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高二生物 SW-16-XX01-005專題二 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)導(dǎo)學(xué)案(二)編寫人:張勇 審核人:肖鴻 編寫時(shí)間: 2016-02-26班級: 組別: 姓名: 等級:_【學(xué)習(xí)目標(biāo)】掌握無菌技術(shù)的操作過程及分析與評價(jià);【學(xué)法指導(dǎo)】1、認(rèn)真閱讀學(xué)習(xí)目標(biāo),牢牢把握學(xué)習(xí)要求。導(dǎo)學(xué)案完成后一定要再回頭看學(xué)習(xí)目標(biāo),檢測自已是否能達(dá)成學(xué)習(xí)目標(biāo)。導(dǎo)學(xué)案的落實(shí)在課堂,而不是在課后,在預(yù)習(xí)課和展示課中都要進(jìn)行知識(shí)的落實(shí)。2、預(yù)習(xí)時(shí)注意分析圖提拱的信息,一定要結(jié)合課本中的圖來記,做到心中有圖。3、將預(yù)習(xí)中遇到的疑難點(diǎn)問題標(biāo)識(shí)出來以備課堂小組計(jì)論、突破。【知識(shí)探究】:實(shí)驗(yàn)操作 - 大腸桿菌的純化培養(yǎng):本實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基是 ,本實(shí)驗(yàn)可分成 和 兩個(gè)階段進(jìn)行。一、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 1制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的操作步驟是 、 、 、 、 。思考5在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的稱量操作中,動(dòng)作要迅速,原因是什么?溶化操作中需要不斷用玻璃棒攪拌的目的是什么?思考6牛肉膏和蛋白胨主要為微生物提供什么等營養(yǎng)物質(zhì)?2 倒平板:待培養(yǎng)基冷卻至 左右時(shí)在酒精燈火焰附近操作進(jìn)行。其過程是:在火焰旁右手拿 ,左手 ;使錐形瓶的瓶口 ;左手將培養(yǎng)皿 ,右手 ,立刻蓋上皿蓋。待平板冷卻凝固后,將平板 。思考7錐形瓶的瓶口通過火焰的目的是什么?思考8倒平板的目的是什么?思考9若皿蓋和皿底之間粘有培養(yǎng)基,則該平板能否培養(yǎng)微生物?為什么?思考10配制斜面培養(yǎng)基作用是什么?試管為什么要加塞棉塞? 二、純化大腸桿菌 微生物接種:最常用的是 法和 法。另外還有穿刺接種和斜面接種等。1平板劃線法是 的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。其操作步驟是:將 在酒精燈火焰上灼燒直至 。在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán),并打開大腸桿菌的菌種試管的棉塞。將菌種試管口通過火焰達(dá)到 的目的。將冷卻的接種環(huán)伸入到 。將菌種試管口再次通過火焰后塞上棉塞。將皿蓋打開一條縫隙,把接種環(huán) ,蓋上皿蓋,不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基。灼燒接種環(huán),冷卻后從 劃線。重復(fù)上述過程,完成三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將 相連。將平板 培養(yǎng)。思考11取菌種前灼燒接種環(huán)的目的是什么? 為什么除第一次劃線外,其余劃線前都要灼燒接種環(huán)? 取菌種和劃線前都要求接種環(huán)冷卻后進(jìn)行,其目的是?最后灼燒接種環(huán)的目的是? 。在第1次劃線后都從上次劃線末端開始的目的是? 。2稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將_進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí),即可獲得單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。3.系列稀釋操作:取盛有 mL水的無菌試管6支 ,編號101、102、103、104、105、106。用灼燒冷卻的移液管吸取 mL菌液注入編號為101試管中,并吹打3次使之混勻。從101倍稀釋液中吸取 mL菌液注入到編號為102 倍稀釋液試管內(nèi)吹打均勻,獲得102倍液。依此類推。思考12系列稀釋操作的注意事項(xiàng)是什么?思考13涂布平板操作的步驟是什么?結(jié)果分析與評價(jià)1培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是什么?,若有菌落形成,說明什么?2在瓊脂固體培養(yǎng)基上,大腸桿菌菌落顏色?形態(tài)?3培養(yǎng)12h和24h后的菌落大?。?
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