氨基酸的常見化學反應.doc

此文檔收集于網(wǎng)絡，僅供學習與交流，如有侵權請聯(lián)系網(wǎng)站刪除氨基酸的常見化學反應n a-氨基的反應n 亞硝酸反應 n 范圍：可用于Aa定量和蛋白質(zhì)水解程度的測定（Van slyke法）n 注意：生成的氮氣只有一半來自于Aa，氨基酸也可反應，速度較慢 n 與?；噭┑姆磻?n Aa酰氯，酸酐Aa被酰基化 n 丹磺酰氯用于多肽鏈末端a的標記和微量a的定量測量 n 烴基化反應n Aa的氨基的一個氫原子可被羥基（包括環(huán)烴及其衍生物）取代n 與2，4二硝基氟苯（DNFB，F(xiàn)DNB）反應 n 最早Sanger用來鑒定多肽或蛋白質(zhì)的氨基末端的Aan 與苯異硫氰酸酯（PITC）的反應n Edman用于鑒定多肽或蛋白質(zhì)的N末端Aa 在多肽和蛋白質(zhì)的Aa順序分析方面占有重要地位（ Edman降解法 ）n 形成西佛堿反應 n Aa的-NH2能與醛類化合物反應生成弱堿，即西佛堿（schiff s base） n 前述甲醛滴定：甲醛與H2N-CH2-COO-結合,有效地減低了后者的濃度,所以對于加入任何量的堿, H2N-CH2-COO- / +H3N-CH2-COO- 的比值總要比不存在甲醛的情況下小得多。加入甲醛的甘氨酸溶液用標準鹽酸滴定時，滴定曲線B并不發(fā)生改變。 n 脫氨基反應n Aa在生物體內(nèi)經(jīng)Aa氧化酶催化即脫去-NH2而轉變成酮酸n -COOH參加的反應n 成鹽和成酯反應 n Aa + 堿鹽 n Aa + NaOH 氨基酸鈉鹽(重金屬鹽不溶于水) n Aa-COOH + 醇 酯n Aa+ EtOH 氨基酸乙酯的鹽酸鹽 n 當Aa的COOH變成甲酯，乙酯或鈉鹽后，COOH的化學反應性能被掩蔽或者說COOH被保護，NH2的化學性能得到了加強或活化，易與?；Y合。Aa酯是制備Aa的酰氨or酰肼的中間物 nn 成酰氯反應 n 當氨基酸的氨基用適當?shù)谋Ｗo基保護以后，其羧基可與二氯亞砜作用生成酰氯n 用于多肽人工合成中的羧基激活n 疊氮反應n 氨基酸的氨基通過?；Ｗo后，羧基經(jīng)酯化轉變?yōu)榧柞?，然后與肼和亞硝酸變成疊氮化合物n 用于多肽人工合成中的羧基激活n 脫羧基反應n a-氨基和-羧基共同參與的反應n 與茚三酮反應 n 茚三酮在弱酸性溶液中與a-氨基酸共熱，引起氨基酸氧化脫氨、脫羧反應，最后茚三酮與反應產(chǎn)物中的氨和還原茚三酮發(fā)生作用生成紫色物質(zhì)n Pro與hyPro（羥脯氨酸）不釋放氨，而直接生成黃色化合物n 定性，定量測定各種Aa，蛋白質(zhì)n 測定CO2 的量，從而可計算參加反應的Aa的量 n 成肽反應n 一個Aa的NH2+另一個Aa的COOH可以縮合成肽，形成的鍵稱肽鍵n 側鏈R基參加的反應 n R功能基：n 羥基，酚基，巰基（二硫鍵），吲哚基，咪唑基，胍基，甲硫基，非a-NH2,非a-COOHn 酪氨酸的酚基在3和5位上容易發(fā)生親電取代反應n 二碘酪氨酸或一硝基酪氨酸和二硝基酪氨酸n 酪氨酸的酚基可以與重氮化合物（對氨基苯磺酸的重氮鹽）生成桔黃色的化合物。Pauly反應n 組氨酸的咪唑基可以發(fā)生類似反應但產(chǎn)物顏色為棕紅色 。n 精氨酸的側鏈胍基在硼酸鈉緩沖液（pH 8-9, 25-35C）中，與1.2-環(huán)已二酮反應，生成縮合物。 該縮合物在羥胺緩沖液中，重新生成Argn 色氨酸的側鏈吲哚基在溫和條件下可被N溴代琥珀酰亞胺（N-bromosuccinimide）氧化。此反應可用于分光光度法測定蛋白質(zhì)中色氨酸的含量，并能在色氨酸和酪氨酸殘基處選擇性化學斷裂肽鍵。 n 蛋氨酸側鏈上的甲硫基是一個很強的親核基團，與烴化試劑如甲基碘容易形成锍鹽（sulfonium salt）n 此反應可被硫基試劑逆轉。在逆轉反應中，原有的甲基和新加入的甲基除去的機會是相等的，因此當用14C標記的甲基碘處理時，獲得的蛋氨酸將有50%是同位素標記的。 n 半胱氨酸側鏈上的巰基（SH）有很強的反應活性，可參與很多反應n 二硫鍵的形成和打開n 2R-SH + 1/2 O2 R-S-S-R + H2O ；Cu2+，F(xiàn)e2+ ，Co2+和Mn2+存在下，巰基的空氣氧化將顯著提高。n 胱氨酸中的二硫鍵在穩(wěn)定蛋白質(zhì)的構象上起很大的作用。氧化劑和還原劑都可打開二硫鍵。過甲酸可以定量地打開二硫鍵，生成磺基丙氨酸（cysteic acid）殘基。還原劑如巰基化合物（R-SH）也能打開二硫鍵，生成半胱氨酸殘基及相應的二硫化物 n 二硫蘇糖醇（dithiothreitol，縮寫為DTT），與胱氨酸中的二硫鍵反應形成一個含分子內(nèi)二硫鍵的穩(wěn)定六元環(huán) n 巰基能和各種金屬離子形成穩(wěn)定程度不等的絡合物e.g. 對氯汞苯甲酸（p-chloromercuribenzoic acid） n 由于許多蛋白質(zhì)，如SH酶，其活性中心涉及-SH基，當遇到重金屬離子而生成硫醇鹽時，將導致酶的失活，因此制備這類蛋白質(zhì)時應避免進入重金屬離子 n 半胱氨酸可與二硫硝基苯甲酸（dithionitrobenzoic acid，縮