DTT二硫蘇糖醇.doc

DTT（ Dithiothreitol）二硫蘇糖醇華越洋 -定義：蘇糖醇的C-1及C-4位羥基置換成巰基的化合物。在生化反應(yīng)中用做還原劑，保護(hù)蛋白質(zhì)或酶中的巰基不致氧化而失活。也常用于還原蛋白質(zhì)分子中的二硫鍵等。簡介 二硫蘇糖醇（Dithiothreitol，簡稱為DTT）是一種小分子有機(jī)還原劑，化學(xué)式為C4H10O2S2。其還原狀態(tài)下為線性分子，被氧化后變?yōu)榘蜴I的六元環(huán)狀結(jié)構(gòu)。二硫蘇糖醇的名字衍生自蘇糖（一種四碳單糖）。DTT的異構(gòu)體為二硫赤糖醇（DTE），即DTT的C3-差向異構(gòu)體。識 別CAS號 3483-12-3應(yīng)用學(xué)科：l 應(yīng)用于生物化學(xué)與分子生物學(xué)簡介華越洋生物DTT二硫蘇糖醇說明：還原蛋白質(zhì)S-S鍵的試劑；生化研究用作巰基保護(hù)劑；酶的專一性抑制劑；測定酶活力。SDS-PAGE上樣緩沖液的配制等。別名：1,4-二硫代-DL-蘇糖醇；1,4-二巰基-DL-蘇糖醇；1,4-二巰基-2,3-丁二醇；1,4-Dithio-DL-threitol；Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol分子式：C4H10O2S2 分子量：154.25CAS：3483-12-3外觀：白色針狀或白色顆粒、粉末特性：純度：97%(滴定)氧化型二硫蘇糖醇：0.5% 熔點(diǎn)：41-44溶解性：用20ml 0.01mol/l乙酸鈉溶液(pH5.2)溶解3.09gDTT，過濾除菌，每管分裝1ml，于-20貯存。R：22-36/37/38 S：26-36儲存條件：2-8 性 質(zhì)化學(xué)式 C4H10O2S2摩爾質(zhì)量 154.253 gmol1外觀 白色固體熔點(diǎn) 42-43 C沸點(diǎn) 125-130 C （2 mmHg壓力下）在水中的溶解度 可溶若非注明，所有數(shù)據(jù)來自25 C，100 kPa還原性DTT是一種很強(qiáng)的還原劑，其還原性很大程度上是由于其氧化狀態(tài)六元環(huán)（含二硫鍵）的構(gòu)象穩(wěn)定性。它的氧化還原電勢在pH為7時為-0.33伏。二硫蘇糖醇對一個典型的二硫鍵的還原是由兩步連續(xù)的巰基-二硫鍵交換反應(yīng)所組成： 其中，第一步反應(yīng)所形成的中間態(tài)很不穩(wěn)定，因?yàn)镈TT上的第二個巰基趨向于與被氧化的硫原子連接，使中間態(tài)很快被轉(zhuǎn)化為DTT的環(huán)狀氧化結(jié)構(gòu)，從而完成對二硫鍵的還原。DTT的還原力受pH值的影響，只在pH值大于7的情況下能夠發(fā)揮還原作用。這是因?yàn)橹挥忻撊ベ|(zhì)子的硫醇鹽負(fù)離子（-S）才具有反應(yīng)活性，硫醇（-SH）則沒有；而巰基的pKa一般為8.3。應(yīng)用DTT的用途之一是作為巰基化DNA的還原劑和去保護(hù)劑。巰基化DNA末端硫原子在溶液中趨向于形成二聚體，特別是在存在氧氣的情況下。這種二聚化大大降低了一些偶聯(lián)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)（如DNA在生物感應(yīng)器中的固定）的效率；而在DNA溶液中加入DTT，反應(yīng)一段時間后除去，就可以降低DNA的二聚化。DTT也常常被用于蛋白質(zhì)中二硫鍵的還原，可用于阻止蛋白質(zhì)中的半胱氨酸之間所形成的蛋白質(zhì)分子內(nèi)或分子間二硫鍵。但DTT往往無法還原包埋于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)內(nèi)部（溶劑不可及）的二硫鍵，這類二硫鍵的還原常常需要先將蛋白質(zhì)變性（高溫加熱或加入變性劑，如6M 鹽酸胍、8M 尿素或1% SDS）。反之，根據(jù)DTT存在情況下，二硫鍵還原速度的不同，可以判斷其包埋程度的深淺。特點(diǎn)由于容易被空氣氧化，因此DTT的穩(wěn)定性較差；但冷凍保存或在惰性氣體中處理能夠延長它的使用壽命。由于質(zhì)子化的硫的親核性較低，隨著pH值的降低，DTT的有效還原性也隨之降低