XN應(yīng)用培訓(xùn)PPT課件.ppt

XN系列血液分析儀檢測原理和臨床應(yīng)用 SysmexCorporation 1 檢測原理 半導(dǎo)體激光的流式細胞術(shù) 波長633nm激光照射細胞獲得前向散射光 FSC 側(cè)向散射光 SSC 側(cè)向熒光 SFL 將細胞進行計數(shù)和分類 FSC 反映細胞的大小SSC 反映細胞內(nèi)顆粒物質(zhì)的大小和多少SFL 反映細胞內(nèi)核酸含量的多少這3種信號 運用獨創(chuàng)性的數(shù)字技術(shù)和演算法 對細胞進行計數(shù)和分類 2 檢測原理 3 檢測通道及原理 XN的幾個主要通道WNR WDF WPC RET PLT F通道 均采用核酸熒光染色和流式細胞技術(shù) 激光 分色鏡 側(cè)向熒光核酸和細胞器的種類和多少 側(cè)向散射光細胞內(nèi)部信息 前向散射光細胞的大小信息 WNR WDF WPC RET PLT F 4 核酸熒光染色技術(shù) 熒光強度與細胞的核酸含量成正相關(guān) 熒光染色后 熒光強度大小依次排列順序為 異型淋巴細胞 原始細胞 幼稚粒細胞 單核細胞 淋巴細胞 粒細胞 晚幼紅細胞 網(wǎng)織紅細胞 網(wǎng)織血小板 聚集血小板 成熟紅細胞 成熟血小板 5 XE系列 WBC BASO NRBC FSC FSC SFL SSC XN系列 NRBC BASO SFL NRBC BASO WBC FSC WBC WBC 1 2WNR通道通道 6 溶血劑 LysercellWNR染色液 FluorocellWNR WNR散點圖 SFL 側(cè)向熒光 FSC 前向散射光 檢測參數(shù)WBC NRBC BASO報警信息PLTClumps NRBCPresent WBCAbnormalScattergram 嗜堿性粒細胞 淋巴細胞 單核細胞 粒細胞 中性粒細胞 嗜酸性粒細胞等 有核紅細胞 紅細胞 弱 中 強 極弱 極弱 中 中 強 側(cè)向熒光 SFL 前向散射光 FSC 細胞膜通過溶血 熒光 1 2WNR通道通道 7 無論CBC模式還是在CBC DIFF模式 儀器均能自動檢測NRBC 并修正白細胞計數(shù)及分類的結(jié)果 由于采用熒光染色法進行白細胞的計數(shù) 所以不再存在難溶紅細胞 脂肪顆粒 聚集血小板對白細胞計數(shù)造成的干擾 不再有 RBCLyseResistance 的報警 WNR通道的要點 8 NRBC 案例1 有核紅細胞 9 鏡檢 NRBC10 和儀器結(jié)果基本一致 通過XN儀器的檢測 在做常規(guī)的CBC DIFF檢測時即可得到NRBC的結(jié)果 自動修正白細胞計數(shù) 對兒童 血液病病人的檢測非常重要 相較于其他儀器NRBC報警后需人工鏡檢修正白細胞數(shù)量 XN可減少鏡檢工作量 縮短報告時間 對婦幼 兒童醫(yī)院非常實用 案例1 有核紅細胞 10 案例2 乳糜或難溶紅細胞 XE 2100的BASO通道出現(xiàn)胡須樣散點圖 儀器報警 RBCLYSERES 白細胞結(jié)果打 號 WBC結(jié)果為8 92 11 XE 2100的DIFF通道白細胞結(jié)果為5 57 12 XN檢測WNR通道白細胞結(jié)果 WNR通道采用核酸熒光染色 XE 2100的胡須樣散點因為熒光強度低 在散點圖上靠左側(cè)分布 不影響WBC結(jié)果 WBC為6 01與XE 2100中WBC D5 57結(jié)果一致 XN的WBC結(jié)果抗干擾能力比XE強 13 XE系列 XN系列 采用新的溶血素 使白細胞破壞程度下降 盡量保持原型 從而和XE相比較 LYMPH和MONO的散點群更加明確地得以劃分 大大降低白細胞分類不出結(jié)果的概率 WDF通道道 14 溶血劑 LysercellWDF染色液 FluorocellWDF WDF散點圖 SSC 側(cè)向散射光 SFL 側(cè)向熒光 檢測參數(shù)NEUT LYMPH MONO EO IG報警信息Atypicallymph Blast AbnLymph IGpresent PLTClumps WBCAbnormalScattergram WDF通道道 15 WDF通道中 對白細胞進行計數(shù)并分類為中性粒細胞 淋巴細胞 單核細胞以及嗜酸性粒細胞 同時定量檢出幼稚粒細胞 IG 以及異型淋巴細胞 HFLC 等的異常細胞 使用價值 對IG和異淋異常報警的復(fù)檢規(guī)則制定更具定量化 有效降低復(fù)檢率 WDF通道道 16 案例1 IG定量結(jié)果 17 IG鏡檢結(jié)果 IG 6 18 案例2 HFLC異型淋巴細胞 19 HFLC儀器結(jié)果3 8 鏡檢結(jié)果 2 20 溶血劑 LysercellWPC染色液 FluorocellWPC WPC散點圖 SSC 側(cè)向散射光 SFL 側(cè)向熒光 FSC 前向散射光 Blast AbnLymph 參數(shù) HPC 參考參數(shù) 報警 Abnormallymph Blasts Atypicallymph WPC通道 21 案例5 髓系白血病李某某 女 確診慢性粒細胞白血病 首次檢測采用CBC DIFF模式檢測 儀器報警 Blasts AbnLympho 22 23 鏡下可見髓系幼稚細胞 最后確診為慢性粒細胞白血病 利用WPC通道 可對原來報警進行確認 提高檢測特異性 還可對白血病進行初步篩查及分型 淋系 髓系 24 案例6 淋巴系白血病 25 Countresultsarebasicallyunsuspicious B 慢性淋巴細胞白血病 在外周血或骨髓中見到有特征性的多毛細胞細胞化學(xué) 酸性磷酸酶 ACP 染色陽性且不被酒石酸 TRAP 抑制 PAS陽性 免疫表型 sIg CD19CD20CD22CD11CCD25CD103 26 XN系列改變了XE2100每個標本都要使用IMI通道的檢測方式 結(jié)合REFLEX功能 用戶可以設(shè)定一定的復(fù)檢規(guī)則 有針對性的使用WPC通道 該通道同樣采用核酸熒光染色的方法 利用原始淋巴細胞和原始髓細胞表面磷脂含量的差異 在特定的溶血素作用下 原始淋巴細胞呈高熒光強度 而原始髓細胞呈低熒光強度 易達到初步鑒別淋巴系或髓系的白血病 WPC通道的要點 WPC通道反映的是 在試劑中細胞的狀態(tài)而不是在體內(nèi)細胞的狀態(tài) Blast在試劑中反應(yīng)不大所以 細胞膜上不易開孔而難染色 導(dǎo)致它出現(xiàn)在體積較大 熒光強度較低的區(qū)域里 相反 AbnLymph在試劑中受試劑影響大 與染色性較強 所以出現(xiàn)在體積較小 熒光強度強的區(qū)域 主要作用 1 白血病的初步篩選 2 降低復(fù)檢率 3 HPC的定量檢測 用于PBSCT干細胞采集時間的判斷 27 稀釋劑 CELLPACKDFL染色液 FluorocellPLT PLT F散點圖 SFL 側(cè)向熒光 FSC 前向散射光 參數(shù) PLT IPF報警PLTAbnormalscattergram PLTClumps PLT F通道 28 SFL SFL FSC PLT O XE PLT F XN FSC PLT F PLT O IPF IPF LowersizePLT LowersizePLT PLT F與PLT O的主要區(qū)別 1 熒光染料的改變 PLT F的熒光染料以噁嗪為主 可以有效去除白細胞碎片 紅細胞碎片 小紅細胞的干擾 2 計算機分析方式的改變 避免樣本中存在的微小血小板的漏檢 PLT F與PLT O的區(qū)別 29 在PLT F通道 使用了不同于RET通道的熒光色素 由于選擇性染色血小板 故網(wǎng)織紅細胞難以染色 另外 也不易受到紅細胞碎片的影響 即使是血小板低值樣本 也可高精度檢測 IPF僅在PLT F通道可以檢測 由于在RET通道無法檢測 因此未搭載PLT F通道的儀器類型 無法檢測IPF PLT F通道的要點 30 案例7 8 小紅細胞 碎片 儀器提示 小紅細胞 從直方圖看紅細胞峰左移 血小板直方圖異常 尾部抬高 初步判斷是小紅細胞或者紅細胞碎片干擾 PLT結(jié)果為541 10 9 L 31 鏡檢 可見大量小紅細胞及碎片 32 加做PLT F 排除部分細胞碎片 血小板結(jié)果降低為179 10 9 L 33 第一次檢測 案例9 巨大血小板 張XX ITP病人 經(jīng)過治療11天后 外周血出現(xiàn)較多巨大血小板 XN首次檢測血小板為15 10 9 L 血小板直方圖異常 觸發(fā)了REFLEX規(guī)則加做PLT F通道檢測血小板 執(zhí)行了第二次檢測 PLT結(jié)果為80 10 9 L 利用DI60閱片可見巨大血小板 PLT F通道的結(jié)果更接近鏡檢結(jié)果 避免血小板假性減少而給臨床錯誤判斷 為臨床提供的準確的參考依據(jù) 34 第二次檢測 血小板低 儀器觸發(fā)3R復(fù)檢規(guī)則 自動進行第二次檢測 PLT結(jié)果為80 10 9 L 35 利用DI60自動閱片機閱片鏡檢 可發(fā)現(xiàn)大量大血小板 36 XN的自動計數(shù)復(fù)檢功能 3R 3R是指XN系列的三個復(fù)檢方式儀器可以根據(jù)規(guī)則判定結(jié)果 執(zhí)行 Repeat 分析 Rerun 分析 Reflex 分析以獲得第二次分析結(jié)果 37 用戶可以根據(jù)本醫(yī)院病人的特點 設(shè)定LW的自動復(fù)檢規(guī)則 有助于提高低值白細胞時的精密度和準確性LW模式通過增加細胞分析的顆粒數(shù) 使低值白細胞時的報警能力也能提高 避免白血病的漏檢該復(fù)檢方式有助于減少人工審核帶來的漏檢風(fēng)險 使檢測流程更加規(guī)范 LW檢測模式的要點 38 案例10 LW模式 沒有異常細胞報警 39 LW模式出現(xiàn)Blast AbnLymph REFLEXLW 40 鏡檢看到原始細胞 41 WBC低值標本 3R工作流程 5 6x10 4 uL WBC報警 觸發(fā)Reflexf規(guī)則 儀器自動復(fù)檢 LW模式CBC DIFF WPC 數(shù)量由儀器低值模式確認 異常細胞由WPC 幼稚細胞通道 確認無異常 42 XN體液散點圖 XE 5000體液散點圖