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文檔簡介
人用狂犬病疫苗 地鼠腎細胞 生產(chǎn)流程 生產(chǎn)流程 細胞制備病毒接種病毒收獲病毒滅活合并 濃縮 純化檢定分裝 及凍干 1 細胞制備 選用12 14日齡地鼠 無菌取腎 剪碎 經(jīng)胰蛋白酶消化 分散細胞 接種培養(yǎng)瓶 用適宜的培養(yǎng)液進行培養(yǎng) 培養(yǎng)液為含適量滅活小牛血清和乳蛋白水解物的MEM 199或其他適宜培養(yǎng)液 2 病毒接種 接種狂犬病病毒 置適宜溫度下培養(yǎng)一定時間后 棄去培養(yǎng)液 用PBS沖洗去除小牛血清 加入適量維持液 置33一35 繼續(xù)培養(yǎng) 3 病毒收獲 經(jīng)培養(yǎng)適宜時間 收獲病毒液 根據(jù)細胞生長情況 可多次收獲病毒液 5 病毒滅活 病毒收獲液按1 4000的比例加入甲醛 置適宜溫度下一定時間內(nèi)滅活病毒 6 合并 濃縮 純化 同批細胞生產(chǎn)的多次病毒收獲液可在嚴格無菌操作的條件下合并為一批 經(jīng)超濾或其他適宜方法適當(dāng)濃縮 經(jīng)濃縮并檢定合格的病毒液以柱色譜或其他適宜的方法純化 純化后加入適量人血自蛋白作為穩(wěn)定劑及一定量硫柳汞作為防腐劑 即為原液 7 原液檢定 半成品配制 檢定 8 分裝 及凍干 工業(yè)用凍干機進行冷凍干燥
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