高中生物 課時(shí)跟蹤檢測(cè)（一）DNA重組技術(shù)的基本工具 新人教版選修3.doc

課時(shí)跟蹤檢測(cè)(一)dna重組技術(shù)的基本工具一、選擇題1實(shí)施基因工程的最終目的是()a提取生物體的dna分子b對(duì)dna分子進(jìn)行人工剪切c在生物體外對(duì)dna分子進(jìn)行改造d創(chuàng)造符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品2有關(guān)dna重組技術(shù)中的工具“分子縫合針”“分子手術(shù)刀”“分子運(yùn)輸車”的組合正確的是()dna連接酶dna聚合酶限制酶rna聚合酶運(yùn)載體abcd3下圖為dna分子的某一片段，其中分別表示某種酶的作用部位，則相應(yīng)的酶依次是()adna 連接酶、限制酶、解旋酶b. 限制酶、解旋酶、dna連接酶c解旋酶、限制酶、dna連接酶d限制酶、dna連接酶、解旋酶4下列有關(guān)基因工程中限制性核酸內(nèi)切酶的描述，錯(cuò)誤的是()一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核苷酸序列限制性核酸內(nèi)切酶的活性受溫度影響限制性核酸內(nèi)切酶能識(shí)別和切割rna限制性核酸內(nèi)切酶可從原核生物中提取限制性核酸內(nèi)切酶的操作對(duì)象是原核細(xì)胞a b c d5下列關(guān)于dna連接酶作用的敘述，正確的是()a將單個(gè)核苷酸加到某dna片段末端，形成磷酸二酯鍵b將斷開的兩個(gè)dna片段的骨架連接起來，重新形成磷酸二酯鍵c連接兩條dna鏈上堿基之間的氫鍵d只能將雙鏈dna片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來，而不能將雙鏈dna片段平末端之間進(jìn)行連接6下列四條dna片段，可能是由同一種限制酶切割而成的是()a b c d7據(jù)圖判斷，有關(guān)工具酶功能的敘述錯(cuò)誤的是()a限制性核酸內(nèi)切酶可以切斷a處bdna聚合酶可以連接a處c解旋酶可以使b處解開ddna連接酶可以連接c處8下面是四種不同質(zhì)粒的示意圖，其中ori為復(fù)制必需的序列，amp為氨芐青霉素抗性基因，tet為四環(huán)素抗性基因，箭頭表示一種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)。若要得到一個(gè)能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的含重組dna的細(xì)胞，應(yīng)選用的質(zhì)粒是()二、非選擇題9(全國(guó)卷改編)根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問題：(1)限制性內(nèi)切酶切割dna分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有_和_。(2)質(zhì)粒運(yùn)載體用ecor切割后產(chǎn)生的片段如下：aattcggcttaa為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的dna除可用ecor切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點(diǎn)是_。(3)按其來源不同，基因工程中所使用的dna連接酶有兩類，即_dna連接酶和_dna連接酶。(4)基因工程中除質(zhì)粒外，_和_也可作為運(yùn)載體。(5)請(qǐng)畫出質(zhì)粒被切割形成黏性末端的過程圖。10下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問題：限制酶bamhhindecorsma識(shí)別序列及切割位點(diǎn)atcccctagcttttcgattccttaccggggcc(1)一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)sma切割前后，分別含有_個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。(2)若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的sma酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越_。(3)用圖中的質(zhì)粒和外源dna構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用sma切割，原因是_。(4)與只使用ecor相比較，使用bamh和hind兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源dna的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止_。(5)為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入_酶。(6)現(xiàn)使用bamh和hind兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源dna，并經(jīng)拼接獲得的重組質(zhì)粒進(jìn)行再次酶切，假設(shè)所用的酶均可將識(shí)別位點(diǎn)完全切開，請(qǐng)根據(jù)圖1、2中標(biāo)示的酶切位點(diǎn)及表所列的識(shí)別序列，對(duì)以下酶切結(jié)果作出判斷。采用bamh和hind酶切，得到_種dna片段。采用ecor和hind酶切，得到_種dna片段。答案1選da、b、c三項(xiàng)均為基因工程操作的具體內(nèi)容，但不是基因工程的目的。實(shí)施基因工程的最終目的是通過基因操作定向改造生物的遺傳物質(zhì)，創(chuàng)造符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。2選c基因工程中，“手術(shù)刀”是限制酶，“縫合針”是dna連接酶，“運(yùn)輸車”是指將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的運(yùn)載體，常用的“運(yùn)輸車”是質(zhì)粒。3選c解旋酶可催化堿基之間氫鍵()的斷裂，限制酶可使兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵()斷開，而dna連接酶則催化磷酸二酯鍵()的形成。4選c限制性核酸內(nèi)切酶主要存在于微生物中，酶的活性受溫度的影響，限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別和切割的是dna分子，而不是原核細(xì)胞。5選bdna連接酶和dna聚合酶都是催化兩個(gè)脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵。dna連接酶是在兩個(gè)dna片段之間形成磷酸二酯鍵，將兩個(gè)dna片段連接成重組dna分子。dna聚合酶是將單個(gè)核苷酸加到已存在的核酸片段上形成磷酸二酯鍵，合成新的dna分子。6選d只有和的黏性末端的堿基都是互補(bǔ)的，它們可能是由同一種限制酶切割而成的。7選da處指的是兩個(gè)相鄰脫氧核苷酸之間的脫氧核糖與磷酸之間的磷酸二酯鍵，而c處指的是同一個(gè)脫氧核苷酸內(nèi)的脫氧核糖和磷酸之間的化學(xué)鍵，dna連接酶不能連接此化學(xué)鍵。8選ca項(xiàng)破壞了復(fù)制必需的序列。b項(xiàng)氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因都完好，在四環(huán)素培養(yǎng)基上和氨芐青霉素培養(yǎng)基上都能生長(zhǎng)。c項(xiàng)氨芐青霉素抗性基因被破壞，四環(huán)素抗性基因完好，能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。d項(xiàng)氨芐青霉素抗基因完好，四環(huán)素抗性基因被破壞。9解析：當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將dna的兩條鏈分別切開時(shí)，產(chǎn)生的是黏性末端，而當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線處切開時(shí)，產(chǎn)生的則是平末端。為使運(yùn)載體與目的基因相連，用另一種限制酶切割后形成的黏性末端必須與ecor切割形成的黏性末端相同。根據(jù)酶的來源不同，可以將dna連接酶分為兩類：一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為大腸桿菌dna連接酶；另一類是從t4噬菌體中分離出來的，稱為t4dna連接酶?；蚬こ讨谐|(zhì)粒外，還有噬菌體、動(dòng)植物病毒等也可作為運(yùn)載體。答案(1)黏性末端平末端(2)切割產(chǎn)生的dna片段末端與ecor切割產(chǎn)生的相同(3)大腸桿菌t4(4)噬菌體動(dòng)植物病毒(5)10解析：(1)該質(zhì)粒為環(huán)狀dna，經(jīng)sma切割前，不含有游離的磷酸基團(tuán)，經(jīng)sma切割后形成平末端，含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。(2)sma識(shí)別的是cccggg序列，在c與g之間切割，sma酶切位點(diǎn)越多，也就是cg堿基對(duì)越多，由于c與g之間的氫鍵(3個(gè))比a與t之間的氫鍵(2個(gè))數(shù)量多，故其含量越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高。(3)據(jù)圖1可知，sma切割位點(diǎn)在抗生素抗性基因(標(biāo)記基因)中，據(jù)圖2可知，sma切割位點(diǎn)在目的基因中，因此使用sma切割會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源dna中的目的基因。(4)用同一種限制酶處理質(zhì)粒和外源dna，再用dna連接酶連接時(shí)，往往會(huì)有三種連接形式：目的基因質(zhì)粒、目的基因目的基因(環(huán)化)、質(zhì)粒質(zhì)粒(環(huán)化)，后兩種是我們不需要的，因而要進(jìn)行篩選。用兩種限制酶處理質(zhì)粒和外源dna，因形成的末端不同可避免上述情況的發(fā)生。(5)連接質(zhì)粒與目的基因的工具酶是dna連接酶。(6)由bamh 和hind 兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源dna，并經(jīng)拼接獲得的重組質(zhì)粒，這兩種酶的識(shí)別序列仍然完整存在，如再用bamh 和hind 兩種限制酶進(jìn)行酶切時(shí)，可再度被切開，形成2種dna片段；而ecor 的識(shí)別序列在原質(zhì)粒中存在并沒有破