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2 2 2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 一 動(dòng)物細(xì)胞融合 細(xì)胞雜交 1 過(guò)程 一 動(dòng)物細(xì)胞融合 細(xì)胞雜交 2 概念 指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程 3 結(jié)果 形成單核的雜交細(xì)胞 4 原理 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 5 誘導(dǎo)方式 物理法 離心 振動(dòng) 電激 化學(xué)法 聚乙二醇 peg 生物法 滅活的病毒 動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程 動(dòng)物細(xì)胞a動(dòng)物細(xì)胞b 誘導(dǎo) 融合 篩選雜交細(xì)胞ab 有絲分裂 膜融合 質(zhì)融合 核融合 注意 動(dòng)物細(xì)胞的融合也需要把多個(gè)兩種細(xì)胞放在一起 讓它們隨機(jī)融合后 再?gòu)闹泻Y選雜交細(xì)胞 7 意義 突破了有性雜交方法的局限 使遠(yuǎn)緣雜交 種間 屬間 科間 動(dòng)植物之間 成為可能 8 應(yīng)用 成為研究細(xì)胞遺傳 細(xì)胞免疫 腫瘤和生物新品種培育等的重要手段 特別是利用細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù) 為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑 1 傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)辦法及缺陷是什么 2 抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生 b淋巴細(xì)胞 每個(gè)b細(xì)胞只分泌一種特異性抗體 要想獲得大量的單一抗體 必須克隆單一的b淋巴細(xì)胞 形成細(xì)胞群 二 單克隆抗體 設(shè)計(jì)方案 一種b淋巴細(xì)胞 只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞 能在體外大量增殖 雜交細(xì)胞 二 單克隆抗體的制備 1 注射抗原的目的是什么 2 誘導(dǎo)其融合的方法有哪些 3 融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞 4 第一次篩選的方法和目的 5 第二次篩選的方法和目的 6 雜交瘤細(xì)胞獲得單一抗的方法 1 原理 雜交瘤細(xì)胞具有兩個(gè)親本的特性 即能迅速大量增殖 又能產(chǎn)生專一的抗體 2 過(guò)程 b淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞 誘導(dǎo)融合 b b細(xì)胞 b 瘤細(xì)胞 瘤 瘤細(xì)胞 選擇培養(yǎng) 雜交瘤細(xì)胞 b 瘤細(xì)胞 克隆化培養(yǎng) 專一抗體檢測(cè) 能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞 體外培養(yǎng) 單克隆抗體 3 單克隆抗體的應(yīng)用 單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn) 特異性強(qiáng) 靈敏度高 產(chǎn)量大 作為診斷試劑 準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì) 并與特異性結(jié)合優(yōu)點(diǎn) 準(zhǔn)確 高效 簡(jiǎn)易 快速 用于 運(yùn)載藥物 制成 生物導(dǎo)彈 治療疾病 主要用于癌癥治療 既不損傷正常細(xì)胞 又減少了用藥劑量 除通過(guò)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體外 還有什么方法 1 科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合 得到雜交細(xì)胞 經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體 與骨髓瘤細(xì)胞融合的是 a 經(jīng)過(guò)免疫的b淋巴細(xì)胞b 沒(méi)經(jīng)過(guò)免疫的t淋巴細(xì)胞c 經(jīng)過(guò)免疫的t淋巴細(xì)胞d 沒(méi)經(jīng)過(guò)免疫的 淋巴細(xì)胞 a 3 動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中 正確的是 誘導(dǎo)融合的方法完全相同b 所用的技術(shù)手段基本相同c 所采用的原理完全相同d 都能形成雜種細(xì)胞 d 4 單克隆抗體制備過(guò)程中培育的雜交細(xì)胞是 a 由小鼠能產(chǎn)生抗體的b淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合b 由小鼠一個(gè)b淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成c 由小鼠一個(gè)b淋巴細(xì)胞與肌瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成d 由小鼠一個(gè)b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成 d 植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖 動(dòng)物細(xì)胞與植物
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