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生物與生活校本課程教案 目錄1. 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 課題1.果酒和果醋的制作 課題2.腐乳的制作 課題3.制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量二.微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 課題1.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)三.植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課題1.菊花的組織培養(yǎng) 課題2.月季的花藥培養(yǎng)四.酶的應(yīng)用 課題1.果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用 課題2.探討加酶洗衣粉的洗滌效果五.DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 課題1.DNA的粗提取與鑒定 課題2.血紅蛋白的提取和分離六.植物有效成分的提取 課題1.植物芳香油的提取 課題2.胡蘿卜素的提取七.生態(tài)環(huán)境與生活 課題1.環(huán)境保護(hù) 課題2.低碳生活一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1 果酒和果醋制作教學(xué)目標(biāo)1、知識目標(biāo)：理解果酒、果醋制作的原理。2、能力目標(biāo)：學(xué)生根據(jù)果酒制作的原理設(shè)計(jì)果酒制作過程，體驗(yàn)制果酒的實(shí)踐操作在對果酒制作結(jié)果進(jìn)行分析與評價環(huán)節(jié)，培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)分析能力和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)乃季S能力。3、情感目標(biāo)：通過果酒釀制歷史的追述，培養(yǎng)學(xué)生的民族自豪感，同時滲透STS教育。教學(xué)重點(diǎn)： 說明果酒和果醋的制作原理 設(shè)計(jì)制作裝置制作果酒和果醋教學(xué)難點(diǎn)：制作過程中發(fā)酵條件的控制教學(xué)過程引言：在中華民族悠久的歷史長河中，很多事物都走在世界前列，酒也一樣，有著它本身的光輝篇章。在酒的記載中，有許多關(guān)于酒的有趣傳說。猿猴釀酒說猿猴的主要食物就是含糖水果，猿猴在水果成熟的季節(jié)收貯大量的水果在“石洼”中，一段時間后，就有特殊香味的液體流出，這就是最早的果酒。在國內(nèi)市場上，近幾年出現(xiàn)了越來越多的果酒，如枸杞酒、青梅酒等。果酒與生活果酒中雖然含有酒精，但含量與白酒、啤酒和葡萄酒比起來非常低，一般為5到10度，最高的也只有14度。因此，被很多成年人當(dāng)作飯后或睡前的軟飲料來喝。果酒簡單來說就是汲取了水果中的全部營養(yǎng)而做成的酒，其中含有豐富的維生素和人體所需的氨基酸。有時候即使生吃水果也不能吸收的營養(yǎng)，通過果酒卻可以吸收，因?yàn)闋I養(yǎng)成分已經(jīng)完全溶解在果酒里了。果酒里含有大量的多酚，可以起到抑制脂肪在人體中堆積的作用，使人不容易積累脂肪和贅肉。此外，與其他酒類相比，果酒對于護(hù)理心臟、調(diào)節(jié)女性情緒的作用更明顯一些。課題1從課題背景人手，然后從實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)流程示意圖和提供的資料，較全 面的介紹了果酒和果醋的制作過程。一、基礎(chǔ)知識 1果酒制作的原理閱讀課本，完成以下問題：（1）果酒的制作需要什么微生物？（2）酵母菌的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、分布、種類及菌落？（3）酵母菌的代謝類型及其呼吸過程的反應(yīng)式如何？（4）酵母菌的適宜溫度是多少？（5）為什么在一般情況下葡萄酒呈紅色？（6）什么叫發(fā)酵？發(fā)酵等同于無氧呼吸嗎？酵母菌有何實(shí)際應(yīng)用？（1）酵母菌形態(tài)、結(jié)構(gòu)、分布、種類及菌落形態(tài)、結(jié)構(gòu)酵母菌是單細(xì)胞真菌，屬真核生物，細(xì)胞大小為130um，呈圓形、橢圓形等。思考：你認(rèn)為酵母菌的細(xì)胞中有哪些結(jié)構(gòu)？ 你認(rèn)為細(xì)菌與酵母菌在細(xì)胞結(jié)構(gòu)上有什么區(qū)別？繁殖酵母菌的繁殖方式有出芽生殖、分裂生殖和孢子生殖，但多以出芽方式進(jìn)行無性生殖。溫度低時形成孢子，進(jìn)入休眠狀態(tài)，溫度適宜時，進(jìn)行出芽生殖，繁殖速度快。菌落： 討論：你知道什么的菌落嗎？ 在生態(tài)學(xué)上一個菌落屬于什么？ 酵母菌在固體培養(yǎng)基上形成的菌落，其表面濕潤、黏稠，呈白色或粉紅色。（在液體培養(yǎng)基中，有些在液體表面形成菌膜，或在容器壁上出現(xiàn)酵母環(huán)，或產(chǎn)生沉淀。） 生存的環(huán)境 自然界中，酵母菌分布廣泛，但多分布在含糖較高的偏酸環(huán)境中，如水果、花、樹皮上，（有些可與昆蟲共生，有些使人致病，如白色假絲酵母引發(fā)鵝口瘡、肺感染。食品中常見的酵母菌有啤酒酵母、葡萄汁酵母、魯氏酵母(醬油釀造)、球擬酵母屬、粉狀畢赤氏酵母等。）一年四季，土壤始終是酵母菌的大本營。思考：在發(fā)酵制作葡萄酒的時候，要對葡萄進(jìn)行消毒嗎？為什么？ 其他微生物與酵母菌的關(guān)系是什么？（2）酵母菌的代謝類型及其呼吸過程酵母菌的呼吸果酒的制作離不開酵母菌。酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，反應(yīng)式如下： 酶 C6H1206+6O2 6CO2+6H20+能量 在無氧條件下，反應(yīng)式如下： 酶 C6H12O6 2C2H5OH+2C02+能量思考： 在發(fā)酵過程中，如果要使酵母菌進(jìn)行大量繁殖，應(yīng)怎樣處理？如果要獲得酒精呢？為什么？（3）發(fā)酵1).發(fā)酵概念 廣義：是通過微生物的培養(yǎng)來大量生產(chǎn)各種代謝產(chǎn)物的過程。包括有氧發(fā)酵（如醋酸發(fā)酵、谷氨酸發(fā)酵）和無氧發(fā)酵（如酒精發(fā)酵）。 狹義：是指微生物的無氧呼吸（包括酒精發(fā)酵、乳酸發(fā)酵等）。2).所以：發(fā)酵無氧呼吸。3).應(yīng)用： 釀酒、發(fā)饅頭、面包制作、酒精制造、生產(chǎn)藥用酵母片、生產(chǎn)維生素、生產(chǎn)抗菌素等。（4）溫度要求 繁殖的最適溫度：20； 酒精發(fā)酵的最適溫度：1825。 思考：你知道酵母菌需要適宜溫度的原因嗎？ 酵母菌有不同的最適溫度說明了什么？補(bǔ)充：溫度對發(fā)酵的影響酵母菌只能在一定溫度下生活。溫度低于10，酵母菌發(fā)育很緩慢。隨著溫度的升高，繁殖速度加快，20時為最佳繁殖溫度，此時酵母菌生殖速度快、生活力強(qiáng)。超過35，酵母菌生長受到抑制，繁殖速度迅速下降，到40酵母菌停止出芽，開始出現(xiàn)死亡。如果想要獲得高酒精濃度的發(fā)酵液、減少究竟的損耗，必須控制好發(fā)酵溫度。你知道嗎？1、一般情況下，葡萄酒呈紅色的原因？ （在發(fā)酵的過程中，隨著酒精度的提高，紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液，使葡萄酒呈紅色。）2、葡萄酒分成干紅、干白等種類的依據(jù)是什么？（1、根據(jù)葡萄酒的顏色分成白葡萄酒、紅葡萄酒和桃紅葡萄酒三種。 白葡萄酒：用白葡萄釀造，皮汁分離發(fā)酵； 紅葡萄酒：用紅葡萄釀造，皮汁混合發(fā)酵； 桃紅葡萄酒：顏色介于白葡萄酒和紅葡萄酒之間，皮的發(fā)酵時間短。 2、根據(jù)葡萄酒的含糖量分成干、半干、半甜、甜四種。 干葡萄酒：含糖量低于4克/升； 半干葡萄酒：含糖量介于4克-12克/升之間； 半甜葡萄酒：含糖量介于12克-50克/升之間； 甜葡萄酒：含糖量高于50克/升。）（5）菌種來源：（在果酒的工業(yè)生產(chǎn)中為了提高果酒的品質(zhì)也可以直接在果汁中加入人工培養(yǎng)的酵母菌，例如：干酵母或酒藥）2、果醋制作的原理 閱讀課本，思考以下問題：（1）醋酸菌的形態(tài)？細(xì)胞結(jié)構(gòu)？（2）醋酸菌有哪些方面的實(shí)際應(yīng)用？（3）醋酸菌的代謝類型？（4）果醋的制作原理？(1)醋酸菌形態(tài)1).從橢圓到桿狀，有單個，有成對，有成鏈狀，以鞭毛運(yùn)動或不運(yùn)動，不形成芽孢，屬原核生物，以分裂方式繁殖，新陳代謝類型為異養(yǎng)需氧型。（醋酸菌與酵母菌相比，最主要的特點(diǎn)是）2).應(yīng)用：食醋、果醋(2)果醋制作的原理 ，醋酸菌是種好氧性細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時，才能進(jìn)行旺盛的生理活動。變酸的酒的表面觀察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。實(shí)驗(yàn)表明，醋酸菌對氧氣的含當(dāng)量特別敏感，當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時，即使只是短時間中斷通人氧氣，也會引起醋酸菌死亡。當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸茵將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；酶C6H12O6 3CH3COOH（醋酸）當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?反應(yīng)簡式如下)。醋酸菌的最適生長溫度為30一35。酶酶2C2H5OH+O2 2CH3CHO（乙醛）+2H2O 2CH3CHO+O2 2CH3COOH（醋酸）過渡：根據(jù)這個原理，我們是怎樣設(shè)計(jì)果酒、果醋制作方案的？提示：從以下三個方面考慮：選材、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)裝置、操作過程二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 1果酒和果醋實(shí)驗(yàn)流程示意圖沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵果酒果醋挑選葡萄閱讀教材3-4頁，對A、B兩同學(xué)的實(shí)驗(yàn)裝置進(jìn)行討論：A：每次排氣時只需擰松瓶蓋，不要完全揭開瓶蓋；制醋時，再將瓶蓋打開，蓋上一層紗布，進(jìn)行葡萄醋的發(fā)酵。（來防止發(fā)酵液被污染，因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌）B：分析果酒和果醋的發(fā)酵裝置中充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接？充氣口是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進(jìn)行充氣用的；排氣口是在酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳的；出料口是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接，其目的是防止空氣中微生物的污染。使用該裝置制酒時，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制醋時，應(yīng)將充氣口連接氣泵，輸入氧氣。2、實(shí)驗(yàn)操作(1)材料的選擇與處理選擇新鮮的葡萄，榨汁前先將葡萄進(jìn)行沖洗，除去枝梗。、取葡萄500g，去除枝梗和腐爛的葉子。、用清水沖洗葡萄12次除去污物。（注意沖洗次數(shù)不宜太多，為什么？ ）討論：你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗？為什么？（應(yīng)該先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會。）(2)滅菌討論：你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？（需要從發(fā)酵制作的過程進(jìn)行全面的考慮，因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌。例如：榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈；每次排氣時只需擰松瓶蓋、不要完全揭開瓶蓋等。） 榨汁機(jī)要清洗干凈，并晾干。 發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70的酒精消毒。 (3)榨汁 將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機(jī)榨取葡萄汁。 (4)發(fā)酵 將葡萄汁裝人發(fā)酵瓶，要留要大約13的空間 (如圖右圖所示)，并封閉充氣口。 制葡萄酒的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在1825，時間控制在1012d左右，可通過出料口對發(fā)酵的情況進(jìn)行。及時的監(jiān)測。 制葡萄醋的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在3035，時間控制在前78d左右，并注意適時通過充氣口充氣。結(jié)果分析與評價1由于發(fā)酵作用，葡萄漿中糖分大部分轉(zhuǎn)變?yōu)镃2和C2H5OH，及少量的發(fā)酵副產(chǎn)品。C02排出越來越旺盛，使發(fā)酵液出現(xiàn)沸騰，CO2從排氣口排出，在發(fā)酵10天后，現(xiàn)象最明顯。發(fā)酵過程產(chǎn)熱，會使發(fā)酵液溫度上升，但酒精發(fā)酵溫度應(yīng)嚴(yán)格控制在1825，發(fā)酵過程中，果皮上的色素及其他成分逐漸溶解于發(fā)酵液中；在發(fā)酵瓶表面，生成浮槽的蓋子。2設(shè)置對照組，將葡萄汁進(jìn)行高壓滅菌，分別裝入A、B兩個發(fā)酵瓶，并各留有13空間，A組加入酵母菌，B組不加，進(jìn)行發(fā)酵，可證明葡萄酒的產(chǎn)生是由于酵母菌的作用。證明葡萄醋中有醋酸生成，簡單易行的方法是品嘗或用pH試紙鑒定。3制作的葡萄酒色澤鮮艷、爽口、柔和、有濃郁的果實(shí)香味；果醋具有琥珀色或棕紅色，具有特有的果香，酸味柔和，稍有甜味，不澀。教學(xué)反思果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用重鉻酸鉀來檢驗(yàn)。在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，檢測時，先在試管中加入發(fā)酵液2mL，再滴人物質(zhì)的量濃度為3molL的H2SO43滴，振蕩混勻，最后滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液3滴，振蕩試管，觀察顏色的變化。想一想，如果要使檢驗(yàn)的結(jié)果更有說服力，應(yīng)該如何設(shè)計(jì)對照? 課題2 腐乳的制作 教學(xué)目標(biāo)1以制作腐乳為例了解傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用2說明腐乳制作過程的科學(xué)原理3設(shè)計(jì)并完成腐乳的制作，分析影響腐乳品質(zhì)的條件重點(diǎn)與難點(diǎn)1課題重點(diǎn)：說明腐乳制作過程的科學(xué)原理，設(shè)計(jì)并完成腐乳的制作2課題難點(diǎn)：在實(shí)踐中摸索影響腐乳品質(zhì)的條件教學(xué)過程你知道嗎？1、制作腐乳的原料是什么？2、為什么腐乳的味道比較鮮美？3、腐乳是如何制作的？引言：腐乳是中華民族獨(dú)特的傳統(tǒng)調(diào)味品，具有悠久的歷史：它是我國古代勞動人民創(chuàng)造出的一種微生物發(fā)酵大豆制品，品質(zhì)細(xì)膩、營養(yǎng)豐富、鮮香可口，深受廣大群眾喜愛，其營養(yǎng)價值可與奶酪相比，具有東方奶酪之稱。 各地人民依據(jù)自己不同的口味，形成了各具特色的傳統(tǒng)產(chǎn)品，如浙江紹興腐乳、北京王致和腐乳、黑龍江的克東腐乳、上海奉賢的鼎豐腐乳、廣西桂林的桂林腐乳、廣東水江的水口腐乳、云南路南的石林牌腐乳、河南拓城的酥制.那么腐乳是如何制作的呢？一、基礎(chǔ)知識 腐乳的制作原理 請大家閱讀書本相關(guān)內(nèi)容，回答以下問題 ： 1、豆腐長白毛是什么原因？ 2、王致和為什么要撒許多鹽，將長毛的豆腐腌起來？ 3、豆腐長的毛是什么生物？ 4、你認(rèn)為毛霉的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有什么特點(diǎn)？ 5、毛霉的繁殖方式是什么？ 6、毛霉中起作用的酶有哪些？（一）毛霉的相關(guān)知識（1）毛霉是一種絲狀真菌，具有發(fā)達(dá)的白色菌絲。它的菌絲可分為直立菌絲和匍匐菌絲。繁殖方式為孢子生殖，新陳代謝類型為異養(yǎng)需氧型。應(yīng)用于腐乳等發(fā)酵工藝。（2）毛霉在腐乳制作中的作用：在豆腐的發(fā)酵過程中，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。（3）傳統(tǒng)腐乳的生產(chǎn)中，豆腐塊上生長的毛霉來自空氣中的毛霉孢子，而現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在無菌條件下，將優(yōu)良毛霉菌種直接接種在豆腐上，這樣可以避免其他菌種的污染，保證產(chǎn)品質(zhì)量。（4）優(yōu)良菌種的選擇：不產(chǎn)生毒素；生長繁殖快，且抗雜菌力強(qiáng)；生長的溫度范圍大，不受季節(jié)的限制；有蛋白酶、脂肪酶、肽酶等酶系；使產(chǎn)品氣味正常良好。小結(jié)：豆腐乳是我國獨(dú)特的傳統(tǒng)發(fā)酵食品，是用豆腐發(fā)酵制成，多種微生物參與發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌具發(fā)達(dá)的白色菌絲。毛霉等微生物產(chǎn)生的以蛋白酶為主各種酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸，與醇類作用生成酯，形成細(xì)膩、鮮香等豆腐乳特色。發(fā)酵的溫度為1518 。 閱讀了王致和制作腐乳的過程，你能說出腐儒制作的流程圖嗎？（二）腐乳制作的流程圖讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制請大家結(jié)合流程圖和P7的資料一、二、三設(shè)計(jì)腐乳的制作過程。二、腐乳制作的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1、設(shè)備及用品瓦罐或有蓋玻璃瓶、保溫容器、小刀、搖床、250ml三角瓶、超凈臺及接種設(shè)備、滅菌鍋2、材料粽葉、北方豆腐、調(diào)料。3、操作步驟1）將豆腐切成3cm3cm1cm的若干塊。所用豆腐的含水量為70左右，水分過多則腐乳不易成形。 那么，怎樣豆腐測定水分含量呢？豆腐中水分測定方法： 精確稱取經(jīng)研缽研磨成糊狀的樣品510 g (精確到0.02mg ，設(shè)為Bg)，置于已知重量（Ag）的蒸發(fā)皿中，均勻攤平后，在100105 電熱干燥箱內(nèi)干燥4 h，取出后置于干燥器內(nèi)冷卻至室溫后稱重（為Cg），然后再烘30 min，直至所稱重量不變?yōu)橹梗ㄔO(shè)最終所有重量為Dg）。 請你寫出計(jì)算豆腐中含水量的表達(dá)式。所以，樣品水分含量（%）計(jì)算公式如下： (烘干前容器和樣品質(zhì)量-烘干后容器和樣品質(zhì)量)/烘干前樣品質(zhì)量2）將豆腐塊平放在鋪有干粽葉的盤內(nèi)，粽葉可以提供菌種，并能起到保溫的作用。每塊豆腐等距離排放，周圍留有一定的空隙。豆腐上面再鋪上干凈的粽葉。氣候干燥時，將平盤用保鮮膜包裹，但不要封嚴(yán)，以免濕度太高，不利于毛霉的生長。3）將平盤放入溫度保持在1518 的地方。毛霉逐漸生長，大約5 d后豆腐表面叢生著直立菌絲（即長白毛）。 你認(rèn)為將溫度保持在15-18 的原因是什么？ 這說明了什么？4）當(dāng)毛霉生長旺盛，并呈淡黃色時，去除包裹平盤的保鮮膜以及鋪在上面的粽葉，使豆腐塊的熱量和水分能夠迅速散失，同時散去霉味。這一過程一般持續(xù)36 h以上。5）當(dāng)豆腐涼透后，將豆腐間連接在一起的菌絲拉斷，并整齊排列在容器內(nèi)，準(zhǔn)備腌制。6）長滿毛霉的豆腐塊（以下稱毛坯）與鹽的質(zhì)量分?jǐn)?shù)比為51。 鹽能否過多或過少，為什么？ 將培養(yǎng)毛坯時靠近平盤沒長直立菌絲的一面統(tǒng)一朝向玻璃瓶邊，將毛坯分層盤立擺放在容器中。分層加鹽，并隨層加高而增加鹽量，在瓶口表面鋪鹽厚些。 為什么要隨層數(shù)的增加而增加鹽的用量，且瓶口用的鹽最多？約腌制8 d。 你認(rèn)為腌制作用有哪些 ？ 腌制的時間可以變化嗎？為什么？ 你能設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)來探究腌制時間對腐乳質(zhì)量的影響嗎？ 實(shí)驗(yàn)過程：7）將黃酒、米酒和糖，按口味不同而配以各種香辛料（如胡椒、花椒、八角茴香、桂皮、姜、辣椒等）混合制成鹵湯。鹵湯酒精含量控制在12左右為宜。注酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時間的長短有很大關(guān)系。酒精含量越高，對蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，蛋白酶的活性高，加快蛋白質(zhì)的水解，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗，難以成塊。你認(rèn)為鹵湯中有哪些成分可以抑制雜菌的生長？ 8）將廣口玻璃瓶刷干凈后，用高壓鍋在100 蒸汽滅菌30 min。將腐乳咸坯擺入瓶中，加入鹵湯和輔料后，將瓶口用酒精燈加熱滅菌，用膠條密封。在常溫情況下，一般六個月可以成熟。你認(rèn)為在整個的操作過程中，有哪些操作可以抑制雜菌的污染？ 長毛時的溫度加鹽腌制鹵湯中的酒精、辛香料對用具的消毒滅菌密封 4、腐乳的主要生產(chǎn)工序釀造腐乳的主要生產(chǎn)工序是將豆腐進(jìn)行前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。 前期發(fā)酵所發(fā)生的主要變化是毛霉在豆腐（白坯）上的生長。 發(fā)酵的溫度為1518 ，此溫度不適于細(xì)菌、酵母菌和曲霉的生長，而適于毛霉慢慢生長。毛霉生長大約5d后使白坯變成毛坯。前期發(fā)酵的作用： 一、是使豆腐表面有一層菌膜包住，形成腐乳的“體”； 二、是毛霉分泌以蛋白酶為主的各種酶，有利于豆腐所含有的蛋白質(zhì)水解為多肽和各種氨基酸，脂肪酶可以將脂肪分解成甘油和脂肪酸。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參與生化反應(yīng)的過程。 通過腌制并配入各種輔料（紅曲、面曲、酒釀），使蛋白酶作用緩慢，促進(jìn)其他生化反應(yīng)，生成腐乳的香氣。5、成果反思1）是否完成腐乳的制作 檢驗(yàn)腐乳是否完成制作的依據(jù)是： 能夠合理地選擇實(shí)驗(yàn)材料與用具；前期發(fā)酵后豆腐的表面長有菌絲，后期發(fā)酵制作基本沒有雜菌的污染。2）腐乳質(zhì)量的評價制作成功的腐乳應(yīng)該具有以下特點(diǎn)： 色澤基本一致、味道鮮美、咸淡適口、無異味、塊形整齊、厚薄均勻、質(zhì)地細(xì)膩、無雜質(zhì)。3）能否總結(jié)不同條件對腐乳風(fēng)味和質(zhì)量的影響影響腐乳品質(zhì)的主要因素： 菌種和雜菌： 菌種是生產(chǎn)發(fā)酵的關(guān)鍵，如果菌種退化則表現(xiàn)出生化功能的變化，如水解速率、代謝產(chǎn)物等都會發(fā)生變化，從而影響品質(zhì)。如有雜菌污染則直接影響產(chǎn)品的色、香、味。溫度： 溫度影響菌絲的生長和代謝，如溫度過低，則菌絲生長緩慢，不能進(jìn)入豆腐塊的深層；溫度高，菌絲易老化和死亡，影響品質(zhì)。溫度還影響生化反應(yīng)速度。 發(fā)酵時間 發(fā)酵時間影響生化反應(yīng)度及生化產(chǎn)物的量。調(diào)味品 加入的各種酒類、糖類等輔料的多少也對口感有重要影響。你能設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)來探究各種條件對腐乳風(fēng)味和質(zhì)量的影響嗎？ 課題3 制作泡菜并檢驗(yàn)亞硝酸鹽含量【教學(xué)目標(biāo)】（一）知識與技能泡菜制作過程中乳酸菌發(fā)酵的原理；泡菜中亞硝酸鹽含量變化及測定（二）過程與方法乳酸菌發(fā)酵與細(xì)胞呼吸的聯(lián)系；測定亞硝酸鹽時的化學(xué)操作（三）情感、態(tài)度與價值觀 認(rèn)同勞動人民在時間中利用微生物進(jìn)行泡菜制作的技能；對泡菜中亞硝酸鹽含量的測定，引導(dǎo)學(xué)生關(guān)注食品安全，維護(hù)身體健康【教學(xué)重點(diǎn)】制作泡菜并測定泡菜中亞硝酸鹽含量【教學(xué)難點(diǎn)】泡菜中亞硝酸鹽含量的測定【教學(xué)方法】啟發(fā)式教學(xué)【教學(xué)工具】多媒體課件【教學(xué)過程】（一）引入新課泡菜不但味美，而且還可以提高人的食欲。泡菜是怎樣制作的？泡菜中含有亞硝酸鹽，亞硝酸鹽有什么危害？怎樣測定泡菜中亞硝酸鹽含量？（二）進(jìn)行新課閱讀“乳酸菌發(fā)酵”，完成基礎(chǔ)知識學(xué)習(xí)1基礎(chǔ)知識11制作泡菜所用微生物是 乳酸菌 ，其代謝類型是 異養(yǎng)厭氧 型。在 無氧 條件下，降糖分解為 乳酸 。反應(yīng)式為：12 常見的乳酸菌有 乳酸鏈球菌 和 乳酸桿菌 ，生產(chǎn)酸奶的是 乳酸桿菌 。思考1含抗生素牛奶不能生產(chǎn)酸奶的原因是 抗生素殺死乳酸菌 。活動2：閱讀“亞硝酸鹽”，回答下列問題：13 亞硝酸鹽在食品生產(chǎn)中常用作 食品添加 劑。14 國家規(guī)定肉制品中不超過30mg/kg，醬腌菜中不超過20mg/kg，嬰兒奶粉中不超過2mg/kg。15亞硝酸鹽被吸收后隨 尿液 排出體外，但在 適宜pH 、 溫度 和 一定微生物 作用下形成致癌物質(zhì) 亞硝胺 。思考2日常生活中不宜食用放置時間過長和變質(zhì)蔬菜的原因是什么？亞硝酸鹽含量較高。2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)21實(shí)驗(yàn)流程：填寫流程圖。修整、洗滌晾曬、切分原料加工條狀或片狀加鹽泡菜鹽水加入_并裝壇思考3在哪些操作過程中會感染乳酸菌？原料加工和裝瓶。22泡菜的制作將新鮮蔬菜預(yù)先處理成條狀或片狀。泡菜鹽水按清水和鹽為 41 質(zhì)量比配制煮沸冷卻備用。預(yù)處理的新鮮蔬菜裝至半壇時放入 蒜瓣、生姜、香辛料 等佐料，并繼續(xù)裝至八成滿。倒入配制好的鹽水，使鹽水 浸沒全部菜料 。蓋上泡菜壇蓋子，并用 水 密封發(fā)酵。發(fā)酵時間受到 溫度 影響。思考4泡菜壇內(nèi)的“白膜”是怎樣形成的？ 產(chǎn)膜酵母繁殖。23 測定亞硝酸鹽含量的原理在 鹽酸酸化 條件下，亞硝酸鹽與 對氨基苯磺酸 發(fā)生 重氮化 反應(yīng)后，與 N-1-萘基乙二胺鹽酸 鹽結(jié)合形成 玫瑰紅 色染料，與已知濃度的 標(biāo)準(zhǔn)顯色液 目測比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。3發(fā)酵操作31 泡菜壇的選擇標(biāo)準(zhǔn)是 火候好、無裂紋、無砂眼、壇沿深、蓋子吻合好 ，否則容易引起蔬菜腐爛 。32 腌制時要控制腌制的 時間 、 溫度 和 食鹽 的用量。思考5導(dǎo)致細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加的因素有食 鹽用量不足10 和 腌制時間過長 。一般在腌制 10 天后亞硝酸鹽含量開始降低。4結(jié)果分析與評價41 測定亞硝酸鹽的含量（1）需要配制的溶液有：對氨基苯磺酸溶液、N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽溶液、亞硝酸鈉溶液、提取劑、氫氧化鋁乳液和氫氧化鈉溶液。思考6哪些溶液需要避光保存？提取劑的成分有哪些？對氨基苯磺酸溶液、N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽溶液；氯化鎘和氯化鋇。（2）配制標(biāo)準(zhǔn)顯色液的基本步驟是：用 刻度移液管 吸取體積0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5mL的 亞硝酸鈉 溶液分別置于比色管中，另取1支比色管為空白對照。向各管加入2.0mL 對氨基苯磺酸溶液 混勻靜置35分鐘。向各管加入1.0mL N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽 溶液。最后用 蒸餾水 定容到50mL?；顒?：閱讀“制備樣品處理液”，討論并回答下列問題：（3）制備樣品處理液的步驟是：稱取 0.4 kg泡菜，粉碎榨汁，過濾得約200mL汁液。取100mL汁液倒入500mL容量瓶，添加200mL 蒸餾水 和100mL 提取劑 ，搖床振蕩1h，再加40mL 氫氧化鈉溶液 ，最后用 蒸餾水 定容到500mL并立刻 過濾 獲得濾液。將濾液60mL移入100mL容量瓶，用 氫氧化鋁乳液 定容后過濾，獲得 無色透明 的濾液。活動10：閱讀“比色”，討論并回答下列問題：（4）比色的步驟是：將40mL濾液移入50mL比色管中，并編號。分別依次加入2.0mL的 對氨基苯磺酸溶液 和1.0mL的 N-1-萘基乙二胺鹽酸溶液 ，并定容到50mL，混勻靜置15min。觀察顏色變化，并與 標(biāo)準(zhǔn)顯色液 比較，記錄亞硝酸鹽含量。計(jì)算樣品濾液（40mL）中亞硝酸鹽含量。計(jì)算公式是：思考7經(jīng)測定某樣品濾液中亞硝酸鹽含量為5.0g，40mL濾液的質(zhì)量為41.3g，則泡菜中亞硝酸鹽含量為 0.12mg/kg 。42制作的泡菜一般在 10 天之后食用最好，原因是 亞硝酸鹽含量明顯降低 。思考8在酸奶制作過程 會 （不會、會）產(chǎn)生亞硝酸鹽。 （三）課堂總結(jié)、點(diǎn)評泡菜的制作原理在無氧條件下，乳酸菌將糖分解為乳酸（反應(yīng)式）。設(shè)計(jì)原料選擇、預(yù)處理調(diào)味裝壇發(fā)酵成品操作泡菜壇的選擇腌制時間、溫度和食鹽量的控制亞硝酸鹽含量測定原理亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸反應(yīng)后，在與N-1-萘基乙二胺鹽酸生成玫瑰色染料，并與標(biāo)準(zhǔn)液比較確定亞硝酸鹽含量。步驟配制溶液配制標(biāo)準(zhǔn)液配制樣品液比色計(jì)算結(jié)果分析與評價亞硝酸鹽的形成、含量變化及其危害二.微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)【教學(xué)目標(biāo)】（一）知識與技能了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識；掌握培養(yǎng)基的制備、高壓蒸汽滅菌和平板劃線法等基本操作技術(shù)（二）過程與方法 分析實(shí)驗(yàn)思路的確定和形成的原因，分析實(shí)驗(yàn)流程，對比前面的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，歸納共性，分析差異，增加印象（三）情感、態(tài)度與價值觀：形成勇于實(shí)踐、嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的科學(xué)態(tài)度和科學(xué)精神【教學(xué)重難點(diǎn)】無菌技術(shù)的操作【教學(xué)方法】啟發(fā)式教學(xué)【教學(xué)工具】多媒體課件【教學(xué)過程】（一）引入新課在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用中，都利用了微生物的發(fā)酵作用，其中的微生物來自于制作過程中的自然感染。而在工業(yè)化生產(chǎn)中，為了提高發(fā)酵的質(zhì)量，需要獲得優(yōu)良菌種，并保持發(fā)酵菌種的純度。這就要涉及到微生物的培養(yǎng)、分離、鑒別等基本技術(shù)?，F(xiàn)在我們開始學(xué)習(xí)微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用專題。（二）進(jìn)行新課1基礎(chǔ)知識11 培養(yǎng)基的種類包括 固體 培養(yǎng)基和 液體 培養(yǎng)基等。思考1瓊脂是從紅藻中提取的 多糖 ，在配制培養(yǎng)基中用作為 凝固劑 ?！狙a(bǔ)充】培養(yǎng)基的類型及其應(yīng)用：標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基類型配制特點(diǎn)主要應(yīng)用物理性質(zhì)固體培養(yǎng)基加入瓊脂較多菌種分離,鑒定,計(jì)數(shù)半固體培養(yǎng)基加入瓊脂較少菌種保存液體培養(yǎng)基不加入瓊脂工業(yè)生產(chǎn)，連續(xù)培養(yǎng)化學(xué)組成合成培養(yǎng)基由已知成分配制而成，培養(yǎng)基成分明確菌種分類、鑒定天然培養(yǎng)基由天然成分配制而成，培養(yǎng)基成分不明確工業(yè)生，產(chǎn)降低成本目的用途鑒別培養(yǎng)基添加某種指示劑或化學(xué)藥劑菌種的鑒別選擇培養(yǎng)基添加（或缺少）某種化學(xué)成分菌種的分離12 培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括 水 、 無機(jī)鹽 、 碳源 、 氮源 四類營養(yǎng)成分。思考2從細(xì)胞的化學(xué)元素組成來看，培養(yǎng)基中為什么都含有這些營養(yǎng)成分？C、H、O、N、P、S是構(gòu)成細(xì)胞原生質(zhì)的基本元素，約占原生質(zhì)總量的97以上?！狙a(bǔ)充】碳源：如CO2、糖類、脂肪酸等有機(jī)物，構(gòu)成微生物的結(jié)構(gòu)物質(zhì)和分泌物，并提供能量。氮源：如N2、氨鹽、硝酸鹽、牛肉膏、蛋白胨等，主要用來合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮代謝物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作為碳源，又可以作為氮源，如氨基酸等。13 培養(yǎng)基除滿足微生物生長的 pH 、 特殊營養(yǎng)物質(zhì) 和 氧氣 等要求?！狙a(bǔ)充】生長因子：某些微生物正常生長代謝過程中必須從培養(yǎng)基中吸收的微量有機(jī)小分子，如某些氨基酸、堿基、維生素等。思考3牛肉膏和蛋白胨主要為微生物提供 糖 、 維生素 和 有機(jī)氮 等營養(yǎng)物質(zhì)。思考4培養(yǎng)乳酸桿菌時需要添加 維生素 ，培養(yǎng)霉菌時需要將培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)為 酸性 ，培養(yǎng)細(xì)菌時需要將pH調(diào)節(jié)為 中性或微堿性 ?；顒?：閱讀“無菌技術(shù)”，討論回答下列問題：14 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 防止外來雜菌的入侵 。15 無菌技術(shù)包括：（1）對實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)行 清潔和消毒 ；（2）將培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行 滅菌 ；（3）為避免周圍微生物污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在 酒精燈火焰附近 旁進(jìn)行；（4）避免已滅菌處理的材料用具與 周圍物品 相接觸。16 比較消毒和滅菌（填表）比較項(xiàng)理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強(qiáng)烈全部微生物能思考5無菌技術(shù)除了防止培養(yǎng)物被污染外，還具有的目的是 防止感染實(shí)驗(yàn)操作者 。17 消毒方法：（1）日常生活經(jīng)常用到的是 煮沸 消毒法；（2）對一些不耐高溫的液體，則使用 巴氏 消毒法（作簡要介紹）；（3）對接種室、接種箱或超凈工作臺首先噴灑 石炭酸或煤酚皂 等溶液以增強(qiáng)消毒效果，然后使用 紫外線 進(jìn)行物理消毒。（4）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手使用 酒精 進(jìn)行消毒；（5）飲水水源用 氯氣 進(jìn)行消毒。18滅菌方法：（1）接種環(huán)、接種針、試管口等使用 灼燒 滅菌法；（2）玻璃器皿、金屬用具等使用 干熱 滅菌法，所用器械是 干熱滅菌箱 ；（3）培養(yǎng)基、無菌水等使用 高壓蒸汽 滅菌法，所用器械是 高壓蒸汽滅菌鍋 。（4）表面滅菌和空氣滅菌等使用 紫外線 滅菌法，所用器械是 紫外燈 。思考6對接種環(huán)滅菌時要用酒精燈的 充分燃燒 層火焰灼燒可能伸入試管或培養(yǎng)皿的部位。思考7利用干熱滅菌箱對玻璃器皿滅菌時物品不能擺得太擠，目的是避免妨礙熱空氣流通。思考8物品裝入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后，要首先打開排氣閥，煮沸并排除鍋內(nèi)冷空氣，其目的是 有利于鍋內(nèi)溫度升高 ；隨后關(guān)閉排氣閥繼續(xù)加熱，氣壓升至 100k Pa，溫度為 121 ，并維持 1530 min；最后切斷熱源，使溫度自然降溫，氣壓務(wù)必降至 零 時打開鍋蓋，其目的是防止 容器中的液體暴沸 。【補(bǔ)充】培養(yǎng)基的配制原則：目的要明確：根據(jù)培養(yǎng)的微生物種類、培養(yǎng)的目的等確定培養(yǎng)基的類型和配制量。營養(yǎng)要協(xié)調(diào)：培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例要適宜。例如：碳氮比41時，谷氨酸棒狀桿菌大量繁殖而產(chǎn)生谷氨酸少；碳氮比為31時，菌體繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。pH要適宜：細(xì)菌培養(yǎng)基pH中性或偏堿性，霉菌培養(yǎng)基呈酸性。2實(shí)驗(yàn)操作21 計(jì)算：根據(jù)配方比例，計(jì)算100mL培養(yǎng)基各成分用量。22 稱量：準(zhǔn)確稱取各成分。稱取牛肉膏和蛋白胨時動作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空氣中水分。23 溶化：加水加熱熔化牛肉膏；加入蛋白胨和氯化鈉繼續(xù)加熱；加入瓊脂；用蒸餾水定容到100mL。整個過程不斷用玻棒攪拌，目的是防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂。24 調(diào)pH：用1mol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)pH至偏堿性。25 滅菌：將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中，加塞包扎后用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌；所用培養(yǎng)皿用報(bào)紙包扎后用干熱滅菌箱滅菌。26 倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至50左右時在酒精燈火焰附近操作進(jìn)行。其過程是：在火焰旁右手拿錐形瓶，左手拔出棉塞；右手拿錐形瓶，使錐形瓶的瓶口迅速通過火焰；左手將培養(yǎng)皿打開一條縫隙，右手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，立刻蓋上皿蓋。待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置。思考1錐形瓶的瓶口通過火焰的目的是消滅瓶口的雜菌，防止雜菌感染培養(yǎng)基。思考2倒平板的目的是防止培養(yǎng)基冷卻過程中形成的水滴落到培養(yǎng)基表面。思考3若皿蓋和皿底之間粘有培養(yǎng)基，則該平板能否培養(yǎng)微生物？為什么？不能?？諝庵须s菌會在這些粘附培養(yǎng)基上繁殖，并污染皿內(nèi)培養(yǎng)基。思考4配制斜面培養(yǎng)基中，試管要加塞棉塞的目的是保持通氣并防止雜菌感染。思考5試管培養(yǎng)基形成斜面的作用是增大接種面積。27 接種271微生物接種的最常用方法是平板劃線法和稀釋涂布法，另外還有穿刺接種和斜面接種等。272平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。其操作步驟是：將接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒直至燒紅。在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開大腸桿菌的菌種試管的棉塞。將菌種試管口通過火焰達(dá)到消滅試管口雜菌的目的。將冷卻的接種環(huán)伸入到菌液中取出一環(huán)菌種。將菌種試管口再次通過火焰后塞上棉塞。將皿蓋打開一條縫隙，把接種環(huán)伸入平板內(nèi)劃35條平行線，蓋上皿蓋，不要劃破培養(yǎng)基。灼燒接種環(huán)，冷卻后從第一區(qū)劃線末端開始向第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)上述過程，完成三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將第五區(qū)的劃線與第一區(qū)劃線相連。將平板倒置放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。思考6取菌種前灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上的微生物；除第一次劃線外，其余劃線前都要灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上殘留菌種；取菌種和劃線前都要求接種環(huán)冷卻后進(jìn)行，其目的是防止高溫殺死菌種；最后灼燒接種環(huán)的目的是防止細(xì)菌污染環(huán)境和操作者。思考7在第1次劃線后都從上次劃線末端開始的目的是獲得由單個細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。273稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，并將不同稀釋度菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時，即可獲得單個細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。274系列稀釋操作：取盛有9mL水的無菌試管6支，編號101、102、103、104、105、106。用灼燒冷卻的移液管吸取1mL菌液注入編號為101試管中，并吹打3次，使之混勻。從101倍液中吸取1mL菌液注入到編號為102試管內(nèi)吹打均勻，獲得102倍液。依此類推。思考8操作中試管口和移液管應(yīng)在離火焰12cm處。整個操作過程中使用了1支移液管。31培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是對照，若有菌落形成，說明培養(yǎng)基滅菌不徹底。32在肉湯培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落呈白色，為圓形，光滑有光澤，邊緣整齊。33培養(yǎng)12h和24h后的菌落大小不同（相同、不同）；菌落分布位置相同（相同、不同）。原因是時間越長，菌落中細(xì)菌繁殖越多，菌落體積越大；菌落的位置不動，但菌落數(shù)增多。思考9在某培養(yǎng)基上出現(xiàn)了3種特征不同的菌落，原因有培養(yǎng)基滅菌不徹底或雜菌感染等。思考10頻繁使用的菌種利用臨時保藏法保存，長期保存菌種的方法是甘油管藏法。前者利用固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)后，保存在4冰箱中，每36個月轉(zhuǎn)種培養(yǎng)一次，缺點(diǎn)是保存時間較短，容易發(fā)生污染和變異；后者將菌種與無菌體積等量混合后保存在20冷凍箱中。（四）課堂總結(jié)、點(diǎn)評微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)培養(yǎng)基無菌技術(shù)純化大腸桿菌培養(yǎng)基的配制配制培養(yǎng)基的原則配制培養(yǎng)基的方法計(jì)算稱量溶化調(diào)pH分裝加棉塞滅菌倒平板平板劃線法稀釋涂布法系列稀釋平板涂布 三.植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 課題1 菊花的組織培養(yǎng) 【教學(xué)目標(biāo)】（一）知識與技能1、熟悉植物組織培養(yǎng)的基本過程2、理解細(xì)胞分化的概念及離體植物細(xì)胞的脫分化和再分化3、通過聯(lián)系農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實(shí)際，培養(yǎng)學(xué)生活學(xué)活用，理論聯(lián)系實(shí)際的能力（二）過程與方法,歸納MS培養(yǎng)基的配制方法，并設(shè)計(jì)表格比較微生物培養(yǎng)基與MS培養(yǎng)基的配方的異同。（三）情感、態(tài)度與價值觀 通過閱讀植物組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展史，課下查閱植物組織培養(yǎng)技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用的資料，關(guān)注學(xué)生科學(xué)態(tài)度的教育，拓展學(xué)生視野，感受科學(xué)技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中的重要價值?！窘虒W(xué)重點(diǎn)】植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術(shù)【教學(xué)難點(diǎn)】植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術(shù)【教學(xué)方法】啟發(fā)式教學(xué)【教學(xué)工具】多媒體課件【教學(xué)過程】（一）引入新課上節(jié)課我們探討學(xué)習(xí)了如何從土壤中分離出尿素分解菌和纖維素分解微生物及其計(jì)數(shù)方法。這節(jié)課我們來學(xué)習(xí)研究植物的組織培養(yǎng)技術(shù)。（二）進(jìn)行新課1基礎(chǔ)知識知識回顧：聯(lián)系“植物細(xì)胞工程”，回答下列問題：11具有某種生物全套遺傳信息的任何一個活細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整個體的能力，即每個生物細(xì)胞都具有全能性。但在生物體的生長發(fā)育過程中并不表現(xiàn)出來，這是因?yàn)樵谔囟ǖ臅r間和空間條件下，通過基因的選擇性表達(dá)，構(gòu)成不同組織和器官。12植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用有：實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖；培育脫毒作物；制作人工種子；培育作物新品種以及細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等?；顒?：閱讀“植物組織培養(yǎng)的基本過程”，討論并完成以下問題：13細(xì)胞分化：個體發(fā)育中細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上出現(xiàn)穩(wěn)定性差異的過程。思考1細(xì)胞分化是一種持久性的變化，它有什么生理意義？使多細(xì)胞生物體中細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能趨向?qū)ｉT化，有利于提高各種生理功能的效率。14愈傷組織是通過細(xì)胞分裂形成的，其細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，高度液泡化呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。思考2填表比較根尖分生組織和愈傷組織的異同：組織類型細(xì)胞來源細(xì)胞形態(tài)細(xì)胞結(jié)構(gòu)細(xì)胞排列細(xì)胞去向根尖分生組織受精卵正方形無液泡緊密分化成多種細(xì)胞組織愈傷組織高度分化細(xì)胞無定形高度液泡化疏松再分化成新個體相同點(diǎn)都通過有絲分裂進(jìn)行細(xì)胞增殖15植物組織培養(yǎng)的過程可簡單表示為：（脫分化）離體細(xì)胞、組織、器官（又叫外植體）（再分化）愈傷組織（生長）胚狀體叢芽等新個體活動2：閱讀“影響植物組織培養(yǎng)的條件”，討論并完成以下問題：16材料：植物的種類、材料的年齡和保存時間的長短等都會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇未開化植物的莖上部新萌生的側(cè)枝作材料。思考3一般來說，容易進(jìn)行無性繁殖的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。思考4選取生長旺盛嫩枝進(jìn)行組培的原因是嫩枝生理狀態(tài)好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。17營養(yǎng)：常用的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co，有機(jī)物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。18激素：在培養(yǎng)基中需要添加生長素和細(xì)胞分裂素等植物激素，其濃度、使用的先后順序、用量的比例等都影響結(jié)果。思考5填表：激素使用的先后順序及其用量比例對細(xì)胞分裂和分化的影響。生長素細(xì)胞分裂素比值與結(jié)果比值高時促根分化，抑芽形成比值低時促芽分化，抑根形成比值適中促進(jìn)愈傷組織生長使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先生長素，后細(xì)胞分裂素有利于分裂但不分化先細(xì)胞分裂素，后生長素細(xì)胞既分裂也分化同時使用分化頻率提高1.9環(huán)境條件：PH、溫度、光等環(huán)境條件。菊花組培所需PH為5.8，溫度為18-22，光照條件為每日用日光燈照射12小時。2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)活動3：閱讀“制備MS固體培養(yǎng)基”，回答下列問題：2121配制各種母液：將各種成分按配方比例配制成的濃縮液。使用時根據(jù)母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量，并加蒸餾水稀釋。22配制培養(yǎng)基：應(yīng)加入的物質(zhì)有瓊脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有機(jī)物和植物激素的母液，并用蒸餾水定容到1000毫升。在菊花組織培養(yǎng)中，可以不添加植物激素，原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易。23滅菌：采取的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。思考6MS培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用是什么？肉湯培養(yǎng)基相比，MS培養(yǎng)基有哪些特點(diǎn)？大量元素和微量元素提供植物細(xì)胞所必需的無機(jī)鹽；蔗糖提供碳源，維持細(xì)胞滲透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營養(yǎng)為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營養(yǎng)。活動4：閱讀“外植體消毒”，填寫下列流程圖：旺盛嫩枝(流水)沖洗刷洗，沖洗20分鐘左右(無菌吸水紙)吸干表面水分(70的酒精)搖動2-3次6-7秒(無菌水)清洗(無菌吸水紙)吸干表面水分(氯化汞)溶液浸泡12分鐘(無菌水)清洗3次思考7在此消毒過程中，是不是強(qiáng)度越大越好，為什么？ 不是。對外植體進(jìn)行表面消毒時，既要考慮到藥劑的消毒效果，又要考慮到植物的耐受力。3發(fā)酵操作活動5：閱讀“接種、培養(yǎng)、移栽和栽培”，填寫：31前期準(zhǔn)備：用70的酒精消毒工作臺，點(diǎn)燃酒精燈。注意所有接種工作都必須在酒精燈旁進(jìn)行，器械使用前后都要用火焰灼燒滅菌。32接種操作：接種過程中插入外植體時形態(tài)學(xué)上端朝上，每個錐形瓶接種78個外植體。思考8外植體接種與細(xì)菌接種相似之處是操作步驟相同，而且都要求無菌操作。33培養(yǎng)過程應(yīng)該放在無菌箱中進(jìn)行，并定期進(jìn)行消毒，保持適宜的溫度和光照。34移栽前應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜，讓其在培養(yǎng)間生長幾日，然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。然后將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中生活一段時間，進(jìn)行壯苗。最后進(jìn)行露天栽培。思考9外植體在培養(yǎng)過程中可能會被污染，你認(rèn)為造成污染的原因有哪些？外植體消毒不徹底；培養(yǎng)基滅菌不徹底；接種中