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章末整合提升 第一部分微生物的利用 梳理知識(shí)構(gòu)建綱要 整合重點(diǎn)提升技能 內(nèi)容索引 梳理知識(shí)構(gòu)建綱要 整合重點(diǎn)提升技能 突破1劃線分離法和涂布分離法的比較 兩種分離法的易錯(cuò)點(diǎn)撥 1 在稀釋涂布平板操作中 每個(gè)步驟都要注意無(wú)菌操作 以防培養(yǎng)基被污染 影響實(shí)驗(yàn)效果 2 每一稀釋倍數(shù)菌液都至少要涂布三個(gè)平板 作為實(shí)驗(yàn)重復(fù) 求平均值 若其中有菌落數(shù)與其他實(shí)驗(yàn)差距懸殊者 應(yīng)舍棄該實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù) 不進(jìn)行統(tǒng)計(jì) 計(jì)算 3 平板冷凝后 皿蓋上會(huì)凝結(jié)成水珠 凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高 將平板倒置 既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā) 又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染 1 微生物的分離和培養(yǎng)是現(xiàn)代生物工程應(yīng)用中的重要環(huán)節(jié) 下圖甲 乙 丙是大腸桿菌分離和培養(yǎng)過(guò)程中部分操作和實(shí)驗(yàn)結(jié)果示意圖 請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題 1 下圖甲所示的是制備固體培養(yǎng)基時(shí)的實(shí)驗(yàn)操作步驟之一 它稱為 2 培養(yǎng)大腸桿菌時(shí) 在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染 對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是 答案 倒平板 將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間 觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 3 下圖乙是平板劃線法接種操作示意圖 正確的操作順序是a b 用字母和箭頭表示 找出圖乙中兩處錯(cuò)誤的操作 用字母表示 答案 g f e c d h cd 4 下圖丙是某同學(xué)用平板劃線法接種后的培養(yǎng)基培養(yǎng)12h后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果 如果培養(yǎng)基上 則說(shuō)明無(wú)菌操作基本符合要求 答案 生長(zhǎng)的菌落顏色 形狀 大小基本一致 并符合大腸桿菌菌 落的特點(diǎn) 突破2培養(yǎng)基的配制和無(wú)菌技術(shù) 1 培養(yǎng)基的制備 以lb固體培養(yǎng)基為例 計(jì)算 稱量 融化 滅菌 倒平板 2 無(wú)菌技術(shù) 1 實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌 干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌等 常用的消毒方法有煮沸消毒法 巴氏消毒法 化學(xué)藥劑消毒法等 對(duì)不同的對(duì)象需采用不同的消毒或滅菌方法 2 微生物培養(yǎng)時(shí)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵 無(wú)菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開(kāi) 主要包括以下內(nèi)容 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間 操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒 將用于微生物培養(yǎng)的器皿 接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌 為避免周圍環(huán)境中微生物污染 實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行 實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料 用具與周圍的物品相接觸 3 倒平板操作待培養(yǎng)基冷卻至60 左右時(shí) 在酒精燈火焰附近倒平板 嚴(yán)格遵循教材上的操作步驟 4 劃線分離法劃線分離法通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作 將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面 5 涂布分離法先將菌液進(jìn)行系列稀釋 然后涂布平板 在稀釋度足夠高的菌液里 聚集在一起的微生物將被分解成單個(gè)細(xì)胞 從而在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落 2 下圖甲 乙是微生物接種常用的兩種方法 請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題 1 圖甲是利用法進(jìn)行微生物接種 圖乙是利用法進(jìn)行微生物接種 這兩種方法所用的接種工具分別是和 對(duì)這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是和酒精消毒 答案 解析 劃線分離 涂布分離 接種環(huán) 玻璃刮刀 灼燒滅菌 解析圖甲和圖乙分別是劃線分離法和涂布分離法 這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和玻璃刮刀 由于在酒精燈火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域 因此接種常在火焰附近進(jìn)行 在微生物培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生水 對(duì)微生物的生長(zhǎng)造成影響 故需要倒置培養(yǎng) 2 接種操作為什么一定要在酒精燈火焰附近進(jìn)行 3 接種后 在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng) 答案 火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域 避免培養(yǎng)過(guò)程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長(zhǎng) 答案 4 如圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解 其接種方法是 填 圖甲 或 圖乙 圖乙 突破3微生物的分離技術(shù) 1 微生物的代謝類型 1 根據(jù)能否將co2合成有機(jī)物可分為 自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物 2 劃分依據(jù) 自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物類型劃分的主要依據(jù)是能否以無(wú)機(jī)碳作為生長(zhǎng)的主要或唯一碳源 而與氮源無(wú)關(guān) 自養(yǎng)型微生物以co2或碳酸鹽為主要或唯一碳源進(jìn)行代謝生長(zhǎng) 異養(yǎng)型微生物必須以現(xiàn)成有機(jī)物作為碳源進(jìn)行代謝生長(zhǎng) 2 選擇培養(yǎng)基在微生物培養(yǎng)中的應(yīng)用 1 在微生物學(xué)中 將允許特定種類的微生物生長(zhǎng) 同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基 稱為選擇培養(yǎng)基 在配制選擇培養(yǎng)基時(shí) 往往要在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì) 例如 當(dāng)需要酵母菌和霉菌時(shí) 可以在培養(yǎng)基中加入青霉素 以抑制細(xì)菌和放線菌的生長(zhǎng) 從而分離出酵母菌和霉菌 在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽溶液可以抑制多種細(xì)菌的生長(zhǎng) 但不影響金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng) 可以將金黃色葡萄球菌分離出來(lái) 2 分離某種目的菌株 應(yīng)根據(jù)它對(duì)營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境的特殊要求 設(shè)計(jì)合理的選擇培養(yǎng)基 3 在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑 含氮有機(jī)化合物 在土壤中不易降解 長(zhǎng)期使用可污染土壤 為修復(fù)被該除草劑污染的土壤 可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌 已知該除草劑在水中溶解度低 含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明 1 制備土壤浸出液時(shí) 為避免菌體濃度過(guò)高 需將浸出液進(jìn)行處理 答案 稀釋 2 要在長(zhǎng)期使用該除草劑的土壤中分離目的菌 從物理性質(zhì) 用途方面來(lái)看 上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點(diǎn)是 3 在劃線培養(yǎng)時(shí) 只有很少菌落出現(xiàn) 大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)的主要原因是或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長(zhǎng) 4 在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中 無(wú)透明帶菌落利用的氮源主要是 有透明帶菌落利用的氮源主要是 據(jù)此可篩選目的菌 答案 在無(wú)氮固體培養(yǎng)基中添加了該除草劑 培養(yǎng)基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源 氮?dú)?該除草劑 5 科研人員用放射線處理該細(xì)菌獲得兩個(gè)突變株a和b 然后對(duì)突變株a和b進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 結(jié)果如下表所示 答案
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