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第38講微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)課時(shí)訓(xùn)練知能提升 限時(shí)式檢測(cè) 梯級(jí)式提升 (時(shí)間:40分鐘分值:90分)測(cè)控導(dǎo)航表知識(shí)點(diǎn)題號(hào)及難易度1.微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基2,3,4,52.無(wú)菌操作6(中)3.微生物的純化1,7(中)一、選擇題:本在題共5小題,每小題8分,共40分。1. 用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)(c)可以用相同的培養(yǎng)基都需要使用接種針進(jìn)行接種都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行接種都可以用來(lái)計(jì)數(shù)活菌a.b.c.d.解析:平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基;平板劃線法可采用接種針進(jìn)行操作,而稀釋涂布平板法采用涂布器進(jìn)行操作;純化時(shí),要進(jìn)行無(wú)菌操作,需要在酒精燈火焰旁接種,以避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基;平板劃線法一般用于分離而不是用于計(jì)數(shù)。2.(2014江蘇南通模擬)有關(guān)培養(yǎng)基配制原則表述正確的是(c)a.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水等b.碳源和氮源必須具有一定比例,碳元素的含量最多,其次為氮元素c.微生物的生長(zhǎng)除受營(yíng)養(yǎng)因素影響外,還受到ph、氧濃度、滲透壓的影響d.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好解析:培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中不需加入碳源,分離自生固氮菌的培養(yǎng)基中,不需加入氮源;一般來(lái)說(shuō),在培養(yǎng)基中碳源、氮源具有一定比例,但培養(yǎng)基中含量最多的應(yīng)該是水;在培養(yǎng)基中,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度過(guò)高,會(huì)導(dǎo)致微生物不能吸水而死亡,因此,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度要適宜,而不是越高越好;對(duì)于微生物的生長(zhǎng)來(lái)說(shuō),在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)充分的基礎(chǔ)上,ph、滲透壓、氧濃度適宜對(duì)于其生長(zhǎng)繁殖都是有利的。3.(2013自貢月考)下列操作不正確的是(c)a.接種前用肥皂洗雙手,再用酒精擦拭雙手b.接種前用火焰灼燒接種針(環(huán))c.培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后應(yīng)立即倒置平板d.在酒精燈的火焰旁完成倒平板的操作解析:培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后,要等待平板冷卻凝固后再倒置平板,防止培養(yǎng)基流淌下來(lái)。4.甲、乙、丙是三種微生物,下表、是用來(lái)培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在中正常生長(zhǎng)繁殖;甲能在中正常生長(zhǎng)繁殖,而乙和丙都不能;乙能在中正常生長(zhǎng)繁殖,甲、丙都不能。下列說(shuō)法正確的是(d)粉狀硫10 gk2hpo44 gfeso40.5 g蔗糖10 g(nh4)2so40.4 gh2o 100 mlmgso49.25 gcacl20.5 g+-+-+注:“+”表示培養(yǎng)基中加入了這種物質(zhì),“-”表示培養(yǎng)基中沒(méi)有加入這種物質(zhì)。a.甲、乙、丙都是異養(yǎng)型微生物b.甲、乙都是自養(yǎng)型微生物,丙是異養(yǎng)型微生物c.甲是異養(yǎng)型微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)型微生物d.甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)型微生物、丙是異養(yǎng)型微生物解析:培養(yǎng)基缺少氮元素, 培養(yǎng)基缺少有機(jī)物,營(yíng)養(yǎng)全面。n是微生物生長(zhǎng)的必需元素,每一種微生物正常生長(zhǎng)都需要n,但自己能夠固氮的微生物可以生活在無(wú)氮培養(yǎng)基上。甲能在上生長(zhǎng)繁殖,而乙、丙都不能,說(shuō)明甲是能夠固氮的微生物;乙能在中生長(zhǎng)繁殖,甲、丙不能,說(shuō)明乙不需要培養(yǎng)基為它的正常生命活動(dòng)提供能源物質(zhì),乙一定為自養(yǎng)型微生物,甲、丙一定都為異養(yǎng)型微生物。5.下列為某同學(xué)在培養(yǎng)金黃色葡萄球菌實(shí)驗(yàn)中的部分操作步驟,其中正確的是(c)a.培養(yǎng)基中蛋白胨、牛肉膏溶化后,直接補(bǔ)充蒸餾水至100 mlb.用1 mol/l naoh溶液調(diào)試ph,使ph為5.06.0c.加壓至98 kpa之前,要徹底排出鍋內(nèi)的冷空氣d.將接種環(huán)放在酒精燈上灼燒,滅菌后立即伸入菌種試管內(nèi)挑取少量菌種解析:a選項(xiàng)應(yīng)該先加水,后加熱溶化,否則培養(yǎng)基會(huì)被燒焦;b選項(xiàng)用1 mol/l naoh溶液調(diào)試ph是正確的,但金黃色葡萄球菌是細(xì)菌,本實(shí)驗(yàn)應(yīng)把ph調(diào)至7.47.6;c選項(xiàng)加壓至98 kpa之前,要徹底排出鍋內(nèi)的冷空氣,是為了使高壓鍋能夠在很短的時(shí)間內(nèi)達(dá)到較高的溫度,使鍋內(nèi)充滿水蒸氣,并使水蒸氣分子運(yùn)動(dòng)達(dá)到盡可能快的速度,穿透各微生物菌體及芽孢等;d選項(xiàng)接種環(huán)放在酒精燈上灼燒滅菌是應(yīng)該的,但不能立即伸入菌種試管內(nèi),這樣會(huì)燙死菌種。二、非選擇題:本大題共2小題,共50分。6.(25分)(1)由于大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、等優(yōu)點(diǎn),因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。(2)在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中,為防止雜菌污染,需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行(填“消毒”或“滅菌”);操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和;空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅,其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能 。(3)通常對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的 。(4)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí),在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是 。解析:(1)大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點(diǎn)。(2)滅菌是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,所以對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌,消毒是使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物,操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒,紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能損傷dna的結(jié)構(gòu)。(3)對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。(4)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí),在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。答案:(1)易培養(yǎng)生活周期短(2)滅菌消毒損傷dna的結(jié)構(gòu)(3)鑒定(或分類(lèi))(4)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生7.(2014山東青島質(zhì)檢)(25分)微生物與人類(lèi)關(guān)系密切。雖然有些微生物能使動(dòng)植物患病,但多數(shù)微生物對(duì)人類(lèi)是有益的。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基配方中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。從土壤中分離分解尿素的細(xì)菌時(shí),培養(yǎng)基中加的唯一氮源為,這種培養(yǎng)基稱(chēng)為培養(yǎng)基。(2)在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的倒平板操作時(shí),平板冷凝后,為什么要將平板倒置? 。(3)微生物接種的方法很多,最常用的是平板劃線法和法。在用平板劃線法接種時(shí),為什么在操作的第一步以及以后每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)? 。在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么? 。解析:從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌,需用選擇性培養(yǎng)基,唯一的氮源是尿素。接種過(guò)程中,最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種方法。以后每次劃線前都要灼燒接種環(huán)的目的是殺死上次接種時(shí)留下的菌種,使下一次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)自上次劃線的末端,以便通過(guò)多次劃線后,得到單個(gè)的菌落。操作的第一步和最后一步需灼燒接種環(huán)的目的分別是防止接種環(huán)上有其他微生物而污染培養(yǎng)物、以免菌種對(duì)環(huán)境造成污染和感染操作者。答案:(1)尿素選擇(2)防止皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染,還可使
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