FQPCR技術(shù)與兒科感染性疾病0.ppt

FQ PCR技術(shù)與兒科感染性疾病 中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司 市場部裴媛媛 達(dá)生命之源安健康之本 主要內(nèi)容 PCR的發(fā)明人 加理 莫理斯 KaryB Mullis 達(dá)生命之源安健康之本 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR polymerasechainreaction 達(dá)生命之源安健康之本 達(dá)生命之源安健康之本 PCR動(dòng)力學(xué)原理 指數(shù)擴(kuò)增 達(dá)生命之源安健康之本 實(shí)時(shí)熒光定量PCR FluorescenceQuantitativePCR FQ PCR 實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán) 利用熒光信號的積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程 最后通過軟件標(biāo)準(zhǔn)曲線對起始模板進(jìn)行定量分析的方法 FQ PCR原理簡化圖 simplifiedpictureofFQ PCR 達(dá)生命之源安健康之本 FQ PCR遞增的熒光信號強(qiáng)度 FQ PCR特點(diǎn) 達(dá)生命之源安健康之本 熒光閾值 循環(huán)閾值 Ct值 達(dá)生命之源安健康之本 FQ PCR擴(kuò)增的理論模式 理想PCR反應(yīng) X X0 2n非理想PCR反應(yīng) X X0 1 Ex n 在擴(kuò)增產(chǎn)物達(dá)到閾值線時(shí) XCt X0 1 Ex Ct M 1 logM logX0 1 Ex Ct 2 logX0 log 1 Ex Ct logM 3 數(shù)學(xué)原理推導(dǎo)過程 達(dá)生命之源安健康之本 FQ PCR定量原理圖 達(dá)生命之源安健康之本 FQ PCR擴(kuò)增曲線函數(shù)關(guān)系 達(dá)生命之源安健康之本 FQ PCR在兒科感染性疾病中的應(yīng)用 達(dá)生命之源安健康之本 研究進(jìn)展 達(dá)生命之源安健康之本 肺炎支原體 mycoplasmapneumoniae MP CLINICALMICROBIOLOGYREVIEWS Oct 2004 p 697 728 達(dá)生命之源安健康之本 Science 2009Nov27 326 5957 1235 40 肺炎支原體 MP 蛋白質(zhì)圖譜繪制完成 達(dá)生命之源安健康之本 Science 呼吸道合胞病毒三維圖像 respiratorysyncytialvirus RSV Three dimensional 3D crystalstructureofadecameric annularribonucleoproteincomplexoftheRSVnucleoprotein N boundtoRNA Thevariableregionisinorange withthe hairpinhighlightedandlabeledwiththeRSV604resistancemutationsites Science 2009Nov27 326 5957 1279 83 達(dá)生命之源安健康之本 人巨細(xì)胞病毒 humancytomegalovirus HCMV NewsandViews NatureMedicine6 863 864 2000 達(dá)生命之源安健康之本 Science CMV的重復(fù)感染機(jī)制 Science 2010Apr2 328 5974 102 6 EvasionofCD8 Tcellsiscriticalforsuperinfectionbycytomegalovirus 達(dá)生命之源安健康之本 EB病毒 epstein barrvirus EBv EBv屬于 皰疹病毒亞科 是一種親淋巴細(xì)胞病毒 能感染人及靈長類動(dòng)物的B淋巴細(xì)胞 EBv顆粒呈圓形 直徑150 180nm 基因組為雙股DNA 長170 175kb NatRevCancer Epstein Barrvirus 40yearson 2004 4 757 768 達(dá)生命之源安健康之本 PNAS EB病毒誘發(fā)腫瘤產(chǎn)生機(jī)制 TheEpstein Barrvirus EBV nuclearantigen EBNA 1istheonlyviralproteinexpressedinallEBV carryingmalignancies butitscontributiontooncogenesishasremainedenigmatic WeshowthatEBNA 1induceschromosomalaberrations DNAdouble strandbreaks andengagementoftheDNAdamageresponse DDR Thesesignsofgenomicinstabilityareassociatedwiththeproductionofreactiveoxygenspecies ROS andarereversedbyantioxidants ThesefindingshighlightanovelfunctionofEBNA 1andapossiblemechanismbywhichexpressionofthisviralproteincouldcontributetomalignanttransformationandtumorprogression ProcNatlAcadSciUSA 2009Feb17 106 7 2313 8 Epub2009Jan12 TheEpstein Barrvirusnuclearantigen 1promotesgenomicinstabilityviainductionofreactiveoxygenspecies 達(dá)生命之源安健康之本 腸道病毒 enterovirus71 EV71 coxsackievirus CoxA16 FQ PCR特異性核酸 EV71 CoxA16 檢測陽性被列為首選的檢測方法和確診依據(jù) 2009年7月 達(dá)安公司自主研發(fā)的三種腸道病毒檢測試劑同時(shí)獲得SFDA頒發(fā)的醫(yī)療器械注冊證 是目前國內(nèi)唯一獲得權(quán)威部門認(rèn)證的手足口病診斷產(chǎn)品 達(dá)生命之源安健康之本 小結(jié) 達(dá)安兒科系列產(chǎn)品 達(dá)生命之源安健康之本 1 熒光定量PCR法檢測呼吸系統(tǒng)感染兒童肺炎支原體DNA的分析 J 臨床兒科雜志2002 2 鼻咽癌患者血漿EB病毒DNA水平的動(dòng)態(tài)變化與臨床療效的關(guān)系 J 癌癥2002 3 檢測肺炎支原體抗體對小兒呼吸道疾病診斷的價(jià)值 J 中國臨床醫(yī)藥研究雜志2003 4 熒光定量PCR與常規(guī)PCR檢測沙眼衣原體 解脲支原體的比較 J 江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)2004 5 熒光定量PCR法檢測呼吸道感染患兒支原體 衣原體感染 J 實(shí)用診斷與治療雜志2005 6 尿巨細(xì)胞病毒定量檢測在巨細(xì)胞病毒感染診斷中的意義 J 實(shí)用兒科臨床雜志2006 7 先天性心臟病患兒體內(nèi)人巨細(xì)胞病毒糖蛋白B基因型研究 J 中國預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志2008 8 不同標(biāo)本EV71和CoxA16檢測對于手足口病重癥患者的臨床意義分析 J 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2009 9 腸道病毒核酸檢測在兒童手足口病臨床診斷中的價(jià)值及意義 J 中國醫(yī)師進(jìn)修雜志2010 使用FQ PCR產(chǎn)品 第一