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微生物的實驗室培養(yǎng)一、單選題1如圖表示培養(yǎng)和純化x細菌的部分操作步驟,下列相關敘述正確的是:a. 對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行火菌處理b. 步驟倒平板操作時.倒好后應立即將其倒過來放罝c. 步驟應多個方向劃線,使接種物逐漸稀釋,培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落d. 步驟劃線結束后在皿蓋上做好標注【答案】c【解析】由圖可知,是倒平板,是用接種環(huán)沾取菌液,是進行平板劃線,是培養(yǎng)。對實驗操作的空間、操作者的衣著和手需要進行消毒處理,a錯誤;倒完平板后立即蓋上培養(yǎng)皿,冷卻后將平板倒過來放置,b錯誤;步驟多個方向劃線,使接種物逐漸稀釋,培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落,c正確;圖中操作結束后需在培養(yǎng)基皿底標注菌種及接種日期等信息,而不是在皿蓋上做標注,d錯誤。2下列有關發(fā)酵過程的做法中,符合生產(chǎn)實際的是( )a通過人工誘變、雜交、基因工程和細胞工程育成菌種b生產(chǎn)過程中排出的廢棄物可直接排入附近農(nóng)田作肥料c分離單細胞蛋白時,通常采用萃取、離子交換等方法d在連續(xù)培養(yǎng)過程中補充的同種培養(yǎng)液和空氣須先滅菌【答案】d【解析】3關于組成酶的敘述正確的是( )a組成酶既是胞內(nèi)酶又是胞外酶b受遺傳物質和營養(yǎng)物質調控c是微生物細胞內(nèi)一直存在的酶d組成酶是在環(huán)境中存在某種物質的情況下才合成的【答案】c【解析】:微生物細胞內(nèi)的酶可分為組成酶和誘導酶。組成酶是微生物細胞內(nèi)一直存在的酶,其合成只受遺傳物質控制,誘導酶則是在環(huán)境中存在某種物質的情況下才能夠由遺傳物質控制合成的酶,誘導酶的合成提高了微生物的適應性。4預處理系統(tǒng)中的微生物的主要作用是( )a.除去污水中的顆粒b.使污水沉淀c.分解污水中的有機物d.產(chǎn)生二氧化碳【答案】c【解析】工業(yè)和生活污水中含有大量的有機物,預處理系統(tǒng)中的微生物作為生態(tài)系統(tǒng)的分解者,其主要作用就是將這些有機物分解成無機物。5關于操作后出現(xiàn)培養(yǎng)物被污染的情況 , 正確的敘述是 ( )可立即打開培養(yǎng)瓶 , 進行清洗先將所有被污染的培養(yǎng)瓶統(tǒng)一放在高壓蒸汽鍋內(nèi)進行高壓蒸汽滅菌 , 然后再打開培養(yǎng)瓶 , 進行清洗按要求操作一定不出現(xiàn)培養(yǎng)物被污染細菌污染可能是由接種人員未戴口罩、接種時說話等引起的真菌污染可能是植物材料滅菌不當引起的( )a bc d【答案】d【解析】試題分析:培養(yǎng)物被污染先將所有被污染的培養(yǎng)瓶統(tǒng)一放在高壓蒸汽鍋內(nèi)進行高壓蒸汽滅菌,不能隨便打開,防止污染環(huán)境。按要求操作也可能會出現(xiàn)培養(yǎng)物被污染??键c:本題主要考查培養(yǎng)物被污染的原因相關知識,意在考查考生能理解所學知識的要點,把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。6關于牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述正確的是a. 牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源、氮源、磷酸鹽、維生素b. 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基需經(jīng)高壓蒸汽滅菌后調節(jié)phc. 該培養(yǎng)基配方中,有機物含量多、無機鹽含量少d. 該培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基【答案】c【解析】蛋白胨不能提供磷酸鹽,a錯誤;牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基應先調ph再經(jīng)高壓蒸汽滅菌,b錯誤;牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基有機物含量多,c正確;固體培養(yǎng)基中去除瓊脂即可制成液體培養(yǎng)基,d 錯誤。7關于滅菌和消毒的不正確的理解是( )a消毒和滅菌實質上是相同b滅菌是指殺死環(huán)境中的一切微生物的細胞、芽孢和孢子c接種環(huán)用燒灼的方法滅菌d常用消毒方法有加熱法、紫外線法、化學藥品法【答案】a【解析】試題分析:滅菌與消毒是兩個概念。滅菌是指殺滅一定環(huán)境中的所有微生物,包括芽孢和孢子。根據(jù)不同的材料選用不同的滅菌方法,如接種環(huán)用火焰燒灼法,培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法等。消毒是指殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子),使用的是較為溫和的物理或化學方法。故選a考點:本題考查滅菌和消毒的相關知識。點評:本題意在考查考生的識記能力和比較區(qū)分能力,屬于中等難度題。8下列關于通過發(fā)酵工程生產(chǎn)谷氨酸的敘述,錯誤的是 a發(fā)酵時需要不斷通入無菌空氣,否則會積累乳酸 b發(fā)酵時常采用的培養(yǎng)基為液體天然培養(yǎng)基c從自然界分離的野生型菌株可直接用于生產(chǎn)d當菌體生長進入穩(wěn)定期時,補充營養(yǎng)物可提高谷氨酸產(chǎn)量【答案】c【解析】略9以下能正確說明酶活性調節(jié)的是a.微生物能夠通過改變已有酶的催化活性來調節(jié)代謝的速率b.代謝過程中產(chǎn)生的物質與酶結合,致使酶的結構產(chǎn)生不可逆轉的變化c.與酶合成的調節(jié)相比,酶活性的調節(jié)是一種快速、精細的不利于生存的調節(jié)方式d.當次級代謝產(chǎn)物和酶脫離時,酶結構不會復原,改變原有活性【答案】a【解析】10下表是在一固定容積的發(fā)酵罐內(nèi)培養(yǎng)酵母菌,并定時取樣測定培養(yǎng)基的ph及菌體數(shù)量(萬個/毫升)的結果,ah是樣品代號。下面對該表的敘述中錯誤的是( )abcdefgh活菌數(shù)3256127234762819821824培養(yǎng)液ph6.05.6a.取樣先后次序為acbgfhde b.g樣時次級代謝產(chǎn)物已有相當?shù)姆e累c.如果要擴大培養(yǎng),可在c樣時期選取菌種 d.d樣時培養(yǎng)基中的養(yǎng)分幾乎被耗盡【答案】 a【解析】 酵母菌在培養(yǎng)過程中會產(chǎn)生co2,使培養(yǎng)液的ph下降,故取樣越晚,培養(yǎng)液的ph越小,取樣的先后順序為acehfgdb;hfg段活菌數(shù)目最多,且相對穩(wěn)定,故g樣時期屬于穩(wěn)定期,該期次級代謝產(chǎn)物大量積累;由ace期菌體數(shù)目迅速增加,故c樣時期屬于對數(shù)期,可進行擴大培養(yǎng);gdb顯示活菌數(shù)目急劇下降,故d樣時期屬于衰亡期,原因是營養(yǎng)物質大量消耗、有害代謝產(chǎn)物積累、ph發(fā)生變化等。11已知甲、乙兩種培養(yǎng)基成分不同,但均適合某種細菌生長?,F(xiàn)從甲培養(yǎng)基中取少量處于對數(shù)期的這種細菌,接種在新鮮的乙培養(yǎng)基上(假設培養(yǎng)條件適宜且無雜菌污染),則在接種后的最初一段時間內(nèi),細菌在乙培養(yǎng)基上的狀況與在甲培養(yǎng)基上的狀況相比,不發(fā)生改變的是a.細胞分裂速度 b.誘導酶的種類c.組成酶的種類 d.細胞的大小【答案】c【解析】試題分析:組成酶不會隨外界環(huán)境的改變而改變,只受遺傳物質控制。細胞的分裂速度、生長速度和誘導酶的生成等都和環(huán)境條件有關,故本題答案選c。考點:本題考查了培養(yǎng)基成分對微生物代謝的影響,屬于對識記、理解層次的考查。12以下說法正確的是 a.次級代謝產(chǎn)物是微生物的生長和繁殖所必需的,這些物質可能存在于細胞內(nèi),也可能分泌到外環(huán)境中b.誘導酶一旦產(chǎn)生,其活性將一直保持下去c.黃色短桿菌能夠利用天冬氨酸是合成賴氨酸、蘇氨酸和異亮氨酸d.微生物的代謝異常旺盛,是由于微生物的表面積與其體積比很大【答案】d【解析】13關于消毒和滅菌的不正確理解是( )a滅菌是指殺滅環(huán)境中的一切微生物的細胞、芽胞和孢子b消毒和滅菌實質上是相同的c常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌d常用消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外線法、化學藥物法【答案】b【解析】試題分析:a滅菌是指采用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽胞和孢子a正確;b消毒是指消除或殺滅外環(huán)境中的病原體,使其無害化;滅菌則是要將所有的微生物和病毒全部殺滅,以達到無菌的目的,滅菌一定可以達到消毒的目的,但消毒不一定能達到滅菌的效果,b錯誤;c 常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌,c正確;d常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學藥物消毒法等,d正確。考點:微生物的分離和培養(yǎng)【名師點睛】無菌技術 (1)關鍵:防止外來雜菌的入侵。(2)具體操作 對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌。為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實驗操作應在酒精燈火焰附近進行。實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸。(3)消毒和滅菌消毒滅菌概念使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包芽孢和孢子)使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物(包括芽孢和孢子)常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌適用對象操作空間、某些液體、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等1414消毒和滅菌是兩個不同的概念,滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠喪失生長繁殖的能力,消毒僅指殺死一部分對人體有害的病原菌而對被消毒的物體基本無害,下列哪些事物適用于消毒處理皮膚 飲用水 牛奶 注射器 培養(yǎng)皿 接種環(huán) 培養(yǎng)基 果汁 醬油 手術刀a. b. c. d. 以上全部【答案】a【解析】試題分析:消毒指用比較溫和的方法殺死微生物的營養(yǎng)細胞,適用于那些不耐高溫的液體。如牛奶、果汁、醬油,這樣可以使其中的營養(yǎng)成分不被破壞。另外對要求不是很嚴格的皮膚、飲用水也用消毒的方法處理。而對于嚴格要求的注射器、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、培養(yǎng)基、手術刀等必須進行滅菌處理。所以,應該用消毒的方法處理??键c:微生物的分離和培養(yǎng)【名師點睛】消毒就是用物理或化學方法殺滅或消除致病微生物,但不一定能殺死細菌芽孢和物體內(nèi)部的微生物。滅菌就是用物理或化學方法殺滅所有的微生物,使其達到無菌,包括致病和非致病微生物以及芽孢。15下列關于生物學研究方法及技術的敘述,錯誤的是a用稀釋涂布平板法可通過統(tǒng)計菌落數(shù)來推測樣品中的活菌數(shù)b進行胚胎分割移植時應選用發(fā)育及形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚c利用試管嬰兒技術培育新個體的過程屬于無性繁殖d利用pcr技術進行dna擴增時不需要加入解旋酶【答案】c【解析】二、非選擇題16 (15分)酵母菌等微生物在日常生活中發(fā)揮著越來越大的作用。請回答下列問題:(1)酵母菌的培養(yǎng)最好使用下列哪種培養(yǎng)基 a牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 b麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基c蛋白胨酵母膏培養(yǎng)基 dms培養(yǎng)基(2)擬將新篩選獲得的優(yōu)良釀酒酵母擴大培養(yǎng),酵母菌種群數(shù)量的變化如下表所示生產(chǎn)用菌種一般選用快速增值階段的菌體,由表中數(shù)據(jù)分析,第 天的酵母菌適宜用于固定化。酵母細胞的固定多采用 法。時間天01234567酵母菌數(shù)(106ml)081830來源:z。xx。k.com5648200804(3)現(xiàn)在工廠化生產(chǎn)果酒,為提高果酒的品質,更好地抑制其他微生物的生長,采取的措施是 ,并接入合適的菌種。(4)甲流再次肆虐,“今天你吃醋了嗎?”成為問候語,果醋有水果和食醋的營養(yǎng)保健功能,是集營養(yǎng)、保健、食療等功能為一體的新型飲品。下面是某同學設計的果酒和果醋制作的實驗流程。挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵果酒果醋沖洗應特別注意不能反復沖洗,原因是 。由圖可知果醋的制作往往在果酒制作基礎上進行,請用相關反應式表示這一過程: (5)小麥脫粒以后還有大量的麥稈,主要成分為木質素、纖維素和半纖維素,但是酵母菌無法直接利用,原因是其 。請?zhí)岢鲆环N解決該問題的方法: 。【答案】(除標注外,其余每空2分)(1) b (1分) (2)第 2 天。 包埋 法。(3) 對原材料進行滅菌 。酶c2h5oh+o2ch3coohh2o(4)防止菌種流失。(5)沒有分解這些物質的酶 。方法: 在發(fā)酵時加入相應酶 或用轉基因方法將相應的酶基因導入酵母菌細胞內(nèi)【解析】【答案】(1)(2)培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液,導致菌體堆積,影響分離效果(3)避免培養(yǎng)基污染棉塞(4)量與活性 (5)j4 發(fā)酵過程會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,j4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高【解析】(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中,需要使用酒精燈對接種環(huán)進行滅菌,對培養(yǎng)皿進行滅菌,用無菌水稀釋菌液,故選。(2)在涂布平板時,滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量過多會在培養(yǎng)基表面出現(xiàn)積液,導致菌體堆積,影響分離效果,所以不能過多。(3)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時,若試管口粘附有培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈以防雜菌污染。(4)在剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩到了幾株有透明降解圈的菌落,降解圈大小與纖維素酶的多少和活性有關。纖維素酶的量越多,活性越強,分解的纖維素越多,透明降解圈越大,所以圖中降解纖維素能力最強的菌株是。(5)由于胃部ph值較低,根據(jù)題意和圖示分析可知,發(fā)酵過程會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,j4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高,所以推測菌株j4更適合用于人工瘤胃發(fā)酵?!究键c定位】微生物的分離和培養(yǎng)【名師點睛】微生物培養(yǎng)的關鍵是無菌操作。微生物培養(yǎng)過程中除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮ph、溫度和滲透壓等條件,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行消毒??梢酝ㄟ^稀釋涂布平板法或顯微鏡計數(shù)法進行統(tǒng)計計數(shù)。剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物,當纖維素被纖維素酶分解后,紅色復合物無法形成,出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。剛果紅可以在細菌菌落形成前倒平板時加入,也可以在菌落形成后加入。若在細菌菌落形成前倒平板時加入剛果紅,則所加剛果紅要進行滅菌,以防雜菌的侵入,影響纖維素分解菌菌落的形成;若在菌落形成后加入剛果紅,則不需要滅菌。18幽門螺桿菌是棲息在胃黏膜的螺旋狀短桿菌,具有很強的脲酶活性。如表是某實驗小組培養(yǎng)幽門螺桿菌所用培養(yǎng)基的配方(培養(yǎng)細菌一般用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基)。請分折回答下列問題:成分葡萄糖kh2po4mgso4naclcaso4caco3瓊脂蒸餾水含量10g0.2g0.2g0.2g0.2g5g3.5g1l(1)實驗室篩選微生物通常須人為提供有利于目的菌生長的_(至少答三種)等條件,抑制或阻斷其他微生物的生長,能達到此目的的培養(yǎng)基稱為_。在實驗中,為使培養(yǎng)基能達到此目的,需設置對照組,對照組所用的培養(yǎng)基一般是_培養(yǎng)基。(2)將幽門螺桿菌接種到ph適宜的該培養(yǎng)基中,最常用

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