FQPCR技術與兒科感染性疾病0.ppt

FQ PCR技術與兒科感染性疾病 中山大學達安基因股份有限公司 市場部裴媛媛 達生命之源安健康之本 主要內容 PCR的發(fā)明人 加理 莫理斯 KaryB Mullis 達生命之源安健康之本 聚合酶鏈式反應PCR polymerasechainreaction 達生命之源安健康之本 達生命之源安健康之本 PCR動力學原理 指數(shù)擴增 達生命之源安健康之本 實時熒光定量PCR FluorescenceQuantitativePCR FQ PCR 實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團 利用熒光信號的積累實時監(jiān)測整個PCR進程 最后通過軟件標準曲線對起始模板進行定量分析的方法 FQ PCR原理簡化圖 simplifiedpictureofFQ PCR 達生命之源安健康之本 FQ PCR遞增的熒光信號強度 FQ PCR特點 達生命之源安健康之本 熒光閾值 循環(huán)閾值 Ct值 達生命之源安健康之本 FQ PCR擴增的理論模式 理想PCR反應 X X0 2n非理想PCR反應 X X0 1 Ex n 在擴增產(chǎn)物達到閾值線時 XCt X0 1 Ex Ct M 1 logM logX0 1 Ex Ct 2 logX0 log 1 Ex Ct logM 3 數(shù)學原理推導過程 達生命之源安健康之本 FQ PCR定量原理圖 達生命之源安健康之本 FQ PCR擴增曲線函數(shù)關系 達生命之源安健康之本 FQ PCR在兒科感染性疾病中的應用 達生命之源安健康之本 研究進展 達生命之源安健康之本 肺炎支原體 mycoplasmapneumoniae MP CLINICALMICROBIOLOGYREVIEWS Oct 2004 p 697 728 達生命之源安健康之本 Science 2009Nov27 326 5957 1235 40 肺炎支原體 MP 蛋白質圖譜繪制完成 達生命之源安健康之本 Science 呼吸道合胞病毒三維圖像 respiratorysyncytialvirus RSV Three dimensional 3D crystalstructureofadecameric annularribonucleoproteincomplexoftheRSVnucleoprotein N boundtoRNA Thevariableregionisinorange withthe hairpinhighlightedandlabeledwiththeRSV604resistancemutationsites Science 2009Nov27 326 5957 1279 83 達生命之源安健康之本 人巨細胞病毒 humancytomegalovirus HCMV NewsandViews NatureMedicine6 863 864 2000 達生命之源安健康之本 Science CMV的重復感染機制 Science 2010Apr2 328 5974 102 6 EvasionofCD8 Tcellsiscriticalforsuperinfectionbycytomegalovirus 達生命之源安健康之本 EB病毒 epstein barrvirus EBv EBv屬于 皰疹病毒亞科 是一種親淋巴細胞病毒 能感染人及靈長類動物的B淋巴細胞 EBv顆粒呈圓形 直徑150 180nm 基因組為雙股DNA 長170 175kb NatRevCancer Epstein Barrvirus 40yearson 2004 4 757 768 達生命之源安健康之本 PNAS EB病毒誘發(fā)腫瘤產(chǎn)生機制 TheEpstein Barrvirus EBV nuclearantigen EBNA 1istheonlyviralproteinexpressedinallEBV carryingmalignancies butitscontributiontooncogenesishasremainedenigmatic WeshowthatEBNA 1induceschromosomalaberrations DNAdouble strandbreaks andengagementoftheDNAdamageresponse DDR Thesesignsofgenomicinstabilityareassociatedwiththeproductionofreactiveoxygenspecies ROS andarereversedbyantioxidants ThesefindingshighlightanovelfunctionofEBNA 1andapossiblemechanismbywhichexpressionofthisviralproteincouldcontributetomalignanttransformationandtumorprogression ProcNatlAcadSciUSA 2009Feb17 106 7 2313 8 Epub2009Jan12 TheEpstein Barrvirusnuclearantigen 1promotesgenomicinstabilityviainductionofreactiveoxygenspecies 達生命之源安健康之本 腸道病毒 enterovirus71 EV71 coxsackievirus CoxA16 FQ PCR特異性核酸 EV71 CoxA16 檢測陽性被列為首選的檢測方法和確診依據(jù) 2009年7月 達安公司自主研發(fā)的三種腸道病毒檢測試劑同時獲得SFDA頒發(fā)的醫(yī)療器械注冊證 是目前國內唯一獲得權威部門認證的手足口病診斷產(chǎn)品 達生命之源安健康之本 小結 達安兒科系列產(chǎn)品 達生命之源安健康之本 1 熒光定量PCR法檢測呼吸系統(tǒng)感染兒童肺炎支原體DNA的分析 J 臨床兒科雜志2002 2 鼻咽癌患者血漿EB病毒DNA水平的動態(tài)變化與臨床療效的關系 J 癌癥2002 3 檢測肺炎支原體抗體對小兒呼吸道疾病診斷的價值 J 中國臨床醫(yī)藥研究雜志2003 4 熒光定量PCR與常規(guī)PCR檢測沙眼衣原體 解脲支原體的比較 J 江西醫(yī)學檢驗2004 5 熒光定量PCR法檢測呼吸道感染患兒支原體 衣原體感染 J 實用診斷與治療雜志2005 6 尿巨細胞病毒定量檢測在巨細胞病毒感染診斷中的意義 J 實用兒科臨床雜志2006 7 先天性心臟病患兒體內人巨細胞病毒糖蛋白B基因型研究 J 中國預防醫(yī)學雜志2008 8 不同標本EV71和CoxA16檢測對于手足口病重癥患者的臨床意義分析 J 中國衛(wèi)生檢驗雜志2009 9 腸道病毒核酸檢測在兒童手足口病臨床診斷中的價值及意義 J 中國醫(yī)師進修雜志2010 使用FQ PCR產(chǎn)品 第一