三點(diǎn)測(cè)交實(shí)驗(yàn)報(bào)告成品.doc

遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 題目：三點(diǎn)測(cè)交 班級(jí)：歷生本 組員：董軻 201023130107 孫菲 201023130110 任晴 201023130119 實(shí)驗(yàn)時(shí)間： 2012年11月3日 教師簽字： 目錄實(shí)驗(yàn)?zāi)康?3實(shí)驗(yàn)原理-3實(shí)驗(yàn)材料及用品-4實(shí)驗(yàn)步驟-5注意事項(xiàng)-5實(shí)驗(yàn)結(jié)果-6實(shí)驗(yàn)分析-7實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?1.掌握三點(diǎn)測(cè)交的原理及方法。 2.學(xué)習(xí)三點(diǎn)測(cè)交的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理及分析方法。 3.了解繪制遺傳學(xué)圖的原理和方法。實(shí)驗(yàn)原理： 連鎖交換定律：處在同一染色體上的兩個(gè)或兩個(gè)以上基因遺傳時(shí)，聯(lián)合在一起的頻率大于重新組合的頻率。重組類型的產(chǎn)生是由于配子形成過(guò)程中，同源染色體的非姊妹染色單體間發(fā)生了局部交換的結(jié)果。 三點(diǎn)測(cè)交：三點(diǎn)測(cè)交就是通過(guò)一次雜交和一次測(cè)交，同時(shí)確定三對(duì)等位基因（即三個(gè)基因位點(diǎn)）的排列順序和它們之間的遺傳距離，是基因定位的常用方法。主要過(guò)程是：用三顯性純合體和三隱性純合個(gè)體雜交，獲得三基因雜合體（F1），再使F1與三隱性基因純合體測(cè)交，通過(guò)對(duì)測(cè)交后代表現(xiàn)型及其數(shù)目的分析，分別計(jì)算三個(gè)連鎖基因之間的交換值，從而確定這三個(gè)基因在同一染色體上的順序和距離。 現(xiàn)用野生型18號(hào)果蠅與突變型6號(hào)果蠅雜交，6號(hào)作母本，18號(hào)作父本。由于小翅(miniature)、白眼(white)、焦剛毛(singed)，由位于X染色體上的三個(gè)隱性基因m，w和sn3決定。故得到的F1代中雌果蠅性狀均為長(zhǎng)翅、紅眼和直剛毛，而雄果蠅性狀均為小翅、白眼和焦剛毛。F1代中雌果蠅為三雜合體，雄果蠅為隱形純合體。F1代雌雄果蠅自交，在產(chǎn)生配子的過(guò)程中，雌果蠅的兩條X染色體發(fā)生交叉互換，可以產(chǎn)生8種配子，由于各基因間的距離不一樣，產(chǎn)生的8中配子數(shù)目不等，而雄果蠅只產(chǎn)生2種配子，且無(wú)論哪種配子與雌果蠅產(chǎn)生的配子結(jié)合，后代的性狀均與雌配子的基因型相吻合。通過(guò)對(duì)F3代果蠅性狀的觀察和計(jì)數(shù)可以推知三個(gè)基因間的距離。 如果兩個(gè)基因間的單交換并不影響鄰近兩個(gè)基因的單交換，那么預(yù)期的雙交換頻率應(yīng)當(dāng)?shù)扔趦蓚€(gè)單交換頻率的乘積，但實(shí)際上觀察到的雙交換值往往低于預(yù)期值，因?yàn)槊堪l(fā)生一次單交換，對(duì)它鄰近位置也發(fā)生交換的機(jī)會(huì)產(chǎn)生影響，這叫干涉。一般用并發(fā)率表示干涉的大小。實(shí)驗(yàn)材料及用品：黑腹果蠅品系：野生型18號(hào)果蠅（+） 突變型6號(hào)果蠅（w sn3 m) 儀器：恒溫培養(yǎng)箱、顯微鏡、解剖鏡、培養(yǎng)瓶、棉花塞、麻醉瓶、毛筆或解剖針、潔凈的白瓷板。試劑：乙醚等實(shí)驗(yàn)步驟：1.11月4日21:00將6號(hào)種蠅瓶中的成蠅全部殺死。2.11月5日7:00選擇處女蠅3只， 15:00選擇處女蠅2只。3.11月5日15:00交配6號(hào)18號(hào)。4.11月12日放親本。5.11月15日21:00 F1自交（1號(hào)瓶）， 16日19:00 F1自交（2號(hào)瓶）， 17日11:00 F1自交（3號(hào)瓶）。6.11月23日16:30 1號(hào)瓶、2號(hào)瓶放親本。 24日20:00 3號(hào)瓶放親本。7.11月26日出現(xiàn)F2代成蠅，觀察并計(jì)數(shù)。注意事項(xiàng)：1.親代雜交時(shí)母本要選6號(hào)，父本選18號(hào)，否則F1代雜交時(shí)還需要選擇處女蠅，給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)不必要的麻煩。2.親代雜交時(shí)要選擇處女蠅，F(xiàn)1自交時(shí)不需要處女蠅，選擇處女蠅時(shí)要嚴(yán)格控制時(shí)間。3.在培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)出現(xiàn)蛹時(shí)（下一代果蠅羽化之前），一定要將親本除去，否則混入下一代中，影響計(jì)數(shù)。4.在選擇果蠅進(jìn)行雜交時(shí)，要將新培養(yǎng)瓶橫放，將果蠅放到瓶壁上，等果蠅蘇醒后，再將培養(yǎng)瓶豎立，以防止果蠅粘在培養(yǎng)基上，影響交配。5.在選擇雜交果蠅時(shí)，要輕度麻醉，以確保果蠅可以蘇醒，不影響交配；在觀察F2代性狀并計(jì)數(shù)時(shí)，要重度麻醉，以免在觀察計(jì)數(shù)過(guò)程中果蠅蘇醒，影響計(jì)數(shù)。6.F2代的計(jì)數(shù)時(shí)間不要超過(guò)13天，確保所計(jì)數(shù)的果蠅中沒(méi)有F3代。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：F2代性狀觀察表瓶號(hào)1號(hào)瓶2號(hào)瓶3號(hào)瓶日期11/2611/2711/2912/112/312/411/2611/2711/2811/2912/111/2611/2711/2912/112/3+118610191131318100292810863999123159131451414221313wsn3m11041018410043112181552151215934656661613101+m00012102000022110102200241126201wsn3+04101011200203020423341112023631+sn3m03124030010103001010110221031133w+22203020224452132011202531300222+sn3+00000000000000000000000000000000w+m00000000000000000001000100000000實(shí)驗(yàn)分析：1.F2 觀察結(jié)果記錄表：測(cè)交后代表型觀察數(shù) 表型間是否重組w-sn3w-msn3-m+ + +366-w sn3 m237-+ + m36-+w sn3 + 53-+ sn3 m38+-w + + 60+-+ sn3 + 0+-+w + m2+-+合計(jì)重組值（%）79310012.618723.59111.4根據(jù)表中的重組值可以繪出遺傳學(xué)圖：12.611.4 M sn3 W24 m 、sn3 、W在X染色體上的相對(duì)位置由圖可知m 、sn3、W在X染色體上的相對(duì)位置和它們之間的圖距。2.計(jì)算并發(fā)率和干涉： 如果兩個(gè)基因間的單交換并不影響鄰近兩個(gè)基因的單交換。那么預(yù)期的雙交換頻率應(yīng)等于兩個(gè)單交換頻率的乘積。但實(shí)際上觀察到的雙交換頻率往往低于預(yù)期值。因?yàn)槊堪l(fā)生一次單交換，它鄰近也發(fā)生一次交換的機(jī)會(huì)就減少一些，這叫做干