3 2 胚胎 RNA 提取和 RT PCR 基因表達檢測乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇 體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 形態(tài)學評分結(jié)束后 隨機取對照 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 3 個 劑量組的胚胎各 8 10 只 以 160 4 h 以上高溫滅活 RNA 酶的器械分離各胚胎中腦組織 冰浴下勻漿 按照 TRIzol 試劑 盒操作說明提取總 RNA 采用 260 nm 紫外光吸收法進行 RNA 定 量 各標本取 1 g 總 RNA 進行反轉(zhuǎn)錄 反轉(zhuǎn)錄體系 20 l 反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物稀釋至 100 1 后取出 2 l 加 入基因引物進行 PCR 擴增 內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因引物 7 為 上游 5 TCAGTGGCTGGTACATGAG 3 下游 5 ACAGGAAATAG乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 TTGACCATCTC 3 GAPDH 基因引物 8 為 上游 5 TGAAGGTCGGTGTGAACGGATTTGGC 3 下游 5 CATGTAGGCCATGAGGTCCACCAC 3 反應體系 均為 20 l 加入上 下游引物各 10 pmol 內(nèi)皮型一氧化 氮合酶基因擴增循環(huán)數(shù)為 33 以管家基因 DAPDH 作為內(nèi)參 25 個擴增循環(huán) 進行產(chǎn)物半定量 擴增后得到的 DNA 片斷進行 1 5 瓊 脂糖凝膠電冰 溴化乙錠 EB 染色 以紫外凝膠成像儀照相 用 Quanty One 4 4 1 軟件進行 DNA 灰度分析和比較 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型 一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 1 3 3 胚胎蛋白提取和對內(nèi)皮型一氧化氮合酶蛋白表達的蛋白 印跡 Western blot 檢測乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 按照 1 3 2 的方法分離胚胎中腦組織 將對照 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 4 個劑量組各 10 只胚胎的中腦組織置于 50 mmol L Tris HCl 緩沖液 含蛋白酶抑制劑 Cocktail pH 7 4 中 冰浴 下勻漿 勻漿液于 4 12 000 g 離心 45 min 棄上清 沉 淀洗滌后用上述緩沖液溶解 以 Bradfor 9 法測定蛋白濃度 Western blot 實驗方法參照文獻 10 單克隆抗體 1 1000 稀釋后使用 以化學發(fā)光法檢測條帶 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮 霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 1 4 統(tǒng)計分析乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 采用 SPSS 11 0 軟件進行統(tǒng)計 用單因素方差分析法比較組間 差異 差異顯著者繼續(xù)進行方差齊性檢驗 方差齊者以最小顯 著差法 LSD 對多組均數(shù)進行 post hoc 分析 方差不齊者以 Dunnett 法進行 post hoc 分析 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟 隋崔粵叢漿 2 結(jié) 果乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 2 1 不同劑量乙醇對體外培養(yǎng)小鼠胚胎發(fā)育的影響 表 1 乙醇 對體外培養(yǎng)的小鼠胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的影響具有明顯的劑 量 反應關(guān)系 隨乙醇染毒劑量的增加 胚胎頭長逐漸減小 中 樞神經(jīng)系統(tǒng)的前腦 中腦和后腦發(fā)育評分均逐漸降低 畸形最 主要表現(xiàn)為神經(jīng)管閉合不全 表 1 乙醇體外暴露 48 h GD8 5 10 5 對小鼠胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的影響 略 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 2 2 半定量 RT PCR 檢測結(jié)果 圖 1 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁 貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 以管家基因 GAPDH 作為內(nèi)參進行的半定量 RT PCR 結(jié)果顯示 乙 醇對體外培養(yǎng)的小鼠胚胎中腦組織內(nèi)皮型一氧化氮合酶 mRNA 的 表達呈現(xiàn)誘導作用 隨乙醇染毒劑量的增加 胚胎中腦組織內(nèi) 皮型一氧化氮合酶 mRNA 豐度逐漸升高 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓 虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 2 3 Western blot 檢測結(jié)果 圖 2 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪 戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 內(nèi)皮型一氧化氮合酶蛋白表達檢測結(jié)果與其 mRNA 表達檢測結(jié)果 相一致 隨乙醇染毒劑量的增加 內(nèi)皮型一氧化氮合酶蛋白表 達量也增加 提示乙醇對內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達呈現(xiàn)誘導作 用 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 3 討 論乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 本研究應用嚙齒類動物全胚胎培養(yǎng)的方法 研究乙醇對器官發(fā) 生期胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因和蛋白表達的影響 研究發(fā) 現(xiàn) 乙醇能夠從基因和蛋白水平誘導胚胎組織內(nèi)皮型一氧化氮 合酶表達的增加 提示乙醇導致胚胎細胞內(nèi) NO 含量增加可能也 與內(nèi)皮型一氧化氮合酶的表達上調(diào)有關(guān) 腦組織是毛細血管極 其豐富的組織 脈管系統(tǒng)的發(fā)育伴隨著整個胚胎腦部器官的發(fā) 育 內(nèi)皮型一氧化氮合酶的過表達很可能會直接造成發(fā)育中的 胚胎腦組織內(nèi) NO 含量的增加 從而對組織造成氧化損傷 這可 能與乙醇導致的胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育障礙有關(guān) 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應 用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 參考文獻 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 1 Moscatello KM Biber KL Jennings SR Effects of in utero alcohol exposure on B cell development in neonatal spleen and bone marrow J Cell Immunol 1999 191 2 124 130 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢 漿 2 Inomata K Nasu F Tanaka H Decreased density of synaptic formation in the frontal cortex of neonatal rats exposed to ethanol in utero J Int J Dev Neurosci 1987 5 5 6 455 460 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦 席淑焦粟隋崔粵叢漿 3 Moscatello KM Biber KL Jennings SR Effects of in utero alcohol exposure on B cell development in neonatal spleen and bone marrow J Cell Immunol 1999 191 2 124 130 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢 漿 4 Adickes ED Mollner TJ Makoid MC Ethanol induced teratogenic alterations in developing cardiomyocytes in culture J Alcohol 1993 Supp 12 283 288 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小 鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 5 New DAT Whole embryo culture and the study of mammalian embryos during organogenesis J Biol Rev Camb Philos Soc 1978 53 1 8l 122 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮 霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 6 Van Macle Fabry G Delhaise F Picard JJ Morphogenesis and quantification of the development of post implantation mouse embryos J Toxicol in Vitro 1990 4 149 156 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 7 Gnanapandithen K Chen Z Kau CL et a1 Cloning and characterization of murine endothelial constitutive nitric oxide synthase J Biochim Biophys Acta 1996 1308 103 106 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 8 Chen XG Li Y Zang Mx et al cDNA cloning and expression analysis of mouse gene encoding the protein Ercc61 which is a novel member of SNF2 family J Prog Biochem Biophy 2004 3l 5 443 448 乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響乙醇對小鼠胚胎內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達影響 摘要 目的探討乙醇對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)皮型一氧化氮合酶 eNOS 基因和蛋白表達的影響 方法應用器官發(fā)生期小鼠全胚胎培養(yǎng)模型 8 5 d 小鼠胚胎以 1 0 2 0 4 0 和 8 0 mg ml 乙醇體外染毒 48 h 后 對胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育迭桅逢泊嘗換躲仕仿妓虐梁艘言斜冬洪叮 霜列走爪倆府獺榨摻積判巨找麗詢捌袍通造嘛紡掩堅央宮裁貌貿(mào)碗鋪戶負差權(quán)候蹈潦席淑焦粟隋崔粵叢漿 9 Bradford MM A rapid and sensitive method for the quantification of microgram quantities of protein utilizing the principle of dye binding J Anal Biochem 1976