微生物實驗室SOP文件.doc

微生物實驗室SOP文件目錄 01 試劑貯存和配制區(qū)工作制度 02 標本處理區(qū)工作制度 03 細菌自動分析區(qū)工作制度04 試劑貯存和配制區(qū)標準操作程序 05 標本處理區(qū)標準操作程序 06 細菌自動分析區(qū)標準操作程序 07 紫外消毒標準操作程序 08 消毒液配制使用標準操作程序 09 普通冰箱使用標準操作程序 10 超低溫冰箱標準操作規(guī)程 11 潔凈工作臺使用操作規(guī)程 12 VITEK32型自動分析系統(tǒng)標準操作程序 13 移液器使用標準操作程序 14 高速離心機操作標準操作程序 15 冰箱維護和保養(yǎng)標準操作程序 16 電熱恒溫水浴箱操作程序 17 潔凈工作臺維護和保養(yǎng)程序 18 可移動紫外消毒車使用操作程序 19 加樣器校準標準操作程序 20 離心機維護保養(yǎng)操作程序 21 溫度計校準程序 22 試劑的質(zhì)檢操作程序 23_微生物實驗室崗位職責(暫行) 24 臨床標本的保存程序 25 普通培養(yǎng)陰性操作程序 26 真菌培養(yǎng)陰性操作程序 27 苛養(yǎng)菌培養(yǎng)陰性操作程序 28 抗酸桿菌培養(yǎng)陰性操作程序 29 支原體培養(yǎng)檢驗操作程序30 臨床檢驗及收費程序 31 微生物檢驗收收費價格 01、標本處理區(qū)工作制度進入本區(qū)需穿工作服、工作鞋。 本區(qū)只能進行：臨床標本的保存，標本接種、培養(yǎng)、及其菌株檢驗前處理、菌懸液制備、染色標本檢查、非上機鑒定與藥敏試驗操作等危險操作，其它操作不得在此區(qū)進行。 在整個本區(qū)的實驗操作過程中，操作者必須戴手套、口罩和帽子，嚴格按照操作規(guī)程進行。 工作結束后必須立即對工作區(qū)進行清潔或消毒。 非本實驗室工作人員未經(jīng)允許不得進入。02、試劑配制和無菌區(qū)工作制度進入該區(qū)需穿專用工作服和工作鞋。 本區(qū)只能進行貯存試劑的制備、試劑的分裝和平板的制備。 在整個本區(qū)的實驗操作過程中，操作者必須戴手套和帽子，嚴格按照操作規(guī)程進行。 工作結束后必須立即對工作區(qū)進行清潔和消毒。 非本實驗室工作人員未經(jīng)允許不得進入。 無菌室公能用于分裝培養(yǎng)管或倒制平板培養(yǎng)基操作。 使用前以紫外燈消毒至少30分鐘，定期用乳酸熏蒸，徹底消毒。無菌室僅限操作者進入，操作時嚴格關門。 室內(nèi)備有空調(diào)設備，以保證不因溫度而影響工作。03、試劑配制和無菌區(qū)工作制度進入該區(qū)需穿專用工作服和工作鞋。 本區(qū)只能進行貯存試劑的制備、試劑的分裝和平板的制備。 在整個本區(qū)的實驗操作過程中，操作者必須戴手套和帽子，嚴格按照操作規(guī)程進行。 工作結束后必須立即對工作區(qū)進行清潔和消毒。 非本實驗室工作人員未經(jīng)允許不得進入。 無菌室公能用于分裝培養(yǎng)管或倒制平板培養(yǎng)基操作。 使用前以紫外燈消毒至少30分鐘，定期用乳酸熏蒸，徹底消毒。 無菌室僅限操作者進入，操作時嚴格關門。 室內(nèi)備有空調(diào)設備，以保證不因溫度而影響工作。04、儀器自動分析區(qū)工作制度進入本區(qū)需穿專用工作服和工作鞋。 本區(qū)只能進行：微生物上機鑒定與藥敏分析、血培養(yǎng)儀增菌培養(yǎng)、培養(yǎng)基溶解與保溫、相關實驗記錄與報告書寫、打??；其它操作不得在此區(qū)進行。 在整個本區(qū)的實驗操作過程中，操作者必須戴手套和帽子，嚴格按照操作規(guī)程進行。 工作結束后必須立即對工作區(qū)進行清潔。 非本實驗室工作人員未經(jīng)允許不得進入。 05、試劑貯存和配制區(qū)標準操作程序1.目的：規(guī)定在本區(qū)進行的工作，確保試劑正確貯存和制備。 2.適用范圍：試劑的貯存和制備。 3.職責：3.1 實驗室工作人員均應熟知并遵守本室相關SOP。 3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。 4 程序：4.1 實驗人員進入該區(qū)須穿本區(qū)專用工作服。實驗中須戴手套、工作鞋。4.2 實驗室所購試劑經(jīng)驗收登記后，按說明書中的要求貯存。 4.3 記錄溫濕度計讀數(shù)。 4.4 記錄冰箱的溫度計讀數(shù)。根據(jù)當天的標本驗收登記表，取出當天實驗須配制和使用的試劑放置于即用冰箱，其余試劑要立即收好放回貯藏冰箱內(nèi)。4.5 不同廠家的試劑勿混用，同廠家的不同檢測項目試劑盒中的相同試劑也不宜混用，除非廠家有特別說明。4.6 做好詳細實驗記錄。 4.7 實驗完畢，清潔實驗臺面。 4.8 每周一清點庫存試劑，看有無過期或?qū)⒔狡诘脑噭蜃鲌髲U處理或排列優(yōu)先使用，避免浪費，然后記錄試劑的詳細保存情況。5. 引用的文件及表格： 5.1 項目SOP：5.2 實驗室清潔程序： 5.3 冰箱溫度記錄表： 5.4 溫濕度計記錄表：06、標本處理區(qū)標準操作程序1.目的：規(guī)定在標本制備區(qū)內(nèi)所進行的工作及其操作。 2.適用范圍：所有在本區(qū)內(nèi)進行的工作。 3.職責： 3.1 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP。 3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。 4、標準操作：4.1.1 實驗人員進入該區(qū)須穿本室專用工作服4.1.2 實驗中須使用一次性鞋套4.1.3 戴手手套4.1.4 手套需常更換每四小時換一次。4.2 從試劑貯存和準備區(qū)取出的試劑放入即用冰箱室試劑存放專區(qū)暫存。 4.3 記錄溫濕度計讀數(shù)。4.4 記錄恒溫箱的溫度計讀數(shù)。 4.5 臨床標本的接收、保存，細菌手工鑒定或上機前處理在本區(qū)內(nèi)進行。 4.6 標本的接收處理和保存按臨床標本的管理程序進行： 4.7 不同檢測項目的樣本核酸的提取和保存按相應檢測項目的SOP進行。4.8 標本接種或涂片在本區(qū)的標本處理臺內(nèi)進行，接種后培養(yǎng)基按要求進行培養(yǎng)。菌落觀察和處理在生物安全柜內(nèi)進行。 4.9 詳細做好實驗記錄和儀器使用記錄。 4.10 保持室內(nèi)空氣流通，且在實驗完畢后，按實驗室清潔消毒程序進行清潔、消毒工作。 5.引用的文件及表格5.1 臨床標本的管理程序進行： 5.2 項目SOP： 5.3 實驗室清潔程序：5.4 恒溫箱溫度記錄表：5.5 溫濕度計記錄表：07、細菌自動分析區(qū)標準操作程序1.目的：規(guī)定在本區(qū)進行的工作，確保靶核酸擴增的準確性和有效性。 2.適用范圍：血培養(yǎng)、自動分析和報告簽發(fā)。 3.職責： 3.1 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP。 3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。 4.標準操作：4.1 實驗人員進入該區(qū)須穿本區(qū)工作服。實驗中須戴手套、帽子，手套需常更換。 4.2本實驗室采取VITEK32微生物自動分析技術，因此，微生物自動鑒定和分析和肥達氏試驗、外菲氏試驗等均在本區(qū)內(nèi)進行。 4.3 鑒定板在標本處理區(qū)準備后帶入該區(qū)，放入充液箱充填，充填菌懸液后加塞，余液連同試管放入消毒桶中消毒，由工人過后洗滌回收試管。4.4 每月必須進行至少一次所有試卡的質(zhì)控，每新到的批號試劑要進行質(zhì)控，過關方能投入使用。4.5 依據(jù)不同檢測項目SOP要求設定微生物檢驗工作程序，并記錄備案；未經(jīng)實驗室負責人允許，不得隨意更改。 4.6 檢測報告的簽發(fā)依據(jù)檢測結果報告程序： 4.7 做好儀器和實驗記錄。 4.8 保持室內(nèi)空氣流通，且在實驗完畢后，清潔、消毒工作臺面。 5.引用的文件： 5.1 檢測結果報告程序： 5.2 項目SOP： 5.3 實驗室清潔程序：08、紫外消毒標準操作程序1.目的：每天實驗后，下班后對工作區(qū)進行必要的紫外線消毒一小時，保正實驗室的清潔。2.適用范圍：適用于本室各工作區(qū)中按裝于天化板上的紫外線消毒燈。 3.職責： 3.1 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP。 3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。 4.操作程序：4.1 實驗結束后先對實驗室進行必要的清潔工作； 4.2 根據(jù)需要設定時間，通常為30分鐘，根據(jù)需要適當延長時間。 4.3 關閉電源開關；4.4 整個紫外線消毒過程中，相關工作人員不能離開實驗室，以防火災發(fā)生。09、消毒液配制使用標準操作程序1、目的：配制消毒液，用消毒液擦拭實驗臺面、用具及浸泡實驗廢棄物。 2、適用范圍：分子生物實驗室的工作人員 。3、職責： 3.1實驗室工作人員應及時配制消毒液，熟知并遵守本SOP，嚴防污染發(fā)生。 3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。 4、工作程序： 4.1確定要配制消毒液的量。 4.2 將36%的次氯酸鈉配制成10%的稀溶液。以1000毫升為例，取278毫升的36%的次氯酸鈉母液，加蒸餾水至1000毫升。4.3 消佳凈：20g加水4000ml,作用20-30分鐘。 4.4 所配制的消毒液只限在當天內(nèi)使用，隔夜如使用時應根據(jù)本SOP重新配制。10、普通冰箱使用標準操作程序1.目的：確保冰箱的正常使用。 2.適用范圍：本SOP適用于本室各類用途使用的普通冰箱、冰柜。 3.職責： 3.1 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP。 3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。4.操作程序：4.1 開、關機：試劑冰箱按說明書要求放好后，插上電源線，冷藏室溫度開關置于4，冷凍室溫度開關置于 -20，2小時后用溫度計確認。系統(tǒng)進入正常運行狀態(tài)后即可正常使用。4.2關機：若冰箱較長時間不用或需要送修時需按以下步驟操作： （1）關閉冰箱電源，并拔下電源插頭。（2）清空冰箱內(nèi)的所有貯存物，并妥善放置到其它冰箱內(nèi)。打開冰箱門，等待冰箱內(nèi)的霜化完。 （3）用肥皂水擦洗干凈冰箱內(nèi)膽，后用10%次氯酸鈉液擦洗一次。 （4）保持冰箱門打開待其自然干燥。 5.引用的表格 5.1 冰箱溫度記錄表：11、超低溫冰箱標準操作規(guī)程1.目的：確保低溫冰箱的正常使用。 2.適用范圍：本SOP適用于 XXX 公司的 XXX 型超低溫冰箱。 3.職責： 3.1 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP，室負責人監(jiān)督落實。 3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。 4.操作程序 4.1 接通電源，將冰箱的開關置ON位置，此時溫度顯示屏顯示冰箱的實際溫度，且數(shù)字不停地閃爍。 4.2 溫度設定：以調(diào)節(jié)冰箱溫度為-70為例說明，按SET鍵，溫度指示顯示-85，且“8”閃爍，按“”鍵直至“8“變?yōu)椤?”；按“”鍵，此時溫度指示為“-75”，“5”閃爍，按“”鍵直至“5“變?yōu)椤?”， 按SET鍵，此時溫度指示“-70”，且不閃爍。 4.3 設定溫度時應注意，一般應以10遞減方式進行，即每次設定的溫度低于冰箱實際溫度10，待冰箱達到設定溫度時再進行調(diào)節(jié)，直至達到所需溫度。 4.3 如超低溫度遇較長時間停電，其溫度顯示會不斷閃爍，且報警指示燈（ALARM）也閃爍，此時應按上述方法調(diào)節(jié)。 4.4 由冰箱管理人或其委托人每工作日記錄冰箱溫度，冰箱溫度記錄表貼于冰箱門，每月更換1次，存檔。 4.5 超低溫冰箱由專人保管，試劑和物品應按指定位置存放。 4.6 超低溫冰箱全室共用，若室外人員需存放試劑或標本，須經(jīng)管理人同意。 5.引用的表格： 5.1冰箱溫度記錄表：12、潔凈工作臺使用操作規(guī)程1.目的：正確使用潔凈工作臺。 2.本SOP適用于實驗室使用的所有國產(chǎn)醫(yī)用潔凈工作臺。 3.職責： 3.1 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP，室負責人監(jiān)督落實。 3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。 4.操作程序： 4.1 新安裝或長期未使用的工作臺，使用前必須用超凈真空吸塵器或不產(chǎn)生纖維的物品認真進行清潔工作。 4.2 接通電源，使用前應提前1530分鐘同時開啟紫外燈和風機組工作。 4.3 當需要調(diào)節(jié)風機風速時，用工作臺操作面板上的風速調(diào)節(jié)鈕進行調(diào)節(jié)。風機、照明均由批示燈指示其工作狀態(tài)，工作時，發(fā)光。 4.4 工作臺面上禁止存放不必要的物品，以保持工作區(qū)的潔凈氣流不受干擾。 4.5 禁止在工作臺面上記錄書寫，工作時應盡量避免作明顯擾動氣流的動作；禁止在預過濾進風口部位放置物品，以免擋住進風口造成進風量減少，降低凈化能力。4.6 使用結束后，用消毒液清理工作臺面后打開紫外燈，1530分鐘后關閉紫外燈，關閉潔凈臺電源。4.7長期不使用的工作臺請撥下電源插頭。13、移液器使用標準操作程序1.目的：正確使用移液器，確保移液的精確性。 2.適用范圍：本實驗室使用的可調(diào)式移液。 3.職責：實驗室工作人員必須嚴格按照本SOP進行操作。 4.操作程序： 4.1 轉(zhuǎn)動旋鈕設定移液量，設定的移液量不可超出該移液器規(guī)定的范圍。 4.2 裝上配套的Tip。4.3 前進移液法 4.3.1 將按鈕壓至第一停點位置； 4.3.2 將移液管管嘴浸入液面下23mm深處，然后慢慢松開按鈕吸入液體。待移入管嘴吸滿液體后，將管嘴撤出液面，擦掉管嘴外側(cè)的所有液滴。 4.3.3 輕輕壓下操作按鈕至第一停點位置，放出液體。約1秒鐘后，繼續(xù)將操作按鈕向下壓至第二停點位置。待管嘴液體放干凈后，將管嘴貼在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中，撤出管嘴。 4.3.4 松開按鈕使之回到起點位置。需要時，可更換管嘴繼續(xù)移液操作。4.4 倒退移液法：適用于高粘度液體及/或易起泡沫液體的移液。 4.4.1 將操作按鈕向下壓至第二停點位置。4.4.2將移液管管嘴浸入試劑瓶液面下23mm深處，然后慢慢松開鈕吸入液體。待移入管嘴吸滿液體后，將管嘴撤出液面，擦掉管嘴外側(cè)的所有液滴。 4.4.3 輕輕壓下操作按鈕至第一停點位置，放出液體。 4.4.4遺留在管嘴時的液體或者隨管嘴一起扔掉，或者放回原來的容器中。 4.5重復操作法：重復操作移液法可以快速、簡便地重復轉(zhuǎn)移同體積的同種液體。 4.5.1將操作按鈕向下壓至第二停點位置。 4.5.2將移液管管嘴浸入液面下23mm深處，然后慢慢松開按鈕吸入液體。待移入管嘴吸滿液體后，將管嘴貼在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中。 4.5.3 輕輕壓下操作按鈕至第一停點位置，放出液體。待放完所需體積液體后，把按鈕停在第一停點位置，不包括在移液量之內(nèi)的少量液體仍留在管嘴內(nèi)，管嘴外的液滴則需包括在移液量之內(nèi)。4.5.4將管嘴浸入試劑液面下不遠處，然后慢慢松開按鈕使管嘴重新吸入液體 。 4.5.5重復步序4.5.3和4.5.4繼續(xù)移液操作，就可重復轉(zhuǎn)移相同體積液體。14、離心機操作標準操作程序1.目的：使每個工作人員能正確地使用本儀器。 2.范圍：本SOP僅適用于各類普通離心機。3.職責： 3.1 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP，室負責人監(jiān)督落實。 3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。4.操作： 4.1 開機：接通電源，打開儀器電源開關，離心機自檢。 4.2 按“Open”鍵，打開機蓋，旋開轉(zhuǎn)子蓋，平衡放入離心管，旋緊轉(zhuǎn)子蓋，關上機蓋，此時“Open”鍵的指標燈亮。（如果接通電源后，機蓋為開的狀態(tài)，則無需此步操作）。4.3 離心條件的設定：通過按“Temp”、“Speed”、“Time”鍵的上下箭頭分別設定離心的溫度、速度和時間。其中離心速度可分為每分鐘轉(zhuǎn)速（rpm）和離心力（cfg）兩種，可通過同時按下“Speed”鍵的上下鍵頭相互轉(zhuǎn)換。 4.4 運行：離心條件設定好后，按“Start/Stop”鍵，離心機啟動，“Open”鍵的指標燈滅。當達到設定的時間后，離心機自動停止，并發(fā)出提示音，“Open”鍵的指標燈亮，按“Open”鍵，打開機蓋，旋開轉(zhuǎn)子蓋，取出離心管。 *若進行樣本的短暫離心，只需按“Short”鍵數(shù)秒即可。 *若需在離心過程中停止離心，則需再按一次“Start/Stop”鍵。4.5 關機：離心完畢后，應及時用干的軟布拭去離心室的冷凝水，關閉離心機電源，并記錄離記機使用情況。15、冰箱維護和保養(yǎng)標準操作程序1.目的：對冰箱進行適當?shù)木S護，以確保冰箱的正常使用。 2.適用冰箱范圍：本實驗室使用的各種品牌、型號的冰箱。 3.職責： 3.1 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP，室負責人監(jiān)督落實。3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。 4.操作方法 4.1 冰箱應放置于水平地面并留有一定的散熱空間。 4.2 外接電源電壓必須匹配，并要求有良好的接地線。 4.3 冰箱內(nèi)禁止存放與本實驗室無關的物品。 4.4 放入冰箱內(nèi)的所有試劑、樣品、質(zhì)控品等必須密封保存。4.5 保持冰箱出水口通暢；非自動除霜冰箱應定期除霜；定期清潔冰箱，清潔時切斷電源，用軟布蘸水擦拭冰箱內(nèi)外，必要時可用中性洗滌劑。 4.6 每日由專人負責觀察冰箱內(nèi)溫度并記錄于表中，記錄表貼于門上，每月一張，一年裝訂成冊存檔。 4.7 若溫度超出規(guī)定范圍，調(diào)節(jié)溫控使其回到正常范圍，并進行記錄。 4.8 若溫控調(diào)節(jié)無效，報請設備科維修，修理后須驗收合格并簽字后方能正常使用。 5.引用的表格 5.1 冰箱溫度記錄表：16、電熱恒溫水浴箱操作程序1. 目的：保證水浴箱工作溫度恒定。 2. 該SOP變動程序：本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室技術負責人。3. 適用水浴箱范圍：電熱恒溫水浴箱 4. 標準操作： 4.1水浴箱應置于堅固的水平臺上，電源電壓須匹配。 4.2在水浴箱內(nèi)注入清潔溫水至總高度1/21/3處。 4.3打開電源開關，把溫度控制器的溫度調(diào)節(jié)旋鈕至設定溫度。 4.4當水槽內(nèi)測定溫度達到設定溫度時，加熱中斷、指示燈熄滅，溫度保持穩(wěn)定。 4.5在每次水浴箱使用前，放入標準溫度計同時監(jiān)測實際水溫，以校正溫度。 4.6水浴箱工作溫度波動范圍是：預設+2 范圍。 4.7每天應使用水銀溫度計水浴箱應記錄每天溫度；如溫度超出正常范圍，該溫度應劃上紅圈，并把修正操作記錄下來。 4.8水浴箱內(nèi)外應保持清潔，外殼忌用腐蝕性溶液擦拭。 4.9儀器不用時，需套好防塵罩，以免溫度控制器受潮影響使用。 17、潔凈工作臺維護和保養(yǎng)程序1.目的：對潔凈工作臺進行適當維護，以保證凈化能力。 2.適用范圍：本SOP適用于實驗室使用的醫(yī)用潔凈工作臺（BC1300型）。 3.職責： 3.1 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP，室負責人監(jiān)督落實。 3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。4.程序：4.1 根據(jù)環(huán)境潔凈程度，定期將預過濾器中的濾料拆下清洗，一般間隔時間為36個月。4.2 每次使用潔凈臺后，均需對潔凈臺進行清潔。 4.3 定期（一般每半年1次）計測工作區(qū)風速，如發(fā)現(xiàn)不符合技術參數(shù)要求，則可調(diào)大風機供電電壓。當風機組電壓調(diào)到最大時，工作區(qū)風速仍達不到0.3m/s，則必須更換高效空氣過濾器。（由廠家或院儀器維修人員進行） 4.4 做好維護記錄。 5.引用的表格：5.1 儀器設備維護保養(yǎng)記錄表：18、可移動紫外消毒車使用操作程序1. 目的：正確使用紫外消毒車進行消毒。 2. 適用范圍：適用于本室使用的ZXC型紫外線消毒車（上海躍進醫(yī)用光學器械廠生廠）。 3. 職責：3.1 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP，室負責人監(jiān)督落實。3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。 4.操作程序： 4.1 打開保護門； 4.2 用手托住燈臂往上抬至需要位置；4.3 插上電源，打開帶燈開關； 4.4 根據(jù)需要設定時間； 4.5 使用完畢將按鈕摁到底，同時另一手托住燈臂慢慢將燈管放進燈箱內(nèi)關上保護門。 4.6 不同實驗區(qū)的紫外線消毒車勿混用。 5. 引用的表格5.1消毒記錄表：19、加樣器校準標準操作程序1.目的：保證加樣器加樣的準確性。2.加樣器范圍：各種品牌、型號的固定、可調(diào)和多通道加樣器。3.職責：本SOP由室負責人執(zhí)行落實。 4.校準程序 4.1校準環(huán)境和用具要求： 4.1.1 室溫：2025，測定中波動范圍不大于0.5。4.1.2電子天平：放置于無塵和震動影響的臺面上，房間盡可能有空調(diào)。稱量時為保證天平內(nèi)的濕度（相對濕度6090），天平內(nèi)應放置一裝有10ml蒸餾水的小燒杯。4.1.3 小燒杯：510ml體積。 4.1.4 測定液體：溫度為2025的去氣雙蒸水。 4.1.5 選擇校準體積： 擬校準體積；加樣器標定體積的中間體積；最小可調(diào)體積（不小于擬校準體積的1）。(4)如為固定體積加樣器，則只有一種校準體積。4.2校準步驟： 4.2.1 將加樣器調(diào)至擬校準體積，選擇合適的吸頭； 4.2.2 調(diào)節(jié)好天平； 4.2.3 來回吸吹蒸餾水3次，以使吸頭濕潤，用紗布拭干吸頭； 4.2.4 垂直握住加樣器，將吸頭浸入液面23mm處，緩慢（13秒）一致的吸取蒸餾水； 4.2.5 將吸頭離開液面，靠在管壁，去掉吸頭外部的液體； 4.2.6 將加樣器以30角放入稱量燒杯中，緩慢一致地將加樣器壓至第一檔，等待13秒，再壓致第二檔，使吸頭里的液體完全排出； 4.2.7 記錄稱量值；4.2.8 擦干吸頭外面； 4.2.9 按上述步驟稱量10次；4.2.10取10次稱量值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量，按附表所列蒸餾水Z因子計算體積：體積=重量/Z因子 4.2.11按校準結果調(diào)節(jié)加樣器 _ 4.3 新購的合格的移液器出廠前經(jīng)過廠家校準，使用前無需校準。 4.4 每年移液器進行校準一次，自校或由廠家有關部門校準。 4.5 做好校準記錄。 5.引用的表格 5.1儀器設備校準記錄表：20、離心機維護保養(yǎng)操作程序1.目的：對離心機進行正確的維護，以保證儀器正常運轉(zhuǎn)。 2.適用范圍：本SOP僅適用于本室使用的離心機。 3.職責： 3.1 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP，室負責人監(jiān)督落實。 3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。 4.操作程序：4.1 離心室的清潔：為了避免樣本等殘留物的污染，應經(jīng)常對離心機外殼和離心室進行清潔處理。對離心室清潔，應先打開離心機蓋，撥掉電源線，用專用設備將離心機轉(zhuǎn)子旋下，再用中性去污劑（70%的異丙醇/水混合物或乙醇去污染）清潔離心室；離心室內(nèi)的橡膠密封圈經(jīng)去污劑處理后，用水沖洗，再用甘油潤滑。 4.2 轉(zhuǎn)子的清潔：轉(zhuǎn)子會被樣本殘留物污染，也可能會被某些化學試劑腐蝕，因此應對轉(zhuǎn)子每月進行清潔維護。每月用中性的清潔劑清潔轉(zhuǎn)子一次，并在儀器使用記錄本上作好記錄，以延長轉(zhuǎn)子的壽命。 4.3 離心完畢后，應及時用干的軟布拭去離心室的冷凝水。（此步僅適用于冷凍離心機） 4.4 離心結束后，使離心機蓋打開，然后關機。21、溫度計校準程序1.目的：保證溫度計的精確性。 2.適用范圍：適用于本實驗室所使用的溫度計。 3.職責：本SOP由室負責人落實。 4.程序 _ 4.1 由設備科人員送質(zhì)檢局對溫度計進行校準。 4.2 每年進行1次。 4.3 經(jīng)校準過的溫度計可作為微量恒溫器溫度校溫的參照。 5.引用表格： 5.1 儀器設備校準記錄：22、臨床非培養(yǎng)標本的采集及處理操作程序1.目的：規(guī)范臨床待檢標本的正確采集、送檢和處理。 2.適用范圍：微生物檢驗實驗室的所有臨床檢測標本。 3.職責： 3.1 所有采集標本的人員均需按本SOP操作，實驗室工作人員有責任向臨床醫(yī)生、護士或病人宣教。 3.2 本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。 4.操作程序 4.1 本實驗室檢測標本為：血清或血漿、痰、生殖道拭子標本、尿液及腦脊液和胸腹水。 4.2 做好標本簽收，核對檢驗單與標本標簽是否清楚無誤，送檢標本是否正確、合格，給所有標本按順序編號，按如下操作規(guī)程操作。4.3 查找抗酸菌操作:將標本置于水浴蒸箱加溫殺菌30分鐘，取標本殘留物或沉淀物加溫涂布玻片，液性標本以3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，取標本殘留物或沉淀物加溫涂布玻片并標注編號后固定，行抗酸染色，先滴加抗酸染色第一液加溫(用酒精燈在玻片下來回加溫置染色液冒熱氣，但無氣泡產(chǎn)生為宜)染色10分鐘，自來水沖洗凈染液，以硫酸美蘭復染2分鐘，水洗涼干。 鏡檢與報告：油鏡下查找分枝、不規(guī)則紅色桿菌，按如下標準進行結果報告。 1)、鏡檢100-300個視野（時間不少于4分鐘）未發(fā)現(xiàn)抗酸菌，繼續(xù)觀察至300個視野仍未發(fā)現(xiàn)抗酸菌者報告抗酸菌（）； 2)、鏡檢100個視野找到抗酸菌1-2條者，報告抗酸菌可疑（），或重涂片或重送標本檢查； 3)、鏡檢100個視野找到抗酸菌3-9條者，報告抗酸桿菌陽性（）； 4)、鏡檢10個視野找到抗酸菌1-9條者，報告抗酸桿菌陽性（2）； 5)、鏡檢每個視野找到抗酸菌1-9條者，報告抗酸桿菌陽性（3）； 6)、鏡檢每個視野找到抗酸菌多于9條者，報告抗酸桿菌陽性（4）。 4.4 查找普通細菌操作：液性標本取離心沉淀物涂片，拭子或膿性標本直接涂布玻片并標注編號后固定。同時取大腸標準株(ATCC25922)和金黃色葡萄球菌標準株（ATCC25922）涂片，一起行革蘭氏染色，先滴加第一液染色1分鐘，水洗，加第二液媒染1分鐘，水洗干凈；以95%酒精脫色30秒鐘后立即水洗，再加第四液復染30秒鐘，水洗后涼干。油鏡下查找菌體并觀察球桿比例；觀察質(zhì)控菌是否合格。 4.5 墨汁染色查找隱球菌：液性標本離心取沉淀物涂片，膿性或拭子標本直接涂片并寫號，以無菌接種環(huán)粘取少量印度墨汁與玻片上標本混勻，壓蓋玻片，先低倍鏡下找到視野再轉(zhuǎn)離倍鏡觀察。若找到透亮，圓形強折光，有厚莢膜的菌體報告墨汁染色陽性；否則報告陰性。4.6 白帶常規(guī)檢查：鹽水管直接將棉簽點至玻片后以高倍鏡檢有無滴蟲；涂片標注編號后固定，行革蘭氏染色，先滴加第一液染色1分鐘，水洗，加第二液媒染1分鐘，水洗干凈；以95%酒精脫色30秒鐘后立即水洗，再加第四液復染30秒鐘，水洗涼干后鏡檢查找革蘭氏陰性雙球菌、霉菌或陽性球菌、線索細胞等。陰道清潔度的按如下判斷標準報告：度：陰道桿菌為主，并可見大量上皮細胞。 度：有部份陰道桿菌，但亦有部份膿細胞和雜菌，上皮細胞少見。 度：僅見少量陰道桿菌和上皮細胞，有大量膿細胞和雜菌。度：鏡下無陰道桿菌，除少量上皮細胞外，主要的幾乎全是膿細胞和大量雜菌。4.7 肥達試驗：標本標明編號，以3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘；取試管架，按每標本排5排試管，每排5支；各標本用加樣器取100l血清置于一支稀釋用試管(注明檢驗號)中，加入1.9ml 0.9%生理鹽水混勻，第一排加入1：20倍稀釋血清各0.2ml，成1：40倍；后稀釋管再加入1.0ml 0.9%生理鹽水，成1：40倍稀釋，加入第二排試管各0.2 ml。同樣方法對倍稀釋至第四排試管，第五排各加入0.2ml 0.9%生理鹽水作陰性對照。從冰箱中拿出肥達反應試驗稀釋菌懸液，第一列各加入H診斷菌液0.2 ml,第二列各加入O診斷菌液0.2 ml，第三列各加入甲型診斷菌液0.2 ml,第四列各加入乙型診斷菌液0.2 ml, 第五列各加入丙型診斷菌液0.2 ml,混勻，置37水浴箱18-24小時。 結果判斷：菌體沉淀至試管底成圓點為陰性管，出現(xiàn)散在顆粒狀凝集為陽性管。以最高稀釋管出現(xiàn)散在顆粒狀凝集為報告滴度。若陰性對照出現(xiàn)凝集則需重新稀釋配制診斷菌懸液重做試驗。 4.8 外菲氏試驗：標本標明編號，以3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘；取試管架，按每標本排3排試管，每排5支；各標本用加樣器取100l血清置于一支稀釋用試管(注明檢驗號)中，加入1.9ml 0.9%生理鹽水混勻，第一排加入1：20倍稀釋血清各0.2ml，成1：40倍；稀釋管留1.0ml再加入1.0ml 0.9%生理鹽水，成1：40倍稀釋，加入第二排試管各0.2 ml。同樣方法對倍稀釋至第四排試管，第五排各加入0.2ml 0.9%生理鹽水作陰性對照。從冰箱中拿出外菲氏反應試驗稀釋菌懸液，第一列各加入OX19診斷菌液0.2 ml,第二列各加入OX2診斷菌液0.2 ml，第三列各加入OXK診斷菌液0.2 ml,混勻，置37水浴箱18-24小時。 結果判斷：菌體沉淀至試管底成圓點為陰性管，出現(xiàn)散在顆粒狀凝集為陽性管。以最高稀釋管出現(xiàn)散在顆粒狀凝集為報告滴度。若陰性對照出現(xiàn)凝集則需重新稀釋配制診斷菌懸液重做試驗。 5.引用表格：5.1拒收標本記錄表：23、臨床標本的保存程序1.目的：臨床標本正確保存，以便必要是復查。 2.適用范圍：微生物檢驗實驗室的所有臨床檢測標本。 3.職責： 3.1 實驗室工作人員必須熟知并遵守本SOP，室負責人監(jiān)督管理。 3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。 4.程序： 4.1 未檢測的標本經(jīng)預處理后及時置-20保存。 4.2標本當天檢測可置4保存，如當天不檢測應置-20保存。報告發(fā)出后丟棄。4.3 原始樣本在報告發(fā)出前均需置4保存，不得丟棄。報告發(fā)出后保存2天，以備查。保存2天后標本由室負責人酌情處理。24、實驗室崗位職責運行程序(暫行)1. 目的：確保日常工作的順利進行。 2. 適用范圍：本實驗室工作人員。3. 職責： 3.1 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP。 3.2 本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：室負責人、科主任。4.為更好的使日常工作有序進行，盡可能以負責的態(tài)度，連續(xù)地完成每一個檢驗的發(fā)報，保證結果的可靠性，每日盡可能安排兩個工作人員上班，分為兩個崗位，各自的工作崗位職責如下。1崗位班、2崗位班采用輪轉(zhuǎn)制。如遇有當班同事休息或值班，第3人就頂上其所上的班。 4.1崗位1班(負責樣本接收、核對、接種以及上日進行的鑒定和藥敏結果進行分析、發(fā)報等工作)。 4.1.1 上班后檢查細菌自動分析儀、血液自動培養(yǎng)儀工作是否正常，并做好記錄。 4.1.2 從冰箱內(nèi)取出當天所需的各種平板：5%綿羊血平皿、中國藍培養(yǎng)皿、淋病奈瑟菌培養(yǎng)皿、麥康凱平皿等。 4.1.3 負責對上日進行的鑒定和藥敏結果進行分析。 4.1.4 負責報告單的打印、核對、登記與錄入等工作，簽發(fā)已核對的所有報告。 4.1.5做好菌種的保存，對一些難得的菌株、標準菌株等要注意保存，并做好記錄。 4.1.6接收樣本：核對各樣本與化驗單名是否一致，核查各送檢樣本是否符合要求，否則立即與病房聯(lián)系以便作出相應的處理，如退單或重送樣本等，并做好聯(lián)系情況的記錄。4.1.7 樣本編號：對合格的樣本作出編號。 4.1.8 普通培養(yǎng)樣本的接種選擇： 痰液、咽拭子分別接種：血平皿、麥康凱平皿； 尿液接種：取100l接種血平皿、麥康凱平皿； 泌尿生殖道：血平板、麥康凱平板； 大便：SS或中國蘭、血平板； 各種無菌體液、腦脊液、膿液等標本：血平皿、麥康凱平皿，用增菌肉湯增菌； 衣原體、支原體培養(yǎng)+藥敏，按說明書接種支原體專用培養(yǎng)基； 真菌培養(yǎng)，各種標本均接種沙保弱平皿和真菌斜面培養(yǎng)基； 所有標本在接種的同時應進行涂片或?qū)ζ涑猎M行革蘭或抗酸染色，并做相應的記錄。 規(guī)定：臨床申請單未明確注明培養(yǎng)目的時，一律按普通培養(yǎng)進行處理。標本送到實驗室后特殊培養(yǎng)標本需在1小時內(nèi)接種，普通培養(yǎng)標本不得超過2小時。4.1.9 培養(yǎng)：一般標本接種后，平板應置于35OC培養(yǎng)箱培養(yǎng)，接種過腦脊液標本、泌尿生殖道標本的血平板還應置于5%-10%CO2環(huán)境中；結核培養(yǎng)置于37OC培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每星期檢查兩次有否可疑菌落生長。收到的普通血培養(yǎng)瓶(如AER)應進行瓶內(nèi)氣壓平衡處理，厭氧培養(yǎng)瓶直接放入培養(yǎng)箱中。4.1.10 對新到崗的實習或進修人員應認真交代本崗位的一切事宜并且認真作好帶教工作。 4.1.11 厭氧培養(yǎng)應接種血平皿或厭氧平皿置于厭氧袋中培養(yǎng)，同時接種BMP進行普通培養(yǎng)。 4.1.12 標本培養(yǎng)處理后幫助2班將需要的各種標本收集并滅菌處理。 4.1.13 負責配制培養(yǎng)基，并做好記錄。 5.1 崗位2班（負責菌株鑒定與藥敏的分析、涂片檢查標本的報告、室內(nèi)質(zhì)控等）。 5.1.1上班后首先核查各個培養(yǎng)箱、冰箱的工作溫度是否在設定的范圍內(nèi)，并做好記錄；檢查各種培養(yǎng)基及試劑的庫存量，做好需配制的培養(yǎng)基或需領出的試劑的記錄工作，對需購買的試劑、平板、培養(yǎng)基、染色液等應及時記錄并告訴室組長，以便及時計劃報主任批準。 5.1.2 做好室內(nèi)常用實驗試劑如觸酶、凝固酶、氧化酶或蛋白胨水的質(zhì)量控制，并做好記錄。5.1.3 負責處理上日接種標本的菌種鑒定與藥敏試驗，觀察血液增菌培養(yǎng)瓶，如發(fā)現(xiàn)有細菌生長，應按三級報告制度處理。觀察培養(yǎng)平板，分析、挑取可疑菌落涂片革蘭染色，能上機的做好觸酶、凝固酶、氧化酶或接種蛋白胨水等相應的檢查后上機，還不能上機或手工試驗的則選用相應的平板分純。用于鑒定或藥敏試驗的菌落應選取培養(yǎng)18-24小時的純菌落進行試驗。 5.1.4 對一些不適合用儀器檢測的細菌，改用手工簽定或用標準的K-B法進行藥敏。碰到異常的耐藥模式，如碰到耐萬古霉素的葡萄球菌、糞腸球菌，耐泰能的大腸埃希菌、克雷伯菌屬、腸桿菌屬等報告時一定要慎重。遇到可疑多重耐藥菌株時，加做特殊的藥敏紙片幫助鑒定。 5.1.5負責控感標本的處理與報告，物體表面菌落計數(shù)標本應于收到標本后2小時內(nèi)處理，消毒液標本應于4小時內(nèi)處理。處理方法按控感監(jiān)控標本處理與報告進行。 5.1.6涂片染色： 抗酸染色嚴格按照操作規(guī)程，胸腹水、尿液、腦脊液等標本應在5000轉(zhuǎn)/分高速離心10分鐘后，取沉淀涂厚片，自然干燥后固定，按要求染色后鏡檢。 G-雙球菌涂片，應用滾動式涂片法從波片一端涂向另一端，反復幾次，火焰固定后進行革蘭氏染色。 腦脊液隱球菌涂片，應快速離心后倒去上清液，沉淀涂片、加相應的優(yōu)質(zhì)墨汁混勻后鏡檢。 5.1.7 對新到崗的實習或進修人員應認真交代本崗位的一切事宜并且認真作好帶教工作。 6. 注：崗位職責分開是相對的，同事間需要互相協(xié)作，互相幫助，共同完成當天的工作。如遇到三個人上班，則其中一個做好室內(nèi)日常記錄的檢查完善和控制感染標本的處理工作。如遇一個人上班，則擔負1崗位班、2崗位班的所有工作。25、普通培養(yǎng)陰性操作程序1、仔細查對標本標簽與檢驗單是否正確，標本質(zhì)量是否合格，若收檢標本與檢驗單查對正確，標本質(zhì)量合格則進行接收檢驗，否則查找原因并在有關記錄本上記錄。 2、標本處理、檢驗與結果報告： 1)拭子、分泌物標本 標本涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35溫箱培養(yǎng)。 培養(yǎng)第24、48小時觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出普通致病細菌。 2)尿液標本 取5ml尿液,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35溫箱培養(yǎng)。 培養(yǎng)第24、48小時觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出普通致病細菌。3)引流液 標本3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35溫箱培養(yǎng)。 培養(yǎng)第24、48小時觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出普通致病細菌。 4)痰液或咽拭子標本 無菌接種環(huán)可疑處采樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35溫箱培養(yǎng)。 培養(yǎng)第24、48小時觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出普通致病細菌。 5)糞便或肛拭子等腸道標本 以無菌接種環(huán)桃取可疑處標本涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48小時觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出普通致病細菌。6)留置針頭、小導管等標本 標本置無菌管中，加入增菌液2ml，35溫箱培養(yǎng)48小時觀察培養(yǎng)液有無混濁，采樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35溫箱培養(yǎng)。 培養(yǎng)第24、48小時觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出普通致病細菌。26、真菌培養(yǎng)陰性操作程序1、仔細查對標本標簽與檢驗單是否正確，標本質(zhì)量是否合格，若收檢標本與檢驗單查對正確，標本質(zhì)量合格則進行接收檢驗，否則查找原因并在有關記錄本上記錄。2、標本處理、檢驗與結果報告： 1)拭子、分泌物標本 標本涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25溫箱培養(yǎng)。 培養(yǎng)第24、48、72小時觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出真菌。 2)尿液標本 取5ml尿液,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25溫箱培養(yǎng)。 培養(yǎng)第24、48、72小時觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出真菌。3)引流液 標本3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25溫箱培養(yǎng)。 培養(yǎng)第24、48、72小時觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出真菌。4)痰液或咽拭子標本 無菌接種環(huán)可疑處采樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25溫箱培養(yǎng)。 培養(yǎng)第24、48、72小時觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出真菌。 5)糞便或肛拭子等腸道標本 以無菌接種環(huán)桃取可疑處標本涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出真菌。 6)留置針頭、小導管等標本 標本置無菌管中，加入增菌液2ml，35溫箱培養(yǎng)48小時觀察培養(yǎng)液有無混濁，采樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25溫箱培養(yǎng)。 培養(yǎng)第24、48、72小時觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出真菌。27、苛養(yǎng)菌培養(yǎng)陰性操作程序1、仔細查對標本標簽與檢驗單是否正確，標本質(zhì)量是否合格，若收檢標本與檢驗單查對正確，標本質(zhì)量合格則進行接收檢驗，否則查找原因并在有關記錄本上記錄。 2、標本處理、檢驗與結果報告： 1)拭子、分泌物標本 標本涂于普通血瓊脂平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置C02缸，35溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。 2)尿液標本 取5ml尿液,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始線，再畫線分離后置C02缸，35溫箱培養(yǎng)。 培養(yǎng)第24、48、72小時觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報告未培養(yǎng)