中藥藥效學(xué)研究概論-修改版ppt課件.ppt

中藥藥理學(xué)專論唐春萍 藥物 drugs 用于治療 預(yù)防和診斷疾病的化學(xué)物質(zhì) 藥理學(xué) pharmacology 研究藥物與機體相互作用及其規(guī)律的學(xué)科 緒言 任務(wù)藥物效應(yīng)動力學(xué) pharmacodynamics 藥效學(xué) 藥物代謝動力學(xué) pharmacokinetics 藥動學(xué) 藥效學(xué) 研究藥物對機體 病原體 的作用及作用機制的科學(xué) 藥動學(xué) 研究機體對藥物的作用 包括藥物在體內(nèi)的吸收 分布 生物轉(zhuǎn)化和排泄過程以及藥物效應(yīng)與血藥濃度隨時間消長規(guī)律的科學(xué) 作用 作用機制 吸收 分布 代謝 排泄 緒言 研究目的充分發(fā)揮藥物的治療效果 提高用藥安全性 為臨床合理用藥提供依據(jù) 為開發(fā)研究新藥或新劑型提供實驗資料 闡明藥物作用機制 進(jìn)一步了解機體功能的生理生化過程的本質(zhì) 緒言 研究內(nèi)容 闡明藥物對機體 包括病原體 的作用和作用機制臨床主要適應(yīng)癥不良反應(yīng)禁忌證藥物的體內(nèi)過程和用法 緒言 新藥的藥理學(xué)研究 臨床前藥理學(xué)研究藥效學(xué)研究一般藥理學(xué)研究藥代動力學(xué)研究新藥毒理學(xué)研究臨床藥理學(xué)研究 期臨床試驗 I期臨床試驗 健康志愿者 20 50例 初步的臨床藥理學(xué)人體安全性評價試驗 觀察人體對于新藥的耐受程度和藥物代謝動力學(xué) 提供給藥方案 II臨床試驗 病例100例 隨機雙盲對照臨床試驗 對新藥有效性及安全性作出初步評價 確定劑量 臨床藥理試驗 中藥藥效學(xué)研究概論 第一節(jié)中藥藥效學(xué)研究的意義 中藥是指在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下 用于預(yù)防 治療疾病的物質(zhì) 包括植物藥 動物藥和礦物藥 中藥藥效學(xué)是研究中藥對機體的作用 作用機制以及產(chǎn)生作用的物質(zhì)基礎(chǔ) 化學(xué)成分 闡明中藥防治疾病原理的科學(xué) 第一節(jié)中藥藥效學(xué)研究的意義 1 對推進(jìn)中藥現(xiàn)代化 促進(jìn)中醫(yī)藥的發(fā)展具有重要意義 中藥功效是幾千年臨床實踐經(jīng)驗的總結(jié) 如果用現(xiàn)代科學(xué)方法研究和闡釋中藥功效 那么既可以溝通中西醫(yī)間的學(xué)術(shù)思想 闡明中醫(yī)藥理論 又可以提高臨床療效 促進(jìn)中醫(yī)藥的發(fā)展 第一節(jié)中藥藥效學(xué)研究的意義 2中藥藥效學(xué)是中藥新藥研究的重要內(nèi)容2 1現(xiàn)代科學(xué)最基本的方法是實驗方法藥效學(xué)試驗研究 可嚴(yán)格控制試驗條件 排除各種干擾因素 進(jìn)行單因素分析 獲得詳細(xì)準(zhǔn)確的結(jié)果 發(fā)現(xiàn)某些內(nèi)在的規(guī)律 第一節(jié)中藥藥效學(xué)研究的意義 2 2動物試驗可獲得大量在人體無法獲得的信息動物試驗可反復(fù)進(jìn)行在人體無法進(jìn)行的傷害性試驗 獲得大量在人體無法獲得的信息 2 3為新藥的臨床研究奠定基礎(chǔ)在不了解新藥的安全性 有效性的情況下 進(jìn)行人體試用 臨床研究 有可能對試用者造成危害 因此在新藥試用于人體之前 對其有效性及安全性應(yīng)有必要的了解 為臨床研究提供可靠的試驗依據(jù) 確保試驗者不至延誤病情 產(chǎn)生不良后果 沙立度胺 反應(yīng)停Thalidomide 反應(yīng)停慘案 反應(yīng)停 Thalidomide 是催眠鎮(zhèn)靜藥 尤其適用于妊娠婦女的嘔吐 煩躁和失眠 一般毒性很低 半數(shù)致死量測不出來 當(dāng)時曾有人服大量反應(yīng)停自殺未果 錯誤的導(dǎo)向驅(qū)使大量孕婦服用反應(yīng)停止嘔 結(jié)果于1959 1962年間在西德 英 加 澳和日等17國出現(xiàn)12000余名 海豹 畸形嬰兒 特點是這些嬰兒缺臂少腿 或手足直接與軀體相連 這萬余名畸形兒中有一半存活 而且智力正常 這無疑給這些畸人造成終生痛苦 給家庭和社會帶來沉重負(fù)擔(dān) 反應(yīng)停慘案出現(xiàn) 一是當(dāng)時沒有進(jìn)行完善各種動物標(biāo)準(zhǔn)的致畸試驗 二是藥審也無此要求 扶正祛邪調(diào)節(jié)平衡 扶正 祛邪 補其偏衰 損其偏盛 第二節(jié)中藥的基本作用 第三節(jié)中藥藥理作用的特點與中藥功效的關(guān)系 1 作用的多效性2 量效關(guān)系的相對不規(guī)則性3 雙向調(diào)節(jié)性4 作用相對溫和 緩慢 中藥藥理作用的特點 中藥藥理作用與中藥功效的關(guān)系 具有相關(guān)性存在差異性豐富了對中藥功效的認(rèn)識 第四節(jié)中藥藥效學(xué)研究的特點 1以中醫(yī)藥基本理論為指導(dǎo) 注意結(jié)合中藥功效設(shè)計藥理試驗2中藥組成復(fù)雜傳統(tǒng)中藥及其方劑 其成分復(fù)雜 往往是多成分 多環(huán)節(jié) 多靶點的整合作用 中藥方劑有其內(nèi)在規(guī)律和科學(xué)基礎(chǔ) 不單是藥物功效的相加或相減 而更具有減毒增效 優(yōu)化組合的作用 研究中藥藥理作用時要根據(jù)每個中藥或方劑的特點開展研究 第四節(jié)中藥藥效學(xué)研究的特點 3整體與離體實驗相結(jié)合 注意中藥多種成分和多方面藥理作用中醫(yī)學(xué)以整體思想體系為基礎(chǔ) 重視宏觀調(diào)控 中藥作用起效往往較慢 藥理試驗常常要多次給藥或預(yù)防給藥才有效 有些成分是在體內(nèi)經(jīng)過化學(xué)變化才發(fā)揮作用 4合理處置試驗中藥 注意避免中藥藥理研究出現(xiàn)假陽性或假陰性結(jié)果中藥包括化學(xué)成分復(fù)雜的單味中藥及中藥復(fù)方 影響中藥藥理作用的因素很多 如中藥品種 產(chǎn)地 采收季節(jié) 貯存保管 炮制方法 提取方法和生產(chǎn)工藝不同等 都可影響實驗結(jié)果 中藥化學(xué)成分復(fù)雜 大量雜質(zhì)及各種無機離子干擾 也可影響實驗結(jié)果 第四節(jié)中藥藥效學(xué)研究的特點 第四節(jié)中藥藥效學(xué)研究的特點 5建立 證 動物模型以研究中藥藥效辨證論治 就是應(yīng)用中醫(yī)藥理論對患者表現(xiàn)的癥狀 體征進(jìn)行綜合分析 辨別為何種證候 在此基礎(chǔ)上擬定出治療措施的過程 故中藥藥理研究要根據(jù)臨床應(yīng)用特點 盡可能建立 證 的動物模型 我國已經(jīng)研制建立了 陰虛 陽虛 氣虛 血虛 血瘀 脾虛 旨虛 厥脫癥 等許多 證 的動物模型 第五節(jié)中藥藥效學(xué)研究的基本思路 1根據(jù)中藥及其方劑的傳統(tǒng)功效和主治研究其作用及作用機制 例如附子及四逆湯 附子 干姜 甘草 具有回陽救逆功效 主治亡陽證 現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)亡陽證與心力衰竭 微循環(huán)障礙有關(guān) 因此即針對 亡陽證 的上述病理改變開展附子及四逆湯中藥藥效學(xué)研究 藥效學(xué)研究證明它們有強心 改善微循環(huán) 抗休克作用 且復(fù)方的作用效果增強 毒性降低 第五節(jié)中藥藥效學(xué)研究的基本思路 2以特定藥效作用或某種疾病動物模型 對天然藥物進(jìn)行篩選和分離 從而開發(fā)出新的藥物 用特定藥效作用或某種疾病動物模型 從一系列中藥或天然藥物中篩選出一個作用明顯的成分 西方國家大多以這種思路研究中藥 在我國也有一部分研究者采用這種思路研究中藥 例如有關(guān)喜樹堿 三尖杉堿的研究 香鱗毛蕨 第六節(jié)中藥藥效學(xué)研究的基本要求與方法 一中藥藥效學(xué)研究的基本目的要求 中藥藥效學(xué)研究的基本目的 中藥新藥的基本要求是安全 有效 可控和穩(wěn)定1通過藥效學(xué)研究確定有效性通過藥效學(xué)研究可以初步明確新藥是否有效 作用的強弱 與同類藥比較在藥效上的優(yōu)缺點和特色 確定有無實用價值及開發(fā)前景 結(jié)合毒理學(xué)研究結(jié)果 確定可否進(jìn)行人體試驗及臨床研究 中藥藥效學(xué)研究的基本目的 2提高臨床療效通過作用機制研究及配伍規(guī)律研究 揭示藥物作用的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用原理 使臨床使用充分發(fā)揮藥物特色 提高臨床療效 中藥藥效學(xué)研究的基本目的 中藥新藥的藥效學(xué)研究應(yīng)充分運用現(xiàn)代科學(xué)特別是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的理論 方法和手段 制定科學(xué) 嚴(yán)密 具有中醫(yī)藥特點的試驗計劃 根據(jù)新藥的特點 功能主治 臨床實踐經(jīng)驗及近年研究成果 合理選用試驗方法 建立與臨床相符的 病 癥 或 證 相似的動物模型與指標(biāo) 對新藥的有效性作出科學(xué)的評價 對天然藥物及中藥中提出的單一化合物研究不強求用中醫(yī)藥理論來指導(dǎo) 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 1試驗負(fù)責(zé)人應(yīng)具有藥理 毒理專業(yè)高級職稱和有較高理論水平 工作經(jīng)驗與資歷的人員 確保試驗設(shè)計合理 數(shù)據(jù)可靠 結(jié)論判斷準(zhǔn)確 試驗報告應(yīng)有試驗負(fù)責(zé)人簽名及單位蓋章 2受試藥物處方固定 制備工藝及質(zhì)量基本穩(wěn)定 一般為中試產(chǎn)品 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 3研究單位從事新藥安全性研究和藥理研究的實驗室應(yīng)符合國家 藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范 GoodLaboratoryPractice 的要求 具有較高的科研水平 技術(shù)實力 組織管理能力 具有較好的實驗條件 其實驗室 儀器設(shè)備 藥品試劑等均應(yīng)符合要求 4實驗動物種屬 性別 年齡 健康狀況 飼養(yǎng)條件 動物等級 特殊模型動物等 均應(yīng)符合國家規(guī)定的試驗要求 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 5試驗記錄5 1記錄要求實驗記錄應(yīng)真實 完整 詳細(xì) 準(zhǔn)確 規(guī)范 每只動物的原始記錄 數(shù)據(jù) 圖譜等 防止漏記和隨意涂改 試驗中出現(xiàn)的特殊現(xiàn)象 矛盾結(jié)果等 均應(yīng)詳細(xì)記錄 描記和形態(tài)學(xué)檢查應(yīng)有記錄圖和照片 不得偽造 編造數(shù)據(jù) 記錄應(yīng)符合國家 藥品研究實驗記錄暫行規(guī)定 的要求 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 實驗室的溫度 濕度 必要時氣壓 實驗的時間 必要時注明白日或黑夜 以及可能影響試驗的環(huán)境因素 均應(yīng)詳細(xì)記錄 實驗負(fù)責(zé)人 參加者 單位等亦應(yīng)記錄 所有試驗記錄 均應(yīng)妥善保存 保管人姓名 單位 隨時準(zhǔn)備上級檢查 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 5 2記錄內(nèi)容實驗名稱每項實驗首先記錄課題名稱及實驗名稱 實驗方案實驗方案是進(jìn)行實驗的依據(jù) 實驗首頁應(yīng)有一份詳細(xì)的實驗設(shè)計及方案 實驗日期每次實驗須記下年 月 日及時間 試驗動物種屬 性別 年齡 數(shù)量 健康狀況 提供單位 合格證 動物等級或特殊模型動物 飼養(yǎng)管理 試驗前觀察與處理 隨機分組的方法 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 試驗用藥與儀器品種 學(xué)名 產(chǎn)地 提取工藝 藥物含量 濃度 給藥劑量與容積 給藥途徑 次數(shù) 時間 陽性對照藥的選擇依據(jù) 處方 功能主治 生產(chǎn)廠家名稱 批準(zhǔn)文號 生產(chǎn)批號及出廠日期 實驗前預(yù)處理 有無特殊溶媒 基質(zhì) 防腐劑 助溶劑 填加劑等 試驗用其它藥品試劑的品名 規(guī)格 生產(chǎn)廠家 批號等 主要儀器及試驗用品 型號 規(guī)格 性能 生產(chǎn)廠家及批號等 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 試驗方法說明參考文獻(xiàn)的來源 主要操作程序 動物麻醉 固定 手術(shù) 觀測等 觀測指標(biāo) 取樣 測試 記錄 計算 統(tǒng)計等 試驗結(jié)果制表 繪圖 分析判斷 獲得準(zhǔn)確可靠的結(jié)論 中藥藥效學(xué)研究的基本要求 6統(tǒng)計處理試驗結(jié)果應(yīng)進(jìn)行正確的統(tǒng)計學(xué)處理 統(tǒng)計方法應(yīng)說明 數(shù)據(jù)表格應(yīng)規(guī)范 資料整理應(yīng)簡明扼要 注意科學(xué)性 嚴(yán)密性 邏輯性 真實可靠地反映出試驗所獲得的各種信息與結(jié)果 二中藥藥效學(xué)研究的方法 1實驗設(shè)計原則應(yīng)該符合中藥特點 符合國家新藥研究申報的有關(guān)規(guī)定 遵守 隨機 對照 重復(fù) 的原則 2動物選擇 2 1 種類動物選擇敏感動物 對藥物的反應(yīng)與人體近似 以進(jìn)化程度較高 解剖 生理 習(xí)性及反應(yīng)性與人相近的動物為佳 常用動物 小鼠和大鼠 易繁殖和飼養(yǎng) 價廉 耗藥量少 豚鼠 易于致敏 對組胺非常敏感 適于做過敏試驗 家兔 對體溫變化十分靈敏 常用于熱原檢查和解熱試驗 貓 犬 大鼠 血壓穩(wěn)定 常作為血壓試驗 大鼠和犬 常用于毒理學(xué)研究 豬 由于解剖和生理上與人相似 近日選用逐漸增多 47 可編輯 2 2品系不同品系動物對藥物的敏感性不一 目前最常用動物為昆明種小鼠 NIH小鼠 Wistar大鼠 SD大鼠 新西蘭兔和日本大白兔 豚鼠等 2 3動物等級實驗動物應(yīng)選用符合等級要求的健康動物 并有供應(yīng)單位合格證 我國將實驗動物分為4級 一級動物即普通動物 CV 二級動物即清潔動物 CL 三級動物即無特定病原體動物 SPF 四級動物即無菌動物 GF 和悉生動物 GN 目前我國藥理學(xué)實驗大多采用普通級動物 CV動物 和清潔級動物 SPF動物 2 4年齡常用性成熟年齡動物 小鼠為6 8周齡 大鼠8 9周齡 豚鼠6 10周齡 兔4 5月 貓6 8月 犬6 8月 常選用成年小鼠體重為18 22g 大鼠200g 150 250g 家兔2kg 1 5 2 5kg 貓2 3kg 犬8一lOkg 猴8 15kg 必要時選用特定年齡 體重動物 2 5性別一般試驗選用雌雄各半動物 某些試驗選一個性別動物 例如熱板法鎮(zhèn)痛試驗選用雌性小鼠 而不用雄性小鼠 2 6數(shù)量每組試驗動物數(shù)應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)要求 藥效學(xué)計量學(xué)統(tǒng)計試驗每組試驗動物 一般小鼠不得少于10只 大鼠為8只 貓 犬為4只以上 以便進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理 用小鼠 大鼠計數(shù)資料試驗動物數(shù)則要求更多 二中藥藥效學(xué)研究的方法 3方法選擇3 1根據(jù)主治 參考功能 選擇試驗方法適用于多數(shù)中藥的基本經(jīng)驗 個別情況下也可根據(jù)功能選擇試驗方法 但要注意 目的性明確 針對性強 避免盲目選作大量無關(guān)或關(guān)系不大的試驗 3 2首選具有中藥特點的試驗方法及動物模型首選符合中醫(yī)理論 具有中藥特點的試驗方法及動物模型 其次可選用現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)合適的方法及模型 3 3主要藥效為主 配合輔助試驗以直接證實主要藥效的核心試驗 或主要試驗 為必作項目 可選作不同模型 方法 動物及給藥途徑的試驗2 3項 以間接證實主要藥效或次要治療作用的外圍試驗 或輔助試驗 為選作項目 可根據(jù)新藥的特點 功能主治及已有的臨床經(jīng)驗 酌情選作幾個方面的藥效試驗 每個方面選作1 2項試驗即可 3 4試驗方法的選擇試驗方法的選擇應(yīng)強調(diào)科學(xué)性 先進(jìn)性 重復(fù)性 目的性 必須有針對性的精選試驗 不可盲目的以多取勝 3 5整體和離體方法選擇中藥由于成分復(fù)雜 特別是復(fù)方粗制劑 為多種化學(xué)成分 或有效部位 的混合體 除有效成分外 尚有一些無關(guān)成分及干擾成分 中藥粗制劑藥效學(xué)試驗應(yīng)以體內(nèi)試驗為主 體外試驗為輔 以消化道給藥為主 其它給藥途徑為輔 二中藥藥效學(xué)研究的方法 4指標(biāo)的選擇選擇符合要求的觀測指標(biāo) 才能反映出藥物對機體的影響 進(jìn)行新藥有效性的評價 指標(biāo)符合以下要求 4 1特異性強任何試驗都應(yīng)選用針對性強 專屬性好 能夠反映變化本質(zhì)及主要藥效的指標(biāo) 4 2敏感性高指標(biāo)要敏感 對于病情及癥候的任何變化 對于藥物的防治作用 能夠敏感 準(zhǔn)確的反映出來 二中藥藥效學(xué)研究的方法 4 3重現(xiàn)性好指標(biāo)要穩(wěn)定 重現(xiàn)性好 結(jié)果才可靠 若重現(xiàn)性差 則應(yīng)查找原因 4 4客觀性主觀檢測的指標(biāo) 誤差較大 不夠準(zhǔn)確 例如肉眼觀測血壓計汞柱的變化 誤差較大 而用描記儀直接描記血壓曲線 客觀的 動態(tài)的記錄血壓變化 則更為精確 二中藥藥效學(xué)研究的方法 4 5定量指標(biāo)為了準(zhǔn)確判斷藥物的作用及機體的變化 必須有量的概念 量的比較 選用可測量的定量指標(biāo) 即計量指標(biāo) 質(zhì)反應(yīng)指標(biāo)只能反映是與否 死與不死 陰性與陽性 只能用計數(shù)指標(biāo) 有的指標(biāo)目前尚無計量方法 可用分級定度打分的辦法 使之定量化 二中藥藥效學(xué)研究的方法 4 6多指標(biāo)綜合運用為了準(zhǔn)確 全面地判斷新藥的有效性 常以生理 生化 形態(tài)等各類指標(biāo)合理搭配 綜合運用 則試驗結(jié)果更為全面 準(zhǔn)確 可靠 有些指標(biāo)單一使用即可達(dá)到試驗?zāi)康?滿足要求 則不必為 多而全 而勉強采用多指標(biāo)觀測 應(yīng)具體情況具體分析 根據(jù)試驗?zāi)康呐c要求 優(yōu)選指標(biāo) 不是 越多越好 而是 越說明問題越好 二中藥藥效學(xué)研究的方法 5 藥物的要求供試藥物 應(yīng)處方固定 各味藥材經(jīng)過品種鑒定 生產(chǎn)工藝基本定型 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及穩(wěn)定性試驗基本符合要求 與臨床用藥基本相同的劑型與質(zhì)量 凡是藥材未經(jīng)鑒定 處方 生產(chǎn)工藝 質(zhì)量 劑型等尚未固定 或有變動者 不宜用作藥效學(xué)試驗 5 1消化道給藥包括灌胃 胃管 十二指腸給藥等 可用制劑或提取物進(jìn)行藥效學(xué)試驗 前者與臨床用藥更為相似 更合理 但因制劑含有大量糊精 蔗糖等賦形劑 水溶后呈黏稠狀 灌胃不便 且體積大 含藥量低 無法濃縮提高含藥量 因而難于提高動物用量 在較多情況下 常用中藥提取物進(jìn)行試驗 5 2注射給藥及試管內(nèi)給藥應(yīng)是化學(xué)純品或精制的中藥制劑 盡量除去雜質(zhì) 不溶成分及無關(guān)成分 其溶解性 粒度 滲透壓 酸堿度 無機離子 鈉 鉀 鈣 鎂等 含量以及可能干擾試驗結(jié)果的各種因素 均應(yīng)控制在生理范圍內(nèi)或符合注射劑基本要求 否則 注射給藥將引起機體非特異性反應(yīng) 產(chǎn)生一系列假象 誤認(rèn)為藥理作用 試管內(nèi)給藥也會出現(xiàn)假陽性結(jié)果 造成錯誤判斷 5 3外用藥包括擦劑 洗劑 貼劑 膏藥等 一類是用于治療體表或局部疾患 如皮膚病 跌打損傷或局部腫痛 骨折等 另一類則是局部用藥治療全身性疾患 例如局部或穴位貼藥治療哮喘 冠心病 高血壓等 兩者用藥目的不同 試驗方法及給藥方式也不完全相同 兩者均可用制劑 含基質(zhì)的成品 或中藥提取物 不含基質(zhì)的半成品 進(jìn)行試驗 以外用給藥的方式為主 可依涂藥面積大小 或含藥濃度高低 或給藥次數(shù)多少等方式 設(shè)立高 中 低給藥劑量組 內(nèi)病外治者 外用藥應(yīng)進(jìn)行透皮吸收試驗 了解藥物滲透吸收的速度與數(shù)量 有助于準(zhǔn)確評價其藥效 以口服的復(fù)方中藥 改為內(nèi)病外治 應(yīng)與口服進(jìn)行藥效學(xué)對照比較 外用藥以制劑進(jìn)行試驗者 若制劑中含有特殊溶媒或基質(zhì)者 除設(shè)空白對照外 尚應(yīng)設(shè)溶媒或基質(zhì)對照 以了解其作用和對主要藥效的影響 5 4其它眼 耳 鼻 吸人劑及腔道內(nèi)給藥 如直腸 陰道 氣管內(nèi) 腹腔 胸腔等 對藥物也有嚴(yán)格要求 特別是氣霧劑 吸入劑及腔道內(nèi)給藥 供試藥物的要求基本與注射劑相同 二中藥藥效學(xué)研究的方法 6給藥途徑給藥途徑應(yīng)與臨床相同 如有困難可選用其它相似給藥途徑進(jìn)行試驗 但應(yīng)該說明原因 例如口服藥進(jìn)行心臟血流動力學(xué)試驗難于顯示結(jié)果 可改用注射給藥 粗制劑可適當(dāng)精制后 皮下 肌內(nèi)或腹腔注入 不宜靜脈給藥 除非供試藥物符合注射劑要求 二中藥藥效學(xué)研究的方法 7給藥容量根據(jù)用藥劑量而定 但應(yīng)當(dāng)適宜 容量過大 過小易出現(xiàn)實驗誤差甚至假陽性或動物死亡 小鼠 常用灌胃 ig 容量0 1 0 2ml 10g體重 不超過0 4ml 10g體重 最大為lml 只 皮下 sc 腹腔 ip 靜脈注射 iV 不超過0 5ml 只 大鼠 灌胃容量一般為1 2ml 100g 體重 最大一般不超過5ml 只 腹腔注射1 5ml 只 皮下和靜脈注射不超過lml 只 肌內(nèi)注射0 4ml 只 兔和貓 灌胃20ml 只 皮下 肌內(nèi)注射2ml 只 腹腔注射5ml 只 靜脈注射10ml 只 二中藥藥效學(xué)研究的方法 8試驗組給藥劑量試驗至少設(shè)3個劑量組 大動物 猴 犬等 試驗或特殊情況下 可適當(dāng)減少劑量組 劑量選擇應(yīng)合理 盡量反映量效和 或時效關(guān)系 劑量偏低難于顯示藥效 劑量過高 甚至超過毒理試驗劑量 其試驗結(jié)果沒有意義 甚至是中毒效應(yīng)被誤認(rèn)為治療作用 8 1根據(jù)半數(shù)致死量 LD50 計算凡是能夠測出LD50者 可用其1 10 1 20 1 40等相近劑量 作為藥效學(xué)試驗的高 中 低劑量組 8 2根據(jù)臨床用量計算根據(jù)人用量的數(shù)倍至幾十倍 用作動物試驗劑量 可根據(jù)人用劑量按千克體重 g或mg生藥 kg體重 來折算動物用量 其粗略的等效倍數(shù)為1 人 3 犬 猴 5 貓 兔 7 大鼠 豚鼠 10一11 小鼠 例如大鼠的一個劑量可選用相當(dāng)于臨床劑量的3 7倍 小鼠可10一15倍 8 3根據(jù)文獻(xiàn)估計劑量文獻(xiàn)中相似藥物的用量 若處方 提取工藝相似 可作為參考8 4根據(jù)體表面積估計劑量對一些安全系數(shù)小的藥物 如抗癌藥 強心苷等藥物按體表面積計算動物用量 不論以何種方法選用的給藥劑量 都應(yīng)該通過預(yù)試 摸索到出現(xiàn)藥理效應(yīng)的適當(dāng)劑量 再確定正式試驗劑量 9給藥方式 根據(jù)藥物特點及試驗要求 可采用 預(yù)防性給藥 即先給藥若干天或若干次 使藥物在動物體內(nèi)達(dá)到有效濃度后再造模型 觀察藥物的保護(hù)作用 治療性給藥 即先造成動物病理模型 然后給藥 觀察藥物的治療作用 后者符合臨床實際情況 更為合理 兩種給藥方式 以治療性給藥為主 部分試驗可根據(jù)需要采用預(yù)防性給藥 但不可全部試驗均用預(yù)防性給藥 10對照藥的選擇 10 1陽性對照藥即已知有效藥 其目的有二 檢查試驗體系是否可靠 可用西藥作陽性對照藥 陽性對照藥的選擇應(yīng)注意 1 可比性其功效 主治 劑型 給藥途徑應(yīng)與新藥相似 便于比較新藥的優(yōu)劣與特點 2 合法性陽性藥應(yīng)是 中國藥典 或部頒標(biāo)準(zhǔn) 或新批準(zhǔn)生產(chǎn)的合法藥物 否則不可作為陽性對照藥 3 擇優(yōu)選用有多種同類藥可供選用時 應(yīng)擇優(yōu)選用當(dāng)前學(xué)術(shù)界或社會公認(rèn)有效的 有代表性的 好 藥 作為陽性對照藥 而勿選用療效差 不良反應(yīng)嚴(yán)重 甚至即將淘汰的藥物 10 2原劑型對照改劑型新藥的陽性對照藥 應(yīng)以該藥的原劑型為對照藥 進(jìn)行藥效試驗 以了解新藥 新劑型 在那些方面優(yōu)于原劑型 10 3空白對照品空白對照包括正常動物及模型動物的空白對照 可用生理鹽水 蒸餾水 注射用水或食用水 據(jù)試驗要求選用 新藥若含有特殊溶媒或基質(zhì)者 應(yīng)作溶媒 或基質(zhì) 對照 中藥復(fù)方藥理研究概況 中藥復(fù)方 由兩味及兩味以上中藥以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo) 按照 君臣佐使 組方原則及配伍理論而組成的方劑 優(yōu)點 療效強 毒性低 中藥復(fù)方藥理研究 1 闡明復(fù)方作用的現(xiàn)代科學(xué)內(nèi)涵 作用 機制 2 改造老方 創(chuàng)制新方3 開發(fā)現(xiàn)代復(fù)方制劑4 揭示復(fù)方配伍關(guān)系5 探索藥效物質(zhì)基礎(chǔ) 研究目的和內(nèi)容 整方研究法拆方研究法單味藥研究法撤藥分析研究法藥物組間關(guān)系研究法正交設(shè)計研究法均勻設(shè)計研究法析因分析法 研究方法 一 研究藥理作用及作用機制 傳統(tǒng)古方研究主要探討復(fù)方作用及作用機制 并闡明中醫(yī)藥理論的科學(xué)性 發(fā)現(xiàn)新功能 提高臨床應(yīng)用的療效 由于藥效是復(fù)方整體起作用 則研究復(fù)方藥效一般首先進(jìn)行全方研究 如黃芩湯對醋酸引起的小鼠扭體反應(yīng)有顯著抑制作用 而組成藥味黃芩 芍藥 甘草 大棗單用卻無明顯影響 全方研究有助于藥效學(xué)的研究 反映配伍效應(yīng)與主治 證 之間的內(nèi)在聯(lián)系 但在揭示中藥復(fù)方的組成規(guī)律方面還存在不足 建立適宜的主治 證 模型 是中藥復(fù)方全方研究的關(guān)鍵 一 研究藥理作用及作用機制 二 研究復(fù)方配伍理論和規(guī)律 1 單味研究法中藥復(fù)方各組成藥物分別與全方進(jìn)行比較可發(fā)現(xiàn)起主要作用的藥物 2 藥對研究法藥對是復(fù)方最小的組方單位 具有復(fù)方基本的主治功能 3 藥物組間關(guān)系研究法指中藥復(fù)方按功效 性味關(guān)系分成不同組分 可探討藥物組與組之間作用關(guān)系和組方理論 如六味地黃湯可分成 三補 和 三瀉 兩種組方 4 撤藥分析法從復(fù)方中撤出一味或一組藥物后進(jìn)行實驗 用以判斷撤出的藥味對原方功效影響的研究方法 5 聚類分析法是通過對同類功效的中藥復(fù)方的數(shù)理統(tǒng)計分析 建立多元回歸方程來揭示同類方的組方規(guī)律 6 正交設(shè)計法以最小的實驗次數(shù)得出盡可能最佳的配伍關(guān)系 最佳應(yīng)用劑量 并可分析主要藥 次要藥 藥物之間的交互作用 7 均勻設(shè)計法按一定的均勻設(shè)計表安排 均勻設(shè)計的實驗次數(shù)與各因素所取水平數(shù)相等 有利于進(jìn)行量效實驗 8 量效關(guān)系法如四君子湯及其拆方對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響 當(dāng)全方中藥黨參 白術(shù) 茯苓 甘草以1 1 1 0 5的比例配方 可以提高吞噬功能 當(dāng)炙甘草量增加到1 3 則明顯減弱其功能 三 研究中藥復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ) 中藥復(fù)方藥效物質(zhì)和作用機制研究是中藥現(xiàn)代化基礎(chǔ)研究的關(guān)鍵 可從本質(zhì)上闡明復(fù)方配伍的科學(xué)內(nèi)涵 并解決長期以來復(fù)方中藥缺乏被國際認(rèn)可和接受的客觀 嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范這個關(guān)鍵問題 以藥效引導(dǎo)中藥復(fù)方進(jìn)行化學(xué)成分的分離 尋找到有效成分或有效成分群 是近期中藥復(fù)方研究的熱點 在單味中藥的化學(xué)成分分析基礎(chǔ)上 有目的地對中藥復(fù)方的活性物質(zhì)進(jìn)行定性定量研究 依據(jù)中藥復(fù)方中所含成分及其含量范圍進(jìn)一步做藥理實驗 與全方比較主要藥效作用 在復(fù)方藥理研究及分析復(fù)方中各藥味已知化學(xué)成分藥理作用的基礎(chǔ)上 進(jìn)行藥效作用機制研究 這些研究可在整體 離體 細(xì)胞 分子生物學(xué)等水平上進(jìn)行 從而發(fā)現(xiàn)主要藥效成分 對炙甘草湯研究其活性成分 首先對炙甘草湯中皂苷及皂苷元成分進(jìn)行定性定量分析 初步認(rèn)為炙甘草湯抗心律失常的主要有效成分或部位為甘草酸單胺鹽 人參總皂苷和麥冬總皂苷 并按0 4 0 16 0 12配伍有明顯協(xié)同作用 從而為進(jìn)一步闡明炙甘草湯抗心律失常的作用機制及開發(fā)出五類新藥 一 從單味藥有效成分分析研究分析研究復(fù)方作用的物質(zhì)基礎(chǔ) 二 將中藥復(fù)方視作一個整體分析其有效物質(zhì)基礎(chǔ)將中藥復(fù)方視作一個整體 運用對單味藥的研究經(jīng)驗 既往基礎(chǔ)和現(xiàn)代高新技術(shù)設(shè)備的使用 對中藥復(fù)方的有效物質(zhì)基礎(chǔ)進(jìn)行確定 把復(fù)方分離為性質(zhì)相近的化合物群 如皂苷類 黃酮類 生物堿類等 即復(fù)方有效部分 運用現(xiàn)代分離方法提取有效部分 通過指紋圖譜定性 指標(biāo)成分定量等方法 可使含有幾百種化合物的中藥復(fù)方分成十多類 每類又含有可定量的幾十種化合物 從而達(dá)到質(zhì)量控制 可將中藥復(fù)方有效部位研制成中藥五類新藥 同時還可望在研究中發(fā)現(xiàn)強活性化學(xué)單體 為研究中藥一類新藥奠定基礎(chǔ) 使復(fù)方中藥與國際醫(yī)藥標(biāo)準(zhǔn)接軌 為中醫(yī)藥走向國際醫(yī)藥市場找到切入點 從中醫(yī)理論和臨床實踐出發(fā) 運用現(xiàn)代科技手段 結(jié)合抗流感病毒活性追蹤 從銀翹散整個復(fù)方中篩選 分離出高效低毒的有效部位 抗病毒 解熱 鎮(zhèn)痛 抗炎 和化學(xué)成分 建立其TLC和HPLC指紋圖譜 對有效成分進(jìn)行確定和結(jié)構(gòu)鑒定 并建立HPLC含量測定的方法 在此基礎(chǔ)上深入研究有效成分及其量的變化與配伍 藥效學(xué)的關(guān)系 有望得到活性成分群間相互作用發(fā)揮最大藥效時 其藥量的最佳比例 最佳配伍 藥味數(shù)優(yōu)化 最佳藥味量的優(yōu)化方 銀翹散 三 中藥化學(xué)和藥理學(xué)結(jié)合系統(tǒng)研究中藥復(fù)方中藥復(fù)方系統(tǒng)研究應(yīng)該以臨床療效為中心 圍繞臨床 藥理與化學(xué)相結(jié)合 即中藥復(fù)方從臨床選方 再由藥效指導(dǎo) 進(jìn)行篩選有效成分的化學(xué)研究 目標(biāo)活性成分再配伍后的藥理研究 直至制劑的形成 形成一套系統(tǒng)化的研究步驟 血清藥理采用經(jīng)給藥后 在一定時間采集血液 分離血清 以含此藥物成分的血清進(jìn)行體外實驗的這種血清藥理學(xué)方法 客觀地模擬了藥物與機體相互作用過程 比較符合體內(nèi)環(huán)境中產(chǎn)生藥理效應(yīng)的真實過程 其血清所含的藥物成分也是經(jīng)過體內(nèi)一系列生物轉(zhuǎn)化后真正發(fā)揮作用的有效成分及藥物作用下機體所產(chǎn)生的內(nèi)生性有效成分 并通過測定血清的藥物成分 有利于尋找到機體內(nèi)真正發(fā)揮作用的有效物質(zhì)基礎(chǔ) 第三節(jié)中藥復(fù)方藥效研究新技術(shù)新方法 一 建立中醫(yī)藥信息系統(tǒng)建立中醫(yī)藥信息系統(tǒng) 將大大提高中藥復(fù)方藥效的研