藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中安全性項(xiàng)目的設(shè)定

藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中安全性檢查項(xiàng)目的確定 主要內(nèi)容 熱原檢查細(xì)菌內(nèi)毒素檢查異常毒性檢查特異性毒性檢查降壓物質(zhì)檢查無菌檢查微生物限度檢查 熱原檢查 一 方法系將一定劑量的供試品溶液 靜脈注射家兔體內(nèi) 在規(guī)定的時(shí)間內(nèi) 觀察家兔體溫升高的情況 以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規(guī)定 熱原檢查是一種限度試驗(yàn) 反映了熱原質(zhì)引起哺乳動(dòng)物復(fù)雜的升溫反應(yīng)過程 具有直觀 代表性好的優(yōu)點(diǎn) 是一種成熟方法 各國藥典均有收載 熱原檢查 二 適用品種主要用于生物制品 抗生素 生化藥品類注射劑及在生產(chǎn)過程中容易被微生物污染或適宜微生物繁殖化學(xué)藥品的注射劑 做靜脈注射的注射液 尤其是劑量較大的靜脈滴注藥 更要注意熱原檢查 某些抗生素 抗腫瘤藥品 放射性藥品等影響家兔正常體溫 因此不適宜采用熱原檢查法 目前存在著細(xì)菌內(nèi)毒素檢查逐步替代熱原檢查的趨勢 熱原檢查 三 劑量限值的確定家兔美1Kg體重注射體積不得少于0 5ml 注射給藥體積不超過10ml kg 如果供試品溶液濃度太低 給藥體積需超過10ml kg才能保證制劑安全性的 一建議改用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查 對大容量注射劑 應(yīng)考慮供試品溶液的等滲 pH值等 必要時(shí)需進(jìn)行調(diào)整 熱原檢查 四 結(jié)果判定如果3只家兔中 體溫升高均低于0 6 并且3只家兔體溫升高總和低于1 4 或在復(fù)試的5只家兔中 體溫升高0 6 或0 6 以上的家兔僅有一只 并且初試復(fù)試合并8只家兔的體溫的總和為3 5 或3 5 以下 均認(rèn)為供試品的熱原檢查符合規(guī)定 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查 一 方法 系利用鱟試劑來檢測或量化由革蘭陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)毒素 以判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法 在GMP條件下 無內(nèi)毒素即無熱原 控制內(nèi)毒素就是控制熱原 這是用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法代替熱原檢查法的依據(jù) 兩種方法 凝膠法和光度測定法凝膠法為限量測定方法 光度測定法為定量測定方法 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查 凝膠法分為 限量試驗(yàn)和半定量試驗(yàn) 光度測定法包括 動(dòng)態(tài)濁度法 終點(diǎn)濁度法 動(dòng)態(tài)顯色法 終點(diǎn)顯色法兩種方法可任選一種進(jìn)行內(nèi)毒素的檢測當(dāng)測定結(jié)果有爭議時(shí) 除有另有規(guī)定外 以凝膠法結(jié)果為準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品 國家標(biāo)準(zhǔn)品 標(biāo)定 復(fù)核 仲裁工作標(biāo)準(zhǔn)品 復(fù)核 陽性對照 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查 二 適用品種 制劑 靜脈注射 鞘內(nèi)注射原料 無菌分裝原料靜脈注射用的抗生素類原料不可滅菌制劑的原料 如生化藥品 生物制品 制備分裝過程無法控制內(nèi)毒素的注射劑的原料 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查 確定細(xì)菌內(nèi)毒素限值 L 和最大有效稀釋倍數(shù) MVD L K MMVD cL 生物制品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值L K ML為供試品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值K為人每千克體重每小時(shí)最大可接受的內(nèi)毒素劑量以EU Kg h 表示 注射劑K 5EU Kg h 放射性藥品注射劑K 2 5EU Kg h 鞘內(nèi)注射劑K 0 25EU Kg h M為人用每千克體重每小時(shí)的最大供試品劑量 以ml Kg h mg Kg h 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查 適用情況 當(dāng)進(jìn)行新藥的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查試驗(yàn)前 或無細(xì)菌內(nèi)毒素檢查項(xiàng)的品種建立內(nèi)毒素檢查法時(shí) 須進(jìn)行干擾試驗(yàn) 當(dāng)鱟試劑 供試品的配方 生產(chǎn)工藝改變或試驗(yàn)環(huán)境中發(fā)生了任何有可能影響試驗(yàn)結(jié)果的變化時(shí) 須重新進(jìn)行干擾試驗(yàn) 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查 注意點(diǎn) 最大有效稀釋倍數(shù)是指供試品溶液被允許稀釋的最大倍數(shù) 它和具體選用的鱟試劑的靈敏度有關(guān) 由于不同廠商生產(chǎn)的鱟試劑其生產(chǎn)工藝 配方 質(zhì)量參數(shù)等存在一定的差異 鱟試劑其抗干擾能力存在差別 因此應(yīng)重視對鱟試劑的選擇 或?qū)c試劑靈敏度的考察 三 驗(yàn)證試驗(yàn)至少三批樣品 按確定的限值和方法進(jìn)行試驗(yàn) 異常毒性檢查 一 方法系將一定劑量的供試品溶液注入小鼠體內(nèi)或口服給藥 在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)觀察小鼠出現(xiàn)的死亡情況 以判定供試品中是否符合規(guī)定的一種方法 異常毒性是檢查藥品在生產(chǎn)制造過程中外來引入的異物或藥物降解產(chǎn)生的不正常毒性反應(yīng) 主要與生產(chǎn)工藝水平有關(guān) 而不是檢查藥物本身毒性 異常毒性檢查 二 適用品種生化藥注射劑 如肽 蛋白質(zhì) 酶及輔酶 多糖 脂質(zhì)等 及抗生素類注射劑 某些中藥注射劑 在藥品生產(chǎn)工藝進(jìn)行較大改變后 特別是改變提煉 精制工藝時(shí) 需要在生產(chǎn)過程中追蹤檢查各工藝段的半成品及成品的毒性試驗(yàn) 異常毒性檢查 三 劑量限值的確定首先測定樣品小鼠單次靜脈給藥的半數(shù)致死量 LD50 和最小致死量 LD5 并了解其毒性反應(yīng)癥狀 異常毒性檢查劑量應(yīng)低于樣品正常毒性劑量 LD5 并應(yīng)高于人臨床最大用藥劑量 對于未測出LD50的注射液 以每只小鼠0 8ml的劑量按常規(guī)速度 3 5秒 靜脈注射 仍未見死亡或毒性反應(yīng) 可以該劑量作為異常毒性檢查限值 異常毒性檢查 四 相關(guān)進(jìn)展目前異常毒性檢查法僅中國藥典和英國藥典有收載 國外藥典中 對大多數(shù)生物提取的生化藥或由現(xiàn)代生物技術(shù)得到的組份單一 結(jié)構(gòu)明確的產(chǎn)品 一般不設(shè)定異常毒性檢查項(xiàng) WHO生物測定專家委員會在1997年曾開會討論異常毒性檢查的必要性問題 認(rèn)為其缺乏專屬性和科學(xué)性 在實(shí)施GMP條件下生產(chǎn)的藥品應(yīng)當(dāng)取消該項(xiàng)檢查 降壓物質(zhì)檢查 一 方法系比較組胺對照品與供試品引起麻醉貓血壓下降的程度 以判定供試品中所含降壓物質(zhì)的限度是否符合規(guī)定 降壓物質(zhì)是指某些藥物中含有的能導(dǎo)致血壓降低的雜質(zhì) 包括組胺 類組胺或其他導(dǎo)致血壓降低的物質(zhì) 降壓物質(zhì)檢查 二 適用品種有可能產(chǎn)生類組織胺樣急性降血壓反應(yīng)的靜脈注射劑 如生化藥注射劑 肽 蛋白質(zhì) 酶及輔酶 多糖 脂質(zhì)等 及抗生素注射劑 在用動(dòng)物臟器或組織為原料制備生化藥物的過程中 正常組織內(nèi)存在的組胺及部分氨基酸脫羧形成的組胺 酪胺等胺類物質(zhì) 均為這類雜質(zhì)的來源 降壓物質(zhì)檢查 三 動(dòng)物靈敏度檢查 自靜脈依次注入上述對照品稀釋液 劑量按動(dòng)物體重每1kg注射組胺0 05ug 0 1ug及0 15ug 重復(fù)2 3次 如0 1ug劑量所致的血壓下降值均不小于2 67kPa 同時(shí)相應(yīng)各劑量所致反應(yīng)的平均值有差別 可認(rèn)為該動(dòng)物的靈敏度符合規(guī)定 注 組胺濃度為0 5ug ml 則給藥量為0 1 0 2 0 3ml kg 降壓物質(zhì)檢查 取對照品稀釋液按動(dòng)物體重每1kg注射組胺0 1ug的劑量 ds 供試品溶液按品種項(xiàng)下規(guī)定的劑量 dT 照下列次序注射一組4個(gè)劑量 ds dT dT ds 然后以第一與第三 第二與第四劑量所致的反應(yīng)分別比較 如dT致的反應(yīng)值均不大于ds所致反應(yīng)值的一半 即認(rèn)為供試品的降壓物質(zhì)檢查符合規(guī)定 無菌檢查 微生物限度檢查法 非無菌藥品的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)是基于藥品的給藥途徑及對患者健康潛在的危害而制訂的 三 細(xì)菌與霉菌口服給藥制劑細(xì)菌數(shù)每1g不得過l000cfu 每lml不得過100cfu 霉菌和酵母菌數(shù)每lg或lml不得過100cfu 大腸埃希菌每1g或lml不得檢出 活螨不得檢出 一 致病菌 口服制劑每g或每ml不得檢出大腸埃希菌 含動(dòng)物藥及臟器的藥品同時(shí)不得檢出沙門菌 含中藥原生藥粉還不得檢出大腸菌群 大腸桿菌 外用每g或每ml不得檢出銅綠假單胞菌 綠膿桿菌 金黃色葡萄球菌 梭菌 大腸埃希菌 眼 鼻 呼吸 陰道 創(chuàng)傷 潰瘍用制劑同時(shí)不得檢出破傷風(fēng)桿菌 一次為準(zhǔn) 檢出以不合格處理 二 活螨不得檢出 局部給藥制劑1 用于手術(shù) 燒傷及嚴(yán)重創(chuàng)傷的局部給藥制劑應(yīng)符合無菌檢查法規(guī)定 2 耳 鼻及呼吸道吸入給藥制劑細(xì)菌數(shù)每1g lml或l0cm 不得過100cfu 霉菌和酵母菌